近交五指山小型猪精液冷冻保存技术的研究

用液氮熏蒸法在氟板上制作冻精颗粒,以解冻后的精子活率、活力和质膜完整性为判定指标,比较4种冷冻稀释液及不同冷冻-解冻程序对五指山小型猪精液冷冻的效果。结果表明:①Ⅳ号冷冻稀释液冷冻解冻后精子的活率(0.610±0.036)、活力(0.427±0.025)和质膜完整性(0.503±0.015)均显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号冷冻稀释液(P<0.05)。②实验中精液在4℃冰箱中平衡降温2 h的精液精子活力、质膜完整性均好于在17℃平衡3 h再放入4℃冰箱中平衡2 h的解冻效果,而且精子活率差异显著(P<0.05)。③湿解法的效果优于干解法。     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

绵羊冻精稀释液加复合维生素B提高冻精解冻后的品质

将山梨醇、氯前列烯醇、复合维生素B在绵羊冷冻精液稀释液中进行添加、筛选。解冻后活率结果显示1号稀释液(41.17±4.72)%和4号稀释液(37.76±3.15)%极显著地高于对照组稀释液(22.80±4.49)%(P<0.01)。表明在绵羊冻精稀释液中添加复合维生素B可有效提高冻精解冻后活率并保护精子形态结构的完整性。 绵羊冻精稀释液加复合维生素B提高冻精解冻后的品质@哈福$甘肃农业大学动物科学技术学院!730070     

羊冷冻精液的制作技术研究

通过对羊精液冷冻稀释液组成成分的研究,筛选合适的稀释液配方,研究精子平衡时间、解冻温度、稀释倍数和稀释方法等对精子活力的影响。结果如下:①解冻后的精子活率以加入Tris的一组稀释液活率最高,与其他组相比差异极显著(P<0.01)。②精液的平衡时间以平衡4～5h解冻后活率最高。③在45℃～60℃的水温条件下,取得了精子复苏率74.5%的解冻效果。④选用5种稀释比例(精液:稀释液),分别为1∶4、1∶5、1∶6、1∶6、1∶8,结果1∶8的稀释比例精液解冻后活率最高,达到了70%以上。     

野生盘羊与巴什拜羊杂交F1代精液冷冻保存技术研究

为了充分利用野生动物资源,本试验首次对野生盘羊与巴什拜羊杂交F1代公羊精液低温和冷冻保存方法进行了研究。结果:在低温(4±0.5)℃条件下稀释保存F1代羊精液,其中采用葡萄糖-蔗糖-柠檬酸钠-卵黄稀释液(III液)低温保存绵羊精子的时间和活率(168 h,0.35)显著优于葡萄糖-柠檬酸钠-卵黄稀释液(II液)(72 h,0.30)、葡萄糖-乳糖-卵黄稀释液(IV液)(48 h,0.35)和葡萄糖-乳糖-卵黄稀释液(I液)(18 h,0.42);采用4种不同冷冻稀释液制作杂交F1代公羊细管冻精,用III液冷冻保存后解冻效果最佳,解冻后精子活率为(48.6±0.4)%,畸形率为(11.20±2.02)%、顶体完整率为(58.4±3.68)%。     

冷冻家猫附睾精液效果初探

为了筛选出适宜冷冻家猫精液的稀释液、冷冻保护剂和解冻温度,本试验采用家猫附睾精液,分别用2种不同的稀释液,3种不同的冷冻保护剂进行稀释、冷冻和解冻。结果显示,Ⅱ号稀释液冷冻效果优于Ⅰ号稀释液。用乙二醇作为冷冻保护剂,解冻后家猫精子活率达到52.7%±4.9%,畸形率为37.3%±4.2%,顶体完整率为52.4%±4.1%,各项指标均显著高于甘油组和二甲基亚砜组（P<0.05）;其中甘油组解冻后活率为35.5%±7.6%,顶体完整率为39.8%±4.4%,高于二甲基亚砜组的33.6%±7.3%和39.1%±4.1%,但两者之间差异不显著（P>0.05）。37 ℃水浴解冻后顶体完整率为36.4%±8.7%,显著高于30 ℃水浴解冻后的25.3%±6.7%（P<0.05）,但它们之间的活力,畸形率差异不显著,总体上37 ℃的解冻效果优于30 ℃。因此,乙二醇和稀释液Ⅱ配合使用冷冻家猫附睾精液效果较好,37 ℃为较优解冻温度。     

猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

不同稀释液及稀释比例对关中奶山羊精液低温保存效果的影响

[目的]试验通过比较精子活率和精子的有效存活时间,探讨在4℃环境下不同稀释液对关中奶山羊精子保存效果的影响,并使用保存效果最好的稀释液进一步研究关中奶山羊精液最佳稀释比例.[方法]试验共设计6种精液稀释液配方,对精液进行1:4稀释,每间隔6h检测精子活率并记录精子有效存活时间,筛选出最佳稀释液配方;使用筛选出的稀释液配...     

