耐热保护剂提高鸡新城疫-传染性支气管炎二联活疫苗保存效果研究

为提高鸡新城疫-传染性支气管炎二联活疫苗的耐热性能,根据前期研究设计了3个耐热保护剂配方,比较不同配方对疫苗的抗原冻干损失、温度耐受性和保存期的影响.结果显示,保护剂TS11、TS37、TS51所制备疫苗的抗原冻干损失均在0.5 lg以下,相互之间差异不明显.但TS37所制备疫苗在37℃和45℃耐受后的抗原效价下降滴度明显低于TS11和TS51,这说明TS37具有更好的耐热保护效果.另外,25℃、2～8℃保存试验显示,配方TS37可使疫苗在室温下至少能保存1个月、冷藏条件下至少保存27个月而抗原含量和攻毒保护仍能达到质量标准要求.因此,本试验研制成功针对鸡新城疫-传染性支气管炎二联活疫苗的耐热保护剂TS37,该保护剂可使疫苗实现2～8℃下长期保存.     

温箱和水浴加热法中和新城疫病毒、传染性支气管炎病毒的效果比较

为明确“鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗”效力检验项病毒中和的条件参数,使检验数据能真实反映疫苗效价的目的。该研究对“鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗”的两种类型LaSota株+H120株和LaSota株+H52株进行效力检验,采用温箱、水浴两种方法在不同温度下进行病毒与对应阳性血清中和。结果显示,阳性血清在25℃以上水浴法及30℃以上温箱法均可完全中和病毒,但30℃的水浴法及温箱法中和会对另一种不予中和的待测病毒带来损伤,导致检验数据不可靠。可见,“鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗”效力检验时,病毒与阳性血清的中和宜采用25℃水浴法1h。     

我国家禽耐热型弱毒活疫苗的研究进展

综述了近几年国内研究禽用耐热型新城疫冻干活疫苗 ,传染性法氏囊病冻干活疫苗 ,传染性支气管炎冻干活疫苗 ,鸡痘冻干活疫苗和鸡马立克氏病冻干活疫苗的概况 ,并对各种疫苗的质量标准 (参数 )进行了分析。     

布鲁氏菌病活疫苗加改良保护剂冻干后的效果观察

为了提高冻干产品的档次 ,对现有的老式冻干机进行了改造 ,冻干工艺由原来的间接板层冻干改变为直接板层冻干 ,由于冻干工艺的改变 ,使用明胶蔗糖保护剂冻干的布鲁氏菌病活疫苗 (M5株 )物理性状不好 ,出现结晶、不易脱壁、残余水分超标等现象。在原明胶蔗糖保护剂的基础上添加了规程容许的其它保护剂成分后 ,问题得到了解决 ,经活菌计数、残余水分测定、物理性状检查 ,保存 4个月、7个月、12个月后活菌计数等与 2 0 0 2 0 3批布鲁氏菌病活疫苗 (S19号 )比较 ,证明疫苗质量并没有下降。试验成果运用在布鲁氏菌病活疫苗(M5株 ) 2 0 0 2 0 7～ 2 0 0 2 15批的生产中 ,疫苗质量有了明显提高 ,完全达到了《规程》标准     

用鸡瘟I系疫苗同治鸡痘病

2009年10月,新邵县陈家坊镇王玉在果园里养了1000羽慢生型三黄鸡.进行过7日龄时鸡新城疫传染性支气管炎H120二联弱毒疫苗的针眼滴鼻,15日龄法氏囊疫苗的饮水,23日龄禽流感灭活疫苗的肌肉注射,30日龄鸡新城疫传染性支气管炎H52二联弱毒苗的点眼滴鼻.     

