樱桃新砧木——马哈利‘CDR-1’的选育

樱桃新砧木马哈利‘CDR-1’属于马哈利樱桃种(Prunus mahaleb),为自然杂交种。‘CDR-1’萌芽力和成枝力强;抗根癌病能力优于中国樱桃和考特砧木;‘CDR-1’砧甜樱桃比酸樱桃及中国樱桃砧甜樱桃早果1～2 a;‘CDR-1’砧甜樱桃矮化效果达到中国樱桃砧甜樱桃的70%;有较强的耐盐碱性。适宜在陕西渭北、关中、陕南等同类地区栽植。     

扁桃PGIP基因的克隆及其序列分析

以晋扁一号扁桃(Prunus dulcis Miller.)基因组DNA为模板,用已登录的扁桃PGIP(多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白)基因保守序列设计引物进行PCR扩增,得到了6个PGIP基因片段并克隆到PBS-T载体中。根据测序结果分析,可利用其中的3个片断,分别命名为PdPGIP1(717bp),PdPGIP2(864bp)和PdPGIP3(796bp),与公共数据库中的序列相似性比较,其中PdPGIP2和PdPGIP3各包含2个外显子和1个内含子,内含子符合GT-AG规律。其核苷酸序列分别与Genbank中登录的3个扁桃以及桃(P.persica Linn.)、杏(P.armeniaca Linn.)、美洲李(P.americana Marsh.)、中国李(P.salicina Lindl.)、马哈利樱桃(P.mahaleb Linnaeus)、苦樱桃(P.emarginata Walp.)、梅(P.mume Sieb.)的mRNA、DNA序列显示出极高的同源性,基本都在90%以上,其中PdPGIP1、PdPGIP2、PdPGIP3与Genbank中登录的3个扁桃PGIP基因的同源性为92%～99%。对氨基酸序列保守性分析发现,含有多数植物PGIP抗病基因表达蛋白特有的亮氨酸重复序列。证明我们所克隆的目的片段为PGIP基因。     

陕西省大荔县新力园艺场

<正>欧洲大樱桃引进繁育基地陕西省农业厅农业引进大樱桃推广项目西北农林科技大学园艺学院果树研究所教授蔡宇良技术指导樱桃要丰产,砧木是关键,售马哈利樱桃种子一、马哈利樱桃砧木由匈牙利引入中国,是西北农林科技大学园艺学院果树研究所教授蔡宇良多年来精心研究、实验、繁育、开发、推广的课题项目。经多年来实践证明:优良樱桃马哈利砧木有以下特点:1.无病毒,高抗根癌病;2.半矮化、结果早、丰产快、     

陕西大荔升隆特色农产品种植专业合作社

正陕西大荔升隆特色农产品种植专业合作社位于大荔县苏村镇堡子村,注册资金500万元,是以小规模化引进、示范种植新品种特色农产品及苹果、樱桃、桃、枣、梨、花椒等苗木的生产繁育经营为一体的家庭农场式合作经济组织。该社自成立以来,与西北农林科技大学、北京果树研究所、山东省果树研究所交流学习。引进马哈利CDR-1、兰丁-2号、吉塞拉(6、12号)、Y1等樱桃砧木及苹果、桃、花椒等新品种苗木繁育推广。     

欧洲大樱桃引进繁育基地 陕西省大荔县新力园艺场

<正>陕西省农业厅农业引进大樱桃推广项目西北农林科技大学园艺学院果树研究所教授蔡宇良技术指导樱桃要丰产,砧木是关键,售马哈利樱桃种子一、马哈利樱桃砧木由匈牙利引入中国,是西北农林科技大学园艺学院果树研究所教授蔡宇良多年来精心研究、实验、繁育、开发、推广的课题项目。多年实践证明优良樱桃马哈利砧木有以下特点:1.无病毒,高抗根癌病;2.半矮化、结果早、丰产快、栽植3年挂果:3.抗盐碱、抗旱、抗寒。二、特供无病毒组培矮化成品樱桃苗矮化吉塞拉(5、6号)樱桃砧木:吉寒拉5号适合温棚栽培,古塞拉6号     

