林下种植灵芝内生细菌和放线菌的分离鉴定

以林下种植灵芝为试材，采用16S rDNA鉴定方法，研究了不同分离方法对灵芝内生细菌和放线菌多样性的影响，以期能够发现产生活性成分的菌种或者新种，从而推动微生物医药的发展进程。结果表明：从健康的灵芝子实体内分离得到放线菌1门1属的4个菌株(LZ-F1、LZ-F2、LZ-F3、LZ-F4)和细菌2门4属的5个菌株(LZ-B1、LZ-B2、LZ-B3、LZ-B4、LZ-B5)。4株放线菌均属于链霉菌属(Streptomyces),5株细菌分别属于周杆菌属(Peribacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、新根瘤菌属(Neorhizobium)和芽孢杆菌属(Bacillus)。该研究为其它食用菌内生菌的分离提供了技术支撑，也为灵芝活性成分的进一步开发利用提供了较好的参考价值。     

土壤中解磷细菌的分离筛选

为筛选出高效的解磷微生物,提高磷的有效利用,采集向日葵、小麦、豆科等不同种植区单株的根际土壤,采用平板溶菌圈法从土壤中进行分离筛选,初步筛选出3株解磷菌JLX-1、JLX-2、JLX-3,研究不同条件对其解磷能力的影响。结果表明:菌株JLX-3的解磷能力较高,溶磷圈直径和菌落直径比值D/d为2.09。菌株JLX-3在碳源为葡萄糖、氮源为硫酸铵时,溶磷量分别为5.572、5.520mg·g~(-1),在氯化钠浓度为0.3g·L~(-1)、pH 7时解磷效果较好。根据形态特征和生理生化特征,初步将菌株JLX-3鉴定为芽孢杆菌。     

美姑县大风顶国家自然保护区大型真菌资源调查

本次考察由四川省林业厅组织,目的是调查美菇县大风顶自然保护区得天独厚的自然资源,便于开发利用。从2002年8月10日至25日,共采样231个,鉴定出大型真菌120种,分属于真菌门的7个目,24科68属。其中伞菌目为31属70种,占本次调查鉴定总数的58 3%,其它如非褶菌目,木耳、银耳等为39属50种,占总数的41 7%。伞菌目中几个重要的科是红菇科12个种,以红菇、乳菇等为主;牛肝菌科10个种。非褶菌目中,有多孔菌、鸡油菌、层孔菌和枝瑚菌等。1　从生态类型看,各类型齐全1 1　腐生型　经鉴定的120个种大多营腐生生活,以腐殖质壤土、木材、树桩、枯枝落叶、堆…     

8种常见芽菜致病微生物的分离鉴定

对目前产业化程度较高的黄豆、黑豆、豇豆、萝卜、蕹菜、花生、黄秋葵、向日葵等8种芽菜患病植株上的致病微生物进行分离、纯化,共得到24株细菌菌株和8株真菌菌株;利用真菌ITS和细菌16Sr DNA通用引物,分别对分离得到的细菌和真菌基因组进行分子生物学鉴定。结果表明:24株细菌分属8个属,分别为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、肠杆菌属(Enterobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)、不动杆菌属(Acinetobacter)、果胶杆菌属(Pectobacterium)、短稳杆菌属(Empedobacter)、戴尔福特菌属(Delftia)、从毛单孢菌属(Comamonas);24株细菌均为革兰氏阴性菌,除果胶杆菌属外,其余都不是典型的植物病原菌;其中不动杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属和假单胞菌属的细菌出现在2种或2种以上芽菜上;另外4个属的细菌则只出现在1种芽菜上,呈现出寄主的专化性。8株真菌分属3个属,分别为镰刀菌属(Fusarium)、链格孢属(Alternaria)和根霉属(Rhizopus);其中根霉属和链格孢属的真菌分别只出现在萝卜芽菜和蕹菜芽菜上,其他6种芽菜上分离得到的真菌菌株均属于镰刀菌属。分离菌株回接试验结果表明,所有菌株均能对芽菜造成不同程度的腐烂症状,生产过程中环境微生物污染同样能致芽菜腐烂病发生。     

