博落回注射液生产工艺及质量的研究

以博落回血根碱含量为指标,分别对博落回注射液５种不同的生产工艺进行了研究。结果表明,当５种不同生产工艺生产的博落回注射液含原生药浓度均为１００％时,生物碱含量以乙醇浸提法最高。     

牛至油博落回口服液的研制及体外抑菌活性测定

【目的】 研制牛至油博落回口服液, 并测定其体外抑菌活性及其主要成分的联合抑菌效果, 为临床用药提供理论依据。【方法】 通过预试验和Box-Behnken响应面法优化处方; 采用高效液相色谱法测定口服液主要成分含量; 采用滤纸片法测定口服液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌的抑菌圈直径; 采用试管二倍稀释法测定口服液、5%牛至油溶液及1%博落回溶液对4种细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC); 采用微量棋盘稀释法对5%牛至油溶液与1%博落回溶液进行体外联合药敏试验。【结果】 牛至油博落回口服液最优配方为: 5%牛至油, 1%博落回提取物, 25%增溶剂聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油, 0.02%抗氧化剂2, 6-二叔丁基对甲酚(BHT), 余量为水。口服液中香芹酚的含量为42.59 mg/mL, 血根碱含量为6.51 mg/mL。口服液对4种菌的抑菌圈直径分别为16.9、16.4、23.7和17.0 mm, MIC分别为3.125、3.125、1.5625和1.5625 μL/mL, MBC分别为12.5、6.25、3.125和3.125 μL/mL; 5%牛至油溶液对4种菌的MIC分别为25、12.5、6.25和100 μL/mL, MBC分别为100、50、25和>200 μL/mL; 1%博落回溶液对4种菌的MIC分别为6.25、12.5、3.125和6.25 μL/mL, MBC分别为50、25、6.25和25 μL/mL。联合药敏试验表明, 二者联合用药对大肠杆菌、沙门氏菌起相加作用, 对金黄色葡萄球菌无作用, 对粪链球菌为协同作用。【结论】 试验制备了牛至油博落回口服溶液剂, 该制剂对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌具有良好抑制作用。     

兽用博落回生物碱的分光光度法测定及提取工艺响应面优化

试验旨在提高兽用博落回资源利用率,开发兽用博落回生物碱快速检测方法。在单因素试验基础上,运用响应面法对博落回中总生物碱提取工艺进行优化,并建立数学模型验证其可靠性。优化过程中采用分光光度法测定生物碱含量。结果显示,博落回生物碱的溴甲酚绿分光光度法检测的线性范围为0.000 8~0.008 0 g/L。博落回生物碱提取工艺响应面优化的回归方程显著(P<0.000 1),失拟项不显著(P=0.121 6)。总生物碱得率影响因素的强弱次序为:提取温度>盐酸浓度>液料比>提取时间。在液料比15 mL/g、盐酸浓度0.2 mol/L、提取温度75℃、提取时间1.6 h的最优条件下,实际总生物碱平均得率为30.34 mg/g,与理论预测值吻合。研究表明,建立的博落回生物碱含量溴甲酚绿分光光度法测定方法操作简便、灵敏度高,可用于生物碱含量的快速检测。通过响应面法优化的博落回生物碱提取工艺稳定可靠,在最优条件下可实现资源利用最大化。     

内部沸腾法提取博落回生物碱的工艺研究

为了得到内部沸腾法提取博落回生物碱的最佳提取工艺,试验逐一考察硫酸浓度、浸泡的乙醇浓度、提取温度、料液比等因素对提取效果的影响,并采用高效液相色谱(HPLC)法测定了提取得到的博落回总碱中血根碱和白屈菜红碱含量。结果表明:当硫酸浓度为0. 10 mol/L、浸泡乙醇浓度为50%、提取温度为90℃、料液比为1∶20时,提取一次的提取率为13%,HPLC检测到的血根碱含量为6. 6%,白屈菜红碱含量为3. 1%,提取效率明显提高。     

不同剂量博落回提取物对断奶仔猪生长性能的影响

为了研究不同剂量的博落回提取物对断奶仔猪生长性能的影响,本试验选用(65±2)日龄、体重相近的杜×长×大三元杂交断奶仔猪252头,随机分为7个处理组,分别饲喂基础日粮(空白对照Ⅰ组),同时在基础日粮中分别添加不同剂量的0.337、0.675、1.35、2.7、5.4mg/kg博落回提取物生物碱(以血根碱+白屈菜红碱总生物碱计),以及30mg/kg金霉素(阳性对照组)作试验组,试验期为28d,试验结束时测定各处理组的生长性能等指标。结果显示,与其它剂量组及金霉素组相比,日粮中添加0.675和1.35mg/kg博落回提取物生物碱,均能显著提高仔猪的采食量(P0.05)、平均日增重(P0.05),降低仔猪料重比(P0.05)。同时日粮中添加不同剂量的博落回提取物生物碱能有效预防仔猪腹泻的发生率。因此,从改善仔猪的生长性能及提高经济效益角度考虑,在仔猪日粮中添加0.675mg/kg的博落回提取物(以血根碱+白屈菜红碱总生物碱计)为理想剂量。     

