微波诱变选育蛋白饲料酵母高产菌株

本试验以甘蔗糖蜜为碳源,对啤酒酵母S2菌株进行微波诱变处理,旨在筛选出一株高生物量高蛋白质含量的菌株.结果表明:微波诱变后所得的正突变菌株WS208生物量及细胞蛋白质含量较诱变前明显提高,总蛋白得率达4.90g/L,是诱变前的2.16倍.菌株WS208传代6次,总蛋白得率无明显变化,表明该菌株遗传性状稳定.     

紫外线诱变选育富铬酵母菌株的研究

采用紫外照射法对一株产朊假丝酵母进行诱变处理,结果表明:在紫外灯功率为15W,照射距离为20cm,诱变时间为30s的条件下,致死率可达到72.10%。通过初筛和复筛得到5株酵母菌,其中C-11号菌株经测定其生物量达到13.1g/L,酵母细胞中有机铬的含量达到628.1μg/g,较诱变前提高了40.90%,且稳定性好,确定其为适于生产所需的强聚铬能力菌株。     

2株海洋红酵母的复合诱变及其高产类胡萝卜素菌株的选育

选用从雷州半岛近岸海域分离鉴定的2株海洋红酵母（胶红酵母J6和黏红酵母J2）作为出发菌株,进行亚硝基胍（NTG）和紫外线（UV）复合诱变,以期筛选出高产类胡萝卜素的突变株。先用NTG处理出发菌株的菌悬液60 min,再用UV照射120 s,且要连续诱变3次;每次复合诱变后的菌悬液经短时间的液体培养后涂布于红酵母琼脂平板培养,从中筛选出一定数量的第1、2和3代突变菌株;将突变菌株接种于红酵母发酵培养基,经培养、离心和烘干,制备出干菌体细胞;用分光光度计法测定干菌体细胞中的类胡萝卜素含量,筛选出高产类胡萝卜素的突变株,并进行遗传稳定性试验。结果表明,胶红酵母J6的正向突变率为56.57%（56/99）,6株高产类胡萝卜素的突变株中,第3代3株,第2代2株,第1代1株,类胡萝卜素含量最高的突变株是胶红酵母J6-82,比出发菌株提高了99.56%;黏红酵母J2的正向突变率为53.01%（44/83）,6株高产类胡萝卜素的突变株中,第3代4株,第2代2株,类胡萝卜素含量最高的突变株是黏红酵母J2-75,比出发菌株提高了93.64%。本试验采用的NTG和UV 3次复合诱变的方法有利于海洋红酵母的变异及其类胡萝卜素含量的提升,且突变菌株有良好的遗传稳定性。     

紫外线诱变选育富铬酵母菌株的研究

采用紫外照射法对一株产朊假丝酵母进行诱变处理。结果表明:在紫外灯功率为15w,照射距离为20cm,诱变时间为30s的条件下,致死率可达到72.10%。通过初筛和复筛得到5株酵母菌,其中C-11号菌株经测定其生物量达到13.1g/L,酵母细胞中有机铬的含量达到628.1g/g,较诱变前提高了40.90%,且稳定性好,确定其为适于生产所需的强聚铬能力菌株。     

利用原生质体诱变方法选育蛹虫草高产突变菌株

对蛹虫草(Cordyceps militaris)原生质体分别进行热应激和紫外线诱变处理后,挑选再生菌株进行栽培试验,通过测定菌株子实体产量及腺苷、虫草素含量,从中筛选高产突变菌株。蛹虫草原生质体经68℃和72℃热应激后,再生菌株子实体干物质含量显著增加,且68℃处理组子实体中腺苷含量显著提高。用紫外灯照射原生质体1 min、6 min和7 min时,子实体干物质含量显著增加,腺苷含量较对照组分别提高49.4%、96.4%和15.9%,虫草素含量分别提高49.1%、20.0%和13.5%。最终从紫外线诱变1 min处理组筛选出5株高产突变菌株,其子实体干质量和生物转化率均显著高于出发原菌株,子实体中虫草素含量分别为原菌株的1.59、1.72、1.74、1.55和1.56倍,并且5株菌株目标性状的稳定性良好。试验结果表明,以原生质体为材料,采用紫外线诱变技术可以选育出蛹虫草高产突变菌株。     

酒糟型酵母培养物在动物营养中的应用研究

酒糟具有营养成分丰富、产量大的优点,作为非常规饲料资源,具有广阔的应用前景.酵母培养物可以改善动物肠道菌群平衡.在饲料中添加酵母培养物(yeastculture,YC)可以起到促生长的作用.近年来,将酒糟用作原料生产酵母培养物的研究较多.文章对酒糟及其酵母培养物的特点和在饲料行业中的应用进行综述.     

