猪羊同栏引发山羊丹毒病

广西都安县为少数民族地区 ,农民有养山羊习惯 ,且往往与猪同栏。韦某猪羊同栏养的猪和山羊已有 1头猪死于猪丹毒。后又有2头山羊突然死亡 ,送病料给兽医站检查 ,无结果 ,后取未经处理的山羊头来校检查 ,因当时气温较低 ,肉眼检查羊头无腐败现象 ,亦无臭味 ,遂用烙铁反复烧灼头部皮肤 ,用无菌方法切开颅腔 ,取脑组织作细菌培养 ,48h后在培养基上长出细小稀疏的菌落 ,同时取脑组织以生理盐水作 1 0倍稀释以 0 .2 ml接种小鼠 ,48h后小鼠死亡 ,取病料纯培养细菌检查为革兰氏阳性的细长杆菌 ,糖发酵试验葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、乳糖不发酵 ;由…     

某猪场高致病性猪蓝耳病和胸膜肺炎放线杆菌混合感染的诊断分析

为了查明贵州省某猪场从湖北引进的部分后备母猪发病及死亡原因,根据临床症状、病理解剖观察、细菌的分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定、PCR/RT-PCR鉴定及小鼠致病性试验及接种Marc-145细胞等方法进行诊断。结果表明:分离的放线杆菌对磺胺甲基异唑和头孢曲松敏感,对小鼠有致病性,PRRSV-G1株的测序结果与近几年来国内各个地区流行的12株高致病性猪蓝耳病毒株同源性较高,为99.0%～99.5%,其NSP2基因均缺失了30个氨基酸,与2012年湖北分离的YC1202株(JX144928)属于同一遗传进化分支;将病料处理后接种Marc-145细胞后能产生细胞病变,最后确诊该猪场患病死亡猪为高致病性猪蓝耳病毒及猪传染性胸膜肺炎放线杆菌混合感染。     

兔病毒性出血症与巴氏杆菌病混合感染的诊治

2012年4月下旬经治一起疑似兔病毒性出血症与兔巴氏杆菌病混合感染的病例,取病兔肝脏进行细菌分离培养、取典型菌落涂片染色进行显微镜下形态观察、细菌生理生化鉴定、小白鼠致病性试验;并取病死兔的肝脾制成混悬液进行人"O"型红细胞凝集试验、动物回归试验等方法等进行病原检测,结果表明:该病料分离菌培养特征、涂片镜检及生化试验结果与多杀性巴氏杆菌特征基本吻合,试验组小鼠于20h发生死亡;悬液能够凝集人"O"型红细胞,兔回归试验出现兔病毒性出血症症状及兔致死结果;说明该病例为兔病毒性出血症和兔巴氏杆菌病混合感染。经过兔病毒性出血症疫苗的紧急免疫及高敏药物的治疗,疫情最终得以控制。     

猪胸膜肺炎放线杆菌分离鉴定与毒力测定

从长春地区疑似猪传染性胸膜肺炎发病猪采集病料,经形态学检查、生化实验、卫星生长现象、溶血试验、PCR鉴定等,分离到7株猪胸膜肺炎放线杆菌;血清定型试验表明,其中血清7型3株,血清5型2株,血清3型1株,血清1型1株.将分离菌株在37℃ BHI液体培养基中培养6～8 h,无菌条件下离心收集菌体,用灭菌生理盐水洗涤菌体3次,腹腔接种健康昆明小鼠,每只小鼠1.0×108 CFU/0.2 mL,结果5型和7型对小鼠的平均致死率最高,分别为100%和66.5%.     

金昌市副猪嗜血杆菌的分离与鉴定

为确诊金昌市金川区某规模养猪场引起猪大量发病死亡的病因,以及时的找到有效的治疗方法,本研究针对该养殖场病死猪进行无菌采集组织病料,送往甘肃农业大学微生物实验室进行细菌学诊断的方法,对采集的病死猪肺脏、关节滑液、胸腔积液和心包积液进行了细菌分离纯化、染色镜检、生化鉴定和药物敏感试验等实验室检测,实验室检测结果显示组织病料抹片和细菌分离后染色镜检发现大量丝状革兰氏阴性杆菌,其生化试验结果与副猪嗜血杆菌生化特性一致,由此可以证实此次引起猪大规模发病死亡的病原微生物为副猪嗜血杆菌,经实验室药物敏感试验结果,可使用先锋霉素Ⅳ、阿米卡星等药物进行临床治疗。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清5型的分离鉴定

