弓形虫感染引起小鼠体内CD_8~+T淋巴细胞免疫的研究

弓形虫感染可诱导宿主机体产生强烈的CD_8~+T淋巴细胞免疫应答,这对机体有效控制弓形虫感染具有重要作用。在感染过程中,CD_8~+T淋巴细胞可刺激机体产生IFNγ等细胞因子,并促进细胞溶解,能够有效阻止机体内潜伏性感染的活化过程。然而,部分易感小鼠体内CD_8~+T淋巴细胞会在感染期间发生功能障碍。文章就慢性感染中CD_8记忆应答的发展及其功能障碍机制展开论述。     

家禽抗沙门氏杆菌免疫应答的研究进展

沙门氏杆菌是一种重要的人兽共患病原菌,食用被沙门氏杆菌污染的家禽产品是人类感染沙门氏杆菌的主要原因。研究家禽抗沙门氏杆菌感染的免疫应答机制对控制沙门氏杆菌在家禽和食物链中的传播具有重要意义。感染早期,机体利用固有免疫系统抵抗沙门氏杆菌的感染,然而其在体内的完全清除依赖于适应性免疫应答,其中CD_4~+、CD_8~+、γδT细胞和B细胞等发挥重要作用。文章对家禽抗沙门氏杆菌感染的固有免疫和适应性免疫应答研究进展进行了总结,并重点阐述了T细胞和B细胞的作用,以期为家禽沙门氏杆菌病的防控提供新的思路。     

19ku脂蛋白信号肽优化表达的牛病毒性腹泻病毒E2基因重组卡介苗初步免疫研究

为评价19ku脂蛋白信号肽优化表达的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组卡介苗对小鼠的免疫效果,本研究将已构建的rBCG/19ku-E_2、rBCG/E_2、rBCG/pMV261(pMV261空载体构建的rBCG作为实验对照组)、卡介苗(BCG)及BVDV灭活苗免疫小鼠,通过检测血清抗体效价、T淋巴细胞亚群含量及细胞因子水平,评价其体液免疫与细胞免疫效果。结果显示,rBCG/19ku-E_2可以引起BVDV特异性抗体的产生,并且抗体水平要高于rBCG/E_2、rBCG/pMV261组。对CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚群含量的检测结果表明,rBCG免疫小鼠对CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚群没有显著影响。通过对IL-4、IL-10、IL-12和IFN-γ细胞因子检测结果表明,rBCG主要诱导Th1型细胞免疫应答,rBCG/19ku-E_2诱导的细胞因子水平低于BCG免疫组,但均高于细胞因子的平均水平。结果表明,rBCG/19ku-E_2可以诱导小鼠产生较好的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答,为BVDV新型疫苗研究奠定基础。     

刺五加多糖对免疫抑制雏鸡脾脏中T淋巴细胞分布及免疫功能的影响

试验旨在研究刺五加多糖(ASPS)对免疫抑制雏鸡脾脏中T淋巴细胞分布及免疫功能的影响,从而对ASPS的免疫增强作用进行评价。300只4日龄海兰褐公雏随机分为3组,每组100只:第1组为空白对照组,第2组为环磷酰胺(CTX)致免疫抑制组,第3组为ASPS+CTX组。第2组和第3组按照80 mg/kg·d的剂量皮下注射CTX,连续注射3 d。从10日龄开始,第3组每只鸡每天皮下注射0.2 m L 200 mg/m L的ASPS,连续注射3 d。第1组和第2组以同样方式注射等量灭菌生理盐水。注射后的第7、14、21和28天分别取脾脏,通过免疫组织化学染色和流式细胞术检测脾脏中CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞分布和数量变化,并利用荧光定量PCR方法检测脾脏中IFN-γ和IL-2 m RNA表达水平的变化。结果显示:CTX能够造成脾脏中CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞数量均显著减少(P0.05),主要由CD_4~+细胞构成的PALS数量减少或消失,红髓和白髓中的CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞分布范围均减小,而且细胞排列疏松,IFN-γ和IL-2m RNA表达水平较空白对照组显著减少(P0.05);在ASPS的作用下,ASPS+CTX组CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞的数量均比CTX组显著增加(P0.05),PALS面积逐渐增加,而且结构逐渐完整清晰,CD_8~+T淋巴细胞的分布范围显著增加,红髓和白髓中CD_8~+细胞分布更加密集,免疫后28 d时基本恢复正常水平,IFN-γ和IL-2 m RNA表达水平显著提高(P0.05)。结果表明,ASPS对CTX造成的脾脏中CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞定位分布和数量异常以及IFN-γ和IL-2 m RNA表达水平下降有显著的修复作用,证明ASPS对鸡脾脏免疫功能具有显著的增强作用。     

