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实验性鸡包涵体肝炎病毒侵袭过程中免疫细胞的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
用鸡腺病毒内蒙古毒株(FAV-HA)对1日龄SPF雏鸡进行人工感染,经HE染色发现,各淋巴器官的淋巴细胞严重流失,肝脏等器官中单核-巨噬细胞活化增生;经间接免疫荧光法病毒抗原定位,除法氏囊外,均呈不同程度的抗原阳性反应,单核-巨噬细胞阳性明显,用间接免疫荧光法计数,实验组T、B淋巴细胞均明显少于对照组。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的高效表达 总被引:8,自引:1,他引:7
将鸡传染性支气管炎病毒( I B V) S1 基因 c D N A 克隆至含有起始密码 A T G 的转移载体 p S X I V V I+ X3/4,构建成重组转移质粒 p S X I V V I+ X3/4 S1. Holte,再与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Tn N P V S V I- G D N A( O C C- , gal+ )共转染 草地夜蛾( Sf9) 细胞, 经空斑纯化得 到已插入 S1 基 因并能形成多角体 的重组病毒 Tn N P V( X3/4) S1. Holte O C C+ 。以重组毒株感染 Tn5 B1 细胞,在不同时间收取感染了病毒的细胞进行 S D S P A G E 与 W estern 印迹检测。 Tn N P V( X3/4) S1. Holte O C C+ 在感染的细胞中高效表达了 S1 基因,表达产物为约 100 000 的融合蛋白,与预计的表达修饰后的产物大小相符,推测此蛋白已糖基化。 S D S P A G E凝胶薄层色谱分析结果显示,感染病毒后 48、72、96 h, S1 蛋白分别占细胞内总蛋白量的 287% 、358% 、371% 。 相似文献
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采用免疫组化BA法,对流行性出血热病毒(EHFV)气溶胶感染乳鼠脏器组织中的病毒动态分布进行了观察,并对其抗体消长进行了测定。结果表明:①BA法为病理诊断EHFV感染提供了一种准确的手段;②EHFV可通过气溶胶途径感染乳小鼠,乳小鼠感染EHFV的LD50值可作为环境浓度的参考值;③EHFV气溶胶途径感染乳鼠后,4h即可在心、肺,1d在嗅球部检出,并可在其组织细胞中增殖,经血循、嗅神经、单核巨噬细胞系统等多途径扩散,造成多组织脏器的泛发性感染。感染后12~14d,病毒检出率和病毒量均达峰值。动物自身免疫系统对EHFV有一定的清除能力;④感染乳鼠脑、肺、肾等脏器组织的病变与人类感染EHFV的病变有一定的相似性,提示可作为人EHFV的模型动物;⑤抗原检出率高于抗体检出率,ELISA法检出率高于IFA法检出率。 相似文献
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鸡包涵体肝炎免疫组织化学动态研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验对100 只3 日龄雏鸡人工感染Ⅷ型腺病毒建立鸡包涵体肝炎( Inclusion body hopytitis I B H)模型,以免疫金银法进行免疫组织化学动态研究。结果表明,该病毒对雏鸡肝脏、胸腺、法氏囊、脾脏、肾脏、肠及胰腺等器官的上皮细胞以及淋巴细胞、血管内皮细胞、红细胞等均具有亲嗜性,主要定位于细胞核中,以肝脏、胸腺及法氏囊最为明显,揭示了感染鸡中枢 及外周免疫器官的细胞免疫和体液免疫功能呈现抑制的发病学基础。此外,接种后12 ~48 h 及9~11 d,组织的胞核中两次表现胶体金颗粒多量存在,其形态为粗大颗粒状或微细颗粒两种,笔者认为是病毒在鸡体内两次复制高峰引起病毒血症的标志。 相似文献
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法氏囊病毒感染对肉鸡内分泌机能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
用鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)弱毒疫苗免疫和强毒感染艾维菌鸡,采用放射免疫分析法(RIA)测定血浆甲状腺素(T3,T4)、促肾上腺皮质素(ACTH)和皮质酮(F)来研究IBDV感染对肉鸡内分泌机能的影响。结果表明:IBDV弱毒疫苗免疫使肉鸡产生高效价抗体,血浆ACTH含量升高;IBDM强毒感染导致肉鸡血浆T2、F急剧升高,法氏囊肿大,血清中也出现IBDV抗体,但效价显著低下;而IBDV强毒感染曾 相似文献
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将亚克隆获得的分别含有鸡痘病毒( F P V) Bam H I相应片段的 p U Fa、p U Fc 和 p U Fd 3 个质粒的单酶切位点,插入 P11 P7.5 Lac Z报告基因盒,构建成 p U Fa1、p U Fc1 和 p U Fd1 3 个重组载体质粒,在脂质体存在条件下,同 F P V 共同转染鸡胚成纤维细胞( C E F),96 h 后在 Xga1 存在条件下挑选蓝色重组病毒空斑,经3 次空斑纯化和传代,获得 1 株可稳定表达 β半乳糖苷酶的重组病毒,并对该重组用质粒作了序列分析。 相似文献
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禽流感RT-PCR诊断法的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
