克氏原螯虾细菌性病原的分离与鉴定

2010年浙江安吉克氏原螯虾养殖发生严重病害,从患病的虾肠道内分离到菌株N201007,人工感染健康克氏原螯虾在8天内其半数致死量LD50为5.3×105,感染发病虾表现出与自然发病虾相似症状。通过革兰氏染色,梅里埃细菌测定试剂条ID32 E鉴定为嗜水气单胞菌。为进一步确定病原菌分类地位,对其16S rRNA序列扩增并测序,在NCBI基因库上进行序列比对,与菌株ATCC7699同源性达到99%,通过以上实验确定导致此次养殖克氏原螯虾大规模死亡的病原为嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明该菌对强力霉素、氯霉素、恩诺沙星、环丙沙星、菌必治敏感。     

乳酸菌产酸动态测定及小鼠乳酸耐量初探

摘要：乳酸是乳酸菌分泌的主要有机酸之一。该试验测定嗜酸乳杆菌分泌乳酸的最大浓度,再利用浓度为12.89ul/ml、30ul/ml、60ul/ml、90ul/ml的乳酸灌服小鼠。结果发现灌服90ul/ml组小鼠2-3h出现死亡。24h后,通过体温、临床症状及剖检观察、生化检测以及病理组织切片得到结果,灌服浓度60ul/ml乳酸血清变化微小,小鼠的小肠没有损伤,从而建立小鼠肠道中乳酸模型。     

3种乳酸菌鉴定、筛选、富硒比较研究

为了筛选耐硒、富硒能力强的乳酸菌,本实验通过对嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌进行耐硒能力比较,并对耐硒能力最强的菌种进行富硒实验。通过采用分离纯化,结合糖酵解和革兰氏染色法对菌种进行鉴别,再对菌种进行驯化培养(所选用的培养基要形成浓度差)以及耐硒实验,利用3,3’-氨基联苯胺比色法测定硒转化能力,结果显示耐硒能力从大到小分别是嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚杆菌;当含硒量为17μg/mL,37℃下培养9h,嗜酸乳杆菌富硒率达到65.4%,在含硒的培养基上观察发现嗜酸乳杆菌的菌落一般比较小,呈不规则圆形,乳白色,表面光滑,有光泽。     

低聚木糖乳饮料对肠道菌群调节功效研究

利用小鼠动物试验评价了低聚木糖酸乳饮料对肠道菌群的调节作用,根据《保健食品检验与评价技术规范(2003)中调节肠道菌群功能检测方法》进行试验,发现高剂量组的小鼠的体重无显著影响,对小鼠的肠道中双歧杆菌、乳杆菌数量均明显高于对照组;肠杆菌、肠球菌数量与对照组无显著差异;产气荚膜梭菌数量明显低于对照组。因此,含低聚木糖的乳饮料能有效促进小鼠肠道双歧杆菌和乳杆菌的数量增加,并有效减少了产气荚膜梭菌的数量。     

免疫增强剂对仿刺参肠道微生物的影响

为了探讨肠道微生物和免疫增强剂的相互作用、拓展免疫增强剂的评价效果,通过植物源免疫增强剂党参来研究仿刺参肠道微生物的特性及其代谢能力变化。从摄食免疫增强剂党参后的健康仿刺参肠道中分离纯化优势菌株,经16S rDNA进行鉴定;以仿刺参“腐皮综合症”致病菌灿烂弧菌(Vibrio splendidus)为指示菌,采用十字交叉和纸片法进行体外拮抗试验,优势菌株进行生理生化特性分析,肠道内容物进行代谢能力分析。结果表明,筛选优化菌株共18株,系交替假单胞菌属、芽胞杆菌属、希瓦氏菌属、不动杆菌属、弧菌属等不同菌属;拮抗试验筛选优势菌株共4株,通过分泌酶等活性物质产生空间竞争,同时产生抑制灿烂弧菌的胞外产物,发生协同抑菌效果;4株优势菌株具有不同的底物特异性,通过透明圈观察其蛋白酶和淀粉酶活性较高,氧化酶、蔗糖、赖氨酸酶试验表现了不同的生化性质;且经党参投喂后仿刺参肠道微生物菌群代谢能力提高。总结,植物源免疫增强剂党参可调控、优化仿刺参肠道微生物特性,提高肠道代谢力,间接提高机体免疫力。     

