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以天竺葵为试材,比较分析了CTAB法、简单法、高盐低pH值法、CTAB-SDS法、SDS法对天竺葵叶基因组DNA提取的效果。结果表明:5种方法提取的天竺葵总DNA在纯度上有很大的差别。所得到的DNA提取纯度依次为简单法、CTAB-SDS法、CTAB法、高盐低pH法、SDS法。酶切结果为简单法、CTAB法效果最好,其次SDS法,高盐低pH法、CTAB-SDS法不能被EcoRI酶完全消化。经综合的比较分析,认为简单法是最佳的提取方法。因其步骤简单、快捷,得到的基因组DNA降解少、杂质含量少,能获得高质量的DNA模板,可以用于分子生物学试验研究。 相似文献
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使用改良的SDS法提取银杏老枝、半木质化嫩枝韧皮部及叶子的基因组DNA,结果表明:从嫩技韧皮部和嫩叶提取DNA可获得较好的效果,但老叶提取DNA因杂质较多,需要多次纯化。 相似文献
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果梅基因组DNA提取方法的比较及ISSR分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以果梅品种鸳鸯梅、皇后梅和肖山选的幼嫩叶片为试材,提取果梅的DNA.针对果梅组织细胞体内含有较多的酚类、糖类及萜类等次生代谢物质的特点,采用传统的CTAB法、改良的CTAB法和改良的SDS法提取果梅基因组DNA,并比较其提取效果.结果表明:改良的CTAB法可获得高质量、高得率的基因组DNA,OD260/280比值在1.80左右.通过基因组DlNA-ISSR分析,完全满足试验要求.并进一步对改良的CTAB法的关键步骤作出具体的分析讨论. 相似文献
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香蕉种质资源的AFLP鉴别与分类中DNA模板的制备 总被引:19,自引:1,他引:18
在运用AFLP技术进行香蕉种质资源的鉴别与分类时,成功的关键之一是HMW基因组DNA的成功制备和避免降解,为了获得高纯度的HMW香蕉模板DNA和清晰的AFLP指纹图谱,以粉蕉为试材进行了用不同方法从不同植物体部位提取香蕉DNA的研究。结果表明,以香蕉未展开的幼叶、成熟叶、新根为材料提取的DNA量足以进行AFLP分析,但考虑到取材的方便性,最好选用未展开的幼叶或成熟叶;用改进后的SDS、CTAB法均可以获得HMW基因组DNA和AFLP指纹图谱,SDS法(用氯仿异-戊醇溶液抽提3次)提取的DNA量将近是CTAB法提取的DNA量的2倍,但SDS法提取的DNA纯度不如CTAB法提取的高。两种方法提取的DNA片段大小一致,大约在16kb左右。 相似文献
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不同方法提取野生荔枝基因组DNA效果的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
以广东、广西地区的3个野生龙眼的幼嫩叶片为试材,采用SDS法、常规CTAB法和改良2× CTAB法提取荔枝叶片基因组DNA,比较研究从富含多酚、多糖和色素等次生代谢物质的野生荔枝叶片中获得高质量DNA的提取方法.结果表明:采用改良的2×CTAB法提取的荔枝叶片基因组DNA纯度最高、质量最佳,可直接用于荔枝叶绿体DNA trnL-F基因的PCR扩增分析,且扩增后条带清晰.表明改良的2×CTAB方法获得的DNA纯度和产率较高,符合进行野生分子标记的实验要求. 相似文献
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常春藤总DNA提取方法的改进 总被引:4,自引:0,他引:4
由于常春藤组织内含有较多的酚类和多糖类物质,获得高质量的总DNA有一定难度.现以常春藤叶片为材料,采用不同方法进行常春藤总DNA的提取,并对提取方法进行了改进、优化,有效去除了多糖类杂质的干扰.结果表明:CTAB法、SDS法及改进方法均可进行总DNA的提取,但改进的方法优于常规CTAB法和SDS法,所得的DNA无降解现象,且无杂质污染. 相似文献
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为从柑桔样品中快速获得高质量的病原DNA,在传统CTAB法基础上,结合热萃取技术,新建立了一种快速提取病原DNA的CTAB简化法。与Solarbio植物基因组DNA提取试剂盒和传统CTAB法相比,该方法所需时间短,1~2 h即可完成整个提取过程,获得的DNA质量高、产量多。采用上述方法提取黄龙病、溃疡病、褪绿矮缩病等3种柑桔病害样品DNA进行PCR检测,CTAB简化法和传统CTAB法的检出结果一致,试剂盒的检出率稍低。新建立的CTAB简化法,适用于柑桔病害大规模DNA检测。 相似文献
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《中国南方果树》2021,(3)
为研究从成熟石榴叶片中提取高质量基因组DNA的方法,根据成熟石榴叶片组织中富含多酚、多糖的特点,以峄城中国石榴种质资源圃20种石榴成熟叶片为材料,分别采用改良CTAB法(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)4种方法提取成熟石榴基因组DNA,通过琼脂糖凝胶、紫外分光光度计分析、ISSR扩增等方法检测所提取DNA的质量。结果表明,改良CTABⅣ法能从各个石榴品种的成熟叶片中提取出基因组DNA,琼脂糖电泳胶孔干净,无拖带,且DNA的纯度和完整性都较好,OD_(260 nm)/OD_(280 nm)的比值均为1.8~2.0,无降解现象,其质量、产量都高于其他改良CTAB法。ISSR-PCR扩增结果表明,此方法提取的基因组总DNA完全适于ISSR分析。其主要的步骤是:在石榴叶片的研磨中添加Vc、PVP等抗氧化物质,加入CTAB提取液后65℃水浴30 min后冷却至室温,离心条件为15℃、10 000 r/min、10 min, DNA粗提液用氯仿抽提3次,可获得高质量DNA。 相似文献
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以改进的CTAB法对三华李品种群中的早食李叶片基因组DNA的提取进行了试验.结果表明,改进的CTAB法适于高质量三华李品种群基因组DNA的提取,提取的早食李基因组DNA完整性较好,无降解,OD260/OD280的比值在1.9~2.0之间,多糖类杂质去除较为干净.经SRAP检验,条带清晰,多态性良好,说明改良CTAB法提取的基因组DNA质量较好,适于三华李高质量基因组DNA的提取.不同时期的不同成熟度的叶片都可以提取到基因组DNA,但以各期的嫩叶(梢)产量最高,效率最好. 相似文献