低聚异麦芽糖和酵母细胞壁对中华鳖肝脏中溶菌酶基因表达的半定量分析

[目的]探讨低聚异麦芽糖和酵母细胞壁对中华鳖肝脏中溶菌酶基因表达的影响。[方法]利用CODEHOP设计简并引物,通过RT-PCR克隆中华鳖溶菌酶基因,然后通过半定量PCR分析低聚异麦芽糖和酵母细胞壁对中华鳖溶菌酶基因在肝脏中表达量的影响。[结果]通过克隆中华鳖溶菌酶基因,获得303 bp的溶菌酶基因片段,其GenBank登录号HQ437284,与GenBank登录号Q7LZQ1.3的中华鳖C型溶菌酶氨基酸序列同源性为75%。半定量分析结果表明,低聚异麦芽糖可显著提高中华鳖溶菌酶基因在肝脏中的表达量,而酵母细胞壁对中华鳖溶菌酶基因片段在肝脏中的表达量的影响不显著。[结论]该研究可为低聚异麦芽糖和酵母细胞壁在中华鳖养殖中的科学应用以及绿色环保添加剂的开发提供理论依据。     

Semi - quantitive Analysis of Isomaitooligosaccharide and Yeast Cell Wall on the Expression of Lysozyme Gene in the Liver of Trionyx sinensis

[目的]探讨低聚异麦芽糖和酵母细胞壁对中华鳖肝脏中溶菌酶基因表达的影响.[方法]利用CODEHOP设计简并引物,通过RT-PCR克隆中华鳖溶菌酶基因,然后通过半定量PCR分析低聚异麦芽糖和酵母细胞壁对中华鳖溶菌酶基因在肝脏中表达量的影响.[结果]通过克隆中华鳖溶菌酶基因,获得303 bp的溶菌酶基因片段,其GenBank登录号HQ437284,与GenBank登录号Q7LZQ1.3的中华鳖C型溶菌酶氨基酸序列同源性为75％.半定量分析结果表明,低聚异麦芽糖可显著提高中华鳖溶菌酶基因在肝脏中的表达量,而酵母细胞壁对中华鳖溶菌酶基因片段在肝脏中的表达量的影响不显著.[结论]该研究可为低聚异麦芽糖和酵母细胞壁在中华鳖养殖中的科学应用以及绿色环保添加剂的开发提供理论依据.     

微生物溶菌酶在饲料工业中的应用及其展望

溶菌酶(LysozymeEc3.2.17)又称胞壁质酶,或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶,它能专一性的作用于目的微生物的细胞壁,而不能作用于其他物质,是一种无毒、无害、安全性很高的盐基水解蛋白酶,被广泛应用于医药、食品、饲料等行业。本文介绍了溶菌酶的来源、结构、抑菌机理,论述了溶菌酶在饲料中的应用,并展望了其发展及应用前景。     

微生物溶菌酶在饲料工业中的应用及其展望

溶菌酶(Lysozyme Ec 3.2.17)又称胞壁质酶,或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶,它能专一性的作用于目的微生物的细胞壁,而不能作用于其他物质,是一种无毒、无害、安全性很高的盐基水解蛋白酶,被广泛应用于医药、食品、饲料等行业.本文介绍了溶菌酶的来源、结构、抑茵机理,论述了溶茵酶在饲料中的应用,并展望了其发展及应用前景.     

嗜酸乳杆菌细胞壁肽聚糖的分离提取

分别采用超声波法、溶菌酶法、三氯乙酸法对嗜酸乳杆菌细胞壁肽聚糖进行分离提取.结果表明超声波法的最优组合为超声功率400 W,超声时间30 min,水浴温度40℃,肽聚糖得率10.2%;溶菌酶法的最优组合为溶菌酶添加量4 mg/mL,水浴温度55%,作用时间5 h,pH 7,肽聚糖得率10.0%;三氯乙酸法肽聚糖得率15.8%.通过多重比较,最终确定采用三氯乙酸法提取嗜酸乳杆菌细胞壁肽聚糖.     

溶菌酶饲料添加剂的研究与应用

溶菌酶，化学名称为N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，能水解肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键，以此破坏细菌细胞壁，具有较强的抑菌抗菌活性。人和动物细胞不存在肽聚糖，所以溶菌酶对人体细胞是安全的。     

溶菌酶饲料添加剂的研究与应用

溶菌酶,化学名称为N-乙酰胞壁质聚糖水解酶,能水解肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键,以此破坏细菌细胞壁,具有较强的抑菌抗菌活性.人和动物细胞不存在肽聚糖,所以溶菌酶对人体细胞是安全的.     

纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖提取工艺优化及其结构初步鉴定

为探究纳豆芽孢杆菌细胞壁肽聚糖提取工艺及其结构,本实验以纳豆芽孢杆菌为研究材料,采用响应面优化超声波破碎法,提取纳豆芽孢杆菌细胞壁,然后经三氯乙酸、乙酸钠、氯仿、甲醇、胰蛋白酶处理等操作分离得到较为纯净的肽聚糖并对其组成成分和结构进行分析。结果表明:用超声波破碎法提取的纳豆芽孢杆菌细胞壁得率为45.8%,纯化后得到的肽聚糖得率为8.5%。所得纳豆芽孢杆菌胞壁肽聚糖中总糖占39.77%,蛋白质占54.47%,总脂含量占4.5%。溶菌酶溶解实验9 h后眼观变为澄清。经红外光谱(IR)和高效液相分析提取的肽聚糖样本与肽聚糖已知结构特征相一致。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析经溶菌酶水解后的肽聚糖分子量约为60 ku。     

溶菌酶制剂对控制仔猪腹泻的效果

溶菌酶制剂对控制仔猪腹泻的效果邵春荣，包承玉，孙有平，张顺珍，刘明智（江苏省农科院牧医所南京２１００１４）仔猪腹泻是影响仔猪生产的主要疾病之一，目前尚无既安全又简便有效的防制方法。溶菌酶是一种能选择性地使对象微生物细胞壁溶解，从而对生物体本身有保护作...     

农抗5102产生菌原生质体融合育种的研究——Ⅰ. 影响原生质体形成和再生的因素

本文报道了溶菌酶的浓度,酶解温度、时间,生长培养基成分和上再生培养基成分等因素对农抗5102产生菌两个营养缺陷型菌株的原生质体形成和再生的影响。实验结果表明:溶菌酶用量为4mg/ml时,合适的酶解温度和时间是32℃,1.5小时;生长在PM_1培养基和有机A培养基上的菌丝细胞壁对溶菌酶最敏感;原生质体不仅可以在高渗的RM_2培养基上形成菌落,而且也可以在非高渗的PM_1培养基上形成菌落;补充10%蔗糖的PM_1培养基上生长的菌丝可以增加对溶菌酶的敏感性和原生质体的再生频率;当原生质体在4℃中贮存24小时和48小时后,再生频率可分别下降达76%和和94%。     

论溶菌酶防治仔猪大肠杆菌性腹泻推广应用前景

仔猪腹泻是集约化养猪生产条件下的一种典型的普遍存在的多因素性疾病。该病是目前威胁仔猪生长最严重的疾病之一,也是引起仔猪死亡的重要原因。溶菌酶是一种水解粘多糖的碱性水解酶,此类粘多糖为细胞壁主要成分之一。该种酶能催化水解细胞壁中的N-乙酰胞壁酸（NAM）与N-乙酰氨基葡萄糖（NAG）之间的β-1,4-糖苷键,使细胞壁不溶性多糖分解成可溶性糖肽,细菌内容物选出而使细菌溶解。溶菌酶作为一种药物,在人药和食品中已经使用相当长时间,具有独特的功能效果,但作为药品和添加剂在善药和饲料行业使用才刚开始。其优势在于：它无抗药性、无残留,具有独特的抗菌消炎效果,还具有抗病毒作用,在临床上可以和其它抗生素联合使用,以增强抗生素的杀菌和抑菌作用。将这一项技术进一步推广到基层,为今后防治大肠杆菌性疾病提供保障,促进养殖业健康、稳步发展,有着及其重要的意义和广阔的应用前景。     

免疫多糖对受免黄鳝免疫保护力的增强作用

在饲料中添加不同剂量的免疫多糖(酵母细胞壁),连续投喂经注射接种嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的黄鳝(Monopterus albus)28 d后,通过测定供试黄鳝的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶(SGPT)活性、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了将LPS作为免疫原、免疫多糖(酵母细胞壁)作为免疫刺激剂结合使用对受免黄鳝免疫保护力的增强作用。结果表明,用添加100.0 mg/kg免疫多糖(酵母细胞壁)的饲料投喂受免黄鳝,不仅可以提高受免黄鳝对A.hydrophila LPS的免疫应答水平,也可以增强黄鳝的非特异性免疫力和抵抗A.hydrophi-la人工感染的能力,同时也证明了在饲料中添加免疫多糖(酵母细胞壁)对黄鳝的生长速度和肝脏功能均无不良影响。     

溶菌酶及其食品保鲜剂的应用

一、前言 溶菌酶又称为胞壁质酶，化学名称为N-乙酰胞壁质聚糖水解酶。它广泛存于鸟类、家禽的蛋清和哺乳动物的眼泪、唾液、血液、鼻涕、尿液、乳汁及组织细胞中（如肝、肾、淋巴组织、肠道等），从木瓜、芜青、大麦、无花果和卷心菜、萝卜等植物中也可分离出溶菌酶。其中，以蛋清中含量为最高，约含0.3％；而人乳、眼泪、唾液中的溶菌酶活性远高于蛋清中的溶菌酶的活力。     

