四川省部分地区大肠杆菌的耐药性监测

采用常规方法对87份采集于四川省部分地区规模化养猪场病料样品(51份),健康鸡(28份)和野生白鹭(8份)粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,并采用K irby-Bauer法对大肠杆菌分离株的26种抗菌药物耐药性进行检测。结果表明,分离鉴定的51株猪源大肠杆菌、28株鸡源大肠杆菌和8株白鹭源大肠杆菌均存在不同程度多重耐药性,3重及3重以上耐药菌株占总菌株数88.51%:其中对青霉素G(100%)、强力霉素(89.66%)、复方阿莫西林(85.20%)、四环素(82.76%)、头孢氨苄(63.22%)、头孢噻吩(52.87%),氨苄青霉素和复方新诺明(51.72%)的耐药性较强;8株野生白鹭大肠杆菌多重耐药性远低于猪源和鸡源大肠杆菌分离株多重耐药性,对受试喹诺酮类、复方新诺明等多种药物高度敏感。     

鸡源大肠杆菌强毒株耐药基因的定位及耐药质粒消除

本试验对临床分离的多重耐药鸡源致病性大肠杆菌强毒株的耐药基因进行初步定位,为临床选择合适的治疗策略提供理论依据。从送检病死鸡的肝脏、心脏中分离鉴定致病菌,质粒提取试剂盒提取分离菌的耐药质粒,转化入基因工程菌JM109,通过质粒纯化、电泳和药敏试验对耐药基因进行了初步定位。并用艾叶水煮液对该菌株进行体外耐药质粒消除试验。结果分离鉴定到1株强毒力鸡源大肠杆菌,该菌呈多重耐药性,且仅对氟奇霉素和链霉素敏感;由质粒转化和药敏试验结果可初步将耐环丙沙星、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸、林可霉素和复方新诺明的基因定位于耐药质粒上,并可随质粒的转移而使转化菌获得耐药性;用艾叶水煮液可使该菌的耐药质粒消除率达60%;质粒消除菌的药敏试验结果表明,消除耐药质粒的细菌恢复了对环丙沙星、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸、林可霉素和复方新诺明的敏感性。本研究结果表明,分离菌的耐药基因分别位于质粒和染色体上,艾叶对耐药质粒有较强的消除作用,可作为临床治疗用药。     

辽西奶牛乳房炎优势病原菌的分离鉴定及药敏试验

采集辽西地区5个城市的临床型奶牛乳房炎奶样89份,采用形态学观察和基因分析法进行了细菌的分离鉴定,结果显示优势病原菌依次为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和无乳链球菌。应用生物梅里埃药敏试剂盒测定所分离的乳房炎主要病原菌对常用抗生素的药物敏感性,结果表明金黄色葡萄球菌敏感率较高的药物有米诺环素、呋喃妥因、喹奴普汀、克林霉素,而耐药率较高的药物有青霉素、苯唑西林、万古霉素、红霉素;大肠杆菌敏感率较高的药物有头孢西丁、替卡西林,而耐药率较高的药物依次为阿莫西林、头孢噻吩、环丙沙星、复方新诺明;无乳链球菌对氨苄西林、万古霉素、利福平、替考拉宁敏感率高达100%,四环素、链霉素次之,而对青霉素、环丙沙星耐药率较高;依据上述结果,青霉素和环丙沙星应为临床治疗奶牛乳房炎的淘汰药物。该结果为针对辽西地区防治奶牛乳房炎采取科学合理的防治措施提供了可靠依据。     

上海市动物源性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

为掌握上海市动物源性大肠杆菌的耐药情况及耐药规律,对2013—2015年在门诊畜禽中分离到的大肠杆菌进行药敏试验。共分离到236株大肠杆菌,其中猪源164株、禽源72株。选用15种抗生素,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法,对大肠杆菌进行药物敏感试验。结果表明,无论是猪源大肠杆菌,还是禽源大肠杆菌,对大多数抗生素的耐药程度均较高。其中,对磺胺异噁唑、复方新诺明、恩诺沙星和大观霉素等抗生素的耐药情况较为严重;对丁胺卡那霉素和阿莫西林/棒酸2种抗生素较为敏感,耐药率低于20%。从耐药谱型来看,猪源大肠杆菌较禽源大肠杆菌具有更加复杂的耐药谱型。     

