蛋白酶对豆粕的酶解研究

本试验研究蛋白酶对豆粕的体外消化率、小肽含量变化及胰蛋白酶抑制因子的影响,并探讨其对豆粕抗原的影响。蛋白酶对豆粕的体外消化结果为:43%豆粕和46%豆粕的消化率分别为70%和74%,相对于对照组分别提高了7.7%和13.8%。蛋白酶对豆粕中小肽含量及胰蛋白酶抑制因子影响结果显示:43%豆粕和46%豆粕经蛋白酶酶解1h,小肽含量迅速提高,含量分别为14.14%和14.99%,几乎达到峰值;经蛋白酶处理后的43%豆粕和46%豆粕胰蛋白酶相对剩余酶活与对照相比均有大幅度提高,分别为85%和60%。其对豆粕抗原影响表现为:经蛋白酶酶解后的豆粕7S和11S亚基已完全消失。     

中性蛋白酶对菜粕品质改良的研究

试验研究中性蛋白酶的添加量、酶解料水比、酶解时间及酶解温度对菜粕蛋白品质和硫甙降解的影响,并通过正交试验确定中性蛋白酶最佳酶解条件。结果表明:中性蛋白酶酶解菜粕的最佳条件是酶添加量125U/g、料水比1:1.2、酶解时间48h、酶解温度45℃。在此条件下,菜粕经酶解后,小肽含量从33.54mg/g提高到137.26mg/g,比原菜粕提高了4.09倍;硫甙含量从50.94μmol/g减少到26.31μmol/g,比原菜粕降低了48.34%。     

固体发酵豆粕、菜粕和棉粕的复合菌筛选

试验根据豆粕、菜粕和棉粕作为植物性蛋白饲料的营养特性,选择中性蛋白酶活较高的细菌和真菌作为发酵豆粕、菜粕和棉粕的菌种以改善豆粕、菜粕和棉粕的蛋白质品质。通过细菌和真菌的两两组合生长试验,分别筛选出适合发酵豆粕、菜粕和棉粕的最佳复合菌各一组。试验结果表明,发酵豆粕、菜粕和棉粕的最佳菌株组合为BS-2和Ao、BS-natto和Ao、BS-natto和Ao。     

两种不同发酵工艺的棉籽粕营养价值的研究

利用现代固态发酵原理,研究两种不同发酵工艺对棉粕脱毒效果及其营养价值的影响。工艺一是使用本实验室保存的两株菌直接进行固态发酵,工艺二是在工艺一的基础上添加酶解液进行固态发酵。试验结果表明(以干物质计),棉籽粕发酵和发酵酶解产品中游离棉酚分别降低到197.68 mg/kg和202.35 mg/kg,粗蛋白质分别提高到59.64%和60.88%,小肽含量分别提高到19.41%和23.59%。来航蛋公鸡强饲代谢试验结果表明,发酵和发酵酶解棉籽粕的能量和营养物质消化率均高于未发酵棉粕。肉鸡饲养试验结果表明,发酵棉粕按50%、75%和发酵酶解棉粕按75%的比例替代基础日粮中的豆粕,不影响肉鸡的日采食量。国标二级高游离棉酚棉籽粕经过固态发酵处理后,外观蓬松变软,气味芳香,其营养价值得到显著改善。蛋公鸡的营养物质及能量消化率得到显著提高,同时益生菌及生物酶活性增加,在肉仔鸡日粮中的应用不影响日采食量。     