禽流感——鸡新城疫重组二联苗(rL-H5株)推广应用

通过试验表明,应用禽流感-鸡新城疫重组二联活疫苗（rL—H5株）预防禽流感、鸡新城疫,具有使用安全、方便、价格便宜等优点。     

家禽饮水免疫应注意的问题

饮水免疫法可以在短时间内完成对大鸡群的免疫而不使鸡群受惊扰,该方法快捷、简便、省力,深受广大养殖户欢迎。适用于饮水免疫的疫苗有鸡新城疫Ⅳ系及Ⅳ-H52二联苗、鸡传染性支气管炎H120和H52弱毒疫苗、甘保罗病弱毒冻干疫苗、传染性腔上囊病弱毒疫苗、鸡球虫病苗等。饮水法由于鸡免疫抗体参差不齐,每只鸡疫苗饮用量不一,不易获得良好效果,应用时须注意几个问题。     

鸡新城疫和传染性法氏囊炎二联卵黄抗体的制备及应用

对制备的鸡新城疫和传染性法氏囊炎二联卵黄抗体的安全性和有效性进行了实验室检测,并开展了其临床应用试验,表明其具有良好的防治效果.     

直投式木葡萄糖醋酸杆菌发酵剂的保护剂筛选研究

利用冷冻干燥技术制备一种直投式木葡萄糖醋酸杆菌的复合保护剂,先采用单因素试验优选出10%脱脂奶粉、5%海藻糖、1%谷氨酸可作为木葡糖醋酸杆菌发酵剂的单一保护剂,然后采用响应面分析法优化了直投式木葡萄糖醋酸杆菌复合保护剂中脱脂奶粉、海藻糖、谷氨酸的浓度和配比。结果表明,当复合冻干保护剂中含脱脂乳6.4%、海藻糖0.075%、谷氨酸0.575%时,木葡萄糖醋酸杆菌冻干后细胞的存活率最高、达93.346%。对比试验表明,添加复合冻干保护剂的发酵剂与同浓度的活菌液体发酵剂的细菌纤维素产率差异不显著。     

直投式木葡萄糖醋酸杆菌发酵剂的保护剂筛选研究

利用冷冻干燥技术制备一种直投式木葡萄糖醋酸杆菌的复合保护剂,先采用单因素试验优选出10％脱脂奶粉、5％海藻糖、1％谷氨酸可作为木葡糖醋酸杆菌发酵剂的单一保护剂,然后采用响应面分析法优化了直投式木葡萄糖醋酸杆菌复合保护剂中脱脂奶粉、海藻糖、谷氨酸的浓度和配比.结果表明,当复合冻干保护剂中含脱脂乳6.4％、海藻糖0.075％、谷氨酸0.575％时,木葡萄糖醋酸杆菌冻干后细胞的存活率最高、达93.346％.对比试验表明,添加复合冻干保护剂的发酵剂与同浓度的活菌液体发酵剂的细菌纤维素产率差异不显著.     

不同鸡新城疫疫苗对种鸽免疫效果的影响

为对比不同鸡新城疫疫苗对种鸽的免疫效果,将试验种鸽进行分组免疫,A组鸡新城疫I系活疫苗单次免疫,B组鸡新城疫L系活疫苗单次免疫,C组鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联油乳灭活疫苗单次免疫,D组二联油乳灭活疫苗二次免疫,E组对照,免疫前后进行抗体跟踪监测。结果表明:在免疫后第1周新城疫抗体水平A组上升最快;免疫后A组第3周达峰值,B组第5周达峰值,C组第2周达峰值,D组第2周和第5周达峰值;免疫后C组和D组有31周时间抗体保持在5 log₂以上,而A组和B组抗体保持时间分别为11周和4周。本研究表明,经鸡新城疫I系活疫苗免疫后,种鸽第1周抗体水平上升最快,表明I系活疫苗比较适用于紧急免疫;使用鸡新城疫L系活疫苗进行种鸽免疫的效果较差;相比活疫苗,对鸽体表现出更好的免疫效果,适用于鸽场的日常免疫。本研究为鸽场疫苗选择与使用提供参考依据。     

