γ射线辐射诱变抗杨白粉病的研究

以"禾阳19"杨组培苗茎段获得的胚性愈伤组织为辐射诱变材料,进行了γ射线(60Co)辐射诱变、培养基上定向筛选杨抗病变异体的方法,结果显示,以茎段的胚性愈伤诱导率最高,达到100%;愈伤分化培养45h胚性细胞分化,73~95h胚性细胞大量形成,γ射线辐射处理为最佳时期;不同辐射剂量比较,30 Gy较接近半致死剂量;辐射后的胚性愈伤在培养基上定向筛选抗杨病变异体,得到生根试管苗408株;经大棚、大田连续进一步筛选获得1个抗杨白粉病的速生优系,定名为"禾抗3号"杨,连续3 a抗病性检测结果表明,"禾抗3号"杨明显高于亲本和对照的抗病性,诱变性状稳定。     

EMS诱变处理定向筛选杨树耐盐突变体研究

应用EMS(甲基磺酸乙酯)处理杨树胚性愈伤组织,通过组织培养方法定向筛选杨树耐盐变异体。对EMS处理"加引"杨树胚性愈伤组织的浓度和时间进行了研究,结果表明:在同一EMS浓度下,随着处理时间的增加,胚性愈伤组织分化芽的比率降低;处理相同时间,随着EMS浓度增加,胚性愈伤组织分化芽的比率降低;不同EMS浓度处理后的胚性愈伤组织分化芽的比率与处理时间呈线性关系。约200万胚性细胞经4‰(V/V)浓度EMS处理36 h,并经逐级耐盐定向筛选,可得在含NaCl 0.5%(m/V)的培养基上生根的组培苗40株。经筛选优系,组培成再生植株,进行植株水平的试管内耐盐性检测,结果表明:诱变处理所得植株与对照相比,其耐盐性明显提高。同时,在未经耐盐定向筛选实验中得到29株叶片颜色发生变异的畸变植株,耐盐定向筛选试验中也得到4株同类型畸变植株。     

γ射线辐射诱变抗杨锈病的研究

本研究以”禾阳2”杨为辐射诱变材料,研究了用γ射线(60Co)辐射诱变在培养基上定向筛选抗病变异体的方法.试验比较了茎段、叶片和叶柄等不同器官材料诱导胚性愈伤组织的效果,发现以茎段的胚性愈伤诱导率最高,达到100％；愈伤分化培养46h后开始有胚性细胞分化,74～92 h有大量胚性细胞形成,是进行γ射线辐射处理的最佳时期...     

EMS诱变处理定向筛选猕猴桃耐盐突变体研究

用EMS(甲基磺酸乙酯)诱变处理海沃德与红阳猕猴桃叶片,进行定向筛选耐盐突变体研究.结果表明,在相同EMS浓度处理下,胚性愈伤组织随着处理时间的增加发生的比率降低;在同一处理时间下,胚性愈伤组织随着EMS浓度增加发生的比率降低.当诱变率达50%致死剂量时,EMS处理浓度为6%、处理时间为2 h时,对海沃德与红阳猕猴桃的处理效果最佳,其后代的分化率可达到70%以上;在含NaCl 1.0 g/L的培养基上通过胚性愈伤组织诱导出海沃德和红阳的组培苗,海沃德11株,红阳组培苗10株,经继代培养筛选鉴定,诱变处理所得植株与正常培养植株相比,其耐盐性明显提高.     

60Co-γ辐射对马铃薯耐盐愈伤组织诱导的影响

[目的]为马铃薯辐射诱变育种研究提供科学依据。[方法]测定不同剂量60Co-γ辐射与不同浓度NaCl对马铃薯愈伤组织生长的影响,并在组织培养过程中定向筛选耐盐变异体。[结果]在辐射处理与盐胁迫的双重作用下,马铃薯的愈伤组织发生了一定程度的变异,使得愈伤组织对盐胁迫的耐受力有了大幅度的提高。[结论]当辐射剂量为40J/kg,NaCl浓度为2.0%时,对马铃薯愈伤组织的诱导效果最好。     

辐射山苦菜茎段愈伤组织的研究

为改良山苦菜基因型,以其茎段愈伤组织为材料,采用不同剂量60Coγ射线对其愈伤组织进行辐射处理,研究不同剂量射线对愈伤组织致死率和分化变异的影响以及对变异不定芽生根率、试管苗移栽和定植成活率的影响。结果表明,经过10,15,20 Gy这3种剂量辐射处理的愈伤组织致死率随着辐射剂量的增加而增加;10,15,20 Gy这3种处理剂量能使分化的不定芽发生变异,并且变异不定芽培养的试管苗生根率、平均生根数、移栽与定植的成活率均随着辐射剂量增加而降低,且试管苗长势较弱。从定植的变异试管苗中筛选出1株具有叶色浓绿有利性状的试管苗,且有利变异植株保持了山苦菜的所有植物学性状。对愈伤组织进行60Coγ射线处理能改变山苦菜的基因型。     

