南美白对虾丝氨酸蛋白酶的分离纯化及性质研究

通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose、Phenyl-Sepharose、Hydroxyapatite、Superdex75等方法,从南美白对虾消化腺中分离得到一种丝氨酸蛋白酶.SDS-PAGE结果显示,其分子质量约为28ku,最适pH值与最适温度分别为9.0和40℃,且pH值在7.0～10.0之间以及温度在40℃以下有较高的稳定性.底物特异性实验与抑制剂实验结果表明,该酶属于类胰蛋白酶的丝氨酸蛋白酶.动力学实验显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,Km=0.69μmol/L,Kcat=0.33S-1,Kcat/Km=4.78×105（mol/L）-1S-1.     

具几丁质酶抑制活性的中性蛋白酶的筛选与纯化

利用平板快速筛选法,从土壤中筛选到一株细菌BacillusSp.2108,其代谢物对几丁质酶具有较强的抑制活性。对其发酵液离心,用硫酸铵盐析后,经Sephadex G-25脱盐柱脱盐、DEAE Sephrose Fast F low阴离子交换柱层析和低压液相色谱Superdex G 75凝胶过滤层析等步骤进行分离纯化,最后通过SDS-PAGE检测,得到一条单带。纯品经SDS-PAGE,转膜,测序,及序列比对,初步判定此抑制物是一种中性蛋白酶。     

南美白对虾附肢的分离与结构研究

[目的]了解南美白对虾附肢的结构分化。[方法]以南美白对虾为试验对象,分离其附肢并对其结构进行观察。[结果]南美白对虾附肢共19对,由于其着生部位和功能的不同,各附肢在形态上各不相同。[结论]各种类虾的不同生活方式,造成附肢在进化上有了不同的分化。     

具几丁质酶抑制活性的中性蛋白酶的筛选与纯化

利用平板快速筛选法,从土壤中筛选到一株细菌Bacillus Sp.2108,其代谢物对几丁质酶具有较强的抑制活性.对其发酵液离心,用硫酸铵盐析后,经Sephadex G-25脱盐柱脱盐、DEAE Sephrose Fast Flow阴离子交换柱层析和低压液相色谱Superdex G 75凝胶过滤层析等步骤进行分离纯化,最后通过SDS-PAGE检测,得到一条单带.纯品经SDS-PAGE,转膜,测序,及序列比对,初步判定此抑制物是一种中性蛋白酶.     

菜豆种子几丁质酶的分离纯化及性质研究

运用硫酸铵分级沉淀与亲和层析技术相结合的方法,分离纯化了菜豆种子中的几丁质酶。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电脉图谱显示,经亲和层析后的蛋白质样品呈单一谱带,分子质量为３．４６×１０＾４,纯化倍数达４８．８倍,几丁质酶回收率为４７％,酶的最适温度为４５℃,最适ｐＨ值为６．０。纯化菜豆种子几丁质酶对绿色木霉菌生长具有抑制作用。     

天津地区南美白对虾人工繁殖技术

对虾养殖业是我国海水养殖业的支柱产业，1992年我国的对虾养殖面积14．7万hm^2，产量21万多吨，成为世界养虾第一大国，为我国沿海地区的经济发展和出口创汇起到了巨大的作用。自1993年全国发生中国对虾病毒爆发性流行病后，养殖面积、产量大幅度下降。近几年来，经过努力，进一步调整了养殖品种，引进养殖南关白对虾，不仅扭转了海水养虾业的困难局面，同时，给淡水养殖业带来了生机。为了解决南美白对虾的苗种，2004年天津警备区八一盐场第一次将南美白对虾大规模引进天津，进行人工繁殖获得成功。先后从海南水产研究所引进4000对F2代亲虾，通过采取一系列技术措施，人工繁殖南关白对虾苗151亿尾。     

微生物几丁质酶的研究进展

概述了有关微生物几丁质酶的研究情况,介绍了几丁质酶的分类、性质、分离纯化、基因克隆与表达以及在实际中的应用。     

长途运输南美白对虾苗试验

2002年5月31日，内蒙古水产科研所从天津塘沽区某虾场购进0.7cm虾苗39万尾，经14h长途运输，目测虾苗成活率达90%以上，现将这次运输的有关操作技术规程进行总结和整理，以供参考。     

南美白对虾染色体的研究

南美白对虾（Penaeusvannamei）又名万氏对虾和凡纳对虾，原产南美洲太平洋沿海，具有生长快、不易暴发疾病、含肉率高等许多养殖上的优点，为世界虾类养殖中的优良品种，我国于1988年7月从美国引进该品种，张伟权等「1993）对其繁殖生物学等方面进行过研究，并取得了人工育苗的成功，为开展大规模养殖生产奠定了基础。本文对南美白对虾染色体进行了初步研究，为进一步开展人工养殖和遗传育种工作提供基础理论资料。l材料与方法南美白对虾于1995年11月间采自江苏省大丰县特种水产养殖场，活体运输带回实验室后，暂养一段时间，选择活力强的…     

中草药免疫增强剂对南美对虾血液生化指标的影响

该研究针对南美白对虾的生理特点,采用中医的辨证施治方法,选用具有补脾益气、消食导滞、催肥增重和增强免疫力等许多优点的中草药组方作为南美白对虾的中草药免疫增强剂。试验结果表明,饲料日粮中添加中草药免疫增强剂的南美白对虾比对照组增重明显,为了验证中草药免疫增强剂的作用原理,试验进行了南美白对虾实验组和对照组几种常见血液免疫生化指标的检测,发现用过中草药免疫增强剂的南美白对虾血液免疫生化指标几种常见体酶的活力有不同程度的提高,由此证实了中草药免疫增强剂对南美白对虾的免疫效果。     

