草鱼出血病病毒减毒的研究

草鱼出血病病毒ＧＣＨＶ－８２９野毒株在ＰＳＦ细胞连续传代过程,于培养液中加入一定浓度的桉液,传至１９代已达减毒目的,继续传至２９代其减毒效果保持稳定,２７代后不再加入桉液,继续传至３７代其减毒效果仍然保持稳定不变。致弱病毒对草鱼的安全性好,免疫原性强,用该弱毒株制备的弱毒疫苗免疫草鱼后,草鱼的成活率和免疫保护率均达１００％,表明桉液的草鱼出血病病毒的一种良好减毒剂,经桉液减毒的ＧＣＨＡＶ－８９２是     

草鱼出血病毒H962毒株的生物学特性研究

为了从细胞水平上研究人－α干扰素对草鱼出血病毒（ＧＣＨＶ）的抗性作用,以草针出血病毒Ｈ９６２毒株进行了稀有Ｊｕ鲫感染试验及细胞病变敏感细胞试验,研究了该毒株的某些生物学特性及不同细胞素。结果表明：该病毒能使稀有Ｊｕ鲫发生出血病,症状明显,死亡率高。感染草鱼肾细胞,能引起细胞病变,但经传代后,病变消失,表现出病变不稳定特点,感染鲤鱼上皮细胞、稀有Ｊｕ鲫性腺细胞、草鱼鳍条细胞和草鱼性腺细胞,不引起细胞     

草鱼囊胚细胞系的生物学特性

国外鱼类细胞培养始于 6 0年代[1 ] 。我国起步较晚 ,主要取材于鲤科经济鱼类 ,多为对草鱼(Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｉｄｅｌｌａ)出血病病毒 (ＧＣＨＶ)敏感的细胞系 /株[2 - 5] 。本实验室为了进行ＧＣＨＶ的分离、培养及鱼类干扰素的诱导和鉴定等鱼类遗传育种研究 ,从 1 989年 4月起开始进行草鱼囊胚细胞培养 ,建立了草鱼囊胚细胞系 (ＧＣＢ)。目前 ,该细胞系已传至 2 0 0余代 ,部分保存于液氮中。本文对其部分生物学特性进行了分析。1　材料1 .1　细胞试验草鱼受精卵取自广东南海。胚胎发育至囊胚期 ,以含抗菌素的平衡盐溶液浸洗…     

草鱼囊胚细胞系的生物学特性

国外鱼类细胞培养始于 6 0年代[1 ] 。我国起步较晚 ,主要取材于鲤科经济鱼类 ,多为对草鱼(Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｉｄｅｌｌａ)出血病病毒 (ＧＣＨＶ)敏感的细胞系 /株[2 - 5] 。本实验室为了进行ＧＣＨＶ的分离、培养及鱼类干扰素的诱导和鉴定等鱼类遗传育种研究 ,从 1 989年 4月起开始进行草鱼囊胚细胞培养 ,建立了草鱼囊胚细胞系 (ＧＣＢ)。目前 ,该细胞系已传至 2 0 0余代 ,部分保存于液氮中。本文对其部分生物学特性进行了分析。1　材料1 .1　细胞试验草鱼受精卵取自广东南海。胚胎发育至囊胚期 ,以含抗菌素的平衡盐溶液浸洗…     

