蒜芥茄种子催芽技术研究

蒜芥茄（Solanum sisymbriifolium）是广西重要的番茄嫁接栽培用砧木。通过种子前处理及发芽试验探讨打破种子休眠的方法,筛选蒜芥茄种子催芽处理的最适组合。结果表明,低温及赤霉素（GA₃）能解除种子休眠;低温诱导60 d 为最佳处理;30 ℃ 16 h/20 ℃ 8 h 变温条件下GA3 浓度200 mg·L^-1,30 ℃恒温条件下GA₃ 浓度600 mg·L^-1 较有利于蒜芥茄种子发芽;自然发酵方式采收的种子比未发酵直接采收的种子更易于催芽。     

球孢白僵菌对棕榈蓟马的毒力测定

采用不同浓度的球孢白僵菌Bb050230 菌株,对棕榈蓟马成虫和若虫进行致病力测定。结果
表明：球孢白僵菌对棕榈蓟马的成虫和若虫具有较高的毒力,用浓度为3.0×10⁸ 个·mL^-1 的球孢白僵菌
孢子悬浮液接种8 d 后对棕榈蓟马成虫和若虫的累计校正死亡率分别为85.76% 和83.25%,致死中时间
（LT₅₀）最短分别为4.43 d 和4.79 d,第8 天棕榈蓟马成虫和若虫的致死中浓度（LC₅₀）分别为3.106×10⁵
个·mL^-1 和3.284×10⁵ 个·mL^-1。     

南瓜MSAP 体系的优化及引物筛选

以南瓜自交系北观（Cucurbita maxima）为材料，利用正交设计L₁₆（4⁵）优化南瓜MSAP 预扩增和选择性扩增体系的主要因素。结果表明，第一步最佳酶切时间2 h，Hap Ⅱ（HpaⅡ，MspⅠ）用量0.5 μL；第二步酶切时间6 h，EcoR Ⅰ用量0.4 μL；连接体系包括酶切产物21 μL，EcoR Ⅰ接头（5 μmol · L^-1）、Hap Ⅱ接头（5 μmol · L^-1）各1.0 μL，连接时间12 h，T4 DNA Ligase 用量为0.5 μL；最佳预扩增反应体系（25 μL）包含2.0 μL 连接产物，1.5 μL 10 × PCR Buffer（Mg²⁺ plus），2.0 μL dNTP（2.5 mmol · L^-1），0.6 μL Taq 酶（5 U · μL^-1），0.4 μL 上下游引物（10 μmol · L^-1）；最佳选择性扩增反应体系为预扩增产物稀释120 倍的模板4.0 μL，其他同预扩增体系。最后，利用建立好的MSAP 体系进行6% 聚丙烯酰胺凝胶电泳验证并筛选出适于南瓜MSAP 分析的36 对引物，表明优化后的MSAP 体系多态性好，体系稳定，可重复，为后续进行南瓜MSAP 分析奠定了基础。     

玫瑰黄链霉菌对根结线虫的防效及对土壤微生物区系的影响

利用玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 菌株的固、液体发酵物防治设施番茄和黄瓜根结线虫,研究其对根结线虫的防效以及施用生防菌对土壤微生物区系的影响。结果表明：Men-myco-93-63 菌株固体发酵物1 V∶200 V对黄瓜和番茄根结线虫病的防效分别达到了65.62% 和57.69%;施用生防菌使得植株根际土壤中细菌数量增加了19.57%,放线菌数量增加了316.67%,真菌数量降低了28.57%,以上3 种可培养微生物总量由7.4×10⁶ cfu·g^-1增加到16.75×10⁶ cfu·g^-1,增加了126.35%。     

利用实时荧光PCR 方法检测香蕉软腐细菌

 由Dickeya spp.引起的香蕉细菌性软腐病是近年来在中国广东发生的一种严重危害香蕉的病 害,检测方法的建立和应用是防止病害传播和实时防治的重要手段。依据报道的Dickeya spp.通用引物, 建立了用于香蕉细菌性软腐病发病植株和带菌土壤检测的实时荧光PCR 方法。优化后的检测体系对香蕉 软腐细菌（XJ8-3-3）靶片段克隆质粒DNA 的检测灵敏度可达到2.4 × 10^-5 ng · μL^-1,对菌悬液的检测灵敏 度可达到4.0 × 10² cfu · mL^-1,而常规PCR 对其检测的灵敏度为2.4 × 10^-3 ng · μL^-1 和4.0 × 10⁴ cfu · mL^-1, 实时荧光PCR 的灵敏度比常规PCR 高100 倍。利用实时荧光PCR 能够快速的检出香蕉细菌性软腐病发 病植株和带菌土壤中的病原菌量,对梯度稀释的菌悬液接种的带菌土壤检测结果表明,可检测到病菌DNA 最低含量为0.35 pg · L^-1。该方法适用于对香蕉软腐病菌的检测和监控。     