禽免疫系统的作用机理

鸡的免疫系统包括法氏囊、胸腺、骨髓、脾脏、哈德尔氏腺、盲肠扁桃体和初级淋巴结。主要的免疫功能是在网状内皮系统参与下,由分化的淋巴细胞来完成。 细胞的免疫机能 成熟的T细胞形成“抗原识别系统”,还能产生在细胞免疫中起重要作用的数种物质。此外,T细胞也参与B细胞的激活。感染之后,T细胞通过产生记忆细胞,特殊的效应细胞(淋巴细胞)、抑制细胞进行应答。成熟的B细胞连续地从法氏囊,向其它淋巴器官移动,一直持续到大约8周龄。B细胞移出法氏囊时,它的表面被非特异性抗体所覆盖。它对感染的应答是通过记忆细胞、产生抗体的细胞(浆细胞)来进行的。     

应用酯酶染色法对初生仔猪哺乳前猪瘟免疫外周血T细胞的检测

T细胞和B细胞是参与动物机体特异性免疫应答的主要细胞。在抗原的作用下,T细胞参与细胞免疫过程,同时还协助B细胞完成体液免疫应答。在淋巴细胞再循环中,参与再循环的淋巴细胞绝大多数是T细胞。在外周血中,T细胞占淋巴细胞总数的正常值的60％～70％。再循环的意义是增加淋巴细胞与抗原物质接触的机会,并不断补充淋巴细胞以维持免疫功能。T细胞正常比值的改变     

金银花复方制剂对人工感染NDV雏鸡免疫器官T淋巴细胞及其亚群以及B淋巴细胞的影响

为了研究金银花复方制剂对人工感染NDV雏鸡免疫器官T淋巴细胞及其亚群以及B淋巴细胞的影响,本试验以21日龄雏鸡为研究对象,随机分成感染组、中药治疗组、空白组。中药治疗组饮水给予复方金银花制剂。应用流式细胞仪检测技术,细胞培养技术研究了金银花复方制剂对人工感染NDV雏鸡免疫器官(胸腺、脾脏、腔上囊)T淋巴细胞及其亚群以及B淋巴细胞的影响,旨在揭示金银花复方制剂对人工感染NDV雏鸡免疫器官细胞免疫和体液免疫功能的影响及其机理。研究结果发现,金银花复方制剂能够提高人工感染NDV雏鸡免疫器官胸腺及脾脏CD3~+、CD4~+T淋巴细胞百分率,使CD4~+/CD8~+T淋巴细胞值升高,提高免疫器官脾脏及腔上囊B淋巴细胞百分率,表明金银花复方制剂能够提高雏鸡的免疫功能。     

雏鸡应用益生菌后消化道黏膜组织T_(ANAE+)及CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞数量变化

50只艾维因雏鸡随机分成益生菌组和对照组,采用酸性α-醋酸萘酯酶(acid nonspecifica-naphthyl acetate esterase,ANAE)染色法和免疫酶组织化学法,通过盲肠扁桃体、十二指肠和回肠派伊尔结T_(ANAE+)及其CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞亚型数量动态变化的检测,研究益生菌应用对雏鸡消化道局部黏膜组织的细胞免疫功能的影响。结果发现,1日龄雏鸡服用益生菌后1-14 d,其盲肠扁桃体、十二指肠及回肠派伊尔结的T_(ANAE+)、CD_4~+、CD_8~+T淋巴细胞数量均不同程度地高于未服用益生菌的对照雏鸡,表明益生菌应用可促进雏鸡消化道局部黏膜免疫组织的细胞免疫功能。     

