H2S在内毒素致肝损伤中的作用及CA的保护效应

将72只健康大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、内毒素(ET)致病组、阳离子A(CA)保护组.3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏作为检测样本,HE染色观察肝脏病理损伤,并采用分光光度法检测肝脏中硫化氢(H2S)含量.结果显示,NS组肝脏组织未见异常.ET组出现微循环障碍与细胞变性坏死等病变,CA保护组则病理变化程度较弱,出现的时间较迟;ET能够使肝脏组织中H2S水平显著升高,而CA保护组H2S在肝脏组织中的含量均显著低于ET组.结果表明,H2S参与了ET致肝脏损伤的病理过程,而CA通过下调肝脏组织中H2S的水平从而对ET的炎性损伤发挥了保护作用.     

H_2S在内毒素致肝损伤中的作用及CA的保护效应

为探讨气体信号分子硫化氢(H_2S)在内毒素(ET)致肝脏损伤中的作用及阳离子A(CA)的保护效应,本试验将72只健康大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组、ET致病组、CA保护组,3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏作为检测样本,H.E染色观察肝脏病理损伤,并采用分光光度法检测肝脏中H_2S含量。结果表明:NS组肝脏组织未见异常,ET组出现微循环障碍与细胞变性坏死等病变,CA保护组则病理变化程度较弱,出现的时间较迟;ET能够使肝脏组织中H_2S水平显著升高,而CA保护组H_2S在肝脏组织中的含量都显著低于ET组。说明H_2S参与了ET致肝脏损伤的病理过程,而CA通过下调肝脏组织中H_2S的水平从而对ET的炎性损伤发挥了保护作用。     

内毒素致肝细胞凋亡与Survivin蛋白表达的关系及阳离子A保护效应

72只SD大鼠随机分为对照组（Ⅰ组）、内毒素组（Ⅱ组）和CA保护组（Ⅲ组）。3组动物经相应处理后分别在第3、4、8、12h采集肝脏作为检测样本,用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况,免疫组织化学染色技术检测Survivin蛋白的表达情况。结果显示,在4个时段中,Ⅱ组凋亡肝细胞百分比都极显著高于Ⅰ组（P〈0．01）;在3、12h,Ⅱ组极显著高于Ⅲ组（P〈0．01）,在4h,Ⅱ组显著高于Ⅲ组（P％0．05）;在8h,1I组肝细胞凋亡百分比呈上升趋势,Ⅲ组在3、4、8h3个时间点呈上升趋势,在12h有下降趋势。Ⅱ组Survivin的表达极显著低于Ⅰ组（P〈0．01）,且Ⅱ组一直呈减少趋势;Ⅱ组极显著少于Ⅲ组（P〈0．01）,Ⅲ组在3、4、8h这3个时间点呈下降趋势,在12h上升。结果表明,在内毒素血症中肝细胞凋亡与Survivin蛋白的表达呈负相关的关系,而cA则能明显上调Survivin在肝脏的表达水平,从而抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤有可能发挥一定的保护作用。     

内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白表达的关系及阳离子A拮抗保护作用的研究

为研究内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白表达的关系及阳离子A(CA)的拮抗保护作用,本研究将72只SD大鼠随机分为对照组、内毒素(ET)组和CA保护组。3组动物经相应处理后分别在第3 h、4 h、8 h和12 h采集肝脏样品,采用流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况、免疫组织化学染色技术检测Caspase-3蛋白的表达情况。结果显示,凋亡肝细胞百分比ET组极显著高于对照组和CA保护组,ET组肝细胞凋亡百分比呈上升趋势,CA保护组在3 h、4 h和8 h 3个时间点呈上升趋势,在12 h呈下降趋势。ET组Caspase-3表达极显著高于对照组和CA保护组。研究表明,在内毒素血症中肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达呈正相关,而CA则能够明显下调Caspase-3在肝脏的表达水平,从而抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤发挥保护作用。     