菌酶协同发酵棉籽粕及其体外模拟消化研究

试验旨在研究蛋白酶和干酪乳杆菌协同发酵对棉籽粕的营养价值及体外消化率的影响。试验一：以蛋白降解度和小肽含量的指标归一值(OD)为综合评价指标,采用4因素3水平的BBD-RSM试验设计,考察酶解温度、时间、酶添加量、料液比和pH对蛋白酶酶解棉籽粕效果的影响;试验二：将植物乳杆菌和蛋白酶协同发酵48 h,分为3个处理组,即不加植物乳杆菌和酶的棉籽粕(对照组)、酶解棉籽粕、菌酶协同发酵棉籽粕,评定3组棉籽粕的营养成分及进行猪胃肠道体外模拟消化试验。结果表明：最佳酶解条件为酶添加量1%、温度40℃、时间8 h、料液比1:4 g/mL、pH 9.0;经过菌酶协同发酵预消化处理之后的棉籽粕与原棉籽粕相比,粗蛋白质、酸溶蛋白以及氨基酸含量有显著提高,粗蛋白质消化率以及干物质消化率也有显著增加。总的来说,蛋白酶与植物乳杆菌协同使用可以更大程度地降解棉籽粕中大分子蛋白,提高蛋白质的营养价值和利用率,提高非常规蛋白原料棉籽粕在饲料中添加比例,降低饲料成本。     

黑水虻幼虫处理豆粕、棉籽粕和菜籽粕对抗营养因子和小肽的影响

为了降低饼粕原料中抗营养因子的含量,同时提高其小肽的含量,我们利用黑水虻幼虫分别处理未发酵与发酵的豆粕、棉籽粕和菜籽粕,并对结果进行单因素方差分析。研究发现:与空白豆粕组相比,添加了200只黑水虻幼虫的发酵豆粕中的胰蛋白酶抑制因子、β-伴大豆球蛋白、总戊聚糖和植酸的含量分别下降了63%、59%、4%和63%,而小肽和粗蛋白的含量分别增加了657%和2%;添加了200只黑水虻幼虫的发酵棉籽粕中粗蛋白和小肽的含量分别增加了11%和630%,植酸、单宁和游离棉酚的含量分别下降了87%、30%和81%;添加了200只黑水虻的发酵菜籽粕中粗蛋白和小肽含量分别增加3%和468%,植酸、单宁、噁唑烷硫酮的含量分别下降98%、50%和99%。同时,在发酵饼粕(豆粕、棉籽粕和菜籽粕)中加入黑水虻幼虫处理后,样品的平均重量分别降低了0.81 g/50 g、1.5 g/50 g和3.8 g/50 g。     

木聚糖酶对玉米、豆粕、小麦和菜粕体外消化率的影响

试验采用单因素试验设计,在恒温摇床中,用胃蛋白酶和胰蛋白酶体外酶解玉米、豆粕、小麦和菜粕,从而评估木聚糖酶对这些饲料原料的营养价值的改善作用,初步确定最佳添加量.在本试验条件下,试验结果表明:①木聚糖酶对小麦的粗蛋白消化率有提高的趋势,添加量为2000 U/kg时,效果最佳;②木聚糖酶对菜粕的能量、粗蛋白和干物质消化率均有增加的趋势,添加量为500 U/kg及3000 U/kg时效果较好;③木聚糖酶对玉米的粗蛋白消化率基本在60%左右,对豆粕的粗蛋白消化率则在70%左右,对小麦和菜粕粗蛋白的消化率分别为80%左右和65%左右,粗蛋白消化率依次为小麦>豆粕>菜粕>玉米.     

翘嘴红鲌、花(鱼骨)对18种饲料原料蛋白质、氨基酸离体消化率

利用翘嘴红鮊、花(鱼骨)的肠道为消化酶酶源,采用离体消化率的测定方法,分别测定了对次粉、麸皮、玉米、小麦、大豆、豆粕、膨化大豆、葵粕、红花籽粕、花生粕、棉粕(1)、棉粕(2)、油菜籽、菜籽粕、菜籽饼、血粉、国产鱼粉、肉粉的离体消化率.翘嘴红鮊对大豆、花生粕、油菜籽、菜籽饼、豆粕有较好的消化率(消化率≥36.20%);花(鱼骨)对花生粕、油菜籽、豆粕、菜籽饼、棉粕(2)有较好的消化率(消化率≥33.87%),这些原料在人工配合饲料中可以优先选择.     