新疆奇台和昌吉市规模化猪场发生育肥猪急性死亡,疑似猪传染性胸膜肺炎,采集病料进行细菌的分离培养、PCR检测、药敏试验及小鼠致病性试验。结果分离获得猪胸膜肺炎放线杆菌奇台株2株,昌吉株1株。PCR分型鉴定均为血清5型。致病性试验显示,分离株均可致死小鼠。对氟苯尼考、头孢噻呋、恩诺沙星等抗生素敏感。结论,确诊病原为猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型。血清5型已成为新疆地区致死率较高的流行血清型。     

猪伪狂犬病的诊断

本文通过荧光抗体组织切片、细胞接种、兔子致病性等方法对临床怀疑为猪伪狂犬病的病猪进行了实验室诊断。结果如下:病猪脾脏和淋巴结制备的冰冻切片经PRV荧光抗体染色后,在荧光显微镜下见到特异性荧光;病料经处理后接种Vero细胞可致细胞圆缩和形成合胞体,具有疱疹病毒的培养特征;将病料上清和细胞培养毒分别皮下接种家兔均可引起奇痒、麻痹死亡,呈现典型的伪狂犬病临床特征,同时病死兔脏器的PRV免疫荧光试验也为阳性。根据上述结果证实了该病为猪伪狂犬病。     

猪胸膜肺炎放线杆菌新疆株的分离鉴定及ApxⅣA基因的克隆与序列分析

从新疆北疆4个规模化猪场的20份发病猪病料中分离到1株细菌。经形态染色镜检、培养特性、生化特性和部分生物学特性试验鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。根据猪胸膜肺炎放线杆菌ⅣA毒素基因特异性引物进行PCR扩增,得到1条与预期大小一致的2427bp的条带,将PCR产物纯化后克隆至pMD19-T载体上并测序。结果表明,该片段的碱基序列与GenBank中参考序列的同源性为98%,并与三株标准株比较,同源性分别为98.23%、99.46%和98.06%。     

猪传染性胸膜肺炎病例报告

为了确诊猪场1例疑似猪传染性胸膜肺炎的病例，本试验首先对该猪死亡前的临床症状进行了解，然后对死亡猪进行剖检并利用收集的病料进行细菌分离培养、质谱分析、PCR检测和组织病理学等实验室诊断。结果显示，该猪死亡前表现出体温升高、呼吸窘迫和鼻内流出血色样泡沫分泌物等临床症状，剖检发现胸腔积液、肺脏出血和肿大等病理变化。实验室诊断结果显示，胸腔积液、血液和肺脏等病料中分离获得的菌株为血清型7型胸膜肺炎放线杆菌。组织病理学观察结果显示，肺脏组织表现为出血性纤维素性肺炎，肺泡渗出液中可见蓝染的菌团；心脏、肾脏、淋巴结、肝脏和脾脏等其他脏器均有不同程度的出血、淤血、水肿和淋巴细胞浸润等组织病理学变化。综合以上诊断结果，确诊该猪为猪胸膜肺炎放线杆菌感染。     

副猪嗜血杆菌对部分常用实验动物的致病性试验

为筛选对副猪嗜血杆菌易感的实验动物,对部分常用的不同品种、不同品系实验动物进行了副猪嗜血杆菌致病性试验。用副猪嗜血杆菌血清型5型标准株（Strain Nagasaki）培养物,以2×10^8-2×10^10CFU的接种量,通过腹腔感染SPF级小鼠、大鼠、金黄地鼠、豚鼠以及清洁级豚鼠和兔。结果当接种量达到2×10^9CFU时,SPF豚鼠、清洁级豚鼠和SPF昆明小鼠出现死亡,在死亡豚鼠观察到典型的副猪嗜血杆菌病病理变化,而在死亡小鼠未见。其它各实验动物在上述剂量范围内均未发病或死亡,感染7d后剖检也未见任何异常。对死亡豚鼠和小鼠的各个组织器官进行副猪嗜血杆菌分离,结果在豚鼠的大脑、心血、肺、肝和腹水中分离到了副猪嗜血杆菌。提示豚鼠对副猪嗜血杆菌易感,可以做为建立副猪嗜血杆菌感染动物模型的候选实验动物。     