甲基磺酸乙酯诱变筛选强耐盐旱柳愈伤组织变异体研究

为获得强耐盐旱柳愈伤组织突变体,采用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变处理旱柳愈伤组织,对得到的旱柳愈伤组织变异体进行耐盐性检验。结果表明,0.4%EMS处理3 h为旱柳愈伤组织的半致死处理方式;愈伤组织存活率和生长率会随盐浓度的升高而降低,NaCl为0.4%时,愈伤组织的死亡率为93.6%;对筛选出的愈伤组织突变体进行盐胁迫形态与生理指标检验,诱变组SOD活性、POD活性、积累可溶性蛋白的能力比对照组高,而MDA含量始终低于对照组。旱柳愈伤组织突变体在0.4%NaCl胁迫下可正常生长,而原亲本只能耐受0.2%盐浓度,诱变体比原亲本耐盐性提高了100%。     

利用细胞工程技术培育玉米耐盐自交系及单交种

以玉米骨干自交系黄早 4、齐 319和 8112的幼胚为外植体 ,用含有 10g/LNaCl的培养基筛选获取耐盐愈伤组织。耐盐愈伤组织分化出幼苗 ,自交结实。子一代通过水培进行耐盐性测定 ,选择耐盐植株 ,对其后代继续进行耐盐性鉴定、筛选 ,获得耐盐突变体。以农艺性状稳定和耐盐性稳定的自交系为材料 ,组配出耐盐杂交种N2 - 1×N1- 4A和 8112 - 1×N1- 6A等杂交组合。盐碱地试验表明 ,这些组合适合于在中度盐碱地种植 ,且在生长后期可以用 5 0 %海水灌溉     

黑莓松散型胚性愈伤组织的诱导

为了诱导出黑莓松散型胚性愈伤组织,试验采用黑莓试管苗叶片、叶柄和茎段为外植体,在含有不同2,4-D及分裂素的MS培养基上进行愈伤组织的初步诱导,从中筛选出松散型愈伤组织的最佳培养基配方;再将诱导出的黑莓松散型愈伤组织转移到含有不同激素种类和浓度的MS培养基上进行松散型胚性愈伤组织的诱导,从中筛选出最佳培养基配方。结果表明,在1/8 MS+3 mg/L 2,4-D+100 mg/L Vc+10 g/L蔗糖的培养基上可以诱导出松散的黑莓愈伤组织;先在MS+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上进行胚性愈伤的诱导继代2~3次,然后转移到MS+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上继续培养并继代3~5次后即可诱导出黑莓的松散型胚性愈伤组织。试验结果将为采用黑莓体细胞诱变育种研究奠定基础。     

三红蜜柚体细胞胚胎的诱导

为建立三红蜜柚体细胞胚胎途径的组培快繁技术体系,采用带腋芽的无菌茎段为外植体,利用正交设计的方法,研究不同的基本培养基与植物生长调节剂对体细胞胚胎的诱导、分化、增殖与生根等关键环节的影响。结果表明,胚性愈伤组织诱导的最适宜培养基为MS+2,4-D 1 mg·L^-1+6-BA 0.5 mg·L^-1;在附加6-BA 0.1 mg·L^-1的MS培养基上淡黄色的胚性愈伤组织块可诱导形成胚状体;胚状体试管苗在1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1培养基上生根率可达90%,移栽成活率达85%。     

小桐子胚愈伤组织耐盐性研究

[目的]筛选耐盐性较强的小桐子新品种。[方法]以小桐子种胚为材料,采用含不同浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)和吲哚丁酸(IBA)组合的培养基对其进行愈伤组织诱导,筛选出最佳诱导培养基;在最佳诱导培养基中分别加入0、20、40、60、80、100 mmol/L NaCl对小桐子胚愈伤组织进行诱导,研究胚愈伤组织的耐盐性。[结果]小桐子胚愈伤组织的最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.1mg/LIBA;胚愈伤组织在含40、60 mmol/LNaCl的培养基上生长状况最佳,当培养基中NaCl浓度达到100 mmol/L时,小桐子胚愈伤组织无法存活。[结论]在MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/LIBA培养基中,小桐子胚愈伤组织具有较好的耐NaCl性。     

6个紫花苜蓿栽培品种高效再生体系的建立

建立高频的紫花苜蓿再生体系,为采用基因工程技术定向改良紫花苜蓿品种奠定基础。以中国6个紫花苜蓿栽培品种的子叶、下胚轴、叶片为外植体,研究不同外源激素、基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织诱导培养及再生的影响。结果表明:新疆大叶苜蓿品种叶片胚性愈伤组织诱导率、分化率及出苗率最佳,分别为95.0%、72.7%和40.0%。最佳诱导培养基为改良SH培养基+2.0mg.L-1 2,4-D+0.25mg.L-1 KT;最佳分化培养基及出苗培养基为MS。此外,还确定生根培养基中以茎段基部蘸取100mg.L-1 IBA以及添加7.5g.L-1蔗糖可提高生根率。     

转甜菜碱醛脱氢酶基因水稻的获得

利用农杆菌介导法,将来源于山菠菜的甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)转到水稻品种丰优516成熟胚诱导的愈伤组织,所获得的G418抗性植株,分别在含有5g/L和8g/LNaCl的生根培养基上进行耐盐性筛选,然后对抗性植株进行PCR分子检测,最终获得73株耐盐的转BADH基因植株。     

