车轮梅茎段高效再生体系的建立

 以车轮梅 (Rhaphiolepis indica L.)茎段为外植体。探讨基本培养基种类、植物生长调节剂组合、蔗糖浓度和AgNO3等因素对茎段器官发生和植株再生的影响。结果表明：MS+6-BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.5 mg·L^-1 + AgNO3 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L^-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,不定芽分化率达90%以上,平均每外植体分化不定芽数达5.38个。不定芽可在1/2MS培养基中有效伸长,适宜生根培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L^-1,生根率达到100%。     

芜菁高频率再生体系的建立及优化

以3个品种芜菁的带柄子叶和胚轴为外植体,采用苯基噻二唑基脲（thidiazuron,TDZ）配合NAA以及BA配合NAA两种组合研究了适于芜菁离体再生的外植体类型和激素组合。发现带柄子叶为外植体,TDZ 7.0 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1的组合对不定芽分化最为有利。以此离体再生体系为基础,针对AgNO3浓度、苗龄、2,4-D预培养时间3个因素进行优化,得到了芜菁高频率离体再生体系。结果表明：采用5 d苗龄的带柄子叶作为外植体,在含有2,4-D 1.0 mg·L^-1的MS培养基上预培养2 d,添加TDZ 7.0 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1 + AgNO3 5.0 mg·L^-1的MS培养基为分化培养基对芜菁离体再生最为有利。依品种不同,最高分化率可以达到90%左右。分化后得到的不定芽在IBA 0.1 mg·L^-1的MS培养基上可以100%生根,移植成活率达95%。     

同源四倍体青花菜离体再生及其倍性鉴定

以同源四倍体青花菜带柄子叶为外植体,研究其离体再生体系。结果表明： 10 d苗龄外植体在MS + 0.05 mg·L^-1 NAA + 3.0 mg·L^-1 6-BA+0.8% 琼脂 + 3% 蔗糖培养基上不定芽的再生频率最高为63.3％;继代培养(MS + 0.04 mg·L^-1 NAA + 4.0 mg·L^-1 6-BA + 0.8% 琼脂 + 3% 蔗糖)增殖系数为6,诱导(1/2MS + 0.1 mg·L^-1 NAA + 0.7% 琼脂 + 3% 蔗糖)生根率100％,移栽成活率90％。流式细胞技术分析及染色体计数鉴定结果表明,再生植株的DNA相对含量为二倍体的2 倍,染色体数为2n=4x=36。     

辣椒离体植株再生及其变异的SSR检测

采用6个不同基因型辣椒（Capsicum annuum L.）的子叶、下胚轴、去除生长点并带下胚轴和各切去一半的两片子叶、去除生长点并带下胚轴和半片子叶为外植体,分别培养在附加不同激素和 AgNO₃ 的MB₅和MS培养基上,研究不同基因型、外植体、激素配比和AgNO₃等对外植体不定芽诱导和芽伸长的影响。结果表明,不定芽诱导以MB₅+2.0 mg·L^-1 TDZ+1.0 mg·L^-1 IAA+4 mg·L^-1 AgNO₃培养基最佳,诱导率最高可达100 %。而芽伸长的最佳培养基为MB₅+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 IAA+5.0 mg·L^-1 AgNO₃+2.0 mg·L^-1 GA₃,最高伸长率可达87.5 %。生根培养基为MS+0.2 mg·L^-1 IAA+0.1 mg·L^-1 NAA,生根率均达100 %。不同的外植体类型具有不同的不定芽诱导和芽伸长的能力,以去除生长点并带下胚轴和各切除一半的两片子叶作外植体时的诱导效果最好。用50对SSR引物检测再生植株,其中86株伏地尖的再生植株和对照植株间均没有扩增出差异条带,而茄门再生植株的SSR检测结果有12对引物表现多样性。     