温度、pH对泥鳅消化酶活力影响的研究

为了研究温度和pH值对泥鳅成鱼肠道和肝胰脏3种消化酶活力的影响。以Folin-酚法、3,5-二硝基水杨酸法及对硝基苯酚法分别测定泥鳅肠道和肝胰脏蛋白酶、淀粉酶及脂肪酶活力。研究发现：泥鳅肠道蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的最适温度分别为40℃、45℃、35℃;肝胰脏蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的最适温度分别为30℃、40℃、35℃。泥鳅肠道及肝胰脏蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的最适pH 7.2。最适温度下,肠道3种消化酶的活力均高于肝胰脏、肠道、肝胰脏A/P值均＞1。建议在泥鳅适宜的养殖水温内,应随着水温的升高适当提高泥鳅的投饵量;泥鳅的食性为偏植食性,对糖类具有较好的利用能力,泥鳅的饵料中可适当增加糖类的比重,既可满足泥鳅的营养需求又节约了饲料成本。     

两种养殖模式下黑鲷肠道及养殖水体菌群结构特征的研究

为了研究池塘流水槽循环水黑鲷养殖模式(IP)和传统池塘黑鲷养殖模式(EP)菌群结构特征,运用高通量测序技术,比较分析2种养殖模式黑鲷肠道和养殖水体中菌群组成结构与功能。结果显示：黑鲷肠道和养殖水体中主要由变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、蓝藻细菌(Cyanobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和绿弯菌门(Chloroflexi)组成,其丰度之和为98.32%~99.22%;在属水平上,菌属差异明显,IP模式下黑鲷肠道显著增加的菌属包括鲁杰氏菌属Ruegeria(14.84%)、聚球藻属Synechococcus(14.24%)、Marivita(3.58%)、norank_o__PeM15(2.97%)、norank_C__KD4-96(2.56%)(P<0.05) (IP>EP);而EP模式下,黑鲷肠道中肠杆菌属Enterobacter(10.31%)、分支杆菌属Mycobacterium(10.30%)、Romboutsia(7.37%)、肠球菌属Enterococcus(6.29%)、乳球菌属Lactococcus(5.38%)显著增加(P<0.05) (IPP<0.05);IP养殖模式水体菌群丰富度和多样性显著高于EP养殖模式(P<0.05),而黑鲷肠道之间无显著性差异(P>0.05)。2种养殖模式条件下菌群结构存在差异,且存在较多丰度差异显著的菌属。IP模式下黑鲷肠道中具有差异显著的优势菌属大多为有益菌,而EP模式黑鲷肠道多为慢性致病菌或条件致病菌属。     

极北鲵与东北小鲵消化道嗜银细胞的比较

摘 要：应用Grimelius法对极北鲵（Salamandrella keyserlingii）、东北小鲵(Hynobius leechii )两种动物消化道嗜银细胞的分布密度及形态进行了比较研究。结果显示：嗜银细胞在两种动物消化道各部分均有分布,但分布密度高峰不同：极北鲵消化道嗜银细胞在直肠部分布密度最高,胃体处最低;而东北小鲵在胃幽门部分布密度最高,在食管处最低。其形态和分布位置相似,嗜银细胞形态有圆形、椭圆形、锥体形和梭形等,分布于腺泡上皮细胞之间、上皮细胞之间和上皮细胞基部,也有少量位于固有膜内。嗜银细胞分布型的形成与动物的食性、生活环境以及消化道各部位生理功能有关。     

果汁中嗜酸耐热菌的特性 控制与检测

嗜酸耐热菌,即环脂芽孢杆菌(Alicyclobacillus spp).,能够经受果汁加工中的高温瞬时灭菌过程,并能在酸性果汁中生长,从而导致果汁风味的劣变和腐败。嗜酸耐热菌是果汁加工中的主要目标控制微生物,为果汁的主要安全性指标之一。系统阐述了果汁中嗜酸耐热菌的生长与耐热特性,危害与污染途径;并在此基础上,全面介绍和分析了嗜酸耐热菌的各种控制与检测方法。其中,非热灭菌技术对嗜酸耐热菌的控制,以及嗜酸耐热菌的特异性快速检测技术,是当前工业界和学术界共同关注的热点。     

黄雀（Carduelis spinus）消化道嗜银细胞的分布及形态学观察

摘 要 本文应用Grimelius银染法对黄雀（Carduelis spinus）消化道嗜银细胞的分布、密度、形态进行了研究。结果显示：食管和嗉囊中未发现嗜银细胞,消化道其它部位均有嗜银细胞,其分布密度大体呈波浪型,有两个分布高峰分别是腺胃和回肠,十二指肠分布密度最低。嗜银细胞主要分布于粘膜上皮之间和腺泡上皮之间,也有少量位于上皮细胞基部。嗜银细胞形态多样呈椭圆形、锥体形、梭形等,其中锥体形嗜银细胞突起伸向肠腔 ,梭形嗜银细胞两端均有突起,分别指向肠腔和固有膜。本文还结合黄雀消化道嗜银细胞分布型的形成与各部位消化功能有关的特点进行了讨论,认为黄雀消化道内嗜银细胞具有内、外分泌两种功能     