Th17在原虫感染免疫中的作用

Th17细胞是一类新发现的CD4+T细胞亚群,参与机体的免疫应答,介导炎性反应,已经成为近期的研究热点.Th17细胞介导的免疫涉及抵抗胞外菌感染、介导慢性炎症、参与自身免疫病和肿瘤发生[1],但近来的研究表明,Th17细胞在原虫感染过程中也扮演重要角色.原虫病是危害人类及动物健康的一类重要的寄生虫病,有关原虫感染过程中机体免疫系统应答的研究是研究原虫感染和寻求预防治疗对策的新领域,本文主要综述Th17细胞在原虫感染中作用的研究进展.     

鸡球虫病的细胞免疫机理

宿主(鸡)感染球虫后,产生非特异性免疫应答和特异性免疫应答———体液免疫应答和细胞免疫应答。非特异性免疫因素主要是遗传因素或体内外理化因素对球虫的杀灭作用。体液免疫主要通过依赖腔上囊B淋巴细胞实现,细胞免疫主要通过依赖胸腺的T淋巴细胞实现。实验分别摘除胸腺和腔上囊,发现鸡球虫病的免疫力可由于摘除胸腺而受到抑制,而摘除腔上囊则无影响,结果表明抗体作用居于次要地位,而细胞免疫居于主要地位。1T淋巴细胞在鸡球虫保护性免疫中的作用用抑制细胞介导免疫力的药物环孢菌素A(CsA)处理鸡后,研究T淋巴细胞在鸡球虫中的保护作用…     

人参皂甙Re对兽用狂犬病灭活疫苗的佐剂作用

大量研究表明从人参中提取的人参皂甙Re(Re)具有提高机体免疫功能的作用,显示了良好的免疫佐剂活性,但其对兽用狂犬病灭活苗(RV)在犬上的免疫佐剂活性研究鲜有报道。本试验将比格犬随机分成RV(1头份)组和RV(1头份)+Re(100μg/只)组,在免疫前1周和免疫后1,4,8,16周采血,进行血清特异性抗体和外周血淋巴细胞CD4+/CD8+值的检测。结果表明,RV+Re试验组能显著提高血清特异性抗体水平,并明显延长了血清特异性抗体的持续时间,提高了CD4+/CD8+值。提示Re作为佐剂能增强机体对抗原的免疫应答,提高RV疫苗的免疫效果。     

表达ETEC F41的干酪乳杆菌免疫小鼠后的黏膜免疫应答

将SPF级Balb/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组小鼠以pLA-F41/L.casei重组干酪乳杆菌滴鼻免疫,对照组用pLA/L.casei干酪乳杆菌滴鼻免疫,应用间接ELISA测定血清中特异性IgG抗体水平和鼻咽部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗液及粪便中ETEC F41特异性SIgA抗体水平.分离并计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数目,利用免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平,观察重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织(NALT)和肠相关淋巴组织(GALT)黏膜部位的免疫应答.结果表明重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答.     

褐藻多糖硫酸脂对小鼠免疫及抗日本乙型脑炎病毒的影响

为了研究褐藻多糖硫酸脂(fucoidan)对小鼠免疫及抗病毒调节作用,研究采用体内和体外试验研究褐藻多糖硫酸脂的免疫调节及抗日本乙型病毒(JEV)作用。结果表明:褐藻多糖硫酸脂能够促进脾脏淋巴细胞增殖,调节CD_4~+T细胞(CD_3~+ CD_4~+)/CD8T细胞(CD_3~+ CD_8~+)/B细胞(B 220+)亚群。说明褐藻多糖硫酸脂能够上调JEV灭活疫苗的抗体水平,同时促进Th1细胞因子IFN-γ及Th2细胞因子IL-4的表达。进一步研究发现褐藻多糖硫酸脂能够直接抑制JEV的复制。说明褐藻多糖硫酸脂具有潜在的抗病毒及免疫调节作用,可作为免疫增强剂及抗日本乙型脑炎的新型药物。     

