杏多酚氧化酶动力学研究

对影响杏多酚氧化酶活性的因素研究表明，２５℃、ｐＨ６．８对杏ＰＰＯ活性最强；８５℃和１００℃下，杏ＰＰＯ完全失活的时间分别为１５０ｓ和３５ｓ，抗坏血酸和Ｌ－半胱氨酸对杏ＰＰＯ活性有抑制作用，抑制程度随浓度增加而增强。     

茶叶多酚氧化酶的基因克隆

本试验以嫁接可可茶为材料,提取了高质量的茶树基因组DNA,以纯化的DNA为模板,利用FS和RX引物组合进行PCR扩增,结果扩增出了约1800bp的片段,与预期大小一致。所克隆的PPO基因与其它茶树PPO基因的同源性达到98％,氨基酸序列同源性达到91％,确认为茶叶多酚氧化酶基因。     

马铃薯多酚氧化酶的特性研究

多酚氧化(PPO)酶是导致切分马铃薯变色的主要原因。以大西洋马铃薯为材料,采用分光光度法研究其PPO的特性。结果表明:该酶仅作用于邻苯酚,与对苯酚、间苯酚和一元酚无作用。以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为5.5,最适温度为5℃。除氯化钠和EDTA外,供试的其它5种浓度为0.01mol/L的抑制剂均可不同程度地对该酶产生抑制。     

植物和真菌多酚氧化酶的分子生物学研究进展

多酚氧化酶(PPO)是细胞内酶促褐化反应的主要催化酶类,同时PPO催化的反应还可应用于多巴药物的生产、含酚污水的净化等方面。现在已经从多种植物和真菌中分离和克隆了PPO及其基因。阐述了多酚氧化酶的结构与功能特点,总结了目前已克隆的植物和真菌多酚氧化酶基因,分析其表达特性,并介绍了转基因方面的研究现状。     

菊芋块茎多酚氧化酶特性

采用分光光度法,研究了菊芋组织中多酚氧化酶(PPO)的活性,以及PPO的最适pH、最适温度、热稳定等特性和不同化学物质对PPO的抑制效果.结果表明,其最适pH为7.4,pH 3.5环境可有效抑制酶活性;最适温度为45 ℃,在70 ℃以下,其热稳定性较强,大于80 ℃时,热稳定性急剧下降,生产上可采用80 ℃热处理2 min使酶失活;0.04 mol·L-1的柠檬酸和亚硫酸氢钠对PPO活性都有较强的抑制作用.     

桃多酚氧化酶的纯化及其特性

为延长桃果实货架寿命及提高贮藏保鲜技术,以5年生早花露桃果实为试材,对桃多酚氧化酶的纯化及其特性进行了研究,结果表明采用疏水柱层析,透析与PEG浓缩,纯化了早花露桃的多酚氧化酶.所得的酶液经薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,显示单一条带,等电点为3.0.经SDS-PAGE分析,它由2条主要多肽(相对分子质量(MW)分别为3.98×104,6.59×104)和2条含量较少的多肽(MW为6.67×104,6.76×104)所组成.纯化酶液的最高吸收峰在波长272.5nm处,300nm以上几乎无吸收.该酶对邻位二元酚有较高亲和力,几乎不能催化一元酚和三元酚的氧化.以儿茶酚为底物,其最适pH为7.0,最适反应温度20℃.在果实生长发育过程中,多酚氧化酶活性呈下降趋势,中期有一活性相对较小的峰,同时,多酚氧化酶疏水特性增强.     

烟草中多酚化合物及多酚氧化酶研究进展

烟草中多酚化合物的含量、合成、积累对烟叶的品质有重要的作用。研究多酚氧化酶(PPO)在烟草中的作用机理，合理控制多酚氧化酶的活性，能增加上、中等烟比例和天然香味，降低刺激性，提高烤烟质量。     

阿魏菇中多酚氧化酶特性及其抗褐变剂的研究

针对阿魏菇储运保鲜中的褐变问题，以分光光度法研究了阿魏菇组织中多酚氧化酶(PPO)的特性，还研究了柠檬酸、抗坏血酸、亚硫酸钠等抗褐变剂对PPO活力的影响，研究结果表明：阿魏菇中多酚氧化酶测定的最大吸收波长为418nm，最适温度为55℃，最适pH值为6．6，在此条件下亚硫酸钠可强烈地抑制PPO的活性，有效防止褐变，抗坏血酸也有较强的抗褐变效果，而柠檬酸只有在高浓度时才有一定的抑制作用。     

不同因子对梨多酚氧化酶活性的影响

对控制梨多酚氧化酶(PPO)活性的方法进行了研究,以氯化钠、柠檬酸、抗坏血酸为PPO活性抑制因子,通过三因子二次回归组合设计建立回归方程,从而准确地反映因子和PPO活性之间的关系,预示抑制因子用量的多少对PPO活性的影响程度和趋势,得出三个因子在抑制酶活性作用中的最佳配比,并分析了各因子间的交互效应.     