酸乳中乳酸菌计数方法的改进

<正>目前,我国通用的乳酸菌的检测方法为GB4789.35-2010食品安全国家标准之《食品微生物学检验乳酸菌检验》。根据该标准,乳酸菌被定义为"一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌,主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属(一般指嗜热链球菌)。该标准将乳杆菌的计数方法规定为乳酸菌总数结果减去双歧杆菌与嗜热链球菌计数结果之和。然而,在实际检测中,食品中乳酸菌总数、双歧杆菌、嗜热链球菌三者的计数结果,容易产生偏差。     

转Cry1Ac/sck基因糙米作为肉仔鸡日粮原料对肠道菌群的影响研究

为评价转Cry1Ac/sck基因糙米作为肉仔鸡日粮原料对肠道微生态的影响。将360只1日龄肉仔鸡随机分成3组,第一组饲喂含转基因糙米日粮;第二组饲喂含非转基因糙米日粮;第三组饲喂非转基因玉米日粮,试验期42天。在21、42天时测定肉仔鸡肠道菌群情况。结果表明：在实验期内,转基因糙米对肉仔鸡肠道菌群未产生明显影响。转Cry1Ac/sck基因糙米作为肉仔鸡日粮原料对肉仔鸡肠道微生态是安全的。     

冬季危害较大的仔猪黄白痢防治问答

<正>仔猪黄白痢又称新生猪腹泻,是仔猪黄痢和仔猪白痢的合称,是由埃希氏大肠杆菌在肠道内产生毒素所引起的急性肠道传染病。目前,已分离到的仔猪黄痢、白痢的血清型众多,各血清型疫苗之间有效的交叉保护性差,     

嗜银细胞在300日龄中国黄羽鹌鹑消化道中的形态与分布

为消化系统的生理和病理学研究提供形态学依据,研究300日龄中国黄羽鹌鹑(Coturnix aponica)消化道嗜银细胞的分布和形态。取消化道各段,应用Grimelius银染法处理,观察嗜银细胞的分布、形态,并统计消化道各段嗜银细胞的分布密度,采用独立样本T检验法对雌雄进行了比较。结果表明：在黄羽鹌鹑的口腔、食管、嗉囊、肌胃和泄殖腔未发现嗜银细胞,在消化道其他部位均有嗜银细胞,其分布曲线大体呈现波浪形,2个高峰分别出现在腺胃和结直肠,空肠的分布密度最低。嗜银细胞主要分布在腺胃腺叶内细胞、肠黏膜上皮细胞、肠固有层和肠腺泡上皮细胞之间。其形态多样,包括锥形、梭形、圆形、椭圆形等等,其中锥形嗜银细胞的突起伸向肠腔,梭形嗜银细胞两端均有突起,分别指向固有层和肠腔。说明黄羽鹌鹑消化道嗜银细胞的分布可能与其种属有关,结合黄羽鹌鹑消化道嗜银细胞分布与形态可以推测其有内分泌、外分泌和旁分泌3种功能。     

利用顶空SPME-GC-MS联用技术检测苹果汁中嗜酸耐热菌代谢产物的研究

以苹果汁中分离获得的1株嗜酸耐热菌和标准嗜酸耐热菌为材料,采用优化的AAM培养基进行培养,用顶空SPME-GC-MS联用技术对其代谢产物进行了研究。结果表明:①嗜酸耐热菌的主要代谢产物为愈创木酚和2,6-二溴苯酚;②单因素分析发现愈创木酚含量远远高于2,6-二溴苯酚,可以作为整个苹果汁中嗜酸耐热菌污染程度和风味败坏的衡量指标;③正交试验分析得到顶空固相微萃取法萃取愈创木酚的条件为DVB/CAR/PDMS萃取头,添加1.8gNa2SO4在温度55℃下萃取20min。     