PRRSV特异性肽对CSFV、PRRSV疫苗免疫猪后T淋巴细胞亚群的影响

用猪瘟疫苗和高致病性猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗对猪进行免疫,在免疫后的14d和28d采集外周血液,分析特异性抗体表达量和外周血T淋巴细胞表型的变化,并用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)特异性肽对淋巴细胞进行刺激。结果显示,在PRRSV免疫后14d,机体PRRSV抗体水平较低,其中CSFV低抗组中CD4+细胞百分数明显降低,CD4+/CD8+细胞的比值也明显降低;用PRRSV特异性肽刺激淋巴细胞24h后,CSFV低抗组与高抗组中CD3+、CD8+细胞的百分数都明显升高,CD4+细胞的百分数及CD4+/CD8+细胞的比值都明显降低。在PRRSV免疫后28d,CSFV抗体和PRRSV抗体的产生都比较高,CD3+细胞、CD4+T淋巴细胞百分数及CD4+/CD8+细胞的比值也明显升高,用肽刺激以后,CSFV高抗组中的CD3+细胞百分数降低,CSFV低抗组中的细胞百分数升高,CD4+/CD8+细胞的比值在所有组中均下降。结果表明,PRRSV特异性肽在PRRSV免疫早期可以使CD3+细胞的百分数升高,CD4+/CD8+细胞的比值降低,其详细的机理还有待进一步的探究。     

羊口疮病毒B2L基因DNA疫苗的构建及其诱导的免疫应答

为研究所构建羊口疮病毒(OrfV)B2L基因DNA疫苗诱导小鼠的免疫应答效果,本研究对pMD18T-B2L质粒进行PCR扩增,克隆B2L片段至pVAX1载体中构建pVAX1-B2L重组质粒,进行酶切和测序鉴定;采用脂质体法将pVAX1-B2L真核表达质粒转染MDBK细胞,RT-PCR和IFA法检测B2L基因在MDBK细胞中的转录和表达;将构建的DNA疫苗免疫KM系小鼠,采用间接ELISA、MTT和FACS法对其诱导的免疫应答进行研究。结果显示,成功构建pVAX1-B2L真核表达质粒,并在MDBK细胞中表达;免疫小鼠后,DNA疫苗能诱导小鼠产生OrfV特异性抗体;脾淋巴细胞增殖、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚群百分比和IL-2、IFN-γ、IL-4细胞因子均高于pVAX1组和PBS组。结果表明,本研究制备的DNA疫苗能够诱导小鼠产生较高水平的体液免疫和细胞免疫应答。     

常见霉菌毒素对免疫系统的毒害作用与防治

<正>1霉菌毒素对动物机体的免疫危害霉菌毒素对畜禽的核心毒害作用是破坏机体免疫系统的平衡,主要通过抑制免疫应答及干扰免疫系统的调节,降低免疫器官比如脾脏、胸腺的质量或T淋巴细胞、B淋巴细胞的生物活性,各种抗体及免疫蛋白的生物合成,减弱某些干扰素及抗体的生物活性,弱化巨噬细胞的吞噬能力     

云南通海县PCV2感染对猪瘟、口蹄疫免疫抗体合格率的影响

<正>猪感染PCV2(圆环病毒2型)会损害机体免疫器官,导致B淋巴细胞和T淋巴细胞减少从而造成免疫抑制,周庆雨、王帅、Huang YL等研究也表明,PCV2感染会抑制免疫应答,降低疫苗免疫效果,甚至阻碍仔猪从奶水中获得母源抗体。但是,也有人认为PCV2的隐性感染对猪瘟、猪口蹄疫等免疫应答不产生抑制作用或者影响不显著,甚至有关于     