翘嘴红鲌、花对18种饲料原料蛋白质、氨基酸离体消化率

利用翘嘴红鮊、花的肠道为消化酶酶源,采用离体消化率的测定方法,分别测定了对次粉、麸皮、玉米、小麦、大豆、豆粕、膨化大豆、葵粕、红花籽粕、花生粕、棉粕(1)、棉粕(2)、油菜籽、菜籽粕、菜籽饼、血粉、国产鱼粉、肉粉的离体消化率。翘嘴红鮊对大豆、花生粕、油菜籽、菜籽饼、豆粕有较好的消化率(消化率≥36.20%);花对花生粕、油菜籽、豆粕、菜籽饼、棉粕(2)有较好的消化率(消化率≥33.87%),这些原料在人工配合饲料中可以优先选择。     

加拿大双低菜粕对奶牛瘤胃发酵功能的影响

文章主要研究在产奶牛日粮中用加拿大双低菜粕完全替代豆粕与棉粕后对奶牛瘤胃发酵的影响,为加拿大双低油菜籽粕在奶牛生产中的科学应用提供理论依据和实践指导。选择3头健康、体重相近、安装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物。试验分两部分进行,分别研究粗蛋白含量为10.5%和8.5%的日粮条件下双低菜粕替代棉粕与豆粕后对奶牛瘤胃代谢的影响,对照组日粮不含有双低菜粕,试验组日粮用5%或2.5%的双低菜粕替代豆粕与棉粕。结果表明:粗蛋白质含量在10.5%和8.5%的日粮条件下,用加拿大双低油菜籽粕替代豆粕、棉籽粕,对奶牛瘤胃液p H值、BCP含量和VFA含量均无显著的影响。在8.5%的低蛋白日粮水平下,用加拿大双低油菜籽粕替代豆粕、棉籽粕,瘤胃氨氮浓度显著(P0.05)或趋于显著(P0.1)低于对照组。     

南美白对虾对四种蛋白质原料的离体消化率和酶解动力学研究

采用离体消化法和茚三酮法研究了南美白对虾(Penaeus vannamei)的胃、肝胰脏及肠道粗酶液对鱼粉、豆粕、菜粕和花生粕的离体消化率和酶解动力学。结果表明:①在离体状态下,南美白对虾消化道不同部位对干物质消化率为:胃>肝胰脏>肠道,且鱼粉在胃部的消化率显著高于肝胰脏和肠道(P<0.01),花生粕在肠道的消化率极显著低于胃和肝胰脏(P<0.01);对蛋白质消化率为肝胰脏>胃>肠道,且菜粕和花生粕在肠道的消化率极显著低于胃和肝胰脏。鱼粉差异显著(P<0.05)。②粗酶液对4种原料干物质的总消化率高低依次为:豆粕50.78%、菜粕42.02%、花生粕39%、鱼粉36.50%;对粗蛋白总消化率高低依次为:花生粕60.40%、豆粕56.45%、鱼粉46.28%、菜粕43.28%。③粗酶液对4种蛋白原料酶解时所产生氨基酸的生成量随着酶解时间的变化具有一定的线性关系;在0～4h内在酶解过程中所产生氨基酸的总量为肝胰脏(96.72mg)>胃(31.28mg)>肠道(27.58mg);酶解时氨基酸生成总速度为花生粕(3.9154mg/h)>鱼粉(3.4774mg/h)>豆粕(2.8316mg/h)>菜粕(2.7404mg/h)。     

