低温对小麦花培愈伤组织绿苗分化率的影响

小麦花药培养的技术关键在于提高花粉植株诱导率。花粉植株诱导率由花药愈伤组织诱导率和愈伤组织绿苗分化率共同决定。本试验以12个不同小麦杂交组合的F2代为材料，研究了在转愈初期短期低温处理对小麦愈伤组织绿苗分化率的影响。结果表明，在转愈伤组织初期，采用了4℃和6℃低温培养1～3d能大幅度提高小麦花培愈伤组织绿苗分化率，提高育种效率。     

水稻体细胞培养与无性系变异——Ⅰ,不同基因型不同外植体的培养

对水稻5个品种的种胚和11个品种的幼穗在含不同激素浓度的MS培养基上培养,诱导愈伤组织并再生绿苗。品种间在愈伤组织诱导率、绿苗分化率和对激素的诱导效应表现了基因型差异。幼穗愈伤组织诱导率和绿苗分化率高于种胚。种胚的盾片愈伤组织分化能力高于胚轴,胚芽鞘的未分化得绿苗。去分化培养基添加2,4—D2mg/1+KT0.5mg/1,诱导愈伤组织的效果甚佳,并促进绿苗分化。选择胚性愈伤组织继代培养,种胚的培养270天,幼穗的培养210天,仍有部分品种保持较高的绿苗分化率。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

水稻早恢402体细胞培养初步研究

对水稻品种早恢402进行体细胞培养,结果表明：（1）幼苗茎段比成熟种胚具有较高的愈伤组织诱导率,但前者绿苗分化率极低。（2）对幼苗进行8℃2－3天的低温预处理,茎段愈伤组织诱导率虽有一定下降,但绿苗分化率却能大幅度提高。（3）进行分化培养的愈伤组织进行4－6天的干燥预处理也能显著提高体细胞培养绿苗分化率。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

本试验采用磁场预处理提高花椰菜花药培养诱导率，结果表明，磁场预处理可以明显提高诱导率，在均匀磁场中预处理30min，磁场强度以300mT效果较好，提高诱导率27．33％，经过磁场预处理后两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比未预处理的对照明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低。在同一种诱导培养基上，经磁场预处理后产生的愈伤组织绿苗分化率比对照高4．1％－13．2％，在两种不同培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13．4％－28．4％。     

基因型及外源因子对小麦花药培养一步成苗的影响

研究了不同基因型及几种外源因子在小麦花药培养一步成苗中的效应。结果表明 ,花药培养一步成苗的愈伤组织诱导率、绿苗分化率、白苗分化率及绿苗产量存在基因型间的差异。高蔗糖浓度有利于获得高频率的花药愈伤组织 ,但同时又提高了花药培养中白化苗频率。动力精 (KT)对花药愈伤组织诱导率影响的差异不大 ,但对绿苗分化率、绿苗产量及绿苗 /白苗 (G/ W)均有显著影响。在试验浓度范围内 ,随 KT浓度的增大 ,绿苗产量提高 ,绿苗分化率明显增加 ,而白苗分化率下降 ,因而 G/ W值明显增大。说明 KT主要是通过提高绿苗分化率和降低白苗分化率 ,增大 G/ W而提高花培一步成苗效率的。在与 KT的配合使用中 ,2 ,4 - D比 NAA更有利于提高小麦花药培养中的愈伤组织诱导率和苗分化频率     

胚乳对籼稻成熟胚愈伤组织诱导及分化的影响

以籼稻品种成熟种子为材料，研究了胚乳对成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明，种子胚乳量愈少，始愈期愈早；形成的愈伤组织生长速率以带全胚乳的种子为最快；愈伤组织分化率则以带半胚乳的种子最高。愈伤组织继代培养次数显著影响绿苗分化频率，以继代培养1次（约12－14d）的愈伤组织分化率最高。     