马立克氏病毒Z_4株培养特性和免疫原性的研究

将鸡马立克氏病毒（ＭＤＶ）血清２型Ｚ＿４毒株第１０代（Ｚ＿４－１０），在对鸡马立克氏病（ＭＤ）高度易感的Ｐ系ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）单层上连续传代全第３０代（Ｚ＿４－３０），Ｚ＿４毒株空斑形成速度和空斑形态均未发生显著变化。分别以Ｚ＿４－１１，Ｚ＿４－２０，Ｚ＿４－２５和Ｚ＿４－３０细胞结合毒作单价疫苗，将Ｚ＿４－１１，Ｚ＿４－２０和Ｚ＿４－３０细胞结合毒分别与Ｆ＿（Ｃ１２６）细胞结合毒组成二价疫苗，免疫Ｐ系ＳＰＦ鸡，用ＭＤＶ强毒ＧＡ株攻击，进行免疫效力试验。结果表明，Ｚ＿４毒株４个代次单价苗之间以及３个代次毒分别与Ｆ＿（Ｃ１２６）毒株组成的二价疫苗之间免疫效力无显著差异。表明Ｚ＿４毒株在ＣＥＦ单层上从第１０代连续传至第３０代，仍然保持其原有的培养特性和免疫原性。     

草鱼的体液免疫应答及抗体产生细胞

以草鱼出血病病毒和牛血清白蛋白（ＢＳＡ）为抗原妆种草鱼,比较了草鱼对两种抗原的体液免疫应答情况。结果显示,在接种了ＢＳＡ的草鱼中,１４ｄ后检测至抗体,其效价在２８ｄ达到峰值;而接种了出血病病毒的草鱼,在２１ｄ后检测到抗体,抗体效价在３５ｄ达到峰值。用ＦＴＴＣ－ＢＳＡ检测免疫ＢＳＡ草鱼的抗体产生细胞,探讨了抗体产生效价与抗体细胞数量的关系。     

传染性囊病病毒CJ801 VP2基因cDNA的序列分析

用ＲＴ－ＰＣＲ从传染性囊病病毒ＣＪ８０１的第１４代囊毒中扩增编码ＶＰ２蛋白的ｃＤＮＡ基因片断，长度为１５００ｂｐ，并对该片断进行了ＤＮＡ序列分析。结果表明，ＣＪ８０１与ＩＢＤＶ标准Ⅰ型毒株５２／７０、ＳＴＣ和Ｃｕｌ的同源性最高，分别为９７４％、９７６％和９６９％，与变异株Ａ、Ｅ、ＧＬＳ的同源性稍低，分别为９６５％、９６３％和９６７％。而与Ⅱ型毒株的同源性只有８１％左右。从遗传进化树上看，ＣＪ８０１处于标准Ⅰ型毒株和变异株之间。根据ｃＤＮＡ序列推导出蛋白质序列，比较蛋白质序列发现，ＣＪ８０１与Ⅰ型ＩＢＤＶ毒株的同源性均在９６％以上，其中与５２／７０的同源性最高，为９８２％。ＣＪ８０１ＶＰ２高可变区的七肽区（Ｓ－Ｗ－Ｓ－Ａ－Ｓ－Ｇ－Ｓ）未发生变化。以上结果说明ＣＪ８０１为ＩＢＤＶⅠ型强毒株。另外，ＣＪ８０１和所有ＩＢＤＶ强毒株在ＶＰ２的２５３、２７９和２８４位上的氨基酸均相同，分别为Ｑ、Ｄ和Ａ；而ＣＪ８０１的细胞适应株ＣＪ８０１ＢＫＦ和所有弱毒株一样，其相应位置的氨基酸分别为Ｈ、Ｎ和Ｔ。这３个氨基酸可能和ＩＢＤＶ的毒力有关。     

狂犬病Flury HEP株的复制及其某些生物学性质的观察

狂犬病ＦｌｕｒｙＨＥＰ株弱毒在ＢＨＫ（２１）细胞上连续传代，培养物经中和试验、间接荧光抗体染色、电镜观察、动物试验、病毒增殖和抗体消长曲线的测定，证明该弱毒株可在ＢＨＫ（２１）细胞上良好地复制。传至二代以后毒价可达到１０（－５）／０．０３ｍｌ。该毒经兔、犬、山羊、牛试验显示了其安全性。免疫后７天即可见到抗体阳转。免疫犬后，血清中和抗体在二年半时间内维持在一个较高的水平。     