南美白对虾保鲜方法的研究

南美白对虾容易受微生物的侵袭而被污染,属易腐食品,对其保鲜方法的研究具有广阔的前景。系统回顾了低温保鲜技术、气调保鲜等传统保鲜方法在南美白对虾上的应用,同时也介绍了目前还未在南美白对虾上得到广泛应用的生物保鲜剂和环境控制系统(EMS)的保鲜方法,并对这些方法的复合保鲜技术进行了展望。     

一种对虾头尾与背腹定向装置的设计与试验

为了解决对虾在机械自动化剥壳过程中定向难的问题,作者设计了一种对虾头尾与背腹定向装置。根据对虾的体型特征,分别利用倾斜布置的V型滑槽和曲型面滑道实现对虾的头尾定向和背腹定向,并进行了原理分析。针对分级后长度为110~130mm的新鲜南美白对虾进行了试验研究,结果表明利用V型槽进行对虾头尾定向的成功率达到了99.4%,利用曲型面滑道进行对虾背腹定向成功率达到了89%,定向装置原理合理,方法可行。研究结果可为对虾机械自动化剥壳加工中定向连续喂料设备的产品开发提供技术依据。     

比较免疫磁珠法与A蛋白亲和层析法纯化兔抗血清中的IgG

优化了免疫磁珠分离法纯化抗血清的实验条件,并与A蛋白亲和层析法比较纯化效果,以求得到一种简便、快速、高效的纯化IgG方法.结果表明：从5只新西兰兔获得210 mL试管凝集效价高达1∶5 120的兔抗鳗弧菌抗血清,磁珠与IgG结合10 min达到平衡,其最大结合量为0.227 mg/mL;免疫磁珠分离法与A蛋白亲和层析法得到的IgG纯度都很高,经过SDS-PAGE电泳都只得到25 ku和55 ku左右的两条带;免疫磁珠分离法得到的抗体ELISA效价高于A蛋白亲和层析法;免疫磁珠分离法反应所需时间（10 min）小于A蛋白亲和层析法所需的20 min,其得率（11.5 mg/mL）也高于A蛋白亲和层析法的10.25 mg/mL.     

根结线虫卵寄生真菌蜡蚧菌(Lecanicillium lecanii)产生的几丁质酶活性

卵寄生真菌产生的几丁质酶在卵孵化和寄生过程中发挥重要的作用,也是评价寄生线虫真菌生物防治潜力重要的生化指标之一。利用NAG法和pNP法分别测定蜡蚧菌(Lecanicillium lecanii)CFCC84957和CFCC80920菌系的几丁质降解酶系和外切酶活性,CFCC84957菌系接种4～6d含有0.2%胶体几丁质的培养滤液后,几丁质降解酶系到达活性高峰期,而CFCC80920菌系的培养滤液未检测到几丁质降解酶系。2个菌系的培养滤液从第2d开始均能检测到几丁质外切酶活性,CFCC84957和CFCC80920活性出现的最高峰分别在第12d和6d,但是CF-CC84957的活性值约是CFCC80920的4倍(分别为0.51μmol·h-1·ml-1、0.12μmol·h-1·ml-1)。含有0.01%糖基化几丁质的几丁质酶活性电泳检测到1条分子量为48.2kD的蛋白质谱带。     

海洋产几丁质酶菌株的筛选及发酵条件优化

通过透明圈法初筛、DNS复筛,从大连近海海域的海泥中分离出一株高产几丁质酶的菌株,经初步鉴定为扩展短杆菌(Brevibacterium linens).采用不同碳源、氮源、温度、pH值等对培养条件进行了优化及正交试验.结果表明:该菌产酶最适条件是在28℃、pH7.0、蛋白胨1g/L、胶体几丁质10g/L、NaCl 20g/L条件下,几丁质酶活力可达0.508 U/mL,比优化前其产酶活力提高了9倍.     

烟草Ⅰ型几丁质酶的生物信息学分析

旨在对烟草Ⅰ型几丁质酶进行生物信息学分析,了解其生物学特征,为下一步研究烟草Ⅰ型几丁质酶在烟草抗病过程中的作用奠定基础。采用生物信息学的方法,对已在 NCBI上登陆的烟草、拟南芥、水稻、菜豆的Ⅰ型几丁质酶（chitinase,ChiⅠ）氨基酸序列特征和进化关系进行了预测和分析。结果表明,这4种植物Ⅰ型几丁质酶的分子量大小在28~37 kDa之间,均具有信号肽,结构域高度保守,均具有几丁质结合区（ Cht BD1）和催化功能区（Glyco_hydro_19）;烟草中的3种Ⅰ型几丁质酶序列相似性较高,可以聚为一类;烟草与拟南芥和菜豆中的一种 ChiⅠ遗传距离较近,而与水稻中 ChiⅠ的遗传距离较远。通过分析发现,烟草Ⅰ型几丁质酶有着与其他植物中该酶相同的特性,为进一步研究烟草抗病蛋白提供理论依据。     

一种快速纯化相思子凝集素的方法

介绍了一种快速提取、纯化相思子凝集素(Abrus agglutinin,AGG)的方法。以Sepharose 6B(琼脂糖凝胶)为亲和层析介质,结合Hiload 26/60 Superdex 75凝胶层析柱,粗提物经2步层析分离纯化,获得了高纯度的AGG。SDS-PAGE电泳时其相对分子量约为65.4 kD,凝集兔红细胞的最小浓度约为0.5μg/mL,LD50为3.6 mg/kg。采用该方法可从相思豆中快速制备高纯度AGG。