紫外线诱变选育高产富硒酵母的研究

本试验旨在研究紫外线诱变对富硒酵母的生物量及硒含量的影响。利用紫外线对热带假丝酵母1254进行诱变,结果表明,该菌株在紫外线诱变70s时,致死率达到77.84%,筛选出6株富硒能力高的酵母菌株,其中Y-4的生物量和硒含量分别提高了67.5%和25%。     

高产蛋白酵母菌株的选育及特性研究

以高产蛋白酵母菌株S4.1为出发菌株,对其进行紫外线诱变,获得一株高产蛋白酵母菌株S4.107,该菌株生长速度快,粗蛋白含量高达27.31%,较出发菌株提高22.96%,净增5.1百分点;较麸皮原料提高67.85%,净增11.04百分点。S4.107的最佳生长时间为26h,最适生长温度为30℃,最适生长pH为7,适宜的碳源为蔗糖和葡萄糖,适宜的氮源为酵母浸出汁和蛋白胨。     

甲基营养酵母Candida boidinii No.2201及其诱变株生产单细胞蛋白的研究

通过对甲基营养酵母Ｃａｎｄｉｄａ ｂｏｉｄｉｎｉｉ Ｎｏ。２２０１进行诱变，筛选出具有耐高初始底物浓度，高生产速率，高生物积累量的优良菌株；并对其部分生长特性做了研究。发酵产物具有高蛋白，低核酸的特点，含蛋白质３９．４０％，核酸２．３７％。     

半干型桑椹全汁果酒酿造工艺研究

以成熟桑椹果浆为原料,Lalvin R 212酵母作为菌种进行发酵,研究酿制桑椹果酒的发酵工艺条件.通过糖度、酸度和酒精度变化研究糖度、接种量、发酵液pH值、发酵时间等单因子对桑椹全汁果酒发酵品质的影响,对影响桑椹全汁发酵的单因素进行工艺条件优化.结果表明:接种量5％,糖度为24％,pH值为3.6及发酵9d发酵效果好,此条件下发酵酒度可达15.0％vol,最大程度上保留了桑椹果香,果酒风味佳,品质、色泽好,各项指标均符合相关国家标准.     

紫外线诱变酵母1254的致死率及高产富铬酵母菌选育研究

利用紫外线对热带假丝酵母1254进行诱变,结果表明:该菌株最高正突变率(49%)时的致死率为86%,紫外线处理时间为40s。筛选出5株高耐铬能力的酵母菌株,其中Y-1、Y-5的生物量和铬含量分别提高了49%、59%和59%、48%。     

人肝癌细胞系HepG2的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型的建立

本试验旨在建立次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的HepG2细胞系,为细胞杂交与单克隆抗体的研究提供亲本细胞。通过N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HepG2细胞突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG有抗性的细胞株,检测它在HAT中生长的情况。得到可在含20 μg/mL 6-TG的高糖DMEM完全培养基中稳定生长的细胞株,此细胞株在HAT培养基中第3天出现明显的死亡,第12天全部死亡,诱变后细胞的染色体分布于32-88,染色体众数为48。突变筛选出的细胞具有对6-TG抗性和对HAT敏感的特性,证实该细胞是HGPRT缺陷型细胞株,为以后进行杂交瘤制备提供了适宜的亲本细胞。     

具有万古霉素高产能的东方拟无枝酸菌诱变株的选育研究

为提高万古霉素(Vancomycin)发酵生产水平,选育出其发酵生产的优良菌株,以东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis oriertalsis)菌株V1806作为原始菌株,利用EMS(甲基磺酸乙酯)、UV(紫外诱变)和ARTP(常压室温等离子体诱变)等单一诱变、复合诱变的方法,选育出1株遗传稳定性好、且对万古霉素耐受性强的菌株Vua-15,其中试发酵效价达到7863 mg/L,比原始菌株提高了74.3%。研究结果表明,复合诱变对东方拟无枝酸菌菌种选育的效果优于单一诱变,更易选育出符合预期的优良菌株。研究不仅对万古霉素工业化发酵生产具有重要意义,而且为其他产品发酵菌种的选育提供了一定借鉴。     