草菇多酚氧化酶基因的克隆与表达分析

【目的】解析草菇多酚氧化酶基因家族序列信息,明确其特征和表达模式。【方法】通过转录组测序找出含有酪氨酸酶结构域的基因,并根据搜索得到的序列设计引物,以不同发育时期的草菇 v26 菌株,以及草菇蛋形期外菌膜、菌盖、菌柄等不同组织为材料提取 RNA,经反转录为 cDNA,扩增获得草菇多酚氧化酶基因序列。采用在线生物信息学网站预测草菇多酚氧化酶的理化性质。采用 RT-PCR 的方法,检测草菇不同发育时期和不同组织部位多酚氧化酶的表达模式。【结果】获得 4 个草菇多酚氧化酶基因家族的 CDS 序列,依次命名为 VvPPO1、VvPPO2、VvPPO3、VvPPO4,其中 VvPPO1 CDS 全长 1 596 bp、编码 531 个氨基酸,VvPPO2 CDS 全长 2 685 bp、编码 894 个氨基酸,VvPPO3 CDS 全长 1 593 bp、编码 530 个氨基酸,VvPPO4 CDS 全长2 067 bp、编码 688 个氨基酸。生物信息学分析表明,4 个基因编码的蛋白均含有 2 个铜离子结合区,为亲水性蛋白;RT-PCR 结果显示,4 个基因在草菇发育的菌丝期、原基期、蛋形期、成熟期均有表达,VvPPO1、VvPPO3 和VvPPO4 的表达量在子实体时期高于菌丝期,在蛋形期 VvPPO1 和 VvPPO4 在外菌膜的表达量比在菌柄和菌盖中的表达量高。【结论】在草菇中搜索得到 4 个多酚氧化酶基因,均含有 2 个铜离子结合区,4 个基因在各个发育时期均有表达。     

乌贼墨多酚氧化酶的部分特性

以乌贼墨为材料，用0.05mol/L pH7.2的磷酸盐缓冲液提取多酚氧化酶（PPO），30%-80%的硫酸铵分级沉淀后通过DEAE-Sepherose CL-6B层析柱分离，合并具有较高酶活性的洗脱液，透析、浓缩后用于酶的特性研究。通过金属离子对该酶活性影响的研究表明，在mmol/L水平，铜离子和铅离子对该酶具有强烈抑制作用，但铜离子在20μmol/L浓度时，对酶却有显著激活作用。在mmol/L水平，Na^ 、K^ 、Mg^2 和Ca^2 对PPO活性无显著影响。在无机阴离子中HSO3^-对酶活性有强烈抑制作用，在10mmol/L时抑制效率达100%，而Cl^-、Br^-、I^-和SO4^2-则对PPO活性无显著影响。     

乌贼墨多酚氧化酶的部分特性

以乌贼墨为材料，用0.05mol/L pH7.2的磷酸盐缓冲液提取多酚氧化酶（PPO），30%-80%的硫酸铵分级沉淀后通过DEAE-Sepherose CL-6B层析柱分离，合并具有较高酶活性的洗脱液，透析、浓缩后用于酶的特性研究。通过金属离子对该酶活性影响的研究表明，在mmol/L水平，铜离子和铅离子对该酶具有强烈抑制作用，但铜离子在20μmol/L浓度时，对酶却有显著激活作用。在mmol/L水平，Na^ 、K^ 、Mg^2 和Ca^2 对PPO活性无显著影响。在无机阴离子中HSO3^-对酶活性有强烈抑制作用，在10mmol/L时抑制效率达100%，而Cl^-、Br^-、I^-和SO4^2-则对PPO活性无显著影响。     

山竹果皮多酚氧化酶酶学特性及抑制效应的研究

多酚氧化酶是酶促反应的关键酶,研究了山竹果皮中多酚氧化酶的活性及不同抑制剂的抑制效果。结果表明:山竹果皮多酚氧化酶的最适pH为5.5,最适温度为30℃,底物浓度与酶活性成正相关;抗坏血酸、亚硫酸氢钠、四硼酸钠、柠檬酸等对该酶表现出不同的抑制作用,抑制作用大小为抗坏血酸>亚硫酸氢钠>四硼酸钠>柠檬酸,抗坏血酸的浓度越高,对酶的抑制效果越明显。     