减蛋综合征贵州分离毒全基因组探针的制备及检测

为准确检测鸡群中减蛋综合征病毒感染情况,从减蛋综合征病毒（ＥＤＳ）贵州分离毒株ＨＳ－１中提纯病毒ＤＮＡ后,用地高辛标记制备了全基因组探针。在Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ中该探针不与正常鸭胚尿囊液核酸提取物及马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ发生反应,只与３株ＥＤＳ病毒（国际标准毒ＡＶ－１２７、贵州分离毒ＨＳ－１、南京分离毒（ＧＣ２）ＤＮＡ呈阳性反应,具有较高的特异性;可检测出３０ｐｇ的同源ＤＮＡ,具有较强的灵敏度     

鸡传染性支气管炎病毒血凝性的研究

用中国和澳大利亚分离的Ａ型魏氏梭菌培养液、Ⅰ型卵磷酯酶Ｃ和胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ），制备的血凝抗原能凝集鸡红细胞，为鸡传染性支气管炎的诊断提供了方法。对鸡传染性支气管炎Ｍ（４１）、Ｈ（１２０）、Ｈ（５２）、Ｇｒａｙ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｔ、ＧＩＢＶ等７个毒株进行了血凝性的比较，以Ｈ（１２０）毒株血凝价最高，其次是Ｍ（４１）、ＧＩＢＶ、Ｇｒａｙ，而Ｈ（５２）、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｔ等毒株血凝性低或无血凝性。作者还对影响鸡传染性支气管炎病毒血凝试验的各种因素进行了研究。     

草鱼病毒性出血病流行性病学及防控措施

草鱼生长速度快、养殖产量高、经济效益好,其养殖规模居中国所有养殖鱼类首位。草鱼病毒性出血病由草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus, GCRV)感染引起,是危害草鱼养殖最严重的疾病。该病发病期长,传染性强,防治困难,无特效药,一旦发病,其死亡率可达80%以上。本文从典型症状、组织病理学特征、基因型、病因等角度对草鱼病毒性出血病的流行情况进行剖析,并就该病的生态预防、免疫预防提供参考建议,对推动草鱼健康养殖具有积极的意义。     

草鱼呼肠孤病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立

为更加快速、灵敏地检测草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV),建立环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。根据GenBank中GCRV HZ08等毒株VP6蛋白基因序列设计引物,以GCRV弱毒疫苗株(GCHV-892)总RNA为模板建立RT-LAMP反应,对扩增产物用限制性内切酶PvuⅡ进行酶切鉴定,所得酶切产物大小符合预期值。随后对LAMP反应体系包括Mg2+、dNTPs、甜菜碱(betaine)和内外引物浓度比进行了优化,并以含VP6蛋白基因的重组质粒(pEASY-VP6)为模板考量了该方法的敏感性,结果显示最低检测限为10copies.μL-1,比RT-PCR检测方法敏感10倍。特异性试验表明与白斑综合征病毒(WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)无交叉反应。应用RT-LAMP方法检测16份疑似出血病草鱼,6份病料获得了阳性扩增,与RT-PCR检测结果一致。     

鸡痘病原分离鉴定及油乳剂灭活苗研制

从发病鸡病变组织采集病料 ,通过鸡胚接种和细胞培养分离病毒 ,经电镜观察、包涵体检查和理化特性检查证明分离病毒为鸡痘病毒 ;用分离毒株研制出鸡痘油乳剂灭活苗 ,配合鸡痘鹌鹑化弱毒苗使用 ,用于鸡痘的预防 ,经临床应用效果良好。     

