抗菌药物对产ESBLs鸭大肠杆菌的抗菌活性试验

采用CLSI推荐的初筛试验和表型确证试验方法,检测临床分离的12株鸭大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,用微量稀释法测定氨苄西林等8种抗菌药及其与舒巴坦联用对产ESBLs鸭大肠杆菌的抗菌活性,分析探讨鸭大肠杆菌的耐药性与ESBLs的关系,为临床诊治提供理论依据.结果表明:临床分离的12株鸭大肠杆菌中,有9...     

黄连素与抗菌药物联用对大肠杆菌体外抗菌活性的影响

文献报道，黄连素与甲氧苄氨嘧啶(TMP)、氟喹诺酮类药物联合，用于治疗志贺氏菌感染引起的肠道细菌感染，疗效明显增强。本试验研究了黄连素分别与氨苄西林、环丙沙星联合对禽大肠杆菌、氨苄西林、环丙沙星耐药性鸭大肠杆菌的体外抗菌活性，以便对临床合理用药，减少细菌耐药性提供参考。     

赤芍水提物及芍药苷对大肠杆菌抗菌增敏活性的影响

旨在考察中药赤芍水提物及其主要成分芍药苷对磷霉素钠的抗菌增敏活性,验证芍药苷对外排泵转运子AcrB的抑制作用,推测其抗菌增敏机制。首先,通过微量棋盘稀释法检测赤芍水提物及其主要成分芍药苷与磷霉素钠联合应用对临床分离的禽多重耐药大肠杆菌E320和质控菌株大肠杆菌ATCC35218的抑菌作用;其次,利用YASARA软件,以大肠杆菌多重耐药AcrAB-TolC系统中的外排泵转运子AcrB为靶标,与芍药苷进行分子对接模拟,探讨两者的识别机制;通过尼罗红外排试验验证芍药苷对外排泵的抑制作用;最后,通过实时荧光定量PCR验证芍药苷降低AcrB mRNA的表达量进而发挥抗菌增敏作用。试验结果证实赤芍水提物和芍药苷与磷霉素钠联合用药均具有协同抑制多重耐药大肠杆菌E320的作用(FICI≤0.5);分子对接结果显示芍药苷与AcrB蛋白受体的结合能达到8.333 kJ/mol,作用主要位点是AcrB蛋白受体上Phe628、Phe615、Val612、Ile277、Asn274、Gly179、Phe178等氨基酸残基,分子间主要作用力为疏水作用力;外排抑制试验结果显示芍药苷可以抑制耐药大肠杆菌外排泵活性,明显阻滞尼罗红的外排;实时荧光定量PCR结果显示芍药苷联合磷霉素钠比单独使用磷霉素钠显著降低大肠杆菌AcrB mRNA的表达量。本试验证明芍药苷通过作用外排泵转运子AcrB,使抗生素在菌体内积聚;并能显著降低AcrB mRNA的表达量进而起到抗菌增敏作用,为临床提供一种有效的抗菌增敏剂,对治疗耐药菌引起的细菌感染具有重要意义。     

纳米银对猪链球菌体外抗菌活性及其生物膜形成的影响

【目的】研究纳米银(silver nanoparticles, AgNPs)对多重耐药猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)的体外抗菌活性及其生物膜形成的影响,为解决猪链球菌的耐药问题提供参考。【方法】以5株临床分离的多重耐药猪链球菌(S1018、S894、S786、S815和S844)为研究对象,采用微量肉汤稀释法测定AgNPs对5株猪链球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC),通过测定AgNPs作用下细菌的生长速率以及不同浓度AgNPs对猪链球菌的抑制率来评价AgNPs的抗菌活性;通过结晶紫染色法测定各菌株生物膜的形成能力和6.25、12.5、25、50μg/mL AgNPs对5株多重耐药猪链球菌菌株生物膜形成的影响。【结果】AgNPs对S1018株的MIC和MBC均为12.5μg/mL,对其余4株多重耐药猪链球菌的MIC和MBC均为25.0μg/mL;AgNPs对多重耐药猪链球菌的抗菌活性好,25～100μ...     