非洲菊根腐病病原菌的分离鉴定及致病性

以非洲菊根腐病发病植株为试材,采用常规组织分离法对引起非洲菊根腐病病原菌进行分离纯化,研究了分离物对非洲菊的致病性,并通过形态学结合rDNA-ITS和TEF-1α序列的分子系统学方法对病原菌进行鉴定,以期明确非洲菊根腐病的病原菌类型.结果 表明:从典型病根上共分离获得8株菌株,分别为FZJf 1-1、FZJf 1-2、FZJf 1-3、FZJf 2-1、FZJf 2-2、FZJf 2-3、FZJf 3-1和FZJf 3-2;8株菌株均能导致非洲菊幼苗出现典型的叶片枯萎和根腐症状,其中菌株FZJf 1-1和FZJf 1-3致病力最强,接种第3周植株开始发病,其次是菌株FZJf 2-1,接种第5周植株开始发病,其余菌株致病性较弱;根据形态学特征和分子系统学特征鉴定出6株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),分别是FZJf 1-1、FZJf 1-2、FZJf 1-3、FZJf 2-1、FZJf 2-3和FZJf 3-2,1株为茄类镰刀菌(F.solani)FZJf 2-2,1株为层出镰刀菌(F.proli feratum) FZJf 3-1,尖孢镰刀菌(F.oxysporum)为优势病原菌,茄类镰刀菌(F.solani)和层出镰刀菌(F.proli.eratum)为弱势病原菌.     

连作对百香果根际土壤微生物群落的影响

以1年种植(新植园)和3年连作百香果园根际土壤作为研究对象,采用Illumina MiSeq高通量测序技术分析根际土壤中的微生物群落结构组成和多样性变化,以期为克服百香果连作障碍提供指导。结果表明,相比新植园,3年连作园根际土壤细菌群落多样性显著降低,细菌群落丰富度,真菌群落丰富度、多样性增加。根际土壤微生物群落组成发生了较大变化,在门分类水平上,3年连作园根际土壤中变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度分别增加了5.86个百分点和2.21个百分点;放线菌门(Actinobacteria)减少了3.40个百分点,子囊菌门(Ascomycota)减少了28.41个百分点,而毛霉门(Mucoromycota)增加了14.73个百分点。在属分类水平上,3年连作园根际土壤中γ-变形菌纲中未分类属unclassified_Gammaproteobacteria、黄单胞杆菌科未分类属unclassified_Xanthomonadaceae相对丰度显著增加,酸杆菌门中Gp2相对丰度显著降低;子囊菌属(Archaeo...     

杏鲍菇与白灵菇红斑病病原菌拮抗菌的筛选与鉴定

筛选并鉴定杏鲍菇和白灵菇红斑病病原菌的拮抗菌,为该病的生物防治提供实验证据。通过牛津杯法筛选拮抗菌,并通过16s r DNA分析进行拮抗菌鉴定。结果表明,筛选到杏鲍菇红斑病病原菌的拮抗菌1株,为GL110,白灵菇红斑病病原菌的拮抗菌2株,分别为GL110和GL52。GL110鉴定为类芽孢杆菌属细菌,GL52鉴定为贪铜属细菌。     

六株扁枝衣内生真菌的抗病原真菌活性

以采自大兴安岭的3份扁枝衣(Evernia mesomorpha)为试材,采用刮皮层法,分离获得6株内生真菌,通过菌落形态观察和ITS序列分析,并以5种病原真菌为拮抗指示菌,采用平板对峙培养法,研究了6株内生真菌的抗病原菌活性。结果表明:6株内生真菌全部属于子囊菌门(Ascomycota)粪壳菌纲(Sordariomycetes),其中菌株FF-3、FF-4为紫棕炭团菌(Hypoxylon fuscum),菌株FF-7为白色侧齿霉菌(Engyodontium album),菌株FF-2为炭团菌属(Hypoxylon sp.),菌株FF-6为炭角菌属(Xylariasp.),菌株FF-9为毛壳菌属(Chaetomiumsp.);菌株FF-2(Hypoxylon fuscum)和FF-6(Xylariasp.)均对多枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)有抑制作用;菌株FF-6对黄瓜萎蔫病菌(Plectosphaerella cucumerina)有抑制作用。其中,FF-6抑制病原真菌的活性较好,形成明显的拮抗条带,最大宽度为7.00mm。菌株FF-2、FF-6有望成为植物病原真菌的候选生物防治菌。     

