中国野生葡萄果实抗白腐病基因的分子标记

 以感病×抗病的葡萄种间杂交组合白玉霓×塘尾的F₁ 代17 个单株及塘尾自交一代16 个单株为试材, 采用BSA 法和RAPD 技术, 通过对155 个随机引物的筛选, 获得了一个与中国野生葡萄抗白腐病基因连锁的RAPD 标记OPP09-760 , 并在中国野生葡萄8 个种的32 个株系及欧洲葡萄16 个品种中得到验证。进一步将该DNA 片段克隆并测序, 根据两端序列, 设计了一对长26 bp 的特异引物分别扩增供试材料, 获得了与该RAPD 标记相同大小的DNA 片段, 成功地将RAPD 标记转化为SCAR 标记, 可以用作抗白腐病基因的分子辅助选择的依据。     

中国葡萄属野生种抗白腐病的鉴定研究

本文通过田间自然鉴定和田间接种鉴定的方法,研究了起源我国的葡萄属12个种或变种、46个株系对白腐病的抗性。结果表明:在田间自然条件下,所有野生种的果实不感白腐病;但在接种条件下,不同的种对白腐病的抗性存在着很大的差异,即使在同一种内的不同株系间也存在着显著的、甚至很大的差异。     

中国葡萄属野生种及其种间F1 代抗旱性鉴定初探

 在盆栽干旱胁迫条件下, 测定了中国葡萄属野生种8 个种的11 个株系及野生种燕山葡萄与美洲种河岸葡萄杂交F1 代的叶片失绿黄化程度、相对含水量和原生质体细胞膜透性, 并以这3 项指标综合评价中国葡萄属野生种及其种间F1 代的抗旱性。结果表明, 中国葡萄属野生种中: 燕山葡萄燕山- 1 为高抗类型; 葡萄泰山- 1 为中抗类型; 葡萄安林- 2、山葡萄泰山- 11、秋葡萄江西- 2 和平利- 7、复叶葡萄甘肃- 91 和南郑- 2、毛葡萄渭南- 3、华东葡萄广西- 1 为低抗类型; 刺葡萄塘尾为不抗类型。燕山- 1 ×河岸葡萄杂交F1 代的抗旱性表现为连续分离现象, 个别杂种单株的抗旱性表现为超亲遗传。     

我国葡萄属野生种对炭疽病抗性的研究

利用田间自然鉴定，田间接种鉴定和室内果实离体鉴定三种方法，研究了起源于我国的葡萄属12种或变种、49个株系对葡萄炭疽病的抗性。结果表明，一些种和株系的果实不感炭疽病或感病率极低，表现为抗性极强或强，严重感病的仅是个别株系。我国葡萄属植物是极为宝贵的抗炭疽病的种质资源。     

中国葡萄野生种对葡萄根癌病的抗性

通过田间接种鉴定，系统研究了中国葡萄属１３个种和变种的２６个株系对葡萄根癌病的抗性，筛选出高抗株系１０个。其中燕山葡萄（♀）因扦插容易生根，可用自根苗作为抗葡萄根癌病砧木进行嫁接试验，其余可用作抗葡萄根癌病的育种资源     

我国葡萄属野生种对炭疽病抗性的研究

利用田间自然鉴定.田间接种鉴定和室内果实离体鉴定三种方法.研究了起源于我国的葡萄属12种或变种、49个株系对葡萄炭疽病的抗性.结果表明.一些种和株系的果实不感炭疽病或感病率极低.表现为抗(?)性极强或强.严重感病的仅是个别株系.我国葡萄属植物是极为宝贵的抗炭疽病的种质资源.     