金黄色葡萄球菌的耐药性分析

为调查金黄色葡萄球菌的耐药性现状,用世界卫生组织(WTO)推进的Kirby-Bauer法,完成11株金黄色葡萄球菌对林可霉素、头孢氨苄、丁胺卡那霉素、青霉素G、恩诺沙星、庆大霉素、万古霉素、复方新诺明、氨苄青霉素、氟哌酸、红霉素、阿莫西林12种抗菌药的药敏试验,试验按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1999年版标准进行判定。结果表明:金黄色葡萄球菌对万古霉素100%敏感,对头孢氨苄和丁胺卡那霉素的敏感程度仅次于万古霉素。但是对β-内酰胺类抗生素几乎全部耐药。对林可霉素、恩诺沙星、庆大霉素、复方新诺明、氟哌酸、红霉素的耐药率分别为63.6%、36.4%、9.1%、45.5%、63.6%、81.8%。     

鸡源耐安普霉素大肠杆菌耐药表型研究

进行了安普霉素耐药大肠杆菌耐药表型的研究.采用常规方法和生化鉴定管对有过安普霉素用药史的鸡场分离的鸡源病原性大肠杆菌进行鉴定,并用试管二倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC),筛选出鸡源安普霉素耐药大肠杆菌;采用药敏纸片法研究了这些耐药菌对安普霉素等14种抗菌药物的敏感性.共筛选出7株对安普霉素耐药的鸡源性大肠杆菌,这些耐药菌株全部对安普霉素、妥布霉素、奈啶酸、多西环素和阿莫西林耐药;大部分对庆大霉素、链霉素、卡那霉素、壮观霉素也呈现耐药.对新霉素的耐药较低,对阿米卡星高度敏感.部分交叉耐药现象的存在揭示对安普霉素等氨基糖苷类药物产生耐药性的菌株,其他抗生素也可能对它们失去疗效.     

母猪子宫内膜炎的病原分离及药敏试验

为了解和掌握吉林农业科技学院猪场猪子宫内膜炎的情况,取母猪的子宫内容物分别采用显微镜观察法、鉴别培养法和生化试验方法,鉴定出有葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌这四种细菌,并将鉴定出来的细菌做药敏试验。结果显示葡萄球菌和链球菌对左氧氟沙星、米诺环素、复方新诺明敏感,对链霉素中度敏感,对青霉素、苯唑青霉素、阿米卡星、头孢噻肟钠耐药;沙门氏菌对左氧氟沙星、米诺环素、复方新诺明、头孢噻肟钠敏感,对链霉素、阿米卡星中度敏感,对青霉素、苯唑青霉素产生耐药性;大肠杆菌对左氧氟沙星、米诺环素、复方新诺明、阿米卡星、头孢塞肟钠敏感,对链霉素中度敏感,对青霉素、苯唑青霉素耐药;中药复方制剂对体外抑菌试验有效果。     

广东地区动物源性大肠杆菌的分离及药敏分析

由广东多个地区猪及禽类养殖场采集疑似大肠杆菌病病料,分离出猪源及禽源大肠杆菌共71株。血清型鉴定实验确定52株的血清型,其中猪源大肠杆菌28株,优势血清型为O101及O157,这两种血清型分别占25％与17．9％;禽源大肠杆菌24株,优势血清型为O119,占62．4％。选用10种抗生素试纸进行药敏试验（庆大霉素、复方新诺明、氟哌酸、红霉素、羧苄青霉素、头孢氨苄、青霉素G、氯霉素、氨苄青霉素、丁胺卡那霉素）,结果表明实验菌株耐药性程度较高。     