内毒素致兔红细胞膜ATP酶活性改变及阳离子A的保护作用

为观察内毒素(ET)致兔红细胞膜(ECM)ATP酶(ATPase)活性变化及阳离子A(CA)的保护作用.采用定磷法分别测定正常对照组(Ⅰ组)、内毒素组(Ⅱ组)和阳离子A拮抗组(Ⅲ组)兔ECM的3种ATPase活性.结果除Na+-K+-ATPase、Mg2+-ATPase活性在0.5 h时与Ⅰ组比较无显著差异(P＞0.05)外,Ⅱ组3种ATPase活性在3.0 h内均显著增高(P＜0.01,P＜0.05),而5,7 h全部下降(P＜0.01);与Ⅲ组比较中,Ⅲ组除1 h时Mg2+-ATPase的活性无显著差异(P＞0.05)外,3种ATPase的活性均显著增强(P＜0.05,P＜0.01).结果表明ET可使ECM上3种ATPase活性先增高后降低,而CA对膜ATPase活性有明显保护作用.     

SSCP检测内毒素致mtDNA基因突变及阳离子A的保护作用

将60只健康试验大鼠随机分为3组：正常对照组（A组）、ET处理组（B组）、CA＋ET处理组（C组），运用PCR-SSCP技术对肝脏mtDNAtRNAcysTyr、COI基因片段一等基因进行了分析，同时运用分光光度计法对血清丙二醛的含量进行测定，观察ET致mtDNA的突变效应以及cA对该效应的保护作用。，结果发现，B组mtDNAtR—NA Cys-Tyr基因片段在第5238与5242碱基处发生了插入1个碱基T的插入突变，COI一基因片段发生T5322G和T5331G处置换点突变，其他各组无基因突变发生。B组血清MDA含量均明显高于其他二组（P〈0．05）、C组明显低于B组但高于A组（P〈0．05）。结果表明，ET可导致mtDNA基因发生突变，而cA对ET致基因突变具有保护效应。     

阳离子A对内毒素诱导兔自由基损伤的保护作用

将56只白兔随机分成3组Ⅰ组为正常对照组,共8只;Ⅱ组为内毒素(endotoxin,ET)处理组,共24只;Ⅲ组为阳离子A(cationA,CA)+ET组,共24只.Ⅰ组静注等量的生理盐水,Ⅱ组静注ET 300 μg/kg,Ⅲ组静注CA 200 mg/kg后,静注ET 300μg/kg.1、2、3、4、5 h后分别采集血液制备血浆样品.2、5 h捕杀Ⅰ组兔4只,Ⅱ、Ⅲ组兔各12只,迅速采集肝脏制备组织匀浆.检测血浆T-AOC、CAT活性和MDA含量,肝GSH、GSH-ST、GSH-Px活性.结果显示Ⅰ组各项指标均保持相对稳定;Ⅱ组MDA含量比Ⅰ组升高(P＜0.01),Ⅲ组MDA含量升高不显著;Ⅱ组T-AOC、CAT活性比Ⅰ组降低(P＜0.01),Ⅲ组显著高于Ⅱ组(1、2、3 h,P＜0.01;4、5 h,P＜0.05);Ⅱ组肝脏GSH和GSH-ST活性显著降低(P＜0.01),第5 h GSH-Px活性降低(P＜0.01),第2 h(P＜0.05);Ⅲ组GSH、GSH-Px(第5 h显著降低)、GSH-ST活性降低不明显.结果提示自由基参与了ET休克的病理过程,CA能有效地保护血浆和肝脏免受自由基的损伤.     

内源性气体信号分子H2S研究进展

H2S是继NO和CO之后发现的第3种内源性气体信号分子.在机体内主要由胱硫醚-β-合酶(cBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)催化产生,广泛分布于机体各个部位.HzS在体内参与舒张血管、抑制平滑肌增殖等各种生理过程.并且在高血压、内毒素性休克、手术创伤等各种疾病病理过程中发挥着重要的作用.论文就H2S的生成、代谢、生理作用及其与疾病的关系等方面做了综述.     