根源蛋白酶对不同类型日粮体外消化效果的研究

以根源蛋白酶为研究对象,验证其对于豆粕型日粮、杂粕型日粮及高粱型日粮体外消化情况,以小肽增量、干物质消化率、粗蛋白消化率为指标进行评估。结果表明:3种类型日粮中添加200 g/t蛋白酶,小肽增量分别为9.35、8.06、6.31 mg/m L,豆粕型日粮酶解效果显著高于非常规日粮组(P0.05);粗蛋白表观消化率中,高粱型日粮最低为67.72%,其他2种日粮均高于75%;干物质消化率方面仍以豆粕型日粮为最好,较对照组提高约0.58%,显著高于高粱型日粮0.42%(P0.05)。因此,同一蛋白酶对于不同类型饲料体外消化效果具有差异性,在实际养殖中需要对饲料营养价值进行评定,以便合理添加。     

草鱼对膨化饲料与非膨化饲料蛋白质酶解速率的研究

试验采用离体研究方法,以草鱼肠道的粗酶液为酶源,测定了膨化和非膨化的7种原料:即鱼粉、豆粕、菜粕、棉粕、肉骨粉、次粉、玉米,在4.5h内氨基酸生成量随反映时间的关系和氨基酸的生成速度。用氨基酸生成速度表示蛋白质酶解速度。结果表明,1)豆粕、鱼粉、肉骨粉膨化后蛋白质酶解速度下降;玉米、菜粕、次粉膨化后蛋白质酶解速度上升,特别是玉米膨化后效果尤为明显;棉粕膨化后蛋白质酶解速度差异不显著;2)对非膨化饲料,蛋白质酶解速度表现为:鱼粉>肉骨粉>豆粕>棉粕>菜粕>次粉>玉米;3)对膨化饲料,蛋白质酶解速度为:膨化鱼粉>膨化玉米>膨化菜粕>膨化肉骨粉>膨化棉粕>膨化次粉>膨化豆粕。     

菌酶协同处理豆粕制备饲用小肽的研究

以小肽含量为指标研究了芽孢杆菌、酵母菌和中性蛋白酶协同发酵、酶解处理豆粕制备饲用小肽的工艺条件。结果表明:菌酶协同处理豆粕的最佳条件为混合菌接种量1.5%、加酶量450 U/g、料水比1∶1.4、发酵温度40℃、发酵时间48 h。在此条件下,豆粕经菌酶协同处理后,小肽含量从11.40 mg/g提高到199.65 mg/g,粗蛋白质含量从47.62%提高到56.72%。     

不同菌株固态生料发酵棉籽粕的研究

试验研究了微生物固态生料发酵对棉籽粕中游离棉酚和蛋白质含量变化的影响。利用12株菌固态生料发酵棉籽粕筛选出高效脱除棉酚菌株和产蛋白酶能力最佳的菌株;在此基础上进行菌种复配发酵棉籽粕。结果表明:单一菌株棉籽粕固态发酵试验中,地衣芽孢杆菌B12脱毒效果最佳,脱毒率为42.7%,水溶性蛋白含量8.2%,小肽含量4.19%;产蛋白酶能力较强菌株为Bsl和Bs3,蛋白酶酶活力分别为43.8U/mL和43.6U/mL;混菌组合发酵中B12+Cul组合脱毒率50.03%,水溶性蛋白含量9.11%,小肽含量6.98%,为最佳菌种组合。结论:混菌发酵效果优于单菌发酵。     

豆粕和棉粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响

试验研究了豆粕日粮和含5%～8%棉粕的日粮中添加α-半乳糖苷酶对肉仔鸡生长性能的影响及可能机制。试验Ⅰ为肉仔鸡饲养试验,选用1日龄AA商品代肉仔鸡公雏672只,随机分为4个处理,每个处理12个重复,每个重复14只鸡,试验期42d。结果表明:在棉粕和豆粕日粮中添加α-半乳糖苷酶对42日龄肉仔鸡体增重分别提高了4.35%和3.49%。试验Ⅱ为排空强饲代谢试验。结果显示:豆粕日粮中添加α-半乳糖苷酶增加蛋公鸡色氨酸真消化率(P<0.001),对其他氨基酸消化率无影响。添加α-半乳糖苷酶的豆粕的,真代谢能值与不添加酶的相比,提高了4.69%(0.51MJ/kg)。本研究表明,在玉米-豆粕型日粮中添加α-半乳糖苷酶,提高了色氨酸真消化率和真代谢能,有利于提高肉仔鸡生长性能。     