3种免疫增强剂对黄颡鱼非特异性免疫机能的影响

[目的]研究酵母细胞壁、黄芪多糖、芪参散这3种免疫增强剂对黄颡鱼非特异性免疫功能的影响,为其在水产养殖中的推广和应用提供参考。[方法]制备含有不同剂量酵母细胞壁、黄芪多糖、芪参散药饵连续投喂42天,并在试验的0、7、14、28天检测黄颡鱼血清的非特异性免疫指标,分析其对黄颡鱼免疫功能的影响。[结果]酵母细胞壁、黄芪多糖、芪参散这3种免疫增强剂对黄颡鱼血清补体C3、SOD、溶菌酶、血清白蛋白均有不同程度提高。免疫攻毒试验表明3种免疫增强剂均有一定的免疫保护作用,其大小次序为:酵母细胞壁组黄芪多糖组芪参散组,其中2和4 g/kg的黄芪多糖和酵母细胞壁组保护率最高,为50%。[结论]饲料中添加酵母细胞壁、黄芪多糖和芪参散均对黄颡鱼的非特异性免疫功能具有一定的促进作用。     

不同裂解方式对微生物DNA提取的影响

分子生物学试验中的细胞裂解及DNA提取是试验的第1步,但是由于细胞种类多样、细胞壁成分复杂,DNA提取的效果容易受到提取方法的影响。针对以上问题,主要研究溶菌酶、蛋白酶K、十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)等4种化学方法对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及大肠杆菌3种代表性细菌细胞的裂解效果。结果表明:溶菌酶+SDS法对3种微生物的裂解效果都不错,但可能造成蛋白质污染且DNA碎片较多;溶菌酶+热冻法对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的裂解效果较好且蛋白质污染较少;蛋白酶K+CTAB法仅对金黄色葡萄球菌的裂解提取效果较好;溶菌酶+蛋白酶K法的提取效果最差。在试验中可以根据需要选择不同的裂解方式,从而达到操作性、重现性及经济性的统一。     

鸡蛋中提取溶菌酶和卵磷脂

通过深加工,从鸡蛋中提取食品用的溶菌酶和卵磷脂,这两种产品都是高附加值产品,可以广泛用于保健品、食品和医药行业。     

酵母细胞壁在动物生产中的应用

酵母细胞壁作为一种无毒害和可取代抗生素的产品,具有提高免疫力、促进生长等多种生物功效,在畜牧业生产中具有广泛的应用前景。随着世界各国纷纷对饲用抗生素进行限制,酵母细胞壁倍受畜禽养殖业的关注。文章针对酵母细胞壁的功能特点及在动物生产中的应用作以综述。     

温度、疾病感染对史氏鲟血清和各组织中溶菌酶水平的影响

对生活在不同温度下的1^ 龄史氏鲟血清及各组织中溶菌酶水平进行了测定,并对各温度下细菌感染后的史氏鲟溶菌酶水平变化进行了比较。史氏鲟血清和组织中溶菌酶的含量基本上随着温度的上升而升高,但耐于不同的组织,溶菌酶含量在每个温度梯度之间变化的规律有所差别。在最低温和最高温时,血清、粘液、肝、胃及后肠的溶菌酶含量有显著性差异,其余各组织的溶菌酶随温度变化无显著性差异;溶菌酶在各组织中分布不同,前肠的溶菌酶量在各温度下均占据优势,幽门垂、后肠及脾中溶菌酶的量也较高,而粘液和血清中溶菌酶的量较低;嗜水气单胞菌感染后的史氏鲟血清溶菌酶量呈升高趋势,但变化不显著;肝脏除在14～15℃无变化外,其余温度下的溶菌酶含量与健康对照组有显著性升高,胃、鳃及粘液溶菌酶随温度产生不同的变化,史氏鲟前肠、后肠及幽门垂溶菌酶含量均降低。     

甘露寡糖的生理功能及其在动物生产中的应用

甘露寡糖广泛存在于魔芋粉、瓜儿豆胶、田菁胶及多种微生物细胞壁内(葡甘露寡糖),目前商品用甘露寡糖主要通过酶解法进行生产,是从富含MOS的酵母细胞壁中通过发酵法提取出来的葡甘露聚糖蛋白复合体。它作为饲料添加剂应用于动物     

溶菌酶在畜禽生产中的应用进展

溶菌酶是一种无毒、无害、安全性高的盐基水解蛋白酶,具有抗菌、抗炎、抗病毒、增强免疫力等作用,还可作为一种天然绿色防腐剂,广泛应用于医药、食品、畜牧等行业。文章介绍了溶菌酶的理化性质、功效作用,并对其在畜禽生产中的应用进行综述。