中西药联用对猪大肠杆菌体外抗菌活性分析

为观察中草药与抗菌药物联用对猪大肠杆菌的体外抑菌效果,将所选中草药按常规方法制备水提取物,用试管二倍稀释法,分别测定中草药水提取物、抗菌药物及中草药和抗菌药物配伍对猪大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）。结果显示,所选的4种中草药和抗菌药物及其两者配伍对猪大肠杆菌均有较好的抑制作用,且抗菌药物和中草药联用的抑菌效力一般表现增强。其中对猪大肠杆菌作用最明显的配伍是秦皮＋欣、连翘＋欣及石榴皮＋菌,其最小抑菌浓度为0．977μg／mL。     

黄连素与其它抗菌药物联用对大肠杆菌体外抗菌活性研究

黄连素又名小檗碱,为毛莨科黄连属植物,是黄连、黄柏等中药中提取的一种生物碱,具有抗病原微生物、抗原虫、抗脂质过氧化作用,能增强白细胞、网状内皮系统的吞噬功能,对细菌毒素有明显的解毒功能,临床上主要用于治疗肠道细菌感染.文献报道[1～3],黄连素与甲氧苄氨嘧啶(TMP)、氟喹诺酮类药物联合,用于治疗志贺氏菌感染引起的肠道细菌感染,疗效明显增强.本试验研究了黄连素分别与氨苄西林、环丙沙星联合对禽大肠杆菌、氨苄西林、环丙沙星耐性鸭大肠杆菌的体外抗菌活性,对指导临床合理用药,减少细菌耐药性具有一定的生产实际意义.     

甘草提取物对1株致犊牛腹泻大肠杆菌生物膜抑制作用的试验

大肠杆菌生物膜的形成与其致病性、抗药性有密切关系,而中药在抗生物膜方面具有独特的优势。本试验对来自新疆阿克苏地区某奶牛场6份犊牛腹泻粪便进行了细菌分离鉴定,获得24株大肠杆菌,5株沙门菌。经96孔微量板法对已分离的24株大肠杆菌进行生物膜阳性菌筛选试验,获得生物膜阳性菌3株,其中1株为强阳性(XN-3-6株)。采用不同浓度甘草提取物对XN-3-6分离株生物膜形成抑制试验,结果表明:甘草提取物抑制大肠杆菌生物膜形成的最小浓度为5%。该试验结果为临床上防治大肠杆菌引起犊牛腹泻病提供了理论依据。     

磷霉素对犬尿道致病性大肠杆菌的体外抗菌活性

应用微量稀释法和E-test,测定磷霉素对不同耐药类型的犬尿道致病性大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),同时测定磷霉素对大肠杆菌的时间杀菌曲线。结果表明,磷霉素对大肠杆菌,包括对其他类抗菌药物耐药的多重耐药菌(MDR)具有良好的抗菌活性,其MIC和MBC分别为0.25~4.00 mg/L和0.50~32.00 mg/L。时间-杀菌曲线法试验结果显示,随着磷霉素浓度的增加,杀菌效应也明显增加,呈现明显的浓度依赖的特性。本研究为磷霉素临床控制动物致病性大肠杆菌感染及防控耐药性的产生提供了实验依据。     

多种草药对家禽致病性大肠杆菌的抗菌活性作用

本研究以家禽致病性大肠杆菌为试验菌种,利用琼脂平板方法中的Kirby-Bour方法测定5种草药的抗菌作用。结果表明,其中两种草药--胡椒老叶和耳叶决明具有抗菌活性。利用相同的方法对该两种草药按不同的稀释比例进行稀释,同时还利用各种稀释剂进行活性成分提取,以检测该两种草药的抗菌活性。大肠杆菌感染鸡临床试验表明,耳叶决明的抗菌活性强于胡椒老叶,同时还研究了两种草药对鸡的副作用、附加作用。     