畜禽大肠埃希氏杆菌的药敏性调查

从梅州地区多个养殖场的动物肠道和排泄物中分别分离出10株鸡源性大肠埃希氏杆菌和8株猪源性大肠埃希氏杆菌,分别对11种较新的抗生素进行药敏性试验。结果表明:诺氟沙星、环丙沙星和阿米卡星的抑菌效果最强;其次为痢特灵、头孢噻吩、氯霉素及卡那霉素;克林霉素、青霉素、氨苄西林和苯唑西林无抑菌作用。     

7味中药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌抑菌活性的研究

考察石榴皮、诃子、炒白术、黄连、败酱草、红藤、薏苡仁等7味中药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌作用。采用纸片法对近年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测。结果表明,14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对黄连敏感;对石榴皮、诃子、败酱草中度敏感;对炒白术、红藤、薏苡仁均耐药;对14种常用抗生素的药物敏感性检测结果显示,14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对万古霉素、青霉素、红霉素表现为耐药,对呋喃妥因中度敏感,对氯霉素、诺氟沙星、万古霉素、头孢唑啉等10种抗生素均敏感。提示7味中药中石榴皮、诃子、黄连、败酱草对肠出血性大肠杆菌病具有一定的治疗作用。     

临床3种常见病原菌的耐药性分析

为了解临床常用抗生素的耐药性,通过K-8纸片法,进行3种病原菌对13种常用抗生素的敏感性测定,并选用微量稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC),进而分析3种病原菌对13种抗生素的耐药性.试验结果表明,大肠杆菌对青霉素、诺氟沙星耐药率最高达100％,对乙酰甲喹耐药率最低为10％;沙门氏菌对青霉素耐药率最高达100％,对氟苯尼考耐药率最低为12.5％;链球菌对红霉素耐药率最高达100％,对头孢噻吩耐药率最低为11.1％.     

屠宰前鸡、猪源大肠杆菌耐药性调查

本试验旨在了解屠宰前鸡、猪源食品动物体内大肠杆菌耐药情况,分析潜在的食品安全问题。从广州市畜禽交易市场随机采集待屠宰鸡和猪的粪便样品,分离鉴定大肠杆菌,并采用琼脂稀释法检测大肠杆菌对15种抗菌药物的敏感性。结果显示,从658份猪源样品和133份鸡源样品中共分离鉴定出731株大肠杆菌,其中猪源606株,鸡源125株。药敏试验结果显示,731株大肠杆菌均表现出不同程度的耐药,耐药谱广且多重耐药现象严重。对复方新诺明和四环素的耐药率为90.0%以上,仅对头孢西丁、黏菌素和阿米卡星较敏感(耐药率均低于3%)。鸡源大肠杆菌对头孢噻肟、头孢曲松、新霉素、阿米卡星、萘啶酸和环丙沙星的耐药率显著高于猪源大肠杆菌(P＜0.05)。鸡源大肠杆菌中3耐及3耐以上的菌株占97.60%,猪源大肠杆菌占94.72%。结果表明,屠宰前畜禽体内大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性非常严重,以多重耐药为主,且耐药谱丰富多样。提示屠宰前畜禽携带的耐药菌对食品安全和人类健康存在较大的安全隐患。     

鸡源普通变形杆菌的分离鉴定及药物敏感性研究

明确鸡源普通变形杆菌的分离鉴定及其药物敏感性状况。采集临床发病鸡的肝脏样品,进行病原分离纯化、革兰染色镜检、生化鉴定,16S rRNA的PCR扩增、测序及同源性比对,对分离菌株进行药敏试验以及最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定。结果显示,分离的细菌为革兰阴性杆菌,16S rRNA同源性分析显示分离菌株与普通变形杆菌的同源性为98.72%;药敏试验结果表明,分离菌株对头孢噻肟、洛美沙星、复方新诺明敏感度高,对红霉素耐药;综合药敏试验及MIC结果,分离菌株对舒巴坦、庆大霉素等5种药物敏感,其中抑菌效果最强的是舒巴坦(MIC 0.125μg/mL),对青霉素、头孢拉定等产生耐药性,其中对青霉素(MIC128μg/mL)和林可霉素(MIC128μg/mL)耐药率较高。说明所分离的菌株是鸡源普通变形杆菌,养殖业中可以选用舒巴坦和庆大霉素等药物进行防控。     

