侧耳属种间原生质体融合杂种选育的研究

用~(60)Co-γ射线辐射诱变佛罗里达侧耳孢子,得到抗NaN_3药物的突变体。突变体的原生质体经0.83%碘乙酰胺灭活处理,与姬菇单核菌丝释放的原生质体进行融合,然后涂布在1×10~(-6)NaN_3药物选择再生培养基上,得到一个融合子菌落。经酯酶同工酶分析表明:融合子的12条区带中,与双亲共有的区带5条,与佛罗里达侧耳亲本同者2条,与姬菇亲本同者3条,新菌株独具的区带2条,证实为双亲融合杂种。     

平菇和香菇原生质体融合育种研究简报

平菇和香菇原生质体融合育种研究简报李成一，王秉峰，卢洪英，路等学（甘肃省科学院生物研究所兰州７３００００）平菇、香菇皆属四极性异宗结合的食用菌类，其异核双核体菌丝（简称异核体）均具“锁状联合（Ｃｌａｍｐｃｏｒｍｅｃｔｉｏｎ）”结构。异核体菌丝经酶解后...     

松茸与香菇原生质体融合子生物学特性的研究

以获得利于半人工或人工栽培优良松茸菌株为目的，利用松茸与香菇分离纯化的再生原生质体[1]对潮霉素自然抗药性的差异，结合原生质体灭活为融合子筛选的依据，在PEG、Ca^2 系统中以30％PEG4000、30℃处理25分钟，诱导松茸与香菇两食用菌原生质体融合，获融合子5株(F1-5)[2]，对融合子进行了部分生物学特性的分析检测。     

侧耳与香菇属间原生质体融合育种研究

侧耳、香菇皆属四极性异宗结合食用菌,其异核双核菌丝体均具“锁状联合”形态标记。本研究以PEG-Ca~(++)为诱导剂,以紫孢侧耳和香菇Cr-20的原生质体再生单核体为亲株,进行侧耳与香菇的属间原生质体融合,结果从1022个融合再生体中镜检出16个具锁状联合遗传标记的融合株。对1～4号融合株与亲株进行的拮抗反应、双单交配、过氧化物同功酶谱分析及菇形特征对比皆证明融合株确具双亲杂合体特征。出菇验证表明,融合株菌丝体长速均快于亲株,出菇期早,菇产量近于或高于亲株侧耳的水平。     

原生质体技术在食用菌育种中的应用研究

原生质体技术在食用菌育种中的应用研究戴秉丽（农学农机系农业微生物室１３００６２）（二）食用菌原生质体变系统另一类原生质体研究是与常规诱变手段相结合的，统称为食用菌原生质体诱变系统。一些研究应用该系统产生营养缺陷型突变株，这类工作大多旨在为原生质体融合...     

平菇与香菇融合子的综合鉴定

原生质体融合研究,属于细胞工程重大理论研究课题。国内外学者都想利用生物工程的理论和技术,来探讨原生质体融合后基因重组遗传规律,在理论上和学术上均具有重大意义。在实践上也为克服远缘杂交不亲和性,为选育新品种提供一条可能的途径。 众所周知,平菇具有生长周期短,易栽培,产量高等特点,但其品质较差,香菇味道鲜美,营养丰富,经济价值高,但香菇生长周期长,产量低,抗逆性差,北方很少栽培。长期以来人们就设想把两者的优点结合起来,但因亲缘关系较远,靠常规杂交不可能实现。 本项研究以平菇和香菇为材料,进行两者原生质体融合遗传规律研究。首先分离并纯化平菇和香菇单孢系(单孢克隆成一个无性系),测定单孢系基因型,以锁状联合作为筛选融合子的细胞标记。用溶壁酶将平菇和香菇单孢系制备出原生质体,而后以PEG作为融合剂使两者异源原生质体融合,利用基因互补原理和细胞标记筛选出融合子,进一步将融合于材料培养出子实体。现将融合子综合分析和鉴定如下: 1.观察统计融合子形成的子实体,其菌伞的形态、颜色、生长习性具有双亲性状。 2.对融合子的氨基酸含量测定,其氨基酸含量有     

侧耳属种间原生质体融合的研究

美味侧耳A38和佛罗里达侧耳A47是侧耳属的两个不同的种,为了使两者的优良性状结合起来,我们进行了原生质体融合育种的研究。笔者利用A38抗多菌灵菌株与A47耐42℃高温菌株作为遗传标记菌株,用30％聚乙二醇诱导融合成功,并筛选出了融合子。这样的融合子既耐高温,又抗多菌灵,子实体有黑白相间的花纹,形态介于两亲本之间。出菇温度35℃左右,生物学效率可达300％以上。现将研究结果报道如下:     

平菇与香菇融合子后代子实体的细胞学研究

平菇(Pleurotus sapidus)、香菇(Lentinus edodes)及其融合子后代子实体的细胞学观察表明:平菇、香菇的担子细胞及核分裂行为均属正常,而融合子后代的担子细胞发生异常,其担子细胞顶端出现粗大伸长的担子梗,其中有的形成一个孢子。处于终变期的染色体收缩成小球状,其数目多于双亲染色体,分裂后期出现落后染色体,融合子后代子实体不形成孢子印,镜检发现有少数孢子。融合子所产生的孢子与双亲的孢子相比较,在形态特征及大小上均有较显著的差异。     