粳稻花药培养几种培养基试验报告

我们在1990～1991年作了两年的诱导培养基和分化培养基的对比试验。结果表明,N_6基本培养基附加NAA的N_6-1诱导培养基和附加NAA和2,4-D的N_6-2诱导培养基的愈伤组织诱导率分别为30.3％和25.3％,它比附加2,4-D的常用的N_6。诱导培养基(愈伤组织诱导率为20.5％)高出47.8％和23.4％。NAA和2,4-D混用的N_6-2去分化培养基所诱导出的愈伤组织的器官分化率为最高,其绿苗分化率为57.4％,它比常用的N_5培养基(绿苗分化率为44.8％)高出28.0％。器官分化率最低的是单用NAA的N_6-1培养基,其绿苗分化率为36.4％,比N_6培养基低18.7％。附加NAA的N_6-1和N_6-2培养基的出愈速度和器官分化速度明显快于附加2,4-D的N_5培养基。N_6-1培养基和N_6-2培养基花药接种后18天就能看到愈伤组织,出愈速度要比N_5培养基提早3～5天。在N_6培养基上的形成的愈伤组织转移后10天只有部分绿苗出现,但N_4-1和N_6-2培养基上形成的愈伤组织转移后10天,可分化出1/3的绿苗,甚至转移后3天可以看到不少绿点分化。分化培养基来看,MS培养基的植物体分化效率明显高于N_6培养基,其绿苗率提高到2.5倍。     

芦笋高效花药培养技术体系的建立

以芦笋品种"Gijnlim"为试验材料,研究花药预处理、培养基附加物、培养方式等对愈伤组织类型、诱导率和绿苗分化率的影响,探讨愈伤组织类型与染色体倍性比例间的关系。结果表明,芦笋花药在4℃低温下冷藏5～7d后接种于含有NAA2.0mg·L-1、6-BA1.0mg·L-1及6%蔗糖的1/2MS培养基上对愈伤组织的诱导最为有利;接种后进行32℃的高温处理5d,有利于提高愈伤组织的诱导率;培养基中加入水解酪蛋白(CH)300mg·L-1有利于提高愈伤组织的诱导率;愈伤组织的类型和日龄影响绿苗的分化率,致密型愈伤组织的分化率高于松散型愈伤组织,30～40d日龄的愈伤组织分化率最高。镜检结果表明,致密型愈伤组织分化的单倍体多于松散型。     

激素处理籼稻植株对花粉绿苗诱导率的影响(初报)

晚籼“金晚3号”和 Jaya/233在减数分裂期喷洒不同浓度的赤霉酸(GA_3 10、15、20ppm)和乙烯利(CPA 600、1000、1400 ppm),部分幼穗结合低温处理,结果表明:单独用低浓度激素处理对“金晚3号”绿苗的诱导有抑制作用。随着浓度提高,绿苗诱导率均有所提高。激素结合低温处理能大幅度提高愈伤组织诱导率,但绿苗分化率普遍降低。而低浓度激素结合低温处理,花粉绿苗诱导率显著提高。激素对“Jaya/233”作用表现则不同。单独用激素处理能大幅度提高愈伤组织诱导率,但不能正常增殖,也未分化绿苗。低温处理愈伤组织能正常增殖,并分化绿苗。而激素结合低温处理能提高愈伤组织的分化力,从而提高花粉绿苗的诱导率。     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

提高小麦花粉植株诱导频率的研究

对影响小麦花粉植株诱导频率部分因素进行了研究,获得以下结果:(1)在现有的小麦花药愈伤组织诱导培养基中,W_(14)和马铃薯-Ⅱ的效果最好;(2)低温预处理的效果因杂交组合的不同而表现不同;(3)短期高温预培养可明显提高愈伤组织的产量;(4)绿苗分化率与愈伤组织年龄关系密切,愈伤组织转移的最适年龄与愈伤组织诱导培养基的种类有关;(5)大量元素减半的MS培养基绿苗分化率显著高于190—Ⅱ培养基。     

不同小麦基因型及其不同外植体离体培养研究初探

以13个不同基因型、3种不同外植体为材料，选用5种不同培养基，研究了各因素对愈伤组织诱导、分化的影响，并在此基础上建立了一套可靠的小麦组培再生系统。结果表明，愈伤组织的诱导、根的分化和绿苗的再生虽然都具有显著的基因型效应，但不具备显著的相关关系；对于绿苗的再生分化，幼胚优于成熟胚，幼穗和幼胚之间不存在显著的差异；X和A培养基各自在愈僵组织的诱导和再生分化上都明显优于MSS AA／2和R培养基。成熟胚愈伤组织诱导率生根率和绿苗率平均分别可达88.9%、56.3%和8.7%；幼胚愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均分别可达99.1%、53.2%和17.6%；幼穗愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均达94.6%、84.8%和18.3%。     

