二化螟抗药性监测和对三唑磷抗性的遗传分析

采用点滴法测定了2001~2002年浙、苏、皖、赣等4省水稻二化螟4龄幼虫对氟虫腈、阿维菌素、三唑磷及杀虫单等的抗性;用三唑磷高抗种群经室内筛选纯化后与室内敏感种群进行正反交、回交,对三唑磷抗性进行了初步遗传分析。结果表明：(1) 通过对4省7个种群的检测,发现浙江瑞安种群对氟虫腈有低水平抗性（抗性倍数为6.5倍）,其他种群虽存在敏感度差异（1.0~1.6倍）,但均属敏感范围;(2) 浙、苏、皖三省6个不同种群对阿维菌素的敏感度变化小于2.3倍,未检测到明显抗药性;(3) 4省10个种群对三唑磷敏感度变化很大（LD50值为有效成分0.0052~1.0114 μg/头）,其中瑞安种群具有高水平抗性（163.1倍）,温州种群为中等水平抗性（18.2倍）,常熟、锡山和金坛3种群为低水平抗性（6.7~9.7倍）,新洋农场、楚州、连云港、宜丰和太湖5种群为敏感（0.8~2.9倍）;(4) 4省9个种群对杀虫单均有不同程度抗药性,瑞安和宜丰种群达高水平抗性（113.7和57.6倍）,温州、常熟、金坛和太湖4种群为中等水平抗性（11.0~29.7倍）,新洋农场和锡山种群为低水平抗性（6.7和7.5倍）,灌云种群抗性最低,为3.7倍;(5)瑞安种群对三唑磷抗性属单个主基因控制的不完全显性性状,但不排除微效修饰基因的存在。     

二化螟对双酰胺类杀虫剂的抗药性监测和交互抗性研究

【目的】为了及时了解我国主要稻区二化螟对氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺的抗药性发展情况,同时明确对氯虫苯甲酰胺原药和制剂的抗性水平是否存在差异及二化螟对新研发的双酰胺类杀虫剂溴氰虫酰胺、四氯虫酰胺及氯氟氰虫酰胺与氯虫苯甲酰胺、氟苯虫酰胺间是否存在交互抗性。【方法】采用稻苗浸渍法测定了2015年我国7省19地二化螟田间种群对氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺的抗药性,同时测定了浙江余姚和象山两个抗性种群对97.3%氯虫苯甲酰胺原药、20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂制剂的抗药性及其对溴氰虫酰胺、四氯虫酰胺及氯氟氰虫酰胺与氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺间的交互抗性。【结果】浙江余姚和苍南种群对氯虫苯甲酰胺已达141.1倍和135.0倍的高水平抗性,象山种群为87.9倍的中等水平抗性;这三个种群对氟苯虫酰胺均表现为中等水平抗性(15.0~58.7倍)。二化螟对97.3%氯虫苯甲酰胺原药和20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂制剂存在抗性差异,浙江余姚和象山种群对制剂的抗性更高。交互抗性研究结果显示,对氟苯虫酰胺和氯虫苯甲酰胺均产生了中到高水平抗性(27.6~133.6倍)的象山、余姚种群,对溴氰虫酰胺、四氯虫酰胺和氯氟氰虫酰胺同样也产生了中到高水平抗性(30.3~127.0倍)。【结论】各二化螟地理种群之间对氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺抗药性差异较大,分别表现出117.6倍和146.8倍的差异,浙江余姚和象山二化螟种群对20%氯虫苯甲酰胺悬浮剂制剂抗药性更高且三种新双酰胺类杀虫剂与氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺之间存在交互抗性。     

龙生型花生青枯病抗性遗传研究──Ⅰ．抗性遗传属性与配合力分析

本文分析了几个龙生型抗青枯病花生品种的抗性遗传属性和配合力效应．结果表明，龙生型抗源抗性呈部分显性，存在加性和非加性的遗传效应，抗性的显性程度高于珍珠豆型和多粒型抗源，而且存在明显的细胞质效应。     