苯菌灵胁迫对蜜蜂肠道微生物菌群结构的影响

旨在探明蜜蜂主要肠道菌群在药物胁迫下的变化规律,为进一步开展蜜蜂肠道共生菌群的生理功能及蜜蜂的健康养殖等研究提供理论参考。以意大利蜜蜂为材料,用PCR-DGGE分析方法对添食苯菌灵前后蜜蜂肠道微生物菌群结构进行研究。基于微生物的rDNA不同可变区经PCR后呈现出一条明亮的条带,表明蜜蜂肠道中有细菌和真菌的驻留。其中细菌的16S rDNA的V3可变区的PCR-DGGE显示有5条带,2条主带和3条副带;真菌18S rDNA V1+V2可变区的PCR-DGGE显示有3条带,1条主带和2条副带,表明蜜蜂肠道微生物较为丰富。在苯菌灵药物胁迫下,条带b、e、f、g逐渐变弱甚至消失,预示着蜜蜂肠道中的真菌种类和数目都有所减少,说明添食苯菌灵对肠道微生物具有抑制作用。苯菌灵药物胁迫会造成蜜蜂肠道微生态平衡失调,从而破坏机体正常的生理功能,严重影响到蜜蜂的健康。     

油茶籽粕多糖的结构表征及其对肠道菌群的影响

以油茶籽粕为原料,经传统水提醇沉与DEAE-52型柱层析纯化后获得2组分盐洗油茶籽粕多糖,即为CCPA(0.3 mol/L NaCl)和CCPB(0.5 mol/L NaCl),对其进行基础结构表征,并通过动物试验对小鼠的肠道代谢和菌群结构进行研究。结果表明,CCPA的分子量为7.02×10⁴Da,半乳糖醛酸含量较高;CCPB的分子量为2.46×10⁶Da,阿拉伯糖含量较高。CCPA和CCPB的干预均能增加小鼠粪便水分含量,而降低pH值和氨含量;均能增加小鼠粪便中乙酸、丙酸及丁酸的含量,且CCPA的增加效果更明显;均能调节肠道菌群的组成比例,增加肠道微生物多样性。结果表明,油茶籽粕多糖能够改善肠道代谢,提高肠道菌群多样性,为定向开发多糖类功能产品提供理论依据。     

探讨砂仁及鸡血藤之水萃物对肠道健康及功能的影响

研究透过仓鼠的体内试验,探讨砂仁(Amomifructus)及鸡血藤(Millettiareticulata)之水萃物对肠道酵素(如:麦芽糖酶及蔗糖酶)、粪便细菌酵素(如:b-葡萄糖酶、b-葡萄糖醛酸酶、黏液素酶及尿素酶等)及盲肠内容物中短链脂肪酸之影响,藉此评估此2种水萃物对肠道健康调节及改善的评估。由实验分析结果得知,水萃物对肠道酵素并无显著差异,但可明显增加粪便的含水量及缩短肠道通过时间,因此可减少有毒物质之产生和吸收,预防肠道产生一些特殊疾病。此外,相较于控制组下,一方面此2种中草药水萃物对b-葡萄糖酶、b-葡萄糖醛酸酶、黏液素酶与尿素酶活性呈现不同程度的降低效果;另一方面,此2种水萃物明显可提高盲肠内容物中短链脂肪酸的含量,尤以鸡血藤最为显著。综合分析结果,0.5%中草药水萃物透过降低仓鼠肠道中有害微生物的代谢活性,及促进有益菌的产生而提高发酵能力,藉此而有助于促进肠道健康。     

丽斑麻蜥消化道嗜银细胞的分布及形态学观察

为了研究丽斑麻蜥消化道嗜银细胞的分布、密度及形态。采用Grimelius银染法,结果表明：在丽斑麻蜥的消化道中嗜银细胞分布广泛,见于其全长。从其分布密度曲线可以看出,胃体和胃贲门部是嗜银细胞分布密度的最高峰,胃幽门部分布密度最低。嗜银细胞形态多样,主要有锥体形、长梭形、蝌蚪形、圆形以及椭圆形。广泛分布于上皮细胞基部、上皮细胞之间、腺泡上皮细胞之间。根据其形态,认为丽斑麻蜥消化道内嗜银细胞具有内、外分泌2种功能,同时丽斑麻蜥消化道内嗜银细胞分布型的形成可能与其食性及消化道各部位功能有关。     

香青兰精油对嗜卷书虱的生物活性较好

正为筛选新型环保植物源仓储害虫杀虫剂,新疆农业大学农学院采用水蒸汽蒸馏法提取8种植物精油,滤纸药膜法、密闭空气熏蒸法测定精油对嗜卷书虱成虫的触杀、熏蒸活性,筛选出高活性植物,并用气相质谱-色谱联用仪(GC-MS)对高活性植物精油进行化学成分的分析和鉴定。结果表明,香青兰、窃衣、啤酒花精油对嗜卷书虱具有较强的触杀活性,LD_(50)分别为157.43、349.34和633.07μ;g/cm~2;香青兰、蒌