陕西大荔升隆特色农产品种植专业合作社

正统一社会信用代码:936105233054571599陕西大荔升隆特色农产品种植专业合作社位于大荔县苏村镇堡子村,注册资金500万元,是以小规模化引进示范种植新品种特色农产品及苹果、樱桃、桃、冬枣、梨、花椒等果树苗木的生产繁育,经营为一体的家庭农场合作经济组织。该社自成立以来,与西北农林科技大学、北京果树研究所、山东泰山果树研究所交流学习。引进马哈利CDR-1、兰丁2号、吉塞拉(6号、12号)、Y1等樱桃砧木及苹果、桃、花椒等新品种苗木繁育推广。     

马哈利樱桃叶片再生的研究

利用马哈利樱桃的无菌苗叶片做外植体 ,进行离体叶片再生不定芽研究。结果表明 :培养基中添加的激素浓度、种类、配比均影响不定芽再生 ,BA诱导马哈利樱桃离体叶片再生的活性强于TDZ ;在WPM BA 5mg/L IBA 0 .7mg/L培养基上 ,通过 3次继代培养的不定梢的叶片 ,再生不定芽的频率达 5 2 .4%。     

樱桃砧木‘马哈利’种子沙藏方法

正‘马哈利’樱桃原产于欧洲,20世纪80年代引入我国。具有抗旱、耐寒、耐盐碱~([1]),与嫁接品种亲和性好~([2]),抗根癌能力较强~([3])等特点。以其为砧木结果早,丰产性好,树体较小,适于密植~([4])。在辽宁大连、陕西、甘肃等地广泛应用。目前繁殖樱桃砧木的方法主要有播种繁殖、组培繁殖和扦插繁殖,但‘马哈利’砧木因其扦插生根     

世界各国樱桃矮化砧木选育情况

世界各国樱桃矮化砧木选育情况姜林（青岛市农业科学研究所２６６１００）世界各国较早使用的樱桃砧木主要为马扎德、马哈利、毛樱桃、酸樱桃、欧李等实生砧,由于是种子繁殖,嫁接树的大小很不一致,并且嫁接亲和性有好有差,给生产管理带来了很大麻烦,为此世界各国相继...     

大樱桃砧木“马哈利CDR-1”在陕北的引种表现

<正>从1994年开始,我们同匈牙利考威尼斯大学园艺学院院长、世界樱桃学院常务理事卡诺利教授合作,引进欧洲大樱桃育苗主要砧木——马哈利CDR-1及勃兰特、吉墨斯、斯坦勒等38个优良大樱桃品种,在陕西三原县秦川大樱桃示范园繁育,并于2004年在陕北高寒地区试验栽植。现将大樱桃砧木马哈利CDR-1在陕北的引种情况总结如下。1安塞县试验点情况试验栽植地之一是陕西延安市安塞县方塔村。园地为西北内陆黄土高原山坡地,气候特点     

中矮1号梨砧木(S_2)PGIP基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术,根据GenBank中梨属PGIP基因序列设计1对特异引物,以梨矮化砧木S2叶片总RNA为模板,克隆到1条约1100bp的cDNA片段,将其与pMD18-Tvector连接后转化Escherichia coli JM109,对筛选到的阳性克隆进行序列测定并使用生物信息学方法对所得结果进行综合分析。结果表明,克隆片段为梨PGIP基因,该cDNA编码330个氨基酸,预测分子量为36388ku,第1～24个氨基酸残基是信号肽。与梨属其它种中已获得的PGIP核苷酸序列开放阅读框(Open reading frame,ORF)的同源性为97.5%～99.6%,氨基酸序列的同源性为97.6%～99.1%。     

龙眼梅PGIP基因的克隆及序列分析

利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)得到在龙眼梅(PrunusmumeSiebetZucc.Longyan)嫩芽中特异性表达的PGIP基因。DNA序列分析表明,所获得龙眼梅的PGIPcDNA的序列全长为1045bp,该序列与已发表的PGIP基因有很高的同源性。     