内毒素对大鼠小肠黏膜组织的影响及多价阳离子A的保护效应

旨在揭示大肠埃希菌内毒素(ET)对大鼠小肠黏膜的结构、绒毛长度、上皮内淋巴细胞(IEL)的数量和分布的影响,并探讨多价阳离子A(CA)对上述指标的保护效应。选用72只140g~150g SPF级SD大鼠随机分为3组,即对照组、ET组和CA保护组,经相应处理后分别在3、4、8、12h采集十二指肠、空肠组织作为检测样本,制备病理组织切片,HE染色并利用图像分析系统进行分析。ET组十二指肠和空肠绒毛长度在3、4、8、12h均显著低于对照组和CA保护组(P0.01),ET组十二指肠、空肠IEL数量在3、4、8、12h均显著低于对照组(P0.01);CA保护组十二指肠和空肠IEL数量在4、8、12h均显著高于ET组(P0.01)。结果显示,ET在不同程度上能够破坏小肠黏膜的正常组织结构,降低小肠绒毛长度,减少IEL的数量,从而影响小肠正常的吸收和免疫功能,而CA则能明显降低ET所导致的毒性作用,发挥其保护效应。     

阳离子CA对c—myc基因在内毒素致肝损伤中表达的影响作用

为探讨内毒素（ET）对大鼠肝脏c—myc基因的表达影响及阳离子（cA）对该过程的保护效应,本试验将72只清洁级SD大鼠随机分为对照组、内毒素组和阳离子A保护组,3组经相应处理后分别在3、4、8、12h采集肝脏作为样本。采用实时荧光定量RT—PCR检测法和免疫组化法分析,结果显示：在mRNA水平和蛋白水平上,ET可上调C—myc基因的表达,从而促进肝细胞凋i-,最终导致肝细胞损伤,CA则能明显下调c—myc基因的表达,从而抑制肝细胞凋亡,对ET诱导的肝损伤具有明显的保护效应。     

土庄绣线菊水浸液对小鼠急性酒精肝损伤保护作用的研究

本试验旨在研究土庄绣线菊水浸液对小鼠急性酒精肝损伤的保护作用。将试验小鼠随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组、模型组和空白组5组。采用一次酒精灌胃法建立急性酒精性肝损伤小鼠模型。建模后,测定各小鼠肝组织谷胱甘肽(GSH)与丙二醛(MDA)含量及血清中冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸转移酶(ALT)的活性,并进行肝组织病理切片观察。结果显示,土庄绣线菊水浸液能够明显降低酒精性肝损伤引起的AST和ALT活性的升高,能有效保持肝脏中GSH含量和明显降低MDA含量,说明土庄绣线菊水浸液对乙醇所致肝损伤具有保护作用,能明显改善酒精引起的肝脏损害。     

卵巢肿瘤去泛素化酶7A基因与鹅肥肝形成关系的研究

【目的】 研究卵巢肿瘤去泛素化酶7A(OTUD7A)基因与鹅肥肝形成的关系。【方法】 选取健康、体重一致的70日龄朗德鹅公鹅40只,随机分为2组,对照组自由采食,试验组进行填饲试验,其中填饲第1~5天每日采食量为500 g,第6~12天每日采食量为800 g,第13~19天每日采食量为1 200 g。在填饲第7、14和19天时,每组随机选取6只鹅屠宰,取肝脏,采用实时荧光定量PCR测定不同填饲阶段肝脏中OTUD7A基因的表达水平。采用Ⅳ型胶原酶消化法分离23胚龄的鹅原代肝细胞,分别用浓度为0(空白组)、125、250 mmol/L的葡萄糖,0(空白组)、50、100、200 nmol/L的胰岛素,0(空白组)、0.125、0.250 mmol/L的油酸、亚油酸及0(空白组)、0.25、0.50 mmol/L棕榈酸处理鹅原代肝细胞,并用实时荧光定量PCR检测这些脂肪肝形成相关因子对OTUD7A基因表达水平的影响。构建过表达OTUD7A基因的载体pcDNA3.1-OTUD7A,并将构建好的过表达重组质粒转染鹅原代肝细胞,通过转录组学测序(RNA-Seq)进行差异表达基因的筛选,并对获得的差异表达基因进行GO功能富集分析。【结果】 在填饲第7、14天时,鹅肝脏中的OTUD7A基因表达显著高于对照组(P<0.05)。与空白组相比,250 mmol/L葡萄糖处理以及0.125 mmol/L和0.250 mmol/L棕榈酸处理均显著提高鹅原代肝细胞中OTUD7A基因的表达水平(P<0.05)。转录组学测序结果表明,OTUD7A基因过表达后共筛选到34个差异表达基因,其中有19个基因表达上调、15个基因表达下调。GO功能富集分析发现,差异表达基因注释到对微生物的防御反应、对外界生物刺激的反应、T细胞分化、细胞外外泌体等条目,其中CLMP、PROCR、SH3BP1、ARHGAP28、ACE、OTUD7A、LOC106045877、LOC106048002基因的表达上调,TNFSF8、DDX60、PLAC8、RSAD2、MX1、RSAD2、GBP1基因的表达下调。【结论】 鹅肥肝形成过程中OTUD7A基因的表达水平升高,OTUD7A基因可能通过调控TNFSF8、RSAD2、MX1、GBP1、CLMP和PROCR等基因的表达参与鹅肥肝的形成。     