洛阳某猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

为确定洛阳某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎的病原种类及其血清型,为其临床科学防疫和合理用药提供参考方案,本试验无菌采集了病猪肺脏等病料,采用病菌培养后形态观察、革兰氏染色、生理生化特性试验、PCR诊断等技术对病原菌进行实验室分离鉴定,通过基因测序和同源性分析方法对其进行确诊,通过动物攻毒试验和药敏试验分析分离菌株的致病性和耐药性,采用5对分型引物对分离菌进行基因分型以确定病原菌血清型。结果显示,分离菌2007菌落形态为光滑、透明、边缘整齐、圆形、隆起的小菌落,革兰氏染色特征为阴性杆菌且呈多型性,具有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)的典型培养特征,且生化结果符合猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的生化特性。同源性分析结果显示,分离菌株2007与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株FJ848573.1同源性为99.4%,说明分离株2007是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。动物攻毒试验结果显示,分离菌株2007对小鼠有强致病性。药敏试验结果显示,分离株2007对泰妙菌素、氨苄西林和头孢噻呋钠等高敏,对替米考星、红霉素、氟苯尼考等20种抗菌药完全耐药,对34种抗生素的耐药率高达76.5%,具有较强的多重耐药性。分离菌2007基因分型扩增到目的基因片段与血清型5型结果相符。本试验结果为发病猪场提出了解决该病的具体防治措施,并最终获得了良好的效果,为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌临床耐药折点的制定提供了一些参考。     

洛阳某猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

为确定洛阳某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎的病原种类及其血清型,为其临床科学防疫和合理用药提供参考方案,本试验无菌采集了病猪肺脏等病料,采用病菌培养后形态观察、革兰氏染色、生理生化特性试验、PCR诊断等技术对病原菌进行实验室分离鉴定,通过基因测序和同源性分析方法对其进行确诊,通过动物攻毒试验和药敏试验分析分离菌株的致病性和耐药性,采用5对分型引物对分离菌进行基因分型以确定病原菌血清型。结果显示,分离菌2007菌落形态为光滑、透明、边缘整齐、圆形、隆起的小菌落,革兰氏染色特征为阴性杆菌且呈多型性,具有猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）的典型培养特征,且生化结果符合猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的生化特性。同源性分析结果显示,分离菌株2007与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株FJ848573.1同源性为99.4%,说明分离株2007是猪传染性胸膜肺炎放线杆菌。动物攻毒试验结果显示,分离菌株2007对小鼠有强致病性。药敏试验结果显示,分离株2007对泰妙菌素、氨苄西林和头孢噻呋钠等高敏,对替米考星、红霉素、氟苯尼考等20种抗菌药完全耐药,对34种抗生素的耐药率高达76.5%,具有较强的多重耐药性。分离菌2007基因分型扩增到目的基因片段与血清型5型结果相符。本试验结果为发病猪场提出了解决该病的具体防治措施,并最终获得了良好的效果,为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌临床耐药折点的制定提供了一些参考。     

猪瘟猪副伤寒混合感染的诊断报告

2002年11月,贵州省某公司从北京引进40～50kg大约克种猪(曾接种过猪瘟兔化弱毒疫苗),1周后,有30头猪先后发病,其临床症状为:体温升至40℃以上,全身皮肤发红,后期发绀,同时伴有腹泻。经青霉素等抗生素治疗,效果不显著,死亡20头,病死率达66.7%。经实验室诊断,报告如下:1材料与方法1.1材料(1)病料贵州省某公司送检病死亡猪。(2)猪沙门氏菌标准血清购于兰州生物制品研究所。1.2方法1.2.1细菌分离无菌取肝脏、脾脏、淋巴结病料分别接种在鸡鲜血琼脂培养基上37℃培养24h后,挑取鸡鲜血琼脂培养基上单个菌落接种在麦康凯琼脂培养基上37℃培养24h。1.…     

一例猪伪狂犬病与猪传染性胸膜肺炎混合感染的诊治报告

运用针对不同病毒的特异性引物,时乐山市某猪场送检的病料进行pCR和RT-PCR检测,结果发现PRV为阳性.无菌条件下分离的细菌可在PPLO培养基上生长,革兰氏染色为阴性,经鉴别培养基培养、生化实验确定为放线杆菌,并结合临床症状、病理变化,确诊该病例为猪伪狂犬病病毒和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌混合感染.     