兴安升麻试管苗培养研究

以兴安升麻嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导和分化培养、不定芽生根和茎段生根继代繁殖培养,以及试管苗移栽和定植试验。结果表明,1/2 MS+BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L+蔗糖35 g/L是愈伤组织诱导培养和继代扩增培养的适宜培养基;1/2 MS+蔗糖40 g/L+ZT 0.4 mg/L+NAA 0.1 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;采用下部切口在10 mg/L IAA溶液中处理5 min,再接种到1/2 MS培养基上进行生根培养的方法是不定芽生根培养和生根继代繁殖培养的理想方法;试管苗移栽成活率为95.1%,定植成活率为98.4%,定植的试管苗保持了兴安升麻的全部植物学性状。     

马齿苋组培与耐盐筛选

为了扩大耐盐植物资源,促进沿海滩涂植物资源利用,以马齿苋(Portulaca oleracea L .)的嫩叶和茎段为试验材料,研究了不同浓度激素和 NaCl 对愈伤组织生长与分化的影响.结果表明:MS +0.10 mg?L‐1 NAA 时,马齿苋茎段生根率较高,生长健壮;MS +2.00 mg?L‐16‐BA 是不定芽诱导的最适培养基;MS +2.00 mg?L‐16‐BA +1.00 mg?L‐1 NAA 是分化的最适培养基;在最适分化培养基中添加100 mmol?L‐1 NaCl ,诱导产生的愈伤组织为5%,大部分愈伤组织生长受抑制,同时也说明马齿苋具有一定的耐盐性.     

芍药遗传转化再生体系的建立

以芍药为研究对象,建立芍药高效的遗传转化再生体系,试验筛选最佳结果为:以茎段为外植体,用HgCl2消毒15min,基本培养基为1/2MS,抗坏血酸(100mg·L-)1,诱导愈伤阶段的植物生长调节剂(PGR)配比为ZT(2.0mg·L-1)+IAA(0.4mg·L-)1,胚状体分化阶段不加植物生长调节剂PGR;生根阶段为IAA(0.4mg·L-)1。抗性筛选时适宜的卡那霉素Km浓度为4mg·L-1,遗传转化受体为胚性愈伤组织。     

玉米体细胞抗盐突变体的筛选及耐盐性鉴定

玉米幼胚所诱导的愈伤组织在继代繁殖后,用NaCl作选择剂,在含质量浓度10～20g·L-1NaCl的N6筛选培养基上连续筛选3代,再转移到无盐的继代培养基上培养3代,得到耐20mg·L-1的抗盐愈伤组织变异体.对愈伤组织相对生长量和游离脯氨酸含量等指标的测定表明,该愈伤组织变异体是耐盐的.耐盐愈伤组织变异体在分化培养基上可分化出再生植株,在10g·L-1NaCl胁迫下耐盐变异体再生植株相对电导率小于对照再生植株,而可溶性糖含量高于对照植株.耐盐株自交得T1代种子,在不同质量浓度NaCl胁迫下测定其发芽率,耐盐变异体后代种子发芽率均高于对照种子发芽率,说明变异体的耐盐性是可遗传的.     

金娃娃萱草组培苗耐盐性研究

以金娃娃萱草茎段诱导出的愈伤组织和丛生苗为外植体,在不同Na Cl浓度的培养基上进行增殖和生根培养,观察盐胁迫对其影响。结果表明:不同盐浓度对外植体根系生长发育的影响大于对地上部分的影响;外植体在盐胁迫下多代转接后,耐盐性均得到提高,这说明盐胁迫下的多代转接是一条获得优良耐盐突变体的有效途径。     

杨树湿地松组织培养愈伤组织耐盐性*

对杨树无性系N L-80105, N L-80106, N L-80117和湿地松组织培养愈伤组织的耐盐性进行了研究。结果表明:以MS为基本培养基,添加2,4-D 2.0 mg kg-1和KT 0.5 mg kg-1,诱导这些树种愈伤组织效果好;在含氯化钠的培养基上,杨树不同器官外植体的愈伤组织诱导能力和耐盐程度有差异,外植体茎、叶比根强;杨树继代愈伤组织的耐盐能力显著高于湿地松,这与植株水平的耐盐性相一致,表明用愈伤组织鉴别这些植物耐盐性的方法是可行的。     

玉米耐盐愈伤组织变异体筛选体系的建立

为了寻找离体筛选耐盐作物类型的新途径,特选配了4个适于幼胚培养的玉米杂交组合,以其幼胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织。继代5次后,用200 mmol/L的NaCl和5.5 mmol/L的Hyp连续筛选3次,获得耐盐愈伤组织变异体。试验确定了适于玉米幼胚培养的诱导培养基和分化培养基,比较了2种筛选剂的选择效果:用Hyp筛选得到的愈伤组织,其分化频率高于用NaCl筛选的愈伤组织;Hyp的选择频率是NaCl的两倍,表明用Hyp间接筛选玉米耐盐变异体,是一条较为合适的途径。