蓝莓根系内生真菌多样性的研究

山东是蓝莓种植大省,至2014年底,种植面积约3 000hm2,年产量约为5万t。为探讨山东栽培蓝莓根系内生真菌的菌群组成和分布特点,利用组织分离法从山东4个地区2个蓝莓栽培品种根系中分离内生真菌1 345株。利用形态特征和分子生物学方法鉴定为29属,其中卵菌1属,占0.45%;担子菌2属,占2.15%;子囊菌17属,占31.16%;无性型真菌9属,占60.82%;其余5.42%无法明确鉴定。结果表明:山东省栽培蓝莓根系内生真菌的菌群多样性丰富,其中以镰孢属Fusarium为优势菌群,分离频率为31.67%;木霉属Trichoderma、青霉属Penicillium、枝孢属Cladosporium、涛旋孢属Zalerion是亚优势种群。不同地区栽培蓝莓根系内生真菌的结构和组成存在一定差异。镰孢属Fusarium是2种栽培蓝莓根系内生真菌的优势菌群。多样性指数的分析反映出蓝莓根系内生真菌菌群的多样性水平存在差异,威海"杜克"的多样性指数(H′)和丰富度指数(R)最高,分别为2.835 9和4.264 3,泰安"杜克"的均匀度指数(E)最高,为0.939 1。由相似性原理得出,各地区之间的内生真菌相似性系数处于中等不相似与中等相似之间,威海和青岛之间的内生真菌菌群相似性最高,它们之间的Jaccard指数和Sorenson指数分别为0.57和0.73。     

蓝莓贮藏期病原真菌的分离与鉴定

为明确云南省玉溪市蓝莓采后贮藏期引起果实腐烂的病原真菌种类,以采自澄江地区的蓝莓鲜果贮藏自然发病的果实为试验材料,采用组织分离法分离培养病原菌,经形态学观察和ITS rDNA(Internal transcribed spacer)区序列测定分析,对相关病原真菌进行了分类鉴定。结果表明:从采后贮藏过程中发生病害的蓝莓果实上分离到3株病原真菌,经鉴定3株真菌分别为枝孢菌属(Cladosporium)、链格孢属(Alternaria)和匍柄霉属(Stemphylium);该研究可为澄江地区蓝莓贮藏期腐烂病害的预防和控制及进一步深入研究提供一定的参考理论依据。     

两株酵母菌对番茄采后病害的防治效果

拮抗菌L-1-6是从辣椒果实表面附生微生物中分离筛选出的对番茄早疫病(Alternaria solani)有拮抗作用的酵母菌;拮抗菌H-2是从李果实表面附生微生物中分离筛选出的对番茄根霉果腐病(Rhizopus nigricans)有拮抗作用的酵母菌。用浓度为1.0×106cfu·mL-1的拮抗菌悬浮液浸泡绿熟期海粉901果实2min,常温贮藏20d,结果表明,拮抗菌L-1-6和H-2悬浮液分别处理番茄果实均能延迟病害发生,分别降低腐烂率40.0%和18.3%,降低失水率0.56%和0.53%,降低总损耗43.2%和21.4%。等体积混合浓度为1.0×106cfu·mL-1的拮抗菌L-1-6+H-2悬浮液处理果实,表现为增加腐烂的发生。用两种拮抗菌悬浮液分别处理番茄果实对果实营养成分含量和感官品质没有不良影响。     