蓖麻蚕滞育与过氧化氢代谢的关系

为了探讨蓖麻蚕滞育的机理,研究了蓖麻蚕蛹H2O2代谢的变化,并比较了在5℃冷藏滞育条件下的差异。结果表明,常温环境蓖麻蚕蛹期的H2O2含量呈减少趋势,第3~5天急速变化,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性在第5天出现活性峰,故蛹期第3~5天是蓖麻蚕生理变化的一个敏感时期。第3天开始蛹滞育条件5℃冷藏,雄蛹在30 d前后、雌蛹在80 d左右H2O2含量出现快速改变;SOD和CAT活性一直呈下降趋势,但自30 d开始CAT活性出现快速下降过程,5℃冷藏30 d是蓖麻蚕蛹H2O2代谢的临界期生理时间,这与蚕蛹的30 d冷藏阈值时间吻合。     

褪黑素对内毒素血症山羊肝线粒体功能的影响

为探讨褪黑素对内毒素血症山羊肝线粒体功能的影响,将48只山羊随机分为4组,生理盐水组（saline,SL组）、内毒素组（LPS组,1 mg&#183;kg^-1）、褪黑素组（MT组,1 mg&#183;kg^-1）和褪黑素保护组（MT＋LPS组）。各组分别在处理后第3和第6小时各宰杀6只羊,取肝组织,提取肝线粒体和肝线粒体DNA（mtDNA）,检测线粒体膜电位（MMP）、ATP酶（ATPase）活性及心磷脂（CL）和肝线粒体DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷（8-OH-dG）含量。结果显示,与生理盐水组相比,内毒素血症时山羊肝线粒体MMP显著下降,ATPase活性抑制,CL含量显著减少,8-OH-dG水平明显增加;而与内毒素组比,褪黑素保护组山羊肝线粒体MMP明显升高,ATPase活性恢复,CL含量明显增加,8-OH-dG水平显著降低。结果提示,褪黑素能减轻内毒素诱导的山羊肝线粒体损伤,保护肝线粒体功能。     

黄芩苷对小鼠四氯化碳肝损伤保护作用的研究

探讨了黄芩苷对小鼠急性肝损伤的保护作用。将50只小鼠随机分成5组:对照组、模型组和黄芩苷低、中、高剂量组。黄芩苷组皮下注射不同剂量的黄芩苷注射液,用四氯化碳致小鼠急性肝损伤,观察小鼠采食量和饮水量、肝指数、血清及肝脏中谷丙转氨酶(ALT)活性和总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)含量。结果表明,黄芩苷各剂量组小鼠血清中ALT活性较模型组均明显降低(P<0.01),肝脏ALT活性较模型组均明显升高(P<0.01);其他指标差异不显著。结论:小鼠皮下注射黄芩苷对四氯化碳致肝损伤有一定的保护作用,且以中剂量为佳。     