广西某规模化猪场胸膜肺炎放线杆菌血清5型的分离鉴定

为调查广西地区某规模化猪场疑似患猪传染性胸膜肺炎猪的病原、血清型及有效治疗药物等情况,首先对患病猪进行剖检观察其病理变化,同时无菌采集病猪肺脏等病料,接种平板后纯化培养,然后通过革兰染色镜检、生化鉴定、16S rRNA序列比对、血清型及毒素基因分析等方法进行鉴定,并对分离菌株的耐药性和动物致病性进行探究。结果：从病料中分离到1株细菌,其菌落、菌体形态、生理生化特性和16S rRNA基因序列符合胸膜肺炎放线杆菌(APP)特征,该菌株含有ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅣ三种毒素,属于APP血清5型,因此将其命名为APP5-YXLM;药敏试验结果显示,该菌对β-内酰胺类药物和头孢类药物敏感,对红霉素、庆大霉素、多西环素、四环素等6种药物耐药;动物致病性试验表明,该菌株对小鼠具有较强的致病性,其半数致死量(LD₅₀)为7.06×10~8 CFU。试验结果为该发病猪场猪传染性胸膜肺炎的防治提供了理论依据,同时也为掌握胸膜肺炎放线杆菌在广西地区的流行情况提供了数据支持。     

绵羊支原体肺炎诊断及病原的分离与鉴定

通过对送检病羊的临床症状、剖检变化、病料染色镜检,初步诊断为绵羊支原体肺炎。又经无菌采取病料接种改良Frey培养氏液,再取培养液接种于固体培养液后分离到可疑绵羊肺炎支原体。然后将培养生长的支原体分别进行革兰氏染色、姬姆萨染色、瑞氏染色和碱性复红染色;进行了各种生化试验,进行动物和鸡胚接种试验和平扳凝集等血清学试验;最后确诊为绵羊支原体肺炎,并分离获得了绵羊肺炎支原体。该结果为绵羊支原体肺炎的防制奠定了基础。     

1例藏香猪伪狂犬病、猪圆环病毒病与附红细胞体病混合感染的诊治

为对送检的发病藏香猪病死因进行确诊,本试验采用常规PCR、RT-PCR及荧光定量PCR方法,并结合流行病学调查、临床诊断及病理剖检等实验室检测对送检病料进行诊断,结果显示病死猪心脏、肺脏充血出血,肺脏肉变,气管内充满白色泡沫,全身淋巴结出血;荧光定量PCR方法检测猪圆环病毒呈阳性,PCR方法检出猪伪狂犬病病毒特异性条带,未见猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体条带,RT-PCR方法未扩增出猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒特异性条带;血液涂片染色镜检可见猪附红细胞体。结果表明病死猪为猪伪狂犬病、猪圆环病毒病与猪附红细胞体病混合感染,采用经实验室诊断给出的综合防治方案治疗后,疫情得到控制。本次病例的诊治为养猪业可能发生的猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪附红细胞体病的混合感染提供了有效的防治方法和借鉴经验。     

凉山半细毛羊肺炎支原体病的病原分离及生化鉴定

通过对送检病羊临床症状、剖检变化、病料染色镜检,初步诊断为羊支原体肺炎。又经无菌采取病料接种改良Frey培养氏液,再取培养液接种于固体培养液后分离到可疑羊肺炎支原体。然后将培养生长的支原体分别进行革兰氏染生化试验和药敏试验,最终确诊为该羊场的半细毛羊感染了羊肺炎支原体病。     

天津部分猪场副猪嗜血杆菌的分离鉴定

为了解天津部分地区2014年副猪嗜血杆菌病的发病情况及菌株的致病力,收集本地区45个规模化养猪场疑似副猪嗜血杆菌病猪的病料53份,通过病原分离培养、培养特性及染色特性观察、生化试验及PCR扩增等方法进行鉴定,最终分离到阳性样品15例,阳性率28.3%;挑选2株(TJ-0121A,TJ-0134A)分离于临床症状典型病猪,且生物学特性典型的分离株进行豚鼠副猪嗜血杆菌的人工感染试验,每只豚鼠腹腔注射2.0×109 CFU/mL菌液。TJ-0121A分离株接种豚鼠后,豚鼠全部死亡;TJ-0134A分离株感染7d后未出现死亡。对所有豚鼠的肝、肺、脾、淋巴结、肾、心肌进行副猪嗜血杆菌分离和PCR检测,TJ-0121A组死亡豚鼠的所有组织均可分离并检测到副猪嗜血杆菌;TJ-0134A组豚鼠仅肺脏分离检测到副猪嗜血杆菌,说明不同菌株间的致病力存在差异。     

副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究

为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。