小麦多酚氧化酶活性的品种间差异及其遗传分析研究进展

PPO活性高低是影响面条等食品色泽及其品质的关键因素,遗传改良是降低PPO活性的有效途径.采用全麦粉法测定了131份小麦品种,其两年PPO活性相关极显著,r＝0.839;扬麦158×淮麦18组合376个F2单株和F3株系PPO活性呈高度相关,r＝0.727;用邻苯二酚代替多巴,检测了(烟农19×安农0016)F3代的117个株系,2种方法测定的PPO活性相关系数高达0.907.对上述杂交组合后代群体的遗传分析表明,PPO活性主要受两对主基因控制.根据GenBank(AY515506)设计引物,其中STS01在高低PPO活性的材料中产生了差异.131份小麦品种中有76个品种扩增出560 bp的目标片段,PPO活性均值为221.44,55个品种没有扩增产物,PPO活性均值为309.98,两者差异达到1%显著水平.将STS01 与中国农业科学院作物所开发的分子标记PPO18进行协同效应分析表明,两者为独立遗传的小麦籽粒PPO活性STS分子标记.PPO活性的检测表明,我国大面积种植的一些小麦品种PPO活性差异很大,说明遗传改良具有很大的潜力.2年试验筛选出渝02321、宁麦9号、02P157、02Y151、34-th195、宁0076、鄂麦19等 12个低PPO活性的品种资源.     

多酚含量及多酚氧化酶活性与柑橘胚性愈伤组织褐化的关系

研究测定了9种不同品种/基因型柑橘胚性愈伤组织的多酚含量和多酚氧化酶（polyphenol oxidase, PPO）的活性,对其与柑橘愈伤组织褐化的关系进行了探讨。结果表明,不同柑橘品种/基因型间多酚含量和PPO活性有明显不同;多酚含量高的宽皮柑橘类胚性愈伤组织容易褐化,葡萄柚与甜橙类的次之,说明柑橘胚性愈伤组织褐化与多酚含量成正相关;PPO活性与柑橘愈伤组织褐化无明显相关。     

碱蓬多酚氧化酶基因的克隆及序列分析

多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是一类植物体内广泛存在的由核基因编码的能与铜结合的金属蛋白酶,是碱蓬甜菜红素合成的第一关键酶.以盘锦红海滩碱蓬(盐地碱蓬)为研究材料,采用同源克隆法,根据植物中已克隆出的PPO序列进行引物设计,利用RT-PCR和RACE技术,从碱蓬中克隆出的PPO基因cDNA全长为1830bp,编码609个氨基酸.序列分析表明,与其他植物PPO核苷酸序列的相似性为69％～87％,氨基酸的相似性为49％～62％.碱蓬多酚氧化酶基因的成功克隆,为碱蓬甜菜红素的研究和利用打下了坚实的理论基础.     

红肉桃皮中多酚氧化酶的酶学特性及结构表征

以红肉桃桃皮中多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)作为研究对象,采用Tris-HCl缓冲液进行提取并采用硫酸铵盐析法和柱层析法进行纯化,电泳得到单一的条带。根据米氏常数确定桃皮PPO的最适底物为邻苯三酚,采用分光光度计法测定桃皮中多酚氧化酶的活性,其最适温度为45℃、最适p H值为7.0~7.5,PPO在中性p H值环境中以及55℃以下更为稳定。分别应用圆二色谱仪、荧光光谱仪、动态散射光谱仪对PPO的结构进行表征。圆二色谱表明,该PPO二级结构包含α-螺旋、β-折叠、β-转角以及无规卷曲等结构,其含量分别为50.61%、32.47%、10.83%和6.21%。荧光光谱表明,该PPO最大发射波长为352 nm,相对荧光强度为133.9,表明荧光基团处于极性亲水环境中。动态散射光谱显示,该PPO粒径分布集中在255 nm处,表明其在溶液中以聚集形态存在。     

马铃薯褐变的控制

本文探讨了影响马铃薯中多酚氧化酶活性的pH值、温度等有关因素,筛选了以亚硫酸钠、硼酸、抗坏血酸、氯化钙为主的护色剂,提出了抑制马铃薯褐变的措施。     

蕉类果实催熟过程中多酚含量、多酚氧化酶和过氧化物酶活性变化研究

研究了5个蕉类品种在果实催熟过程中多酚含量、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性的变化.蕉类果实催熟后,其多酚含量均有所提高,不同品种的多酚含量表现为鸡蕉＞红达卡蕉＞大蕉＞粉蕉＞威廉斯蕉;PPO活性除了大蕉呈现先降低再升高而后降低的趋势外,其他4个品种均呈现先升高而后降低的趋势,不同品种的PPO活性表现为红达...