紫叶稠李叶片离体培养再生植株

以紫叶稠李为试材,采用组织培养方法,研究不同激素对其试管苗不定芽诱导、不定芽生根及成苗影响。结果表明:叶片切块可诱导产生大量的不定芽,MS附加0.5mg/L BA和0.01mg/L NAA的培养基不定芽诱导率为50.1%;利用植物激素0.5mg/L BA,0.5mg/LNAA,0.5mg/L KT和0.2mg/L IBA的组合,不定芽可多次继代培养增殖;不定芽在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上生根,生根率为67%。该试验结果说明,紫叶稠李试管苗叶片可作为外植体离体培养获得再生植株,BA是主要的调控植物激素,IBA对生根有一定促进作用。     

余甘子下胚轴离体再生体系的优化

 以余甘子( Phyllanthus emblica L. ) 下胚轴为外植体, 通过器官发生途径诱导形成不定芽, 探讨影响下胚轴器官发生和植株再生的因素, 建立了下胚轴高效再生体系。结果表明: 附加AgNO₃ 1 mg·L^-1和蔗糖40 g·L^-1的1 /2MS培养基最适合不定芽的分化; 下胚轴不同部位不定芽再生能力由强到弱表现为:形态学上部>中部>下部; 前期暗培养有利于下胚轴不定芽的形成, 暗处理14 d效果最好。通过以上优化措施可以使不定芽再生率达100% , 平均每外植体不定芽数11.7 个。不定芽较适生根培养基为胺鲜酯(DA26) 3 mg·L^-1 +复硝酚钠(CSN) 3 mg·L^-1 , 生根率达到62.8%。     

多裂叶荆芥离体再生体系的建立

以多裂叶荆芥无菌幼苗根、茎段、叶片等为外植体,进行不定芽离体再生,建立了多裂叶荆芥离体快速繁殖体系,研究了不同外植体和附加不同外源激素配比对不定芽离体再生的影响。结果表明:多裂叶荆芥离体再生的最佳外植体为带有叶腋的茎段,诱导不定芽再生的适宜培养基为MS+0.2mg/L NAA+1.0mg/L TDZ,每个外植体产生不定芽数平均为18个;不定芽增殖培养每4周为1个周期,理论年繁殖系数可达1×1812;当不定芽生长至3~4cm时移入生根培养基诱导生根;适宜的生根培养基为MS+0.2mg/L NAA,移栽成活率为53.85%。     

桂花子叶切块培养再生苗的研究

以桂花品种大花金桂(Osmanthus fragrans‘Dahuajingui’)的子叶切块为外植体,研究了不同激素水平对桂花子叶切块愈伤组织诱导、芽分化和试管苗生根的影响。结果表明:诱导出的愈伤组织在分化培养基(1/2MS+0.5mg/L TDZ+0.1mg/L NAA)上继代培养9次后分化不定芽,不定芽分化率为22.86%,平均再生苗数为3.22,继代培养10次后,不定芽分化率高达36%。进行生根试验,确定桂花最佳生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA+2.0mg/L NAA,生根率达到70%。     

金樱子(Rosa laevigata Michx.)叶片直接再生不定芽体系的建立

以金樱子组培苗的划伤叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂配比组合、暗培养时间、添加物L-脯氨酸、叶片不同部位对不定芽直接再生的影响。结果表明:当TDZ浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.000 5 mg·L^-1时,不定芽直接发生率最高,为9.5%;不同暗培养时间对不定芽直接诱导具有一定影响,暗培养时间为10 d时不定芽的直接发生率最高,为10.5%;添加了不同浓度的L-脯氨酸后不定芽的诱导率不增反降,所以以不添加L-脯氨酸为宜;叶片不同部位的再生率比较中,仅带叶叶柄可直接诱导出不定芽。综上所述,叶片直接再生不定芽的诱导方法是,以金樱子带叶叶柄为外植体,在直接诱导培养基上1/2MS+TDA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.000 5 mg·L^-1+CH 100 mg·L^-1+AgNO3 10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.5 g·L^-1,暗培养10 d后,转至正常光周期下培养3周左右,不定芽诱导率最高,为10.5%。所得不定芽在增殖培养基MS+NAA 0.1 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1生长3周后,增殖系数可达到3.5左右;将丛生芽切割成单芽后转入不含任何激素的MS培养基壮苗3周,幼苗可长高至3~5 cm;再转入MS+NAA 0.1 mg·L^-1培养基中生根,1个月后生根率达95%。     