我国部分省区牛源金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性调查

为调查我国奶牛乳房炎奶样中金黄色葡萄球菌的药物敏感性情况,以便为该病的临床用药提供参考,本试验采用纸片扩散法对从北京、山西、内蒙古、新疆、浙江5省区奶牛乳房炎奶样中分离的148株金黄色葡萄球菌进行了抗菌药物敏感性检测。北京、山西、内蒙古分离株的临床药敏试验显示,所有菌株对头孢西丁、多西环素、四环素敏感或中介,对红霉素、克林霉素、青霉素、复方新诺明严重耐药,对氯霉素、环丙沙星和庆大霉素的敏感性有地域性差异,66%～100%的菌株同时对3种以上的抗菌药物耐药;新疆86株分离株和浙江20株分离株的临床药敏试验显示,所有菌株除对红霉素、克林霉素、青霉素、复方新诺明耐药外,对多西环素和四环素完全耐药,86%以上的分离株对5种以上抗菌药物耐药,同时还发现头孢西丁耐药株。调查结果显示,5省区乳房炎奶样中的金黄色葡萄球菌除对头孢类(头孢西丁)敏感外,对其他类型抗菌药物均存在一定程度的耐药,尤其对大环内酯类(红霉素)、林可胺类(克林霉素)、青霉素类(青霉素)、磺胺类(复方新诺明)抗菌药物严重耐药,对3～5种以上不同类型抗菌药物的多重耐药也较为普遍。调查表明,牛源性金黄色葡萄球菌耐药性的广泛存在将对金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎的抗菌药物治疗形成严重挑战。     

兔源大肠杆菌耐药表型分析

从9个规模化兔场分离到50株大肠杆菌,选取了16种抗生素对这50株大肠杆菌运用Kirby-Barer法进行药敏试验,结果表明：先锋霉素、新霉素、痢特灵、丁胺卡那霉素的抑菌作用比较强;而细菌对氨苄青霉素、阿莫西林、强力霉素、林可霉素则表现出极其高的耐药性,对四环素、氯霉素、卡那霉素、庆大霉素、复方新诺明、恩诺沙星、诺氟沙星、链霉素也有很高的耐药性。所分离的大肠杆菌以耐药8～12种居多,占细菌总数的78％,未发现不耐药的菌株与全部耐药的菌株。     

1997—2010年上海市猪源大肠杆菌耐药性和产ESBLs菌的基因型检测

[目的]了解1997—2010年上海市猪源大肠杆菌的耐药情况和产ESBLs大肠杆菌的基因型分布。[方法]采用K-B法对199株猪源大肠杆菌进行药敏试验,采用PCR方法对TEM、CTX-M、SHV和OXA等4种基因型进行检测。[结果]199株猪源大肠杆菌对20种抗菌药物均表现出不同程度的耐药性。耐药率最低的为大观霉素（7.04%）,其次为头孢曲松（10.55%）、头孢哌酮（12.56%）,最高的为林可霉素（100%）,对阿莫西林和复方新诺明的耐药率分别高于80%和93.33%。5~15耐的菌株占88.94%。15种抗菌药物之间均存在不同程度交叉耐药性。共检出15株产ESBLs菌株（7.54%）,其中2株TEM型,5株CTX-M型,7株同时携带TEM、CTX-M型。[结论]上海市猪源大肠杆菌分离株耐药谱广、耐药率高;对抗菌药物的交叉耐药现象严重,交叉耐药率有的相似,有的差异大。猪源大肠杆菌ESBLs基因型主要以TEM型和CTX-M型为主,尚无SHV型和OXA型。     