梨叶片原生质体制备方法的建立及其基因瞬时转化试验

以‘新梨7号’梨叶片为材料，探究影响原生质体分离的主要因素，制备高产优质的叶肉原生质体，并进行基因瞬时转化和表达。将继代30 d的组培苗嫩叶在最佳酶解液(1.0%纤维素酶，0.1%果胶酶，0.4%离析酶，0.5 mol·L^-1甘露醇，20 mmol·L^-1 KCl,20 mmol·L^-1 MES,10 mmol·L^-1 CaCl2,1.0 g·L^-1 BSA)中酶解12 h，可制备出产量为1.09×10⁶ protopl·mL^-1、活力为90%的原生质体。将1～2μg·mL^-1 pROK2-GFP质粒DNA通过40%PEG-4000介导转化至上述原生质体中并培养12 h，可以观察到GFP绿色荧光信号，转化率可达40%。     

苦瓜新品种早翠的选育

早翠是以自交系翠绿作母本，以自交系宝来2 号作父本配制而成的油绿型苦瓜一代杂种。早中熟，从播种至始收春季71 d（天）、秋季53 d（天），延续采收期春季34 d（天）、秋季37 d（天）。果实长圆锥形，果皮春季浅绿色、秋季绿色，条瘤为主、间有圆瘤；瓜长约28 cm，横径约6 cm，肉厚约1 cm，单瓜质量370～380 g，VC 含量364.0 mg · kg^-1，可溶性固形物含量36.0 mg · g^-1，粗纤维含量8.0 mg · g^-1。一般每667 m² 产量2 200 kg 左右，商品瓜率93% 左右，适合华南地区春秋季栽培。     

生防菌FC21对番茄灰霉病的防效及其促生作用

以番茄、生防菌FC21、番茄灰霉病为试材,采用盆栽和大田试验法,研究生防菌FC21不同浓度发酵液对番茄种子发芽率、番茄植株生长、番茄叶片叶绿素含量和抗性相关酶活性的影响及对灰霉病的防效,以期为生防菌FC21防治番茄灰霉病的进一步开发利用提供参考依据。结果表明：与对照相比,生防菌FC21发酵液100倍稀释液对番茄种子的发芽率、芽长、根长和番茄植株的促进作用最好,发芽率93.18%、芽长2.87 cm、根长5.38 cm、株高21.32 cm、茎粗5.68 mm; 100倍稀释液处理的叶片叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量最高,分别为3.31、1.34、5.11 mg·g^-1;10倍稀释液处理的叶片超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性最高,分别为100.11 U·g^-1、128.36 U·g^-1·min^-1、13.96 U·g^-1·min^-1,且随着稀释倍数的增加逐渐减小;100倍稀释液(1×10⁶ cf...     

串番茄新品种红星302 的选育

红星302 是以抗病、耐低温弱光材料01-61 为母本,以01-23 为父本育成的串番茄一代杂种,无限生长类型,果实串收,果色亮红,果实椭圆形,酸甜适口,品质佳,VC 含量为364 mg · kg^-1,可滴定酸0.44%,可溶性糖4.25%,平均单果质量30.79 g,硬度为11.40×10⁵ Pa。单株结果数约为53个,产量4 900 kg ·（ 667 m²）^-1 左右,高抗蕨叶病毒病、青枯病,适宜河北地区冬季日光温室和早春保护地栽培。     

鲜干两用枸杞新品种‘宁杞 5 号’

 ‘宁杞5号’枸杞新优良种是由‘宁杞1号’生产园中发现的雄性不育植株（YX-1）经单株无性扩繁育成的。它具有生长旺盛、成枝力强、树体成形快,果实成熟期显著提前,结果性状好等优良特性。鲜果平均单果质量1.1 g,最大单果质量3.2 g。果实平均纵径2.54 cm,横径1.74 cm,果肉厚0.16 cm,内含种子15 ~ 40粒。干果含总糖560 mg · g^-1,枸杞多糖34.9 mg · g^-1,类胡萝卜素1.20 g · kg^-1,甜菜碱9.8 mg · g^-1。鲜果粒大,肉厚,果形优美,口感甘甜但不失枸杞特有的药香味,可鲜干两用。     

生防菌+恶霉灵最优组合的筛选及对苦瓜枯萎病的防治效果研究

苦瓜枯萎病是由尖孢镰孢菌苦瓜专化型（Fusarium oxysporum f. sp. momordicae）侵染引起的一种土传病害，目前市场上缺乏防治效果较好的农药或生防菌剂。为了更好地防治苦瓜枯萎病，通过盆栽试验筛选出绿针假单胞菌（Pseudomonas chlororaphis）G5 与恶霉灵复配施用的最优组合，并在苦瓜枯萎病发病样地对盆栽试验筛选出的最优组合进行防效验证。试验结果表明：菌药组合B+0.75Hym（1×10⁹ cfu · mL^-1 G5 菌悬液+187.5 mg · L-¹ 恶霉灵）处理对盆栽苦瓜枯萎病的防病效果为81.60%，明显高于其他处理；同时该组合对苦瓜幼苗的促生作用最为明显。接种苦瓜枯萎病菌后，菌药组合B+0.75Hym的苦瓜叶片中PAL、PPO、POD 防御酶活性较高。田间防效验证试验中苦瓜苗移栽30、60 d 后菌药组合B+0.75Hym 对苦瓜枯萎病的防治效果较高，分别达到了52.59%、32.13%，且苦瓜产量也高于其他处理。表明盆栽试验筛选出的菌药最优组合B+0.75Hym 不仅能够降低农药的使用量，而且能够有效防治苦瓜枯萎病，提高苦瓜产量，有一定的生产实用价值。     