二化螟越冬种群特点及其对三唑磷靶标抗性突变频率分析

 调查分析了我国长江流域以及南方稻区20个地区的二化螟越冬代种群的龄期结构、个体体质量及其对三唑磷的靶标抗性突变频率。结果表明,在20个采集地中有18个以6龄幼虫所占比例最高,其中,广东广宁和安徽桐城均达到80%以上;在所有的采集地中,4龄、5龄和6龄个体的总数在整个采集样本中占的百分率均达90％以上,表明我国长江流域以及南方稻区二化螟种群均以高龄幼虫越冬。二化螟对三唑磷的靶标抗性突变频率检测结果显示,不同地区二化螟种群的靶标抗性基因突变频率存在很大差异,其中,处于我国二化螟主发生区的浙江（100%、31.3%）、福建（77.1%、66.7%）、江西（68.8%、43.8%）、湖南（35.4%、33.3%）以及接近二化螟主发生区的广西阳朔（72.9%）和广东广宁（33.3%）的突变频率较高;其他地区抗性突变频率较低（<23%）,其中,安徽阜南、湖北荆州、四川德阳和乐山、重庆江津的二化螟种群未检测到抗性突变。     

玉米对玉米禾螟的抗性遗传

玉米禾螟(Chilo partellus)在玉米上造成明显的产量损失,尤其在亚洲、非洲的炎热、潮湿地区更为严重。其危害形式主要是引起叶损伤、枯心、矮化、茎穿孔和茎破裂。在玉米作物种植较少或没有害虫防治措施的耕作条件下,由于这种害虫的危害造成低产。虽然在某些国家如肯尼亚常常通过施用杀虫剂来保护作物免遭害虫危害。但是如果不及时得以保护,一些感虫品种和杂交种会受到严重危害。此时抗性品种和杂交种在防虫上显示出较大的     

快速冷耐受对水稻二化螟滞育幼虫的生理效应

 为从生理生化水平上探讨快速冷耐受(RCH)对二化螟滞育幼虫的生理效应,分别对正常饲养(CK)、非快速冷耐受(NRCH)和RCH处理过的二化螟幼虫的水分、脂质、总糖、小分子碳水化合物含量及SOD、POD、CAT活性进行了测定。结果表明,RCH处理组水分含量较对照组显著下降,POD活性对照组显著上升,脂质、总糖、海藻糖、葡萄糖、甘油含量及SOD和CAT活性无显著差异;NRCH处理组水分含量较对照组显著降低,而POD活性则显著下降,其余未见显著变化;RCH处理组仅见POD活性较对照组显著增加。由此可见,RCH处理对二化螟滞育幼虫体内水分和POD诱导效应显著。     

长江流域稻区二化螟抗药性监测

2008-2009年期间,采用毛细管点滴法测定了浙、苏、皖、湘、鄂、川、豫等7省17个种群二化螟4龄幼虫对常用杀虫剂的抗性,结果表明:长江流域稻区二化螟对杀虫剂的抗性分布存在明显的区域性。高抗区浙江南部的苍南、瑞安、江山二化螟种群对20世纪70-90年代广泛使用的沙蚕毒素类的杀虫单(抗性倍数43.2～177.0倍)和有机磷类的三唑磷(238.7～728.1倍)、毒死蜱(31.7～57.8倍)均产生了高-极高水平抗性,且对近年来开始广泛使用的氟虫腈(11.2～24.7倍)和阿维菌素(5.9～7.1倍)也产生了中等或低水平抗性;中抗区的安徽庐江、湖南攸县、江苏高淳种群对三唑磷产生极高水平抗性(203.2～379.0倍),对杀虫单(18.3～48.8倍)和毒死蜱(29.8倍)产生了中等-高水平抗性,对氟虫腈(4.4倍)和阿维菌素(4.1～4.7倍)为敏感性降低;低抗区除江苏仪征种群对毒死蜱(45.2倍)、安徽和县种群对三唑磷(50.0倍)开始产生高水平抗性外,对其他杀虫剂为敏感-中等水平抗性,对氟虫腈和阿维菌素为敏感;敏感区的河南信阳、江苏连云港、四川武胜种群除对个别杀虫剂(如杀虫单)为低水平抗性外,对其他大多数杀虫剂为敏感-敏感性降低。还讨论了按抗性分布的区域性来制定相应的抗性治理方案。     