侧耳与香菇原生质体无性再生株性状研究

本研究以11个菌株为材料,对原生质体无性再生株的单、双核比例、产菇优势及出菇性状进行了研究。结果表明:（1）侧耳、香菇无性再生株以“锁状联合”的有无可区分为无锁状联合的单核株和有锁状联合的双核株,但其比例因菌株不同而迥异;（2）同一菌株的单、双核株的菌丝生长速度、出菇期及菇产量等性状有较大差异,双核株多优于单核株;但原生质体双核株与其亲株双核株相比,优劣因菌株而异;（3）无性单核株是进行细胞融合或常规杂交育种的理想材料,而原生质体双核株可用于选出优质高产菌株。     

香菇DNA导入平菇原生质体及转化子鉴定研究

采用氯化苄方法提取香菇总ＤＮＡ，用Ｇｅｎｅ Ｐｕｌｓｅｒ Ⅱ电击系统将香菇ＤＮＡ导入平菇单核原生质体，通过香菇ＤＮＡ的导入，利用基因互补原理获得了能出菇的转化子１－１和１３－４８，并对转化子进行了拮抗试验、菌丝生长速度分析，酯酶同工酶分析和ＲＡＰＤ分析。     

糙皮侧耳原生质体制备与再生条件

原生质体制备是通过体杂交或基因转导进行种质改良的基础。探讨了糙皮侧耳原生质体制备及再生条件。用ＭＹＧ培养菌丝，以甘露醇为稳渗剂，用１．５％溶壁酶Ｌｙｗａｌｌｚｙｍｅ进行酶解脱壁，在菌龄７天，酶液ｐＨＷＦＨＧ４．５，温度２８℃，酶解４ｈｒ的条件下原生质体产量最高（２０×１０＾６／ｍｌ，０．１ｇ湿菌丝），其再生率大于８％，菌丝培养前对接种物进行予切碎处理可进一步使产量提高约２倍，而再生率不并显著下降。     

食用菌母种培养基的试剂化制备及应用

研究了将多种农产品及农副产品的营养物质提取出来,制备成营养浸膏技术;并探讨了这结营养浸膏作为主要营养物质配制成的母种培养基在平菇、香菇、木耳菌丝体培养中的应用价值。制备的营养浸膏可以作为化学试剂保存备用。     

金针菇与凤尾菇科间原生质体融合研究

金针菇与凤尾菇皆属四极生异宗结合食用菌,其双核异核体菌株都具有锁关联合遗传标记本研究以金针菇和凤尾菇的双核异核菌株为亲本,将热灭活的凤尾菇原生质体,以ＰＥＧ为融合剂,在高下,高ＰＨ值条件下,与金针菇原生质体融合,结果从１３２９个再生菌株中选择出６株双亲细胞质和细胞核都融合的无锁状联合菌株,经融合核分裂技术处理后,融合核分裂成为具有锁状联合的双核菌株。     

荧光标记紫孢侧耳和糙皮侧耳原生质体融合研究

异硫氰酸荧光素(FITC)标记的紫孢侧耳单核原生质体与未标记的糙皮侧耳单核原生质体经PEG融合后,在倒置显微镜下,用显微操纵仪直接吸取一方带有荧光另一方不带荧光的原生质体对,经培养后,根据“锁状联合”这一形态特征挑选出融合子,融合率为5.2×10~(-3).进一步鉴定结果表明,融合菌株的酯酶同工酶谱发生了明显的变化,其生物量和生长速度有不同程度的提高,子实体形态也与双亲有所不同.     

不同温度对不同含水量食用菌贮藏效果的影响

通过将香菇、草菇和鸡腿菇分别进行不同程度脱水处理,测定了鲜菇及不同含水量的子实体分别在4℃、室温(15℃)及恒温(20℃、25℃或30℃)条件下的贮藏效果。结果表明,不同种类食用菌的贮藏效果存在显著差异。温度越低,各不同含水量香菇的贮藏时间越长;鸡腿菇除鲜菇外多数含水量在4℃低温贮藏没有明显效果。香菇在4℃条件下,含水量达到40%及以下,能长期贮存,而在室温(15℃左右)及恒温20℃条件下,含水量降到30%及以下才能长期贮存;草菇含水量降到40%时,室温下能延长货架期1d,在25℃条件下能延长货架期2d,含水量降到30%及以下在3个温度下均能长期贮存;鸡腿菇在供试3个温度条件下,含水量降到20%及以下才能长期贮存。     

灵芝与糙皮侧耳原生质体融合子生物学特性的初步研究

以获得弱木栓质化灵芝菌株为目的，利用液体培养4d的灵芝菌丝体和液体培养3d的糙皮侧耳菌丝体为材料，在PEG-Ca^2 系统中诱导原生质体融合，获得初筛融合子19株(F1～F19)。其中，融合子F8的菌丝生长速度和生物量均接近糙皮侧耳，显微镜下，其菌丝体与灵芝和糙皮侧耳的均不相同，木栓质化程度大于糙皮侧耳，小于灵芝。