广西南宁市和崇左市草鱼养殖水体水质定点监测及分析

为了解目前广西南宁市和崇左市草鱼养殖水域的水质状况,于2009年1～6月对南宁市和崇左市4个草鱼养殖水域水质进行监测和取样,采用通用、成熟和可比性强的指数法,对主要污染物的特征值进行统计分析。并根据水域的环境特点,划分出5个评价区,对主要污染物质进行分析、比较和评价,对各养殖水域水质进行综合评价。评价结果表明,南宁市和崇左市草鱼养殖水域的主要污染物质为悬浮物、化学耗氧量（COD）、氨氮、生物耗氧量（BOD）和活性磷酸盐。各个草鱼养殖监测水域的水质均受到不同程度污染,其中以靠近城镇生活区的养殖水域污染较为严重。     

一种新抗冻剂DMF在淡水鱼类精液超低温保存上的应用

本文首次报导了一种新的抗冻剂——N-N-二甲基甲酰胺(DimethylFormamide,DMF)对淡水鱼类精液超低温冷冻保存具有明显效果,冻精的受精效果优于二甲亚砜(DMSO)。团头鲂、鲤、草鱼、鲢、鳙使用13%DMF抗冻剂,精液液氮保存3—4周,受精率分别为76%、54.03%、68.6%、37.9%和40.60%,而用13%DMSO作为抗冻剂时,则分别为69.1%、42.6%、67.6%、19.4%和37.4%。结果表明10—15%DMF作为抗冻剂,含0.5%NaCl的稀释液稀释精液,精液与稀释液按1:4比例混合冷冻;2%NaCl作为激活剂,以10倍体积激活剂稀释解冻精液进行授精为宜。     

Interaction of attenuated and virulent tobacco mosaic virus strains

An interfering effect between an attenuated tobacco mosaic virus (TMV) strain (isolated from a tissue culture) and virulent (typical) strain of this virus distinctly manifests itself starting from an interval of 3 days between infection by these strains and reaches a maximum on the fifth day. The protective effect weakens with increasing interval between inoculation with the attenuated and virulent strains.     

茶香即食草鱼的工艺及产品特性研究

[目的]利用草鱼良好的加工特性与茶叶的特殊功能制成符合质量要求的即食产品。[方法]以草鱼为原料,在加工过程中加入茶元素,通过浸渍调味、油炸熟化干燥、复合增香等工艺制成茶香即食草鱼制品。同时,对茶香即食草鱼的营养成分、微生物安全性和质构特性进行检测分析。[结果]试验表明,制得的茶香即食草鱼鱼块大小均匀、颜色一致、软硬适度,有该产品特有的香味,微生物含量指标符合国家标准,营养成分含量丰富,质构特性好。[结论]茶香即食草鱼兼具鱼香和茶香,口感、风味、营养俱佳,开袋即食,方便快捷,有广阔的市场前景。     

草鱼、鲢、鳙秋繁及其对次年春繁的影响

1991年秋催产草鱼、鲂、鲢、鳙亲鱼256组,共获鱼苗5040万尾。平均催产率78.2%,受精率71.9%,孵化率75.4%。秋繁鱼苗当年可育成10cm以上鲢、鳙鱼种和8cm以上草鱼、鲂鱼种。鱼苗到鱼种成活率为37.2%。秋繁亲鱼次年春繁催产率、受精率和孵化率基本不受影响,产卵量比往年未秋繁者低6.8%～9.6%,卵径、卵粒重和鱼苗体长等无显著差异。草鱼、鲢、鳙卵母细胞发育不同步,春繁后经60天左右强化培育,卵巢中未成熟的卵母细胞可发育成熟。     

乌梁素海网围养殖草鱼及氮、磷转化试验

2006年项目组与乌梁素海渔场合作在乌梁素海进行了草鱼网围养殖试验,试验面积56hm2,投放2龄草鱼种14489kg,产出草鱼商品鱼49607kg,实现利润255187元,投入产出比1∶2.1.草鱼净增重35118kg,试验利用水草140万kg,转化氮、磷、钾的量分别为1436kg、124kg和579kg.实现了通过生物治理方法达到延缓湖泊富营养化、沼泽化进程的目的.