猪瘟耐热活疫苗节能冻干曲线的优化研究

猪瘟疫苗真空冷冻干燥工艺,可减少冻干对制品活性的影响,降低制品冻干过程的耗能,缩短冻干周期,故研制安全、耐热、节能的猪瘟减毒冻干疫苗极为重要。选用甘露醇、甘氨酸等成分设计猪瘟耐热保护剂配方,通过间接免疫荧光法比较制品在37℃、10 d的冻干和耐热损失,并用兔体热反应法复核。检测优化配方的共晶点和塌陷温度设计冻干程序,比较不同预冻方式对猪瘟耐热疫苗冻干的影响,调整冻干周期。猪瘟耐热保护剂配方A-4的冻干和耐热损失最小,分别为0.30 lg和0.45 lg。根据制品的共晶点-27.51℃,对预冻方式筛选,发现快冻冻干和耐热损失最小,分别为0.17 lg和0.38 lg,根据塌陷温度-24.3℃,成功将冻干曲线缩短至24 h。调整后的配方可使猪瘟活苗在37℃保存15 d、45℃保存7 d;内毒素和动物试验表明该疫苗安全、无副反应。上述结果表明,试验成功筛选出猪瘟耐热保护剂配方A-4,在保证疫苗质量的前提下优化冻干曲线,调整后的保护剂配方保证疫苗耐热性能,安全无副反应。     

蛋鸡抗IBV HI抗体效价与攻毒后产蛋性能的相关性

【目的】研究抗呼吸型IBV HI抗体水平与蛋鸡产蛋率的对应关系。【方法】将180只SPF鸡分为4组,第1组和第2组首免用鸡传染性支气管炎H120活疫苗免疫,1羽份/只,4周后采血,第2组鸡同时用3批次的鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+HN6株)分别进行加强免疫,试验同时设置攻毒对照第3组和不免疫攻毒对照第4组。灭活疫苗免疫4周后,当产蛋率稳定在80%以上时,对试验鸡采血测定抗体,同时使用M41株病毒进行攻毒,记录攻毒后4周内各组鸡的产蛋性能,分析抗IBV HI抗体水平与攻毒后产蛋性能的相关性。【结果】弱毒活疫苗和灭活疫苗联合免疫组抗IBV HI抗体水平在2-8.2~2-9.3时,免疫鸡能够耐受IBV强毒的攻击,其产蛋性能不受影响。弱毒活疫苗免疫组抗体为2-4.8,产蛋量下降了12.69%。攻毒对照组抗体水平为2-2.0,攻毒后产蛋量下降45.22%。【结论】蛋鸡抗IBV HI抗体效价与产蛋率对鸡传染性支气管炎强毒的攻毒保护之间呈正相关,可以用HI抗体检测来评价鸡传染性支气管炎灭活疫苗对产蛋鸡的免疫效果。     

狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的制备及理化性质的检测

[目的]分析研发的狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的脂质体形态、粒径分布状态、疫苗抗原包封率,确定狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的制备工艺.[方法](1)以大豆卵磷脂、胆固醇、十八胺、VE等物质为原料,采用薄膜分散法制备空白脂质体,采用电子显微镜和激光粒径分布仪测定空白脂质体的形态与粒径分布;(2)采用冷冻干燥方法将狂犬病rSRV9减毒株与空白脂质体等体积混合后冻干,制备狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗;(3)采用BCA蛋白定量法检测狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的抗原包封率.[结果]制备空白脂质体形态为大单室脂质体;平均粒径为378 nm;疫苗包封率为71.19;.[结论]薄膜分散-冻干方法制备狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗,抗原包封率高、性状稳定.     

这些新型兽用疫苗,你认识吗?

1.基因工程疫苗 1.1重组活载体疫苗 病毒活载体疫苗的研究较多,如用鸡痘病毒作为载体,表达成功的保护性抗原基因就有新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、马立克氏病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒、狂犬病病毒、传染性支气管炎病毒、艾美尔球虫等.2005年12月24日,农业部在北京宣布,我国已成功研制出禽流感--新城疫重组二联活疫苗,并正式批准生产.     