砂生槐子生物碱超声辅助醇提工艺优化

优化砂生槐子生物碱的提取工艺,为兽药开发利用提供依据。建立砂生槐子中4种生物碱(氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱)含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,以4种生物碱的提取率及干粉得率的总评"归一值"(OD)为评价指标,分别考察乙醇浓度、料液比、超声温度、超声时间、超声功率因素对OD值的影响,并结合Box-Behnken中心组合设计的三因素三水平响应面试验方法来优化砂生槐子生物碱的提取工艺。结果显示,最佳的提取工艺为:乙醇750 mL/L,提取温度55℃,料液比为1 g/mL∶30 g/mL,超声时间为50 min,超声功率为150 W,在此条件下,OD值为0.5586,干粉得率为20.37%,4种生物碱总含量为388.48 mg/g。此工艺优化显著提升了砂生槐子生物碱作为兽用药物的开发价值。     

博落回散对蛋鸡产蛋后期生产性能的影响

本试验旨在研究蛋鸡产蛋后期使用博落回散对其生产性能的影响。试验采用单因子随机分组设计,选取8 000只60周龄的产蛋后期罗曼粉壳蛋鸡,随机分为2个组,每组4个重复,每个重复1 000只,正试期12周。本试验采用玉米-豆粕型粉状日粮,试验组在对照组日粮基础上添加300 mg/kg博落回散（有效成分含量0.375%）。结果表明：蛋鸡产蛋后期日粮中添加300 mg/kg博落回散,产蛋率显著提高3.99%(P<0.05),料蛋比、破蛋率及死亡率分别显著下降3.50%、22.74%和32.10%(P<0.05);在蛋壳质量等级方面,一级和二级蛋壳鸡蛋分别显著提高30.34%、24.60%(P<0.05),三级蛋壳鸡蛋极显著降低37.03%(P<0.01)。由此可见,在产蛋后期日粮中添加300 mg/kg的博落回散能有效改善蛋鸡生产性能,提升蛋壳质量。     

博落回生物碱作用于微生物的研究进展

博落回生物碱是一种天然植物提取物,具有抗菌消炎、促生长等多重功效,在饲料生产中抗生素即将禁用的背景下具有极大的开发应用价值。博落回生物碱对多种病原细菌、真菌以及病毒均有抑制作用,同时又能直接或间接促进某些益生菌的生长,改善肠道微生态环境,促进机体生长。文章就博落回生物碱对各种微生物的作用影响进行综述,为此类生物碱产品与微生态制剂联合运用提供参考。     

高效液相色谱法同时测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量

建立了高效液相色谱法测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱含量的方法。采用Agilent 1260型高效液相色谱仪,配二极管阵列检测器(PDA),色谱柱为waters SymmetryC18(4.6mm×250mm,5μm),柱温:35℃,流速为:1.0mL/min,流动相:乙腈-三乙胺溶液=25∶75(磷酸调pH值至2.5),检测波长270nm。结果表明:血根碱在0.5~100μg/mL范围内线性关系良好(R^2=1.000),平均回收率(n=6)为98.21%,RSD为1.76%;白屈菜红碱在0.25~50μg/mL范围内线性关系良好(R^2=1.000),平均回收率(n=5)为98.77%,RSD为0.83%。本方法简便快捷,可用于博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量测定。     

博落回提取物对脂多糖诱导猪应激细胞应激参数及免疫球蛋白G和超氧化物歧化酶mRNA表达的影响

本文旨在研究博落回提取物对脂多糖(LPS)诱导猪应激细胞应激参数及免疫球蛋白G(IgG)和超氧化物歧化酶(SOD)mRNA表达的影响。试验选用猪胚胎背部成纤维细胞,分别用正常细胞和以LPS刺激细胞建立的应激模型进行试验,对照组采用基础培养液,土霉素组在基础培养液中添加土霉素50μg/mL(阳性对照),博落回组在基础培养液中分别添加50、100、150 ng/mL的博落回提取物。检测IgG、溶菌酶(LSZ)、一氧化氮(NO)含量,一氧化氮合酶(NOS)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及IgG和SOD mRNA表达量。结果表明:1)博落回组IgG、NO和LSZ含量及NOS活性均极显著高于对照组(P<0.01),土霉素组IgG和LSZ含量极显著高于对照组(P<0.01)。2)对应激细胞和正常细胞而言,博落回组IgG mRNA表达量均极显著高于对照组和土霉素组(P<0.01),50和100 ng/mL博落回组均极显著高于150 ng/mL博落回组(P<0.01)。土霉素组IgG mRNA表达量极显著高于对照组(P<0.01)。100 ng/mL博落回组应激细胞IgG mRNA表达量极显著高于正常细胞(P<0.01)。3)对应激细胞和正常细胞而言,与对照组相比,添加博落回提取物50、100、150 ng/mL均极显著提高SOD mRNA表达量(P<0.01)。土霉素组SOD mRNA表达量极显著高于对照组和博落回组(P<0.01)。各组应激细胞SOD mRNA表达量均显著或极显著高于正常细胞(P<0.01)。综合各项指标,博落回提取物可提高LPS应激细胞IgG、NO和LSZ的含量及NOS活性,提高应激细胞和正常细胞IgG和SOD mRNA的表达量,总体效果优于土霉素,较好的添加浓度为50～100 ng/mL。     

