橡胶树具有稳定重复性RAPD反应体系的建立

为增强橡胶树RAPD反应的稳定性,通过对影响PCR反应体系的几个主要因子进行组合研究,并分析了增效剂TMAC,BSA对PCR的影响,确定了各成分的最佳工作浓度,建立了稳定的橡胶树RAPD反应体系,为利用RAPD技术对橡胶树种质资源进行研究提供了可靠保证。     

板栗PAPD影响因素的研究

稳定的RAPD反应体系是进行RAPD分析的关键，分别测试了模板DNA、dNTP、Ｍg^2 、引物、ＴaqDNA聚合酶浓度和变性时间、退火温度及时间、延伸时间、延伸时间、循伸时间、循环次数等对反应结果的影响。通过实验确定了板栗最佳的ＲＡＰＤ反应条件。在５０ul反应体系中含有50ng模板、0.74umol/L随机引物、180umol/LdNTP、3UTaqDNA聚合酶、2.0mmol/LMgCl2。反应扩增程序为：94C预变性5min.40次热循环，每个循环包括：94C变性30sec,36C退火45sec,72C延伸90sec，最后72C终延伸7min。按照优化的RAPD条件进行的重复实验，重现性良好。     

马尾松针叶DNA抽提

经多次实验改良的CTAB法抽提马尾松针叶DNA,其浓度和纯度符合RAPD实验的要求,个别有明显杂质的样品提纯后经凝胶电泳检测,DNA纯化效果良好。     

八角RAPD-PCR反应体系的建立及引物筛选研究

在提取高质量八角基因组DNA的基础上,通过对其RAPD反应体系的Taq DNA聚合酶、dNTPs浓度、Ｍg2+浓度、引物浓度等因子的优化,建立了稳定、重复性高的八角RAPD-PCR反应体系.研究结果表明,在25 μL PCR反应体系中,含1.0 UTaq DNA聚合酶,0.15 mmol·L-1 dNTPs,2.0mmol·L-1 Mg2+,2.0 μmol·L-1引物,20～ 80 ng模板.最佳反应程序为,94℃预变性5 min,扩增后94℃变性30 s,31 ～37℃退火30 s,72℃延伸30 s,35个循环;72℃完全延伸7 min,4℃保存.在建立RAPD-PCR反应体系的基础上,从240条RAPD引物中筛选出15条扩增条带清晰、稳定性好的引物,并通过各引物的退火温度梯度实验,确定了各引物的最适退火温度.     

油茶随机扩增多态DNA条件的研究

以改进的CTAB法提取油茶嫩叶总DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析,分别测试了Mg2+浓度、引物浓度、dNTP浓度、模板DNA浓度和TaqDNA聚合酶用量对反应结果的影响,确定了油茶RAPD分析的最适反应体系:在25μlPCR反应体积中,含20ng模板DNA,2 5mmol·L-1MgCl2,0 2mmol·L-1dNTP,0 3μmol·L-1引物,1UTaqDNA聚合酶。扩增程序为:94℃预变性180s;94℃变性60s,37℃退火90s,72℃延伸120s,反应40个循环;最后在72℃延伸5min。     

适于草果遗传多样性分析的RAPD引物筛选

以云南省文山州西畴县和德宏州陇川县的12株草果优良无性系为材料,利用RAPD标记技术,选用192个RAPD随机引物,对草果进行PCR扩增,并用UPGMA法对RAPD引物扩增条带进行聚类分析,计算其遗传相似系数,以期筛选出适用于草果遗传多样性分析的RAPD有效引物。实验共筛选出21个条带清晰、多态性丰富并具有可重复性特点的有效引物。21个引物在实验选用的12份样品中共扩增出177条DNA带,其中多态性带数为119条,占扩增总带数的67.2%,每个引物平均扩增出8.4条带。结果表明,12份草果样品聚为A组和B组,其中A组又分为两个亚组,聚类结果与所选用材料的地理来源基本一致,这也说明该研究所筛选得到的21个RAPD引物适用于草果的遗传多样性分析。该研究为应用RAPD标记技术对草果进行遗传多样性分析等研究奠定了基础。     

魔芋葡甘聚糖纯化优化及复水溶较稳定性研究

从魔芋精粉的溶胀特性出发,研究了提取和纯化萄甘聚糖的方法,并且探讨了pH、蛋白质残留量以及溶胶浓度等因素与KGM复水溶解性质的关系。通过一系列单因子实验,发现了上述3种因素不仅可以改变KGM溶胶的理化性质,而且对溶胶稳定性亦有不同程度的影响。pH值在9．0～10．0范围内KGM溶胶最稳定,蛋白质残留量较低时对复水稳定性有促进作用．溶胶浓度在1;100～1：300范围内成膜性最好．     

核桃RAPD条件的优化

对核桃RAPD分析中Mgh、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶浓度及复性温度等因素进行了比较影响分析。建立了适合核桃DNA多态性分析的RAPD反应体系：25μL反应液中,3．5mM Mg^2＋、0．2mM dNTPs、0．2μM随机引物、1．0UT aq酶、50ng～100ng模板DNA;反应过程为45个循环,94℃变性60s,36℃退火60s,72℃延伸120s。     

松树种子胚乳DNA的抽提与分析

运用改良SDS(十二烷基硫酸钠)法,从马尾松、黄山松、黑松等松树种子胚乳中提取到较高纯度的DNA,并对其纯度、浓度及产率进行了分析.经RAPD检测表明,DNA扩增效果良好,完全能满足常规DNA实验的要求,为针叶树种等其它小粒种子DNA的提取提供了经济、快速、可靠的实验方法.     

钙碱浓度对磺酸盐共聚物稳定Zn2＋性能的影响研究

通过静态容量瓶法研究了不同钙碱水质条件下,磺酸盐共聚物对Zn2＋的稳定性及Zn2＋、Ca2-和碱度之间的关系。结果发现：钙碱浓度的变化对磺酸盐共聚物稳定Zn2＋的性能影响较大,Ca2＋浓度为600～800mg／L是磺酸盐共聚物对Zn2＋稳定性的拐点,Ca2＋浓度低于600mg／L时,磺酸盐共聚物对Zn2＋稳定性较好,此时碱度为主要影响因素,应重点控制水中的碱度;Ca2-浓度高于800mg／L时,磺酸盐共聚物对Zn2＋稳定性较差,应该开发高钙条件下专用的稳锌聚合物。