根据禽流感病毒(AIV)A/Chicken/Breslin/1902(H7N7)株的血凝素(HA)基因参考序列设计合成一对H7HA特异引物,并应用SDS-蛋白酶K法提取病毒RNA,建立了逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测AIVRNA的方法。应用此法对鸡胚培养的AIV尿囊液、SPF感染鸡粪便进行了检测,并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、减蛋综合征病毒(EDS-76V)等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明,AIV尿囊液RT-PCR全部阳性,SPF感染鸡粪便87份,RT-PCR检出69份阳性,样品处理浓缩后琼脂扩散检出11份,电镜检测了23份样品,仅检出2份阳性。非特异性对照样品经RT-PCR检测全部阴性。将AIV感染鸡胚尿囊液作10倍系列连续稀释,可检出稀释度为10-2的病毒尿囊液。RT-PCR最早检出时间为感染后第3天,而琼扩和电镜均是7天。该法具有高度的特异性和灵敏性,且节约时间(只需8小时左右),可从分子水平上对AIV进行早期快速诊断和流行病学调查 相似文献
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猪生殖-呼吸道综合征国内分离毒株的病毒纯化及其结构蛋白分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究主要对猪生殖呼吸道综合征( P R R S) 国内分离毒株( C H Ia) 进行了病毒纯化及其结构蛋白的分析。选用聚乙二醇( P E G6000) 沉淀和差速离心法粗提了经 Marc145 细胞系增殖的猪生殖呼吸道综合征病毒( P R R S V) 。并采用非线性蔗糖密度梯度离心法纯化了 P R R S V, 经免疫电镜观察纯化病毒, 发现有较多的胶体金颗粒吸附在直径为42 ~78nm 的病毒粒子周围。经 Dot E L I S A 测定纯化病毒的滴度可达1 1600 以上, 并利用 S D S P A G E 和 Westernblot 两种方法对国内分离毒株( C H Ia) 与欧洲型( Lelystad) 、美洲型( V R2332) 等参考毒株的病毒结构蛋白组成和部分抗原特性进行了初步的研究。测得国内分离毒株主要结构蛋白的分子量为145 K D,192 K D 和263 K D, 并均能被 P R R S V 的高免血清识别, 这与国外的同类报道很相似。 相似文献
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禽肺病毒发病机制比较研究 总被引:2,自引:1,他引:1
禽肺病毒(AIV)是侵袭家禽上呼吸道的一种高度传染性的病毒,其感染火鸡引起火鸡鼻气管炎(TRT),感染鸡则可引起肿头综合症(SHS)。关于APV作为SHS的原发病原,虽有不少争议,但众多证据显示其与鸡SHS密切相关。一般认为,APV原发性感染鸡后,继发或并发细菌感染,从而出现肿头综合症。关于这一说法,在国外众多鸡场采用TPT疫苗(如英特威的TRT弱毒疫苗和灭活疫苗--Nobilis RTV 854 相似文献
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产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针的制备及应用研究 总被引:2,自引:0,他引:2
用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将其中的2.0kb片段克隆进pUC18DNA载体中,重组质粒DNA用digoxigenin标记作为DNA探针,在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病毒(CAV)DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应,只与3株EDS病毒(EDS标准毒株AV-127、EDSH91毒株和从健康鹅体中分离的EDSY81毒株)DNA呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后24h即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出EDS病毒DNA,在感染后35h仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用SPF鸡胚分离病毒,并用HA和HI试验检测分离病毒的特异性;在感染过程中,同时检测了血清中HI抗体的消长情况。结果表明,人工感染鸡排毒至少可以维持2个月左右,而且血清中HI抗体即使很高,也不能阻止感染鸡的排毒。 相似文献
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采用 A、 B、 C、 D 血型系统的10 种血型因子试剂测定了亚发雏鸡的血型,并对马立克氏病肿瘤病变与各血型因子的关系进行了研究。结果表明,在14 日龄感染雏鸡后的 30~60 d 内, M D V 对各个器官肿瘤病变形成上,不同的血型系统因子对其影响有很大的差异,其中带有 A308、 B691 因子的雏鸡对 M D V 较易感,而带有 B365 因子的雏鸡抗性较强。同样实验还表明,采用鸡的( M H C) B F I V 血型分型试剂与 A、 B、 C、 D 血型试剂检测人工感染 M D V 60 天后存活鸡表明: B365 与 B21 均100% 存在于这些鸡中,说明二者抗 M D能力有一定的相似性。说明 A、 B、 C、 D血型因子可做为选择标记用于抗 M D选育。 相似文献
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张存帅 《国外兽医学(畜禽传染病)》1994,14(1):13-14