葡萄属RAPD分类研究

对葡萄属３３个种及品种材料进行ＲＡＰＤ分析。结果表明,ＲＡＰＤ能较好地用于种及品种的鉴定,供试３３个材料可分为９类和１个特殊型。美洲葡萄类群聚为一个类型,起源于我国的东亚类群分属于８个类型,圆叶葡萄单独为一个类型。     

芭蕉属野生种的地理分布

芭蕉属起源于热带亚热带区域,对芭蕉属野生种质资源的研究始于20世纪40年代。通过检索INIBAP的多个数据库和相关文献,归纳整理出芭蕉属野生种的分布规律,为野生蕉的种质资源保存、利用以及品种鉴定提供一定的理论依据。经分析,目前已经报道的芭蕉属共有52个野生种,其中真芭蕉组(Eumusa)11个,观赏蕉组(Rhodochlamys)9个,澳蕉组(Australimusa)13个,红花蕉组(Callimusa)18个,不确定组(Incertae sedis)1个。马来西亚、印度尼西亚、巴布亚新几内亚、印度和中国均分布有不同的3组芭蕉属野生种,但马来西亚和印度分布的种数最多,各分布有15种,约占总数的29%,可能是芭蕉属野生种的多样性中心。     

中国野生葡萄抗霜霉病基因RAPD标记的筛选

以抗病的中国野生华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)白河-35-1(Baihe-35-1)与感病的欧洲葡萄佳利酿(Carignane)杂交F2代为试材,从520条随机引物中筛选出21条可以扩增多态性DNA片断的随机引物,从中获得了6个抗霜霉病基因的RAPD标记,对这些标记回收、克隆、测序后,将得到的6个标记分别记录为:S294-369,S202-527,S382-615,S221-677,S416-1224和S390-725。通过分析这6个RAPD标记在F2代植株中的表现,证明这些标记都与霜霉病抗性的基因有连锁关系。这将为葡萄抗霜霉病育种的分子标记辅助选择提供分子依据。     

山葡萄性别相关AFLP分子标记的筛选及SCAR标记的转化

 山葡萄是一种重要的抗寒、抗病葡萄种质资源。通过AFLP分子标记方法,应用64对引物组合EcoR I-NNN/Mse I-NNN对山葡萄雌花、雄花和完全花植株基因池进行筛选,引物E-AGC/M-CTG在雄花和完全花植株基因池DNA中扩增出一条分子量为283 bp的特异性条带;经组池个体和其它品系验证,该特异性条带能在雄株和完全植株中稳定出现。将该特异性条带回收、克隆、测序,设计SCAR标记引物,对已知性别的85份山葡萄种质进行盲测,准确率达到97.6％,表明标记转化成功。由于该SCAR标记在绝大多数山葡萄栽培品种和有育种价值的种质资源中得到验证,可利用该SCAR标记对山葡萄杂交后代在苗期进行性别鉴定,提高育种效率。     

黄瓜ZYMV-CH抗性遗传与连锁分子标记研究

 小西葫芦黄化花叶病毒中国株系( ZYMV-CH) 是危害我国黄瓜的主要病毒之一。本试验以抗病的‘秋棚’和感病的‘欧洲8号’杂交获得的115份重组自交系(R IL) 为材料, 进行了黄瓜抗ZYMV-CH遗传规律和连锁分子研究。结果表明: 病情指数在黄瓜R IL群体呈双峰分布, 表明其对ZYMV的抗性是受主基因控制的性状, 但也存在微效基因的修饰作用。采用集团分离分析法(BSA) 和AFLP技术, 获得与ZYMV-CH抗性基因连锁的两条特异性片段 E-ACG/M-CAG-182和E-ACG/M-CAG-180) , 遗传连锁距离分别为5 cM 和11 cM。将E-ACG/M-CAG-180 特异片段转化成共显性的SCAR 标记SCAR3-109, 与ZYMV-CH的抗性基因遗传连锁距离为11 cM。该标记可以作为黄瓜抗ZYMV辅助选择的分子标记。     

番茄抗叶霉病基因Cf-7分子标记及片段克隆

用RAPD方法对番茄抗叶霉病基因Cf-7进行了分子标记,得到了2个标记,其中S429/650与Cf-7的遗传距离为5.3 cM,并对此片段进行克隆、测序,此片段长618 bp。     