鸭梨多酚氧化酶基因CDS区的克隆及表达

以鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)果皮基因组DNA为模板,根据已经发表的多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)基因保守序列设计引物,利用PCR技术,克隆得到鸭梨多酚氧化酶编码区序列,将此核酸序列克隆到载体pGEM-T,酶切鉴定后测序,结果表明该段序列含有1782个核苷酸,编码593个氨基酸。对鸭梨多酚氧化酶基因片段的一致性分析和进化树分析表明,该片段与沙梨(Pyrus pyrifolia,AB056680)、苹果(Malus domestica,L29450)、李(Prunuss alicina,AY866432)以及杏(Prunus armeniaca,AF020786)的一致性分别为99%、96.3%、82%和51.4%,绘制的进化树和形态学分类地位相一致。将该片段连接到表达载体pET39b上,获得的重组子命名为pET39b-PPO,热激法转化表达受体大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG进行诱导。SDS-PAGE分析表明,PPO基因在大肠杆菌中被诱导表达蛋白质相对分子质量约66ku,检测表明具有多酚氧化酶的活性。     

苹果‘长富2号’开花调控转录因子基因MdIDD7的克隆及表达分析

以‘长富2号’苹果为试验材料,采用RT-PCR的方法,从其芽中克隆得到INDETERMINATE DOMAIN(IDD)转录因子基因MdIDD7,其开放阅读框长度为1 626 bp,编码541个氨基酸。序列比对和结构域分析表明,该转录因子含有1个核定位信号和4个高度保守的锌指蛋白结构域。系统进化树分析表明,MdIDD7与白梨(Pyrus×bretschneideri,XP_009364602.1)、桃(Prunus persica,XP_007225628.1)和梅(Prunus mume,XP_008220893.1)聚在一起。实时荧光定量PCR表明,MdIDD7在‘长富2号’不同组织(茎、叶、花、果和芽)中均有表达,其中芽的表达量最高。花后40~60 d,MdIDD7在易成花品种‘烟富6号’芽中表达量显著高于难成花品种‘长富2号’。"小年"树顶芽组织中MdIDD7的表达量显著高于"大年"树。在花芽诱导前期,外源GA处理诱导MdIDD7下调表达,而蔗糖处理诱导其上调表达,说明MdIDD7响应激素和糖信号,促进苹果成花。     

新疆栽培杏群体遗传结构的SSR分析

 利用11对SSR引物对喀什、和田和库车3个新疆栽培杏( Prunus armeniaca L. ) 品种亚群进行了分子系统学研究。结果表明: 各位点平均期望杂合度(He = 0.2364) 显示新疆栽培杏群体具有较高的遗传多样性水平。根据基因分化系数(Gst = 0.1508) 值, 新疆杏各品种亚群的遗传分化主要存在于亚群(84.9%) 内。基于Gst测得的基因流Nm 为2.3666, 人为通过种子引种可能是其基因交流的主要方式。根据果实形态和地理起源对新疆杏进行传统分类并不能完全反映出新疆杏品种间的亲缘关系。     

6个甜樱桃品种ACO基因多态性的检测

乙烯在植物果实成熟过程中起着重要的作用,ACC合酶(1-aminocyclop ropane-1-carboxylic acid synthase,ACS)和ACC氧化酶(1-aminocyclop ropane-1-carboxylic acid oxidase,ACO)是植物乙烯生物合成途径的限速酶。通过DNA序列分析,以不同果实成熟期的6个甜樱桃品种(Prunus avium L.)为材料,检测ACO基因的多态性。获得甜樱桃ACO基因约1 kb,与桃(P.persica)ACO基因(GenBank登录号:AF532976)序列的同源性达96%,其预测的氨基酸序列与桃、梅(P.mume)、美洲李(P.armeniaca)和欧洲李(P.domestica)等ACO的氨基酸序列同源性超过95%。该片段包括4个外显子和4个内含子,内含子符合GT-AT规律。用DNAMAN进行多序列比对分别在内含子2和内含子4内发现2个多态性简单重复序列(AT)n。内含子2有3种片段:即(AT)6、(AT)7和(AT)8;内含子4有2种片段,即(AT)5和(AT)6,组合后共得到4种ACO单倍型。研究在甜樱桃ACO基因座上发现2个SSR标记,为进一步研究ACO基因多态性与果实成熟期相关性奠定基础。     