大青叶樱桃根际微生物种群结构及其变化动态

利用选择性培养基,对2年生大青叶樱桃(Cerasus pseudocerasus)根际微生物进行了分离、鉴定和分类,分析了不同物候期根际微生物种群结构的变化。结果表明,从大青叶樱桃根际分离纯化获得的细菌分别属于15个属,以芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)为主;放线菌属于链霉菌属的6个类群,以白色类群(Albosporus)、黄色类群(Flavus)为主;真菌以镰刀菌(Fusarium)和木霉属(Trichoderma)为主。不同生育期根际微生物种群结构不同,落叶期根际细菌种群结构最丰富,萌芽期最少。     

如何解决盆景创作难题系列——松树的创作难题

松树盆景创作时常见有三个难题． 1、牺牲枝及干切断面难看的问题。（参考图1-图14） 2、呆直枝如何调矫为自然弯曲的问题。（参考图20-图29） 3、枯枝如何美化为枝舍利的问题。（参考图30-图35）     

卡里佐枳橙幼苗病害致病菌的分离和鉴定

在卡里佐枳橙幼苗上发生一种严重病害,为害卡里佐枳橙茎干,造成褐变,叶片干枯或脱落,严重时植株死亡。从卡里佐枳橙病害苗上分离纯化得到4株真菌,分别为MP1、MP2、MP3和MP4。致病性测定发现,上述4种真菌的致病程度不同,MP2孢子悬浮液处理发病最轻,MP3孢子悬浮液处理发病最为严重;对这4种菌进行形态学和分子生物学鉴定,发现3株属于链格孢属(Alternariasp.),另外1株属于盾壳霉属(ConiothyriumCorda)。     

草本药用植物猪殃殃白粉菌分子生物学鉴定

以河南商丘地区草本药用植物猪殃殃白粉菌为试材,采用分子系统学方法研究了其形态学、致病性鉴定、分子生物学鉴定及其系统进化关系,以期为白粉病的防治提供理论依据。结果表明:猪殃殃白粉菌着生于叶的两面及茎上,随着病原菌的发展,蔓延至覆盖整个叶子表面。显微分析结果表明,病原菌分生孢子梗直立,(100~260)μm×(10~12)μm,产生2~3个未成熟的分生孢子。足细胞(28~65)μm×(9~11)μm,紧邻着2~3个短细胞。分生孢子桶-柱形,(22~42)μm×(15~20)μm。对其核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列进行PCR扩增,测序获得632 bp序列,Gen Bank登陆号为KX396590。经MEGA 5.0软件分析,其与奥隆特高氏白粉菌Golovinomyces orontii ITS序列AB430813序列聚为一枝,而来自其它属种白粉菌的5条ITS序列亲缘关系较远。河南商丘地区的猪殃殃白粉菌为奥隆特高氏白粉菌G.orontii。     

草莓病害拮抗细菌的筛选及其对草莓褐色叶斑病的防效

通过组织分离法和稀释分离法从草莓根、茎、叶和根际土壤中分离内生细菌183株及根际细菌55株，其中9株拮抗菌对草莓褐色叶斑病病原菌（Pilidium concavum）、灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）、链格孢菌（Alternaria alternate）4种草莓病原菌具有广谱拮抗效果。结合病原菌形态学特征、生理生化特性和分子生物学鉴定结果，将拮抗菌株G3-23、J3-20、G3-29鉴定为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,J6-1、J1-4、G2-12、G3-k2和J1-11鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,G3-20鉴定为耐盐芽孢杆菌（Bacillus halotolerans）,G3-17鉴定为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）。菌株G3-23能够分泌蛋白酶和纤维素酶，对由P. concavum引起的草莓褐色叶斑病具有良好的防治效果，并且该菌株能在离体草莓叶片上成功定殖，表现出较好的生防潜力。     

青藏高原溶磷菌菌株的分离筛选

对青海省主要耕作区农田土壤进行了溶磷菌的分离和筛选,得到具有明显溶磷圈的溶磷菌48株。通过对溶磷圈大小测定,筛选出5-1、5-2、12-7等12株菌,溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)比值(D/d)均≥1.5。结果表明:通过摇瓶复筛,获得3株溶磷菌,可使培养液磷含量升高,均超过180μg/mL,而pH平均降低1个单位。因此,最终确定5-2、5-3和12-7株菌为适合青海农作区推广的高效溶磷菌。     