有斑百合鳞片离体培养研究

以有斑百合鳞片为外植体,研究不同激素配比对不定芽诱导、增殖、生根的影响及不同基质对试管苗移栽成活的影响。结果表明:鳞片诱导不定芽的最佳培养基为MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率达80.0%;最佳继代培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L,增殖系数达2.83;最佳生根培养基为MS+IBA 0.5 mg/L,生根率达100.0%;试管苗最适扦插基质为珍珠岩,扦插成活率达96.7%。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

桂花离体培养与快速繁殖技术的初步研究

 以桂花(Osmanthus fragrans Lour. ) 胚和新梢茎段为外植体进行了离体培养与快速繁殖研究,筛选出最适培养基——— (1) 胚萌发: MS +BA 1.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 2) 新梢茎段启动培养: LMc +KT 8.00 mg·L ^{- 1}+NAA 0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; ( 3) 继代增殖培养: LMc + TDZ 0.50 mg·L ^{- 1} +NAA0.10 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%; (4) 生根培养: 1/2MS +NAA 2.00 mg·L ^{- 1} +蔗糖3%。采用腐殖质土为栽培基质, 移栽成活率可达80%以上。     

云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

红千层的离体培养及快速繁殖

 研究了红千层离体快繁的若干影响因素。结果表明: 叶片在MS + 6-BA 115 mg·L ^{- 1}+NAA015 mg·L ^{- 1}中的愈伤组织诱导率43% , 并可直接从愈伤组织表面分化出不定芽, 分化率为69.2%; 腋芽启动培养基为MS + 6-BA 1～1.5 mg·L ^{- 1} + NAA 0.5 mg·L ^{- 1} , 萌动率为77%; 继代和增殖培养基为MS + 6-BA 1 mg·L ^{- 1} +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 平均增殖系数为16.7; 生根壮苗培养基为1 /2MS +NAA 0.25 mg·L ^{- 1} , 生根率96.1%; 试管苗生根培养30～35 d移栽, 成活率最高可达90%以上。     

梨矮化中间砧S2 、S5 和PDR54的离体培养研究

 以梨矮化中间砧S2、S5和PDR54试管苗为试材, 探讨了培养基和植物生长调节剂对梨矮化中间砧试管苗增殖和生根的效应。其结果表明: MS培养基较QL、AS和WPM培养基更有利于中间砧茎的增殖, 2～3 mg·L ^{- 1} 6-BA、0.1～0.2 mg·L ^{- 1} IBA和1～2 mg·L ^{- 1} GA₃组合能有效促进S2、S5和PDR54试管苗的增殖, 其增殖倍数达3.71～5.83。综合各品种增殖倍数、茎高度以及茎质量等指标表明, MS + 3.0 mg·L ^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 IBA + 2.0 mg·L^-1 GA₃是S2的最佳增殖培养基; MS + 2.0 mg·L^-1 6-BA + 0.1 mg·L^-1 IBA + 1.0 mg·L^-1 GA₃是S5和PDR54增殖的最佳培养基。同时, S2、S5和PDR54增殖的试管苗在不同的生根条件下分别获得了67%、50%和86%的生根率。     

枣离体叶片高效再生植株的研究

 以‘黄骅冬枣’组培苗叶片为试材, 研究了叶片幼嫩程度、叶片来源、组培苗状态以及植物生长调节剂等对离体叶片诱导不定芽再生的影响, 并获得了完整的再生植株。结果表明, 以未生根组培苗中上部叶片再生效果较好; TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于BA; 离体叶片在MS + TDZ 1.0 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中诱导培养28 d后, 转入MS + IBA 0.1 mg·L ^{- 1} + GA₃ 0.05 mg·L ^{- 1}培养基中二次培养, 叶片再生效果最好, 再生率可达92.45%。将叶片再生植株转入MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} + KT0.5 mg·L ^{- 1} + IBA 0.1 mg·L ^{- 1}培养基中继代增殖培养, 增殖系数达3.64。以1 /2MS + IAA 1.0 mg·L ^{- 1}培养基诱导生根, 生根率87.1%。生根苗大田移栽成活率达到57%。