马铃薯真菌病害拮抗菌株鉴定及初步应用

针对马铃薯真菌病害发生严重、多种病害混合发生、缺乏安全有效防治方法的问题，对前期筛选出的高效拮抗 菌株BA-26 进行分类鉴定，研究其胞外代谢产物的稳定性，明确防病促生作用。通过形态特征、生理生化特性鉴定以及 16S rDNA 序列分析，BA-26 菌株为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens），该菌株对8 种马铃薯病原真菌均表现出 较强的拮抗作用，对茄链格孢菌（Alternaria solani）、茄病镰刀菌（Fusarium solani）、燕麦镰刀菌（Fusarium avenaceum） 的抑菌率大于80%；胞外代谢产物经100 ℃处理30 min、紫外照射8 h、pH 2～10 酸碱处理、蛋白酶处理1 h 后，相对抑菌 率均维持在80% 以上；室内抑菌活性测定结果表明BA-26 滤液对茄病镰刀菌的抑制率为91.3%；盆栽试验中，每盆施用 20 mL 浓度为4.0×10⁹ cfu · mL^-1 的BA-26 发酵液使马铃薯根长、须根数、株高、叶片中叶绿素含量分别显著增加32.07%、 111.94%、48.0%、19.6%。表明解淀粉芽孢杆菌BA-26 对马铃薯真菌病害抑菌谱宽，胞外代谢产物稳定性强，有较强的防病 促生作用，具有开发为马铃薯专用生防菌剂的潜力。     

促植物生长根际细菌HG28-5对黄瓜苗期生长及根际土壤微生态的影响

为研究促植物生长根际细菌HG28-5对黄瓜生长发育和根际土壤微生态的影响,采用HG28-5菌悬液进行黄瓜浸种处理后播种到穴盘,调查出苗和苗期生育指标,确认其对黄瓜的促生作用;测定黄瓜苗期根际土壤酶活性、速效氮磷钾和微生物种群数量,了解HG28-5对黄瓜苗期根际土壤微生态的影响;并检测HG28-5在黄瓜苗期植株根部和根际土壤的定殖密度。结果表明,HG28-5浸种处理能显著提高黄瓜的出苗势、出苗指数,提高出苗整齐度;显著增加苗期黄瓜株高、叶片数、根长、地上部和根鲜质量,显著提高根系活力;显著提高黄瓜苗期根际土壤脲酶、磷酸酶和蔗糖酶的活性,显著增加根际土壤速效磷的含量;显著增加黄瓜苗期根际土壤细菌和放线菌的数量,显著减少根际土壤真菌数量;另外,HG28-5在黄瓜根际具有良好的定殖能力,播种后第30天时,在黄瓜根系和根际土壤中的定殖密度分别为9.20×10~5cfu·g~(-1)和5.90×10~5cfu·g~(-1)。     

普通白菜1，5- 二磷酸核酮糖羧化/ 加氧酶小亚基基因BcrbcS 的克隆及表达分析

利用RACE 技术,从普通白菜抗霜霉病品种苏州青叶片克隆到1,5- 二磷酸核酮糖羧化/ 加氧酶小亚基（ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit,BcrbcS）基因的全长cDNA 序列。采用qRT-PCR 分析该基因在普通白菜不 同组织的表达模式。利用SDS-PAGE 技术分析了该基因的原核表达特征。序列分析结果表明,BcrbcS 基因的cDNA 序列全 长为733 bp,其中开放阅读框长度为543 bp,共编码181 个氨基酸,分子质量为20.3×10³ Da,理论等电点为8.23。氨基酸 同源系统进化分析表明,普通白菜BcrbcS 基因与同科植物的进化关系相近。实时定量分析结果表明,BcrbcS 基因在普通白 菜叶中表达最强;在SA 和NaCl 处理下,BcrbcS 基因表达量均在处理24 h 后达到峰值。原核表达载体经IPTG 诱导表达出分 子质量约为20×10³ Da 的融合蛋白。     

食用百合试管苗原生质体制备条件的优化

以龙牙百合试管再生苗小鳞茎为试材,利用正交试验优化原生质体制备参数,并探讨酶解振荡速度、酶解时间、原生质体收获时离心速度和原生质体纯化媒介蔗糖浓度等对原生质体产量的影响。结果表明:1.0%纤维素酶、1.0%果胶酶酶解继代培养40d的试管再生苗鳞茎3h,酶解时振荡速度50r·min-1,收获原生质体时离心条件为700r·min-1、6min,获取的原生质体最后用25%蔗糖纯化的组合条件最佳,1g鳞茎能获得6.60×106个·m L-1活原生质体。