恩诺沙星对鸭大肠杆菌在体内抗菌活性的试验

以人工诱发雏鸭大肠杆菌感染模型,采用肌注不同剂量的恩诺沙星注射液评价恩诺沙星体内抗菌活性。实验性治疗结果表明,不同剂量恩诺沙星注射液(7.50,5.63,3.16,2.32,1.78mg/kg),对鸭大肠杆菌的保护率分别为100%,100%,80%,60%,50%,而大肠杆菌对照组的死亡率为100%。恩诺沙星对鸭大肠杆菌的ED50值为2.93mg/kg。实验显示,恩诺沙星注射液对鸭大肠杆菌具有较强的体内抗菌活性。     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果,本研究对河南部分地区采集的样品(50份)进行分离鉴定、生化试验及致病性试验,对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测,将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验,并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示,采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性,且23株菌均为致病性大肠杆菌;通过耐药性检测,23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性,其中试验菌株对甘草耐药率最高(82.6%),其次为生地(78.2%),而对黄柏(17.3%)和白头翁(21.7%)耐药性较低,具有一定的敏感性;体外抑菌试验结果发现,中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果,其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性,还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果,本研究对河南部分地区采集的样品（50份）进行分离鉴定、生化试验及致病性试验,对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测,将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验,并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示,采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性,且23株菌均为致病性大肠杆菌;通过耐药性检测,23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性,其中试验菌株对甘草耐药率最高（82.6%）,其次为生地（78.2%）,而对黄柏（17.3%）和白头翁（21.7%）耐药性较低,具有一定的敏感性;体外抑菌试验结果发现,中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果,其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性,还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

10味中药对畜禽大肠杆菌的体外抗菌活性试验

大肠杆菌可引起多种畜禽疫病,临床最常见的有仔猪黄、白痢,仔猪水肿病,鸡的败血症、心包炎、肝周炎、腹膜炎、肠炎,家兔的黏液性肠炎等。大肠杆菌病目前在国内大多数养殖场广泛流行,发病率和死亡率居高不下,严重威胁着畜禽养殖业的发展,给养殖业造成了巨大的经济损失。     

复合益生菌对大肠杆菌的抑制作用

面对抗生素作为饲料添加剂的毒副作用和禁用问题,研究高效复合益生菌来替代抗生素已变得越来越重要。为了获得抑制大肠杆菌生长的高效益生菌组合,本研究首先选用3种枯草芽孢杆菌(芽孢菌-1、芽孢菌-2、芽孢菌-3)进行组合,获得最佳配比后再与乳酸杆菌和酵母菌进行组合。通过测定菌液的pH值及大肠杆菌数来判断不同配比的复合菌对大肠杆菌抑制作用的强弱。结果表明,芽孢菌组合(芽孢菌-2和芽孢菌-3的比例为1∶1)、乳酸杆菌、酵母菌按0∶1∶1、1∶3∶0、2∶2∶3和2∶3∶2来制备复合菌剂时,对大肠杆菌的抑制效果最好,而且优于抗生素。而没有添加乳酸杆菌的几组复合菌对大肠杆菌的抑制效果明显较弱,说明乳酸杆菌的抑菌作用较好。     

大肠杆菌FliC基因敲除后对大肠杆菌生物膜形成的影响

利用无疤痕基因敲除方法,构建大肠杆菌FliC基因敲除突变株。基因重组PCR结果显示:在重组转化体中FliC基因完全被卡那抗性基因和CcdB替代,获得Ⅰ型突变株(△1FliC);同时利用基因突变技术,对FliC基因起始密码子进行点突变,将ATG突变为AAA,再次进行基因重组后获得Ⅱ型FliC基因沉默菌株(△2FliC)。利用96孔微量板法,分别对野毒株、△1FliC和△2FliC进行生物膜表型检测,结果显示:△1FliC和△2FliC生物膜形成能力明显低于野毒株,从而为临床上大肠杆菌病的预防及疫苗的研制提供一定的理论基础。     