EDS-76病毒株(EDSV-IVRI/AD-86)经口服感染产蛋鸡,虽然不引起明显的临床症状和眼观病变,但能引起子宫的严重损伤,出现蛋情品质低劣的破壳蛋和软壳蛋。感染鸡的脾脏,子宫和阴道组织内可观察到病毒的特异性免疫荧光。感染后6天,病毒经汇殖腔排出,感染后9~10天可产生HJ抗体,效价达2^3~2^6。 相似文献
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应用免疫酶染色法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用免疫酶染色法检测Vero细胞培养物,陈旧石蜡切片和人工感染试验鸡组织中的AVAV,并比较了AVAV强毒和弱毒株在组织中情况,结果发现,试验鸡于感染AVAV弱毒株后1-5天、感染AVAV强毒株后1-9天出现病毒血症;跗关节、跖趾关节、趾关节,趾屈肌健、脾脏、肝脏等组织中病毒的检出最高,存在时间也最长;在感染后3-20天于感染鸡法氏囊、感染后3-11天于感染鸡胸腺中检出了强毒株,在这两组织中未检出A 相似文献
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用免疫酶染色法检测Vero细胞培养物、陈旧石蜡切片和人工感染试验鸡组织中的AVAV,并比较了AVAV强毒和弱毒株在组织中的分布情况。结果发现,试验鸡于感染AVAV弱毒株后1~5天、感染AVAV强毒株后1~9天出现病毒血症;跗关节、跖趾关节、趾关节、趾屈肌健、脾脏、肝脏等组织中病毒的检出率最高,存在时间也最长;在感染后3~20天于感染鸡法氏囊、感染后3~11天于感染鸡胸腺中检出了强毒株,在这两组织中未检出AVAV弱毒株。感染8小时后的Vero细胞培养物和陈旧石蜡切片均被检出AVAV。 相似文献
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H3亚型禽流感病毒分离株与变异株的生物学特性 总被引:5,自引:0,他引:5
本研究对分离到的H3N8禽流感病毒株(分离株A/Chick/Jilin/98,以下简称J1株)和传代过程中发生变异的变异株(A/Chick/Jilin/99,以下简称J2株)进行了生物学和病理学特性的初步研究,发现在相同的时间内,J1株病毒致死鸡胚数量明显高于J2株病毒,病毒HA的滴度也明显高于J2;J1株的IPVI为1.44,而J2为0.64;毒株的致病性试验与SPF感染鸡的器官变化表明J1组的病理学变化较J2组明显,且主要的嗜器官为肺、肝、法氏囊、胸腺、脾等主要的免疫器官;本研究还对SPF感染鸡的病变器官进行了病原学检测、病理组织检测和电镜观察。结果表明两者存在较明显的差异。 相似文献
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将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒(DHV)A66侏接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)进行细胞培养,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查,证明了DHVA66毒株能够在CEF上增殖。试验还表明,犊牛血清对DHV增殖具有明显的抑制作用。此外,还根据细胞培养物病毒滴度毒滴度测定结果绘制出了病毒在CEF上的生长曲线。 相似文献
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鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养 总被引:4,自引:0,他引:4
将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒(DHV)A66株接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)进行细胞培养,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查,证明了(DHV)A66毒株能够在CEF上增殖。试验还表明,犊牛血清对DHV增殖具有明显的抑制作用。此外,还根据细胞培养物病毒滴度测定结果绘制出了病毒在CEF上的生长曲线。从生长曲线可以看出,接种后8~16h病毒开始增殖,36~60h细胞培养物中病毒滴度达最高水平。这与(DHV)A66死鸡胚的时间基本一致鸭肝炎病毒A_(66)弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养@张小飞$安徽… 相似文献
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黄曲霉毒素B1和乙型肝炎病毒在鸭肝炎,肝癌发生,发展过程中的意义 总被引:2,自引:0,他引:2
以DHBV-DNA斑点杂交检测鸭血清中病毒,分别给予一定量的AFB1,定期剖杀观察肝脏变化及肝癌发生,并在饲料中加硒观察了AFB1诱癌的预防效应,实验结果DHBV阳性实验组的肝脏病变重于DHBV阴性实验组:DHBV阴性加AFB1组病变重于DHBV阳性对照组,DHBV阴性加AFB1线病变重于DHBV阴性对照组,而DHBV阳性高毒组与DHBV阳性高毒加硒组之间,以及DHBV阴性高毒组与DHBV阴性高毒 相似文献
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为确定供生物制品和生物工程产品生产所用动物传代细胞系有无致癌/致瘤性,对研制生产犬、貉、狐用五联病毒,即犬狂犬病病毒(RV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CDV)、犬腺病毒2型(CAV2)和犬副流感病毒(CPIV)的活疫苗以及猫、狮、虎、豹用三联病毒,即泛白细胞减少症病毒(FPLV)、猫疱疹病毒1型(FHV1)和猫杯状病毒(FCV)的活疫苗,所用猫肾细胞系(F81,CRFK)、犬肾细胞系(MDCK)、非洲绿猴肾细胞系(Vero,Vero2)、恒河猴肾细胞系(MA104)和叙利亚金… 相似文献