博落回提取物（MCE）中主要生物碱与硫酸成盐研究

目的：测定博落回提取物（MCE）中4种生物碱与硫酸成盐的计量关系及其含量,为建立MCE的质量标准提供实验依据。方法：用HPLC法测定其中4种主要生物碱的含量;BaSO4沉淀重量法测定SO42-含量;NaOH酸碱电位滴定法测定H2SO4和HSO4-的总量。结果：硫酸氢根含量约为18%,生物碱的硫酸氢盐含量〉80%,游离硫酸含量约为0.76%。结论：MCE中生物碱以硫酸氢盐形式存在,而且血根碱和白屈菜红碱（苯并菲啶类生物碱）为其主要有效成分。     

博落回提取物对断奶仔猪生长性能、血清免疫指标及抗氧化指标的影响

本试验旨在研究博落回提取物对断奶仔猪生长性能、血清免疫指标及抗氧化指标的影响,选择120头35日龄的健康杜×长×大三元杂交断奶仔猪,按体重相近、性别比例相同原则随机分成2组,每组5个重复,每个重复12头猪,预饲期5 d,试验期30 d,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加0.1%博落回提取物的基础日粮。试验期间,测定每组仔猪的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）及料重比（F/G）;在试验结束时,每个重复选取2头仔猪采血测定血清免疫指标及抗氧化指标。结果显示：①添加博落回提取物组断奶仔猪ADG较对照组提高3.89%（P>0.05）,F/G下降4.32%（P>0.05）,且腹泻率较对照组有显著降低的趋势（P=0.076）。②日粮中添加博落回提取物显著提高了断奶仔猪血清中免疫球蛋白G （IgG）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量（P<0.05）,血清IgA及IgM含量分别较对照组提高了4.59%和4.60%（P>0.05）。③日粮中添加博落回提取物可显著降低断奶仔猪血清中丙二醛（MDA）含量（P<0.05）,同时显著提高总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性（P<0.05）。综上所述,在日粮中添加0.1%博落回提取物可降低断奶仔猪腹泻率,并提高机体免疫力及抗氧化能力,且对断奶仔猪生长性能无不良影响。     

双黄连口服液质量分析

考察市售不同厂家生产的双黄连口服液的质量控制。依据2015版《中国兽药典》二部双黄连口服液质量标准~([1]),采用薄层色谱法和高效液相色谱法,分析双黄连口服液中的黄芩苷、绿原酸和连翘苷的色谱特征和含量。结果表明,测定18批双黄连口服液的合格率为33.33%:而定性检测合格的比例为66.67%;黄芩苷含量范围为0.17%～439.61%,黄芩苷含量合格率为61.11%;绿原酸含量范围为0.02%～231.48%,绿原酸含量合格率为33.33%;连翘苷含量范围为0.46%～341.87%,连翘苷含量合格率为38.89%。源于18个厂家的双黄连口服液的合格率仅为33.33%,且双黄连口服液中主要成分含量相差较大,因此,应从中药材的源头控制及制剂生产环节全过程进行产品质量控制,确保产品质量稳定可控。     

博落回提取物对断奶仔猪生长性能的影响

为了研究博落回提取物对断奶仔猪生长性能的影响,试验选用28±2日龄、体重相近的长×大断奶仔猪160头,随机分为4处理组,分别饲喂给基础日粮（空白对照组）、基础日粮＋100 mg/kg金霉素（阳性对照组）、基础日粮＋0.45 mg/kg血根碱（血根碱组）和基础日粮＋0.675mg/kg博落回提取物（博落回提取物组）,试验期为30天,试验结束时测定各处理组的生长性能等指标。结果表明：与空白对照组相比,血根碱组仔猪的平均日采食量和平均日增重分别提高8.53%（P〈0.05）、11.93%（P〈0.05）,料肉比下降了3.18%（P〈0.05）,博落回提取物组仔猪的平均日采食量和平均日增重分别提高12.32%（P〈0.05）、17.26%（P〈0.05）,料肉比下降了4.5%（P〈0.05）。试验显示,血根碱和博落回提取物均能显著提高断奶仔猪的生长性能,有效缓解了断奶应激,表明博落回提取物作为植物源性抗生素替代产品在断奶仔猪日粮中有良好的应用效果。     