五味中草药对大肠杆菌生物膜形成的影响

生物膜是细菌分泌的多糖、纤维蛋白、核酸、磷脂、脂质蛋白等含水聚合性基质构成,膜内细菌有很强的耐药性,给临床治疗带来很大困难,本试验利用96孔微板法研究苦豆子、金银花、黄连、连翘、夏枯草5味中草药对大肠杆菌生物膜形成的影响,为临床上治疗大肠杆菌引起犊牛腹泻病提供新的理论依据。结果显示:随药物浓度的升高,黄连、苦豆子、金银花和连翘在抑制细菌生长的同时,也抑制细菌生物膜的形成;而夏枯草在抑制细菌生长的同时,细菌生物膜的生长呈现增强的趋势。     

多种消毒剂对大肠杆菌的抑制作用研究

正大肠杆菌(Escherichia coli)主要寄居于动物肠道内,可引起仔猪黄痢(1~3日龄多发,发病率可达100%)、白痢(10~30日龄多发,发病率达30%~80%)及水肿病(断奶仔猪多发,发病率为10%~35%,但致死率可达80%~100%)[1],而在禽大肠杆菌病中以急性败血性和生殖器官病型危害最严重,因此采用有效消毒剂对病原体进行消灭,切断传播途     

腐殖酸钠对大肠杆菌的抑制作用研究

为探讨腐殖酸钠对大肠杆菌的抑制作用机理,试验采用稀释平板计数法测定不同水平腐殖酸钠对大肠杆菌的抑制效果,并通过透射电镜对大肠杆菌菌体进行观察。结果表明,添加5%、10%、15%腐殖酸钠可使大肠杆菌活菌数量明显降低（P＜0.05）;同一菌株随腐殖酸钠添加量增加,抑制效果明显加强（P＜0.05）;不同菌株在相同处理条件下,随时间的延长,抑制作用越明显。透射电镜下观察发现,添加5%腐殖酸钠组与添加5%腐殖酸钠调节pH组均可使大肠杆菌细胞膜通透性改变,细胞内出现空泡。综上所述,腐殖酸钠可有效抑制大肠杆菌生长。     

金银花等5种中药对猪源大肠杆菌抗菌活性的影响

为观察金银花、五味子、黄连、赤芍、鱼腥草对猪源大肠杆菌体外抑菌效果,测定其最小抑菌浓度,本实验采用平皿打孔法测定各中草药的抑菌圈直径,梯度稀释法测定各中草药抑制病原菌生长的最小抑菌浓度,结果表明,金银花、五味子、黄连、赤芍、鱼腥草对猪源大肠杆菌的抑菌圈直径分别为23.6、20.2、22.1、15.3、17.1 mm,最小抑菌浓度分别为0.2、0.3、0.2、0.6、0.5 g/mL,金银花、五味子、黄连、赤芍、鱼腥草对猪源大肠杆菌体均有体外抑菌效果,其中金银花,黄连,五倍子的抑菌效果最好,赤芍和鱼腥草抑菌效果不明显。     

5种复合藏药对西藏牦牛源大肠杆菌抗菌活性的研究

为了解石榴健胃丸、仁青芒觉、十五味黑药丸、仁青常觉等5种复合藏药对西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌的抑菌情况。利用药敏试验的研究方法,对近几年来实验室分离保存的14株西藏牦牛源肠出血性大肠杆菌进行了药物敏感性检测的研究。结果表明:14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对仁青芒觉表现为中度敏感;对石榴健胃丸、十五味黑药丸、仁青二十五味马宝丸、仁青常觉均表现为耐药;14株牦牛源肠出血性大肠杆菌对常用抗生素均敏感。通过动物试验表明,只接种牦牛源肠出血性大肠杆菌没有注射仁青芒觉的分离菌株均能引起大多数小鼠死亡,均具有高致病性,致死率达到95%,而注射了仁青芒觉复合藏药的试验组,死亡情况明显降低。结论提示:5种复合藏药中仁青芒觉对肠出血性大肠杆菌具有一定的治疗价值,目前对于肠出血性大肠杆菌的治疗没有有效的方法,特别是在耐药性泛滥的形势下,大肠杆菌病的治疗方面除了临床上常用的抗生素,复合藏药也是一个良好的选择。