CD8~+T细胞表位鉴定技术研究进展

CD8~+T细胞表位通过MHCⅠ分子呈递到细胞表面,激活CTL细胞从而介导并调节机体抗内源性抗原的免疫应答。MHC-peptide稳定性试验通过TAP缺陷的RMAS细胞转染克隆在细胞水平鉴定CD8~+T细胞表位与MHCⅠ分子的亲和力;酶联免疫斑点技术(ELISPOT)通过检测IFN-γ的分泌水平评估抗原免疫后机体的细胞免疫应答能力,具有较高的敏感性和高效性。四聚体技术通过流式细胞仪分析抗原特异性CD8~+T细胞的表型和功能特征。论文介绍了CD8~+T细胞表位的特征和上述3种表位鉴定方法的基本原理和研究进展,为CD8~+T细胞表位的鉴定和表位疫苗的研制提供参考。     

左旋咪唑对鸡细胞免疫和体液免疫功能的作用

系统研究了左旋咪唑对鸡细胞免疫和体液免疫功能的作用。结果表明左旋咪唑可影响正常鸡的免疫功能 :左旋咪唑可显著促进鸡外周血T淋巴细胞增殖 ,但对B淋巴细胞无明显影响 :2 5～ 1 0mg/kg左旋咪唑可使CD+4/CD+8淋巴细胞比值明显升高 ;左旋咪唑可使鸡体内抗颗粒性、胸腺依赖性抗原SRBC抗体滴度 ,抗可溶性、胸腺依赖性抗原BSA抗体滴度和抗非胸腺依赖性抗原BA抗体滴度均明显升高 ;2 5～ 1 0mg/kg左旋咪唑可使鸡血清总补体活性明显升高。左旋咪唑影响正常鸡回忆性免疫应答反应 :左旋咪唑 ( 1 0mg/kg)可使二次免疫鸡抗SRBC抗体滴度和抗BA抗体滴度回忆性免疫应答反应明显升高 ;但使鸡对抗BSA抗体滴度回忆性免疫应答反应明显降低。     

柔嫩艾美耳球虫对藏鸡和隐性白羽鸡致病性差异分析

为进一步明确柔嫩艾美耳球虫对球虫易感性差异鸡种的致病性,本研究以1×10~5个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的剂量分别感染对球虫具有抗性的藏鸡和易感的隐性白羽鸡,接种后观察记录各组鸡的临床表征、血便记分、死亡率、增重、盲肠病变记分、卵囊产量,并于感染前和感染后3、6和8 d每个品种分别随机选择5只鸡采集抗凝血,应用流式细胞仪(FCAS)检测外周血CD4~+T和CD8~+T淋巴细胞亚群数量。结果显示,柔嫩艾美耳球虫感染后藏鸡相对增重率高于隐性白羽鸡,死亡率、血便记分和盲肠病变记分均低于隐性白羽鸡,但卵囊产量高于隐性白羽鸡。外周血T淋巴细胞亚群变化方面,感染前,藏鸡CD4~+T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值均高于隐性白羽鸡。感染后第3天,藏鸡CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值下降,隐性白羽鸡CD8~+ T淋巴细胞数略有下降,CD4~+T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值上升,但CD4~+/CD8~+比值仍显著低于藏鸡(P0.05)。感染后第6天,2个品种鸡CD4~+ T淋巴细胞数及CD4~+/CD8~+比值均下降,其中藏鸡表现为显著下降(P0.05),而隐性白羽鸡仅CD4~+/CD8~+比值显著降低(P0.05),隐性白羽鸡CD8~+ T淋巴细胞数显著升高(P0.05)。感染后第8天,2个品种鸡CD4~+/CD8~+比值显著下降(P0.05),藏鸡CD8~+ T淋巴细胞数显著高于隐性白羽鸡(P0.05),但CD4~+/CD8~+比值显著低于隐性白羽鸡(P0.05)。结果表明,球虫对藏鸡和隐性白羽鸡的致病性存在差异,这种差异与T淋巴细胞介导的免疫应答反应密切相关。