当前鸡病为何难治疗

一、防疫不当1.不按程序防疫一般1日龄时接种马立克氏病疫苗,3～4日龄时接种传染性支气管炎疫苗,7～10日龄时接种法氏囊疫苗,10～15日龄时接种鸡新城疫疫苗,20～25日龄法氏囊疫苗二免,30～40日龄,鸡痘首免,鸡新城疫、鸡传染性支气管炎二免,70～90日龄,鸡新城疫三免。搞规模饲养     

传染性支气管炎病毒M_(41)株种子批的建立

[目的]为生产鸡传染性支气管炎疫苗奠定基础。[方法]在研究制备鸡传染性支气管炎疫苗所用毒种的毒力、免疫原性、保存期等的基础上,测定4种来源的传染性支气管炎病毒M41株的50%鸡胚感染量(EID50),选取滴度较高病毒作为毒种,建立传染性支气管炎病毒M41株种子批,并测定其毒力。[结果]含毒尿囊液在冻干前后对鸡胚的毒力不变。毒力试验结果表明该毒的毒力中等,可为雏鸡提供保护。M41株种毒的EID50和免疫原性在7代内无变化。湿毒在-15℃保存半年以内,其毒价基本不变。种子批建立后未受到细菌及其他微生物的污染。[结论]该种子批可以用于生产鸡传染性支气管炎疫苗。     

猪瘟疫苗冻干保护剂的筛选及免疫效果评价

为了筛选耐热性能好、能提高猪瘟病毒(SFV)疫苗经口服途径免疫效果的冻干保护剂,配比不同组分的冻干保护剂与黏膜佐剂LTRG蛋白、SFV按比例混合,通过对冻干工艺的优化,制备了4种.SFV的冻干苗;口服免疫小鼠,测定血清IgG和粘膜IgA抗体效价。结果表明:试验2组即甘氨酸+明胶组和试验4组即明胶组的外观形态较好,水溶后呈现澄清的状态;试验2组和试验4组的冻干苗经口服免疫,诱导小鼠产生的IgG抗体水平显著高于SFV组、SFV+LT组及其他试验组(P0.01)。二免7 d试验2组小鼠肛试子IgA抗体显著高于其他组(P0.01),且小鼠脾脏IFN-γ和IL-4细胞因子的表达量也极显著高于其他组(P0.01)。研究初步筛选出第2组配方,即以甘氨酸和明胶配伍作为猪瘟口服疫苗冻干保护剂,为研制口服途径免疫的猪瘟疫苗奠定了基础。     

ChIFN酿酒酵母工程菌冻干保护剂的优化

本研究通过二水平析因设计试验筛选冻干过程中影响工程菌存活状况的主要保护剂种类,并利用响应面设计试验(RSD)优化得到真空冷冻干燥环境下最佳复合保护剂配方。试验结果表明,真空冷冻干燥过程中蔗糖、脱脂奶粉和聚乙二醇3种冻干保护剂是影响工程菌存活率的主要影响因子,获得蔗糖(144.4 g/L)+脱脂奶粉(100.8 g/L)+聚乙二醇(11.1 g/L)配比的复合保护剂对工程菌保护作用达到最大,保护效率为80.81%。该复合保护剂对工程菌在冻干过程中具有较好的保护效果,可作为工程菌冷冻干燥过程的保护剂。     

鸭病毒性肝炎活疫苗的耐热冻干工艺策略设计

【目的】为了提高鸭病毒性肝炎弱毒(DHV)活疫苗的耐热性能。【方法】选用蔗糖、普鲁兰糖、明胶、甘油、磷酸盐等成分设计耐热保护剂组方,根据配方的共晶点、塌陷温度科学设计冻干程序,并比较了不同预冻方式对鸭病毒性肝炎活疫苗的效价影响。【结果】耐热保护剂配方A在37℃10 d、15 d病毒损失分别为0.35、0.61 Lg;对快冻、慢冻以及退火3种不同的冻干方式进行比较,发现对鸭肝炎病毒耐热损失由大到小依次为:退火慢冻快冻;疫苗长期保存期试验结果表明,可在2~8℃可保存2年;采用10倍剂量免疫2日龄雏鸭均未出现死亡,且精神饮食体重增长均正常。【结论】采用A配方与快速冻干冻方式的耐热性能最好,延长保存期并且提高了耐热性能,为动物疫苗耐热新剂型的研发提供技术支撑。