二化螟实时荧光定量PCR内参基因筛选和表达稳定性评价

【目的】筛选特定试验条件下二化螟(Chilosuppressalis)稳定表达的内参基因,为二化螟基因表达研究奠定基础。【方法】根据二化螟转录组测序结果挑选出11个候选基因,利用实时荧光定量PCR测定其在二化螟不同发育历期、不同组织、温度处理、杀虫剂处理、取食不同饲料、取食不同水稻、dsRNA处理和混合样品的表达量,利用RefFinder、BestKeeper、Ge Norm和NormFinder等软件和ΔC_t值对11个候选基因的稳定性进行评估。【结果】5种分析方法表明,在二化螟不同发育历期稳定性较高的内参基因是AK、RPL10和EF1,不同组织中稳定性较高的内参基因是EF1、TUB和ACTB,不同温度下较稳定的内参基因为TUB、RPL10和EF1,杀虫剂处理样品中较稳定的是TF4和ACTA,取食不同饲料较稳定的是TUB、TF4、EF1和RPL10,取食不同品种水稻较稳定的是TUB和EF1,dsRNA处理样品中较稳定的是TUB、AK、ACTB和EF1,混合样品中较稳定的是EF1、TUB和ACTB。【结论】为不同试验条件下选择合适的内参基因提供了参考,也有利于在二化螟基因表达研究中获得更加可靠准确的数据。     

辽宁省不同地区水稻二化螟对阿维菌素的抗药性研究

为明确辽宁省不同地区水稻二化螟对阿维菌素的抗药性变化以及抗性机制,连续3年采用毛细管点滴法和分光光度法测定水稻二化螟对阿维菌素的抗药性水平、羧酸酯酶（CarE）活性、多功能氧化酶（MFO）活性以及谷胱甘肽-S-转移酶（GST）活性。结果表明,辽宁省各地区水稻二化螟对阿维菌素的抗药性逐年上升,但仍处于低抗及敏感水平;CarE活性在不同地区的表现没有显著差异,MFO及GST活性均伴随着水稻二化螟对阿维菌素的抗药性上升呈现逐年增强的趋势,且部分地区间存在显著差异。由此可见,辽宁省各个地区水稻二化螟对阿维菌素的抗药性仍处于敏感水平,施用阿维菌素仍能取得较好的防治效果;水稻二化螟GST和MFO的活性变化能够较好的反映其对阿维菌素抗药性水平的变化。     

Preliminary Study on Resistance of the Rice Stem Borer （Chilo Suppressalis） to Fipronil

By means of topical application, fipronil resistance was surveyed in the rice stem borer, Chilo suppressalis, from 12 diferent areas in east China from 2001 to 2004. The rice stem borers in most regions of Jiangsu and Anhui were still susceptible to fipronil. But in Wuxi, Jiangsu Province and Cixi, Zhejiang Province, their sensitivity became decreased （resistance ratios were 3.1 and 3.6, respectively）, and the medium level of resistance （resistance ratio was 21.2） was found in Cangnan, Zhejiang Province. So, it was still at the early stage for fipronil resistance development in this pest. Synergism experiments showed that piperonyl butoxide（PBO） had a little effect on both susceptible and resistant borers （synergism ratios were 1.1-1.2）. Though triphenyl phosphate （TPP） and diethyl meleate （DEM） had no effect on the susceptible borers, they had significant synergism on fipronil in the resistant population to fipronil （synergism ratios were 1.8 and 1.6, respectively）, indicating esterase and glutathion S-transferase may be involved in the resistance mechanism. Bioassay with currently used insecticides indicated that triazophos （because of high resistance）, trichlorphon and acephate had very low toxicity to resistant borers. But diazinon, pyridaphenthion, decamethrin and avermeatin showed high toxicity and had no cross resistance to fipronil, which could be considered as substitute insecticides in the resistance managment.     

转sck/cry1Ac 双基因抗虫水稻对二化螟和稻纵卷叶螟的抗虫效果

通过室内测定和田间观察 ,就转sck/cry1Ac双基因抗虫水稻MSB和MSA对我国主要水稻害虫二化螟和稻纵卷叶螟的抗虫效果进行了研究。室内离体植株测定结果表明 ,MSB、MSA高抗两种害虫 ,抗性水平受水稻苗龄影响。 6 5～71d苗龄水稻上害虫校正死亡率达 98.9%～ 10 0 % ,10 5～ 10 9d时抗性水平有所降低 ,但除MSB对二化螟的校正死亡率 (仍达 79.3% )降低明显 (P <0 .0 5 )外 ,MSA对二化螟及MSB、MSA对稻纵卷叶螟的校正死亡率 (92 .8%～ 98.1% )均无明显下降(P>0 .0 5 )。选取MSB进行的田间实验进一步明确 ,MSB对两种害虫有显著控虫效果 ,抗性水平与抗虫对照克螟稻 1号(含cry1Ab)无明显差异(P >0 .0 5 ) ,且略优于施药亲本明恢 86。相对于未施药明恢 86 ,MSB对两种害虫的防治效果分别为 92 .6 %、97.3% ,施药明恢 86则分别为 87.7%、89.8%。