甜樱桃DELLA蛋白基因PaGAI的克隆与表达分析

 利用RT-PCR和RACE技术从甜樱桃（Prunus avium L.）嫩叶中克隆了赤霉素信号转导途径中的关键负调控因子DELLA蛋白基因cDNA全序列,将其命名为PaGAI。该基因cDNA全长2 310 bp,开放阅读框ORF为1 788 bp,推测其编码一个含有595个氨基酸残基的多肽链,蛋白质分子量约64 kD。生物信息学分析结果表明,PaGAI编码蛋白具有DELLA蛋白保守结构域,其N端存在两个非常保守的酸性结构域DELLA和VHYNP作为信号感知区域,C端有VHIID、RVER 和SAW结构域作为阻遏区域。PaGAI与其它植物的DELLA蛋白具有较高的同源性,其中与苹果MdRGL2b蛋白同源性最高,达到84%。构建pGEX-4T-1/PaGAI原核表达体系,并转化E. coli BL21,经0.5 mmol · L-1 IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE检测获得了分子质量为91 kD的融合蛋白,半定量RT-PCR分析表明,PaGAI在花、果实、叶片、韧皮部中普遍表达,在花与韧皮部中的表达远远强于在果实与叶片中的表达。     

桃成花基因PpLFY的克隆与表达及多克隆抗体制备

 以‘八月脆’桃成花诱导期腋芽为试材,克隆得到一个FLORICAULA/LEAFY同源基因,命名为PpLEAFY（PpLFY）,GenBank登录号为EF175869,该基因cDNA全长1 314 bp,ORF为1 248 bp,编码一个含416个氨基酸残基的蛋白,与其他物种中的LEAFY蛋白的同源性较高,为（74.22%~84.69%）。时期及组织特异性表达分析表明,PpLFY主要在叶片、花瓣及成花诱导期及花芽形态分化初期中表达。构建了pGEX-4T-1/PpLFY原核表达系统,获得了可溶性融合蛋白rPpLFY,分子量约为36 kD。利用该蛋白免疫新西兰大白兔,获得了抗rPpLFY的多克隆抗体,ELISA效价为1:10 000。     

新疆红肉苹果PGIP基因的克隆及原核表达

【目的】研究克隆新疆红肉苹果[Malus sieversii f.neidzwetzkyana(Dieck)Langenf]PGIP基因并进行原核表达,探讨其抗病机制。【方法】根据Genbank中已经发表的‘金冠’苹果PGIP保守区域设计1对特异引物,以新疆红肉苹果叶片总RNA为模板,T/A克隆后进行序列测定,并对该序列进行分析。随后将该蛋白成熟肽cDNA片段连接到原核表达载体pET30a(+)中,构建融合表达质粒,转化到E.coli BL21(DE3)中进行表达。【结果】序列分析表明,新疆红肉苹果PGIP基因cDNA编码区全长993 bp,编码330个氨基酸残基,命名为MsPgip,GenBank登录号为JQ001783。MsPgip分子质量为36.6 kD,等电点为7.05,有6个潜在的N-糖基化位点,信号肽为N端24个氨基酸残基。该蛋白质还具有2个连续的24个氨基酸残基大小的LRR基序(LSQLKNLTFLDLSFNNLTGAIPSSLSQ LPNLNALHLDRN-KLTGHIPIS)。与已克隆的‘澳洲青苹’、‘金冠’、‘富士’苹果PGIP氨基酸序列同源性均高达99%。原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,表达蛋白的分子质量与预期一致。【结论】克隆了新疆红肉苹果PGIP基因,并可在大肠杆菌中表达。