中药复方宫炎净中生物碱的提取工艺研究

本试验旨在通过优化提取中药复方宫炎净中的有效成分生物碱,得到最佳提取工艺。试验通过探究乙醇体积分数、超声提取时间、超声提取次数及料液比这4个单因素对提取效果的影响,以盐酸水苏碱为标准品,采用L₉(3⁴)正交设计法优选中药复方宫炎净中总生物碱的提取工艺。结果显示中药复方宫炎净中总生物碱的最佳提取工艺为乙醇体积分数为70%、超声提取时间为25 min、超声提取3次、料液比为1:10,且在影响中药复方宫炎净中生物碱提取的因素中,影响大小依次为料液比、乙醇体积分数、超声提取次数、超声提取时间。     

博落回中四种生物碱的薄层鉴别研究

建立博落回药材中四种生物碱的薄层色谱(TLC)鉴别方法。开展利用二甲苯-甲醇(5∶1)展开剂分离鉴别博落回中的原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱;利用氯仿-二甲苯-甲醇-氨水(50∶10∶1∶0.1)展开剂分离鉴别博落回中血根碱和白屈菜红碱;利用环己烷-丙酮(3∶2)展开剂分离鉴别博落回中原阿片碱和别隐品碱的系统研究。结果表明建立的薄层方法简便,准确和稳定,可以用于控制博落回药材的质量。     

益母黄丹口服液的制备工艺研究

确定益母黄丹口服液的制备工艺条件并建立质量标准。采用正交试验法,对益母黄丹口服液的提取制备工艺条件进行优化,并采用紫外分光光度法,以盐酸益母草碱为对照品,在277 nm处测定按照不同工艺制备的口服液中盐酸益母草碱含量,再采用薄层色谱法对口服中益母草、黄精进行定性鉴别进行质量控制。结果表明,口服液最佳制备工艺为煎煮时间1.5 h,煎煮3次,醇沉分数50%;紫外分光光度法能测定口服液中益母草碱含量、薄层色谱中益母草、黄精斑点清晰,阴性对照无干扰。本试验制备工艺的方法简单可行,建立的质量标准适用于益母黄丹口服液的质量控制。     

不同溶剂提取的钩吻粗提物中成分含量的测定

钩吻为马钱科钩吻属常绿藤本植物,具有抗肿瘤、免疫调节、促生长等功效,研究表明其主要活性和毒性成分均为吲哚类生物碱。钩吻的药效剂量与中毒剂量十分接近,且致死量低,为给钩吻广泛的临床应用提供理论依据,分别采用酸性染料比色法、苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法对3种不同溶剂工业化提取的钩吻粗取物中生物碱、多糖、蛋白质进行含量测定。结果显示,钩吻醇提(950 mL/L乙醇)、酸水提(5 mL/L H2SO4)、水提物中生物总碱含量分别为64.4g/L、21.5g/L和5.7g/L,糖含量分别为264.1g/L、89.6g/L和9.3g/L,蛋白含量分别为44.7g/L、12.7g/L和34.6g/L。     

Study on the Optimum Extraction Process of Mulberry Leaf Polysaccharide

The experiment was conducted to study the best extract process of mulberry leaf polysaccharide,three factors and three levels orthogonal test was designed to optimize the extraction process.Three factors were considered,including ratio of solid to liquid,decoction time,the time of extracting and the yield of mulberry leaf polysaccharide was determined with phenol-sulfurie acid colorimetry as the evaluate index.Meanwhile,the influence of ethanol concentrations on mulberry leaf polysaccharide extract was studied.The results showed that decoction times could greatest affect the extraction percent of the polysaccharides.The extraction percent of polysaccharide was the highest (4.94%) when the rate of solid to liquid was 25,the time of extracting was 2 h and decoction times was 2.While the most appropriate process was 25 times for the rate of sdid to liquid,2 h for extracting and decoction times was 3,considering with practical situations.The concentration of ethanol would significantly affect polysaccharides yield and purity.When the concentration of ethanol was 70%,the yield of mulberry leaf polysaccharid was highest.When the concentration of ethanol was 40%,the content of mulberry leaf polysaccharide was highest (41.5%),significantly higher than other ethanol concentration (P < 0.05).It suggested that the higher the ethanol concentration,the lower the polysaccharide content,but the higher the yield.The optimum extraction of mulberry leaf polysaccharides were that the rate of solid to liquid was 25,extractign for 2 h,decoction 3 times and 70% ethanol precipitation.