长治鸡群大肠杆菌耐药状况的研究

研究长治鸡群大肠杆菌耐药状况、交叉耐药状况、多重耐药状况及是否出现超级大肠杆菌,同时为临床用药提供参考,减少用药成本,控制大肠杆菌的危害,增加养殖户的收入.剖解病死鸡,采集可疑病料进行细菌分离培养鉴定,通过药敏试验确定其耐药情况.试验结果:长治鸡群大肠杆菌对氨苄青霉素耐药程度83%;对红霉素耐药程度67%;对复方新诺明耐药程度50%;先锋V耐药程度50%;对诺氟沙星耐药程度50%;对万古霉素耐药程度50%;对氯霉素耐药程度33%;对庆大霉素耐药程度33%;对阿米卡星耐药程度17%;对环丙沙星耐药程度17%;对利福平耐药程度17%;对复达欣耐药程度17%;对新生霉素耐药程度为0.结论:长治鸡群分离出的6株大肠杆菌中的5株为多重耐药性大肠杆菌,目前未出现超级大肠杆菌.对常用抗菌药物中的青霉素类、大环内酯类、头孢类、喹诺酮类耐药程度达到50%以上,分别为83%、67%、50%、50%;对新药万古霉素的耐药程度也达到了50%.     

西藏林芝地区藏猪源大肠杆菌耐药表型及耐药基因检测

本文采集西藏林芝地区藏猪养殖场和散养藏猪腹泻物,采用细菌学方法分离鉴定藏猪源大肠杆菌后,检测抗菌药物的敏感性及耐药基因。结果显示:林芝地区藏猪源大肠杆菌分离菌株对各种抗生素存在不同程度的耐药性,其中对诺氟沙星、阿奇霉素、复方新诺明极敏感;对氯霉素、头孢唑林、链霉素、丁胺卡那霉素、四环素、庆大霉素、头孢西丁高度敏感;呋喃妥因中度敏感;而对万古霉素、青霉素、红霉素耐药。并检测出P基因,其检出率为100%。根据实验结果,提出了科学用药措施,为西藏林芝地区藏猪养殖业的健康发展提供理论依据。     

某肉鸡场鸡源大肠杆菌耐药性跟踪检测与分析

2012~2014年从辽宁某肉鸡养殖场采集300份鸡泄殖腔拭子,分离获得152株鸡源大肠杆菌。采用微量稀释法对152株鸡源大肠杆菌进行了14种兽用和16种人用抗菌药的药物敏感性测定,并参照CLSI肠杆菌判定标准进行判定。结果显示,鸡源大肠杆菌对兽用阿莫西林、氨苄西林、恩诺沙星、复方新诺明、磺胺异噁唑、四环素和人用哌拉西林、替卡西林、环丙沙星均产生明显耐药性,耐药率较高。对所分离的鸡源大肠杆菌耐药性检测结果与EUCAST发布的野生型菌株MIC值分布进行比较分析,耐药结果基本一致,但通过MIC值分布比较,结果显示出分离菌株的大观霉素、氨苄西林、恩诺沙星、复方新诺明、头孢噻吩、头孢呋辛、环丙沙星和妥布霉素药物的MIC值发生了明显右移,表明该肉鸡场大肠杆菌对上述抗菌药的耐药强度呈现逐渐增强的趋势。在养殖过程中应采取科学饲养和严格的生物安全措施防控疾病,科学合理使用抗菌药物,控制肉鸡场细菌耐药性的产生和传播。     

辽西地区鸡源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测

为检测辽西地区(锦州、盘锦、阜新、朝阳、葫芦岛)鸡源大肠杆菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),选取15种代表药物,采用Kirby-Bauer纸片法、最小抑菌浓度(MIC)法进行药敏试验。结果:分离检测到产ESBLs的37株大肠杆菌,对氨苄西林、头孢噻呋、新诺明的耐药率较高,均高于91.2%,对硫酸安普霉素、阿米卡星、恩诺沙星、复方新诺明的耐药率均高于78.4%,对多西环素、氟苯尼考、克林沙星药物耐药率等于或低于46.0%,头孢吡肟、阿莫西林与棒酸(CA)酶抑制剂联用后耐药率低于8.11%。由此表明,辽西地区鸡源大肠杆菌产ESBLs耐药菌株表现多重耐药现象,但配合ESBLs抑制剂能明显增强抗菌活性,降低耐药率。