铜离子对猕猴桃愈伤组织再分化培养的研究

以秦美猕猴桃茎段为外植体,诱导愈伤组织并进行猕猴桃再分化及生根试验。在分化培养基中分别添加不同浓度的铜离子进行筛选,以确定适于猕猴桃愈伤组织分化的最佳铜离子浓度。结果表明:再分化培养基中添加1.0 mg.L-1的铜离子时,可明显提高猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率及生根率。但当铜离子浓度超过2.0 mg.L-1时,猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率显著降低。     

不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养研究

[目的]研究不同基因型亚麻花粉小孢子离体培养,建立亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,以期加快亚麻单倍体育种进程。[方法]以5种不同基因型亚麻的花粉小孢子为外植体,研究不同基因型亚麻愈伤组织诱导率、绿苗的分化率的差异,筛选适宜亚麻花粉小孢子培养基。[结果]不同基因型的亚麻花粉愈伤组织的诱导率、绿苗分化率差异显著,9601和9605愈伤组织的诱导率较高,分别为30.8%和28.6%;9601组合的花粉绿苗分化频率最高为14.5%。其次为9718和9712,分化率分别为11.5%和8.0%;筛选出亚麻花粉小孢子适宜的愈伤组织诱导培养基HF1、绿苗分化培养基HF2。[结论]初步建立了亚麻花粉小孢子离体培养再生体系,为亚麻单倍体育种、突变体筛选、转基因等研究奠定了基础。     

铜、银元素对水稻愈伤组织绿苗分化率的作用

铜、银元素对水稻愈伤组织绿苗分化率作用的研究结果表明 ,铜、银元素能明显提高水稻愈伤组织绿苗分化率 ,使用的浓度范围较广 ( 2～ 2 0 μmol/L) ,其中以铜元素 2 0 μmol/L、银元素 5 μmol/L效果最好 ;同工酶分析表明 ,经过 2～ 3d铜、银处理的水稻愈伤组织过氧化物酶 (POX)的活性增强 ,说明铜、银短时间处理能增强水稻愈伤组织过氧化物酶活性 ,从而诱导愈伤组织绿苗分化     

基因型及培养基种类对不结球白菜一代杂种花药培养的影响

对10个基因型的不结球白菜杂种F1花药进行了离体培养,并分析了不结球白菜基因型、培养基种类对花药愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明:供试的10份材料均能在3种诱导培养基中发生愈伤组织.但愈伤组织的分化较为困难;有4份材料能在分化培养基上分化出绿苗,但发生率低,平均绿苗分化率最高的仅为1.515%,另6份材料未发现绿苗产生.     

小麦花培过程中转愈时间对绿苗分化的影响

研究了愈伤组织向分化培养基上转移时间对绿苗分化的影响，结果表明，随着药药接种时间的延长，愈伤组织的琢其分化成绿苗的能力下降、花粉愈伤组织向分化培养基上转移的时间以在接种３０－５０天内，选择颜色淡黄，结构臻密，直径在２ｍｍ 左右的愈伤组织，分２－３批转移为宜，这样可以避免愈伤组织绿苗 分化潜力的降低。     

大麦离体培养花药对低温预处理及NaCl胁迫的反应

以3份大麦基因型作供试材料,探讨了离体麦穗低温预处理对花药离体培养愈伤组织诱导、绿苗分化及NaCl胁迫对花药培养愈伤组织分化形成绿苗的可能原因。依据研究结果,推测：不同供体基因型的花药对低温预处理首先是一个冷胁迫反应,其次才是培养反应。认为制定适宜的低温预处理时间。应以最大限度提高供试基因型花培绿苗率为前提。     

人参粉对小麦和小黑麦花药培养的影响

小麦花药培养中愈伤组织诱导率和绿苗分化率低一直是悬而未决的问题.本试验表明,在NT_5-1培养基中附加1.5g/1人参粉后,能显著提高普通小麦和八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率.其中普通小麦花粉愈伤组织诱导率可达2.98%(对照为1.49%),出愈时间(22天)较对照早3天,唯绿苗分化率(19.21%)低于对照(28.5%);八倍体小黑麦花粉愈伤组织诱导率达15.86%(对照为8.33%),出愈时间(25天)比对照提早4天,绿苗分化率(4.26%)亦高于对照(3.33%).