金黄色葡萄球菌小菌落突变株研究进展

Jacobsen(1910)分离到一种异常的伤寒埃伯泽氏菌株,并依其特殊的表型特征命名为小菌落突变株(small colony variants,SCVs)。自此,人们开始了对SCVs的研究。深入研究发现,许多细菌(如表皮葡萄球菌、头葡萄球菌、绿脓杆菌、洋葱伯克氏菌、霍乱弧菌、志贺氏菌、羊布鲁杆菌、大肠埃希氏杆     

A型、C型肉毒毒素对鼠伤寒沙门氏菌的诱变性研究

应用鼠伤寒沙门氏菌4种组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102的诱变试验来研究A型、C型肉毒毒素的诱变作用。A型、C型肉毒毒素通过点试法、渗入法（-S9和＋S9）及液体预保温培养法检测，结果均为阴性，说明A型、C型肉毒毒素对原核细胞无诱变性。     

硒的营养作用研究历程及富硒酵母作为畜禽营养应用概述

1硒的发现及其应用硒,ⅥA族元素。原子序数34,原子量78.96,元素名来源于希腊文,原意是"月亮"。硒有六种同素异形体,晶形硒分为红色的α硒、单斜硒、灰色的六方晶体硒三种。无定形硒有剧毒,形态有红色和黑色的玻璃状硒,以及胶状硒。     

产朊假丝酵母改善麻疯树提油饼粕营养效价的研究

利用产朊假丝酵母作为发酵菌株,采用固态发酵方式改善麻疯树提油饼粕的营养效价。试验结果表明,控制培养基湿度为100%(w/w)条件下恒温发酵4d,麻疯树提油饼粕中的粗蛋白含量达到最大值。统计分析结果表明,向培养基中添加碳源后,发酵饼粕的粗蛋白增长率、粗蛋白体外消化率、氨基氮含量和蛋白酶活力都比未添加碳源组有显著提高(P<0.05)。与未发酵麻疯树提油饼粕相比,添加10%(w/w)葡萄糖的发酵饼粕中粗蛋白含量、粗蛋白体外消化率和氨基氮含量分别提高了0.48、15.6和37倍,蛋白酶活力达到2100U/g,其营养效价得到明显提高。     

利用酵母双杂交系统筛选与猪2型链球菌透明质酸酶(HYL)相互作用的蛋白质

以猪链球菌2型(SS2)透明质酸酶(HYL)作为诱饵蛋白,利用CytoTrap酵母双杂交系统,从人的肺组织cD-NA文库中筛选与HYL相互作用的蛋白,探索HYL在SS2致病中的作用.首先,通过PCR扩增SS2 Hyl全长基因,定向克隆到pSos载体多克隆位点中,构建诱饵载体(pSos-Hyl).同时,将Hyl克隆到pET-28c载体中,构建重组表达栽体(pET28c-Hyl).将pSos-Hyl和人肺cDNA文库(pMyr-cDNA)共转化cdc25H酵母细胞,筛选与HYL相互作用的阳性克隆.经过筛选和重复验证,并时所得到的栽体插入片段进行测序,经BLAST分析,从人肺组织cDNA文库中得到2个与HYL相互作用的阳性克隆,2个基因分别与γ内收蛋白(Homo sapiens adducin 3(gam-ma)(NT-030059.12),ADD3)和装配架离子转运蛋白(Homo sapiens chromosome 6 genomic contig,reference as-sembly ion transporter protein(NT_034880.3),AITP)基因的同源性为99%和100%.将HYL原核表达,ADD3和AITP真核细胞表达后,用免疫共沉淀试验分别验证了HYL与ADD3和AITP之间的相互作用,为进一步研究ADD3和AITP可能与SS2致病的关系奠定了前期基础.     

适宜放牧的根蘖型苜蓿生理特性及营养动态研究

选择国外根蘖型苜蓿润布勒 (Rambler)、兰吉兰德 (Rangelander)品种和国内育成的综合种 4号、5号、6号根蘖型苜蓿 ,进行生理特性及营养动态研究。结果表明 ,国内育成的根蘖型苜蓿在抗旱、营养成分和生物产量上均优于国外根蘖型苜蓿品种