不同蛋白酶对豆粕中抗原蛋白的降解效果

豆粕中抗原因子众多,为了更好利用及改善豆粕品质,试验在酶解条件一致的情况下,使用根据蛋白酶作用最适pH分类的碱性蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶,分别对豆粕进行酶解,研究不同蛋白酶酶解对豆粕抗原蛋白的影响。试验条件为加酶量0.2%,料水比2∶1,酶解温度50℃,酶解时间40 h。结果显示,豆粕经过酶解后,抗原蛋白显著减少,小肽含量增加8.2～20.95个百分点,粗蛋白质增加-3.2～1.31个百分点。结果表明,不同酸碱性的蛋白酶对豆粕抗原因子的降解效果不同,碱性蛋白酶>中性蛋白酶>酸性蛋白酶,选择适宜的蛋白酶对抗原进行降解,可大幅提高工作效率。     

枯草芽孢杆菌发酵棉粕营养特性的研究

试验采用枯草芽孢杆菌对高压灭菌后的棉粕底物进行发酵,以未高压和高压的未发酵棉粕底物作为对照,从发酵棉粕的棉酚含量、常规营养物质变化、小肽及游离氨基酸的含量对枯草芽孢杆菌发酵棉粕进行营养特性评定。结果表明:发酵后棉酚含量与未高压和高压处理的未发酵棉粕相比显著降低88.84%和74.77%(P0.05),蛋白质含量显著提高14.37%和13.79%(P0.05),相对分子质量小于600、600~1 000和1 000~1 800 u小肽分别由发酵前的4.00%、0.42%和0.058%提高到发酵后的12.40%、1.45%和1.74%,15种必需氨基酸的含量均有不同程度的提高,其中必需氨基酸苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸分别提高8.45%、6.25%、24.13%、3.52%、12.31%和9.52%,使用枯草芽孢杆菌发酵棉粕能显著提高棉粕的营养价值(P0.05)。     

棉酚降解酶及热带假丝酵母ZD-3对棉籽粕脱毒的对比研究

试验旨在研究对比棉酚降解酶及热带假丝酵母ZD-3对棉籽粕中游离棉酚与营养物质的影响,从而评定棉酚降解酶对棉籽粕脱毒的效果。利用棉酚降解酶及热带假丝酵母ZD-3对棉籽粕分别进行酶解与固态发酵。检测原棉籽粕及处理后棉籽粕中游离棉酚与营养物质的含量及蛋白质分子质量分布。棉籽粕经棉酚降解酶酶解后,游离棉酚的含量与原棉籽粕相比极显著降低,棉籽粕的脱毒率为92.67%,较热带假丝酵母ZD-3发酵后的脱毒率上升了4.46%,经棉酚降解酶酶解后及热带假丝酵母ZD-3发酵后的棉籽粕,两者的营养物质含量差异不显著,均未检测到棉籽粕中大分子蛋白质降解成小分子蛋白质的现象。棉酚降解酶可以很好的代替热带假丝酵母ZD-3应用于棉籽粕的脱毒,同时棉酚降解酶酶解脱毒较热带假丝酵母ZD-3固态发酵能够极大地缩短时间。     

中性蛋白酶酶解猪肺制备蛋白肽的工艺条件研究

以猪肺为原料,研究中性蛋白酶酶解制备猪肺蛋白肽的条件。结果表明,采用中性蛋白酶进行猪肺酶解,底物浓度12%,温度45℃～48℃,酶解时间12h,酶量E/S=4000U/g为最适合反应条件,可获得小肽含量55%以上的猪肺蛋白肽产品。