玉竹提取物A对小鼠免疫性肝损伤治疗作用的研究

本试验旨在研究玉竹提取物A(extraction A of polygonatum odoratum,EA-PAOA)对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠免疫性肝损伤的治疗作用,探讨其发挥此作用的可能机制。将昆明小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、试验1组(EA-PAOA 0.5 g/kg)、试验2组(EA-PAOA 1 g/kg)、试验3组(EA-PAOA 2 g/kg)。除正常对照组外,其余各组均尾静脉注射20mg/kg的ConA 0.5 mL,每天06∶00注射1次,连续5 d。每天注射ConA 2 h后,EA-PAOA 3个试验组分别腹腔注射不同浓度的EA-PAOA 0.5 mL,每天3次,共4 d,第5天只在注射ConA后2 h注射1次EA-PAOA。末次注射EA-PAOA后6 h,摘眼球取血低温保存,待测谷丙转氨酶活性(ALT)、3个细胞因子;取肝待行肝脏组织病理学检查注射;取脾待行淋巴细胞增殖试验(MTT法)和流式细胞术以检测T淋巴细胞亚群。结果显示,EA-PAOA 3个试验组血清中,ALT、IFN-γ、TNF-α水平明显降低,IL-10水平明显升高,能显著抑制T淋巴细胞的转化增殖,与模型对照组相比差异极显著(P0.01);但流式细胞术检测T淋巴细胞亚群发现,5组CD4+T和CD8+T淋巴细胞的数量和比例并无明显差别,都与正常对照组无显著差异;EA-PAOA 3个试验组肝脏组织病理改变较模型对照组明显改善。表明EA-PAOA可能是通过抑制T淋巴细胞的转化增殖,抑制其活性,调节Th1和Th2的数量及比例,降低血清中IFN-γ、TNF-α水平,提高IL-10水平,以此发挥其治疗免疫性肝损伤的功能。     

青海草地建设投资与草地产出灰色关联分析

用灰色关联分析方法，对青海省草地建设投资与草地产出作相关分析。结果表明：两者相关性较强，关联度系数γｙ０１８＝０．７１６８（畜牧业产值）和γｙ０２８＝０．７２４４（畜产品产量）；在草地建设分项投资中，与草地产出关联度最大的为灭鼠投资，分别为γｙ０１５＝０．９１６２（牧业产值）和γｙ０２５＝０．８８８５（畜产品产量），其次顺序为种草投资（γｙ０１２＝０．８２６６和γｙ０２２＝０．８１３１），草地围栏     

外源硫化氢缓解桑树重金属胁迫的效应分析

利用硫氢化钠溶液浸种处理,探讨外源施加硫化氢能否缓解重金属镉、砷对桑树种子萌发及幼苗生长的胁迫作用。结果表明:镉和砷胁迫对桑树种子的发芽率、发芽势、发芽指数、种苗生长量、种子活力指数均有显著抑制作用,对胚根伸长的抑制尤为严重,且抑制作用随浓度升高而增强;与重金属胁迫处理组相比,0.3 mmol/L、0.9 mmol/L、1.5 mmol/L硫氢化钠浸种处理能够显著提高镉或砷胁迫下桑树种子的发芽率、发芽势、发芽指数、种苗生长量以及种子活力指数,且提高的程度随着处理浓度的升高而加强,1.5 mmol/L硫氢化钠浸种处理的效果最好,但硫氢化钠浸种处理并不能显著改善重金属镉或砷胁迫对于胚根伸长的抑制作用。     

外源性硫化氢的毒性机制及在动物体内代谢的研究进展

外源性硫化氢是畜禽养殖过程中由含硫有机物发酵而产生的一种恶臭气体,其具有神经毒性,能刺激眼和呼吸器官,使氧化型细胞色素酶失去活性,并有直接抑制呼吸中枢等作用,引起急性和慢性中毒,高浓度可导致迅速窒息死亡,严重影响畜禽生产、动物福利和人类健康。然而,硫化氢中毒的预防和治疗至今仍缺乏有效的方法,因此,深入研究外源性硫化氢在动物体内的吸收代谢规律,阐明其作用机制,对缓解硫化氢在畜禽生产中的危害具有重要意义。本文从外源性硫化氢的性质及毒性机制、外源性硫化氢对动物机体的危害、外源性硫化氢进入动物体内的途径和分布状况及新陈代谢规律4个方面进行综述,以期为外源性硫化氢对畜禽健康影响机制研究提供参考,为动物健康养殖提供理论依据。