应用两种稀释液冷冻驴精液试验报告

本试验选用两种冷冻稀释液,通过离心去除精清的方法对驴精液进行了冷冻。结果发现在试验条件相同的情况下,用配方2冷冻稀释液冷冻精液的效果好于配方1,其平衡后活率(0.700±0.038)极显著高于配方1的平衡后活率(0.605±0.040)(P<0.01);经过冷冻后,其冻后活率(0.460±0.066)也极显著高于配方1的冻后活率(0.325±0.064)(P<0.01);且其精子顶体完整率(0.800±0.031)也极显著高于配方1(0.736±0.024)(P<0.01)。这表明配方2是1个冷冻驴精液的较好配方。     

绒山羊精液冷冻保存技术的研究

为了使绒山羊精液得到长期保存,充分发挥和提高优良种公羊的利用率,本实验对绒山羊精液冷冻保存技术进行了研究,比较了4种自行研制的保存稀释液的冷冻效果。结果表明:采用Ⅰ液(葡萄糖-卵黄-柠檬酸钠)冷冻保存绒山羊精液,解冻后精子活率(0.508±0.010)极显著高于Ⅱ液(葡萄糖-卵黄-乳糖-柠檬酸钠)(0.275±0.008)、Ⅲ液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-柠檬酸钠)(0.354±0.012)和IV液(葡萄糖-卵黄-蔗糖-乳糖-柠檬酸钠)(0.319±0.006)(P<0.01);Ⅲ液极显著高于Ⅱ液(P<0.01)和显著高于Ⅳ液(P<0.05)。解冻后Ⅰ液的精子顶体完整率(59.4%±0.5%)极显著高于Ⅱ液(47.1%±0.8%)、Ⅲ液(52.4%±0.6%)和IV液(51.3%±0.5%)(P<0.01)。精液解冻后在室温(23±2)℃下避光培养,Ⅰ液中精子活率在5h内能够保持0.30以上,Ⅱ、Ⅲ液和Ⅳ液精子活率维持在0.3不到2h。     

四季气温变化对皮埃蒙特牛精液品质的影响

环境温度对精子活力、密度等对有较大程度的影响。本文比较了南阳地区四季气温变化对皮埃蒙特牛精液量、精液色泽、活力，密度等的影响，指出了为保证精液质量在控制环境温度方面应做的工作。     

白藜芦醇对松辽黑猪精液冷冻的影响

试验旨在评价白藜芦醇(resveratrol,Res)对松辽黑猪公猪精液冷冻的影响。试验分为5组,分别为对照组(不添加Res)和Res处理组(在冷冻基础液中分别加入25μM、50μM、100μM、200μM浓度的Res)。采用手握法采集松辽黑猪精液,用5种冷冻基础液稀释,在25℃平衡1 h,17℃平衡2 h,4℃平衡3 h后灌装于0.5 mL细管中,在液氮上方3 cm处熏蒸10 min,保存在液氮罐中30 d后进行检测。样本解冻后分别检测精子活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、质膜完整性、过氧化氢酶(CAT)活性、顶体完整性、线粒体活性、活性氧簇(ROS)水平、DNA完整性、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)水平。结果显示:与对照组相比,冷冻基础液中添加50μM Res可以显著提高冻融后精子的活力、SOD活性、质膜完整性、CAT活性、线粒体活性、GSH-Px活性、顶体完整性(P0.05);可以显著降低精子ROS水平和MDA水平(P0.05);添加Res对DNA完整性未表现出具有显著影响(P0.05)。结论:猪精液冷冻前添加Res可改善冻融后精子质量,添加量50μM效果最佳,但Res是否可以改善公猪冷冻精液的体外受精及人工授精能力,有待于进一步的研究。     

浅析猪精液常温保存技术的研究现状

为了更好地将常温保存的猪精液最大限度地利用,提高猪人工授精的效率。文章结合团队近些年的研究成果,介绍了猪精液常温保存的原理,影响猪精液保存的物理因素、微生物因素,精液稀释方法以及精液稀释液成分等,对提高猪精液常温保存的质量和延长保存时间提供技术支持,为将来猪精液低温保存,乃至冷冻精液保存技术的发展和完善提供参考和帮助。     