中国野生葡萄抗黑痘病基因的RAPD标记

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术 ,对抗病×感病的葡萄种间杂交组合白河 35 1×佳利酿的亲本及其 2 3株F1代单株进行了抗黑痘病的遗传分析 ,通过对 196个随机引物的筛选获得了 1个与中国野生葡萄抗黑痘病基因连锁的RAPD标记OPS0 3 130 0 ,并在所有供试的中国野生葡萄 7个种的 2 0个株系和欧洲葡萄 8个品种中得到了验证。这一分子标记将为葡萄抗病育种和深入研究中国野生葡萄的抗黑痘病基因提供DNA依据     

与梨黑星病抗性基因连锁的AFLP标记筛选及SCAR标记转化

以‘鸭梨’（Pyrus bretschneideri）ב雪青’梨（P. bretschneideri × P. pyrifolia）F1代群体（97株）为试材,采用扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism,AFLP）技术和集群分类法（bulked segregant analysis,BSA）筛选与梨抗黑星病基因连锁的分子标记。通过64对AFLP标记引物在亲本和分离群体中的筛选和验证,获得与梨抗黑星病基因紧密连锁标记两个,即ACA/CAA-179和AAC/CAG-198。它们与抗黑星病基因的遗传距离分别为5.2和8.3 cM。对AFLP标记片段的克隆和测序结果显示其长度分别为179和198 bp。根据序列信息设计特异引物,在杂交后代群体上的PCR分析表明AFLPACA/CAA-179标记被成功转换成SCAR标记,命名为SCAR-117。本研究结果将有助于对抗黑星病梨品种资源的分子鉴定及杂种后代的早期辅助选择。     

梨矮化基因pcDw的一个SCAR标记

以'矮化梨'(Pyrus communis L.)与 '茌梨'(Pyrus bretschneideri Rehd.)的杂交后代共111个单株为试材,采用分离群体分组分析法（Bulked Segregate Analysis, BSA）,通过对412个随机引物的筛选,获得了一个与控制梨树矮化性状基因pcDw连锁距离为8.3 cM、长度为940 bp的RAPD标记S_1172-940, 并将其转换成了SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) 标记,即SCAR_-940。这一研究结果,为该矮化性状的标记辅助选择提供了有效工具。     

与大白菜雄性不育基因Ms连锁的SCAR标记

用基因型为MsMs的大白菜雄性不育两用系'AB01'的不育植株,与基因型为msms的双单倍体可育品系'FH-1'杂交,构建BC1群体。采用BSA法,在不育池和可育池之间筛选512对AFLP引物组合,获得了与不育基因连锁的3个AFLP标记,并将其转化成SCAR标记syau_scr02、syau_scr03和syau_scr05。3个SCAR标记位于不育基因Ms的同一侧,与Ms的遗传距离分别为1.60、1.60和2.50cM。多态性检验表明,3个SCAR标记在'AB01'和12个msms基因型的自交系之间具有良好的多态性。     

黄瓜无苦味基因bi的分子标记研究

以黄瓜纯合自交系9110Gt（bibi）和03828(BiBi)为双亲获得的F₂代为试材,利用分离群体组群分析法,从256对AFLP选择性引物中获得了与营养器官无苦味位点连锁距离为6.43 cM的AFLP分子标记TG/GCT₁₅₀,并成功地将其转化为操作简便、表现稳定的SCAR标记SC₈₇。     

月季种质鉴定和多样性分析

 利用RAPD 技术对28 个月季品种和2 个蔷薇品种进行了遗传多样性分析, 从145 个引物中筛选出12 个引物, 可以扩增出清晰、稳定和多态性高的产物。其中3 个引物从30 个材料中扩增出3 个品种特异的RAPD 分子标记, 并将其中的一个成功地转换成了SCAR 标记。利用筛选出的12 个引物扩增出的65 条多态性片段作了聚类分析, 对这些月季品种的亲缘关系和进化作了初步探讨。