赣南桉树品种(系)对桉树枝瘿姬小蜂的抗性研究

桉树枝瘿姬小蜂已成为危害赣南桉树枝叶的主要害虫,已进入爆发阶段,严重威胁着赣南桉树产业的发展,选育优良的桉树抗性品种(系)是防治该蜂的最有效方法之一。以目前江西赣南推广面积较大的7个桉树品种(系)为试材,采用野外调查和室内幼苗接虫抗性鉴定等方法,选取样枝平均虫瘿数、有虫瘿株率、丛枝率等指标进行综合评价,研究这些品种(系)对桉树枝瘿姖小蜂的抗性。结果表明:不同桉树品种(系)对桉树枝瘿姬小蜂的抗性不同,7个桉树品种(系)对桉树枝瘿姬小蜂的抗性从高到低顺序为:柠檬桉巨尾桉GL9赤桉大叶桉≥巨桉窿缘桉巨园桉DH201-2,其中柠檬桉为高抗虫品种,林间调查未发现有虫瘿,巨尾桉GL9属中抗品系,受害较轻,而巨园桉DH201-2为高感虫品系,受害严重。     

不同种类食用菌菌糠与鸡粪堆腐的性状差异研究

菌糠是生产食用菌后的废弃栽培袋料,不同种类食用菌所采用的栽培袋料性状各异。该研究利用好氧堆腐方法,在温室环境下探讨了平菇菌糠(Ⅰ)和香菇菌糠(Ⅱ)分别与木耳菌糠、鸡粪间按照3∶4∶3(1)、2∶4∶4(2)和1∶4∶5(3)的质量比混合,在充分构建堆腐条件后,动态监测其在90d腐解期间内含水率、pH、C/N、全磷含量、全钾含量以及发芽指数的变化,旨在为不同种类食用菌菌糠的资源化利用提供切实可行的堆腐配方。结果表明:1)6个(Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅰ-3、Ⅱ-1、Ⅱ-2、Ⅱ-3)处理在25d撤水后转入温室环境,物料含水率均呈先增加后渐趋平稳的变化趋势,物料pH均能够在波动中有所上升,最终pH为7.5~9.0,6个处理C/N均随堆腐进行而呈递减规律;2)从堆腐后的物理性状来看,当平菇菌糠、木耳菌糠与鸡粪间以2∶4∶4的质量比混合时(Ⅰ-2、Ⅱ-2)更有利于物料颜色、气味、菌落生长及湿度状况向充分腐熟的方向转化;3)由平菇菌糠、木耳菌糠和鸡粪所组成的混料,其在堆腐期间均可使全磷及全钾含量先增加而后降低。当香菇菌糠、木耳菌糠与鸡粪间按照3∶4∶3、2∶4∶4或1∶4∶5配比混合后(Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅰ-3),其在堆腐完成皆有助于全磷及全钾含量的提升;4)当平菇菌糠、木耳菌糠与鸡粪间质量比为3∶4∶3时(Ⅱ-1),历经90d腐解仍无法保证堆料在生物学角度达到充分腐熟,相反,其余2个处理(Ⅱ-2、Ⅱ-3)则可有效推进堆料的腐熟进程。     

不同生态条件对西瓜根际土壤微生物群落结构的影响

以西瓜为试材,在黑龙江省内11种典型栽培模式背景下种植西瓜,研究了西瓜根际土壤微生物群落结构的变化。结果表明:栽种西瓜后明显改变了土壤微生物群落结构,其中处理D(西瓜/西瓜)的微生物多样性指数和均匀度以及细菌的丰富度最低,并且与大多数处理的微生物群落结构相似性较低。相关性分析表明,真菌的多样性与土壤的电导率呈极显著负相关。经测序后发现,大部分的细菌属于链球菌属、放线菌、拟无枝酸菌、芽单胞菌门等;真菌类群为赤霉属、链格孢属、毛壳菌属、隐球菌属等。