不同采精阶段对后备北极公狐的射精量、精子活力及密度的影响

采用后备北极公狐在配种期内用６个阶段的采精频率检测公狐精液的采出率、射精量、精子活力和密度。精液采出率以３月下旬和４月上旬最高,极显著地高于３月上旬（Ｐ＜００１）;射精量以３月下旬和４月上旬最高,３月上、中旬最低（Ｐ＜００５）;精子活力以４月上旬最高,极显著地高于４月下旬（Ｐ＜００１）,但４月上旬与其他阶段差异不显著（Ｐ＞００５）;精子密度以３月中旬和４月中旬最大,３月下旬最低,二者差异显著（Ｐ＜００５）。结果表明,不同的采精阶段对后备公狐的射精量、精子活力和密度均有一定的影响,尤其对后备公狐发情开始和接近结束阶段的影响更大。     

不同品种公猪精液品质调查

为了研究品种不同的种公猪的精液品质之间存在的差异,本试验通过对长白、大白、杜洛克等3个品种的成年种公猪的精液品质进行统计学方法分析和比较。结果显示:长白公猪的精子活率最好(75.03%),然后依次是大白(71.62%)、杜洛克(70.36%),长白与大白及杜洛克之间差异显著(P<0.05),但大白与杜洛克之间差异不显著(P>0.05);长白种公猪的精液量(337.60mL)与大白(380.00mL)之间差异不显著(P>0.05),但均与杜洛克(251.74mL)之间差异显著(P<0.05)。三个品种精子活率由高到低依次为长白、大白、杜洛克;平均精液量大小依次为大白、长白、杜洛克,综合评价,长白猪的精液品质最好。     

保持公羊精液卫生无菌的措施

公羊包皮、四肢被毛、母台羊、采精及精液处理环境条件、饲养条件、人员操作、精液稀释液等十大因素可能是造成精液污染的主要因素。因此,必须从上述各方面采取技术措施保持精液卫生无菌。     

广州地区娟姗种公牛精液品质随月份的变化研究

选择在广州地区亚热带气候条件下2岁～6岁的娟姗公牛5头,观察其精液品质(采精量、原精密度、原精活力以及细管精液产量)在全年不同月份的变化情况.结果表明:娟姗公牛的每次采精量和细管精液产量在气温较高的7～9月份会因为采精频率的减少而增加,10月份会因为周采精频率增加而使每次采精量和细管精液产量有明显减少;娟姗公牛的原精密度在气温适宜的2月份和采精频率较低的8月份会出现两个高峰值;娟姗公牛的原精活力在气温较高的月份会出现明显的下降趋势,2月份气温适宜时原精活力最好.     

猪精液冷冻技术试验

从稀释液和解冻液的筛选，平衡时间、平衡温度、冷冻剂型的选择等方面进行试验。试验结果：猪精液冷冻后活率为３０％－６０％；解冻后的复苏率为５１．４２％－５８．７２％；保存３０天的冻精与保存３６０天的冻精受胎率无明显差异（Ｐ＞０．０１）；冻精保存期一年以上；输精受胎率达６３．６４％（６０％－６６．６６％），平均窝产仔６．１头。     

脱霉剂对种公猪精液品质的影响

饲料霉变及霉菌毒素严重影响饲料工业和畜牧业生产。本试验以种公猪作为试验对象,在公猪日粮中添加G1和G2脱霉剂,试验开始后每周对公猪精液品质进行品质检测,G2见效要比G1快;两种脱霉剂使用后对采精量、每次射精精子总数、精子活力均有所提高,精子畸形率也有下降。综上所述,这两种脱霉剂均可有效提高霉菌毒素引起的公猪生殖性能抑制,从而提高公猪的精液品质,G2效果要更佳。     

Effects of reduced glutathione supplementation in semen freezing extender on frozen-thawed bull semen and in vitro fertilization

During cryopreservation, spermatozoa may suffer cold and cryo-induced injuries ―associated with alterations in cell defense systems― that are detrimental to their function and subsequent fertility. This study aimed to determine the efficacy of supplementing the semen freezing extender with the antioxidant reduced glutathione (GSH) in cattle. Semen was collected from four bulls and diluted in a freezing extender supplemented with or without GSH (0, 1, 5, and 10 mM) before the cooling step of the cryopreservation process. After thawing, the quality of the frozen-thawed semen was investigated for motility, viability, acrosomal and DNA integrity, and subsequent embryo development after in vitro fertilization of bovine oocytes. Additionally, semen from one of the bulls was used to analyze semen antioxidative potential, sperm penetration into oocytes, male pronucleus formation rate, and embryo DNA integrity. The sperm quality varied among bulls after GSH supplementation. One bull had decreased sperm total motility, and two bulls had decreased sperm DNA integrity. GSH supplementation had positive effects on embryo development for three bulls. Two of them showed both improved cleavage and blastocyst formation rates, while the other one only showed an improved cleavage rate. We observed positive effects on early male pronucleus formation and no negative effects on DNA integrity and cell number in blastocyst stage embryos. Although the effect varies depending on individual bulls and GSH concentration, GSH supplementation in semen may improve in vitro embryo production from frozen semen.