大豆（Glycinemax）原生质体培养与分化

试验56份大豆栽培品种。采用幼荚子叶、无菌苗下胚轴和子叶、幼胚悬浮培养细胞作原生质体游离材料。苗期子叶和下胚轴用酶液:1％Hemicellulase HP150,0.4％Cellulase R—10,0.1％Pectolyase Y—23;幼荚子叶用1％Cellulasc R—10,1％Hemicellulase HP150,0.5％Pectinase;悬浮培养细胞用1％Cellulase R—10,0.2％Pectolyase Y—23,2％Driselase游离,4种材料均获得大量原生质体。原生质体培养基均为K8P,分化培养基为MS、B5,培养基中的激素试用了2.4—D,2.4.5—T,NAAIAA、ZT、KT、BA、zip和毒莠定等不同配合和浓度。结果有12份品种的幼荚子叶。下胚轴和苗期子叶的原生质体形成愈伤组织、有不同类型的根分化和绿点出现,分化培养基B5+0.1-0.2mg/l 2.4.5-T+1-1.5mg/l·BA较好。     

沿海甜菜(Beta maritima L.)高频率丛生芽诱导和植株再生

选用沿海甜菜(Beta maritima L．)幼嫩花序项端为试验材料，建立了一个快速高效的离体培养体系。在附加1mg／L 6-BA的MS培养基上培养6周可诱导出丛生芽，诱导率达90％左右。丛生芽在适宜培养基上可快速扩增和长期继代培养。在附加1mg／L NAA的MS培养基上诱导小苗生根，生根率可达90％。再生植株经炼苗后移栽成活率为70％-80％。     

甜菜原生质体培养再生植株的研究

以栽培甜菜的未授精胚珠或胚为外植体，在ＭＳ附加ＮＡＡ和ＢＡ的培养基上诱导愈伤组织，选择胚性愈伤组织进行继代培养，从该愈伤组织分离原生质体并以液体浅层法或半固体琼脂糖法培养在一系列培养基上，植板率为０．０１％～１．２％．再生愈伤组织形成后，转入固体培养基（ＭＳＢ）上培养，再转入分化培养基上分化出苗，分化率可达２．５％，由愈伤组织上切下分化苗在生根培养基上很容易诱导生根。     

橡胶树花药愈伤组织继代培养与胚状体发生能力研究

利用橡胶树花药愈伤组织进行继代培养与胚状体诱导,结果表明,在诱导愈伤组织、继代培养和分化胚状体中MS培养基稍优于改良MS培养基;以继代1代的愈伤组织胚状体的诱导率最高,分别达到70．8％和67．5％;在继代0代、2代和3代之间差异达到极显著,在继代4代时差异达到显著,其他继代次数之间差异不显著。在继代8代后,两种培养基的诱导率逐渐升高,分别达到44．6％和35．3％。     

甜菜未授粉胚珠培养技术研究

甜菜未授粉胚珠接种在附加不同生长素(IAA、2,4—D)、细胞分裂素(KT、6BA)或激素组合(6BA NAA和IAA KT)的MS、PGOB、1/2MS等培养基上,可成功诱导出胚状体,分化诱导形成单倍体植株,对其用0.1％～03％秋水仙碱溶液处理使染色体加倍,获得了高度纯合的二倍体株系。试验选配了110种诱导培养基、两种分化和3种生根培养基,选择了143种不同基因型材料.不同基因型材料在不同培养基上的诱导率各不相同.     

枇杷花药胚状体诱导条件的优化

以‘大五星’枇杷花药为外植体,研究小孢子发育时期、低温处理及植物生长调节剂对花药愈伤组织诱导及胚状体发生的影响。结果表明：枇杷小孢子发育时期与花蕾横径存在对应关系,横径为4.68～5.28 mm的枇杷花蕾处于单核靠边期,此时期的小孢子胚状体诱导率最高,为25.05％;经4 ℃低温处理2 d的花药愈伤组织诱导率最高,达69.93％;花药愈伤组织诱导的最适培养基是MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织诱导率为78.22％;枇杷花药愈伤组织诱导胚状体的最适培养基为MS+ZT 0.05 mg/L+NAA 0.01 mg/L+IBA 0.05 mg/L,胚状体诱导率为25.56％。     

甜菜基因型的筛选及胚性细胞系建立的研究

通过以甜菜未成熟胚为外植体诱导愈伤组织，再将产生的愈伤组织转移至分化培养基（ＭＳＢ培养基附加１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、３％蔗糖、８％琼脂）进行分化力测试实脸，筛选出两个再生能力强的基因型─８９３０、ＧＤ＿２．通过挑选淡黄色或灰白色、呈颗粒状的愈伤组织继代培养，经调节培养基的ＩＡＡ和ＮＡＡ的浓度，得到再生能力强的胚性愈伤组织，建立了胚性细胞无性系。     

甜菜低糖原因的研究——Ⅰ.土壤营养与甜菜糖氮代谢的关系

通过对低糖、中糖地块土壤的营养诊断和甜菜糖氮代谢对比研究,查明了甜菜低糖原因为:前茬0—2m土层残留大量氮素和K_2O/N比例失调,导致甜菜氮素代谢旺盛,块根游离氨基酸和色氨酸含量增加,糖代谢减弱,降低了块根于物质蔗糖含量。甜菜土壤营养诊断取样适宜深度为2m.     

显齿蛇葡萄（藤茶）愈伤组织培养的研究

以显齿蛇葡萄叶片、叶柄、茎段和茎尖作为外植体进行愈伤组织诱导与增殖,结果表明,叶片外植体明显优于其它材料,且以叶片正面向上培养为佳。经过单因素试验和正交试验,MS＋1．5mg／L6-BA＋0．15mg／LKT＋0．2mg／LNAA＋2mg/L2,4-D＋100ml／L椰子汁,光照强度250～350Lx,光照时间14h／d时,愈伤组织诱导率最高。     

咖啡叶片原生质体分离条件的研究

以中粒种咖啡（Coffea. canephora）叶片组织为材料,研究酶液组合、酶解时间、酶液渗透压及预处理措施对其原生质体分离效果的影响,以期确定能够酶解出高数量且高活力的原生质体的酶解条件。结果表明：获得有活力原生质体的最佳酶液组合为2％纤维素酶+0.5％果胶酶+0.3％离析酶,同时酶解时间为20 h、酶液渗透压即甘露醇浓度为0.7 mol/L,预处理措施为黑暗24 h的咖啡叶片组织得到8.1×105个/g、活力达到73％的原生质体。     

拮抗性大豆根瘤菌原生质体制备研究

选用具有拮抗作用的根瘤菌L396,对影响该菌原生质体制备的几个重要因素进行了研究。结果表明:制备原生质体的最佳菌龄为对数生长中期,培养液中加入0.5%青霉素可以促进原生质体的形成,在溶菌酶浓度1.5 mg.mL-1、酶解温度为35℃的情况下可以较快较好的产生原生质体,同时显微观察了原生质体的释放过程。     

施用ABT5号增产灵对甜菜农艺性状和内源激素含量的影响

在框栽和田间条件下研究了ABT5号增产灵浸种处理和叶喷处理对甜菜农艺性状及对甜菜叶片和根系内源激素含量变化的影响。结果表明,ABT5号处理明显增加根中赤毒素(GA_(1、3、4、7))、生长素(IAA)含量。明显增加根及叶中细胞分裂素(DHZR_S)含量,降低脱落酸(ABA)含量,导致刺激生长的激素(DHZR_S GA_(1、3、4、7) IAA)与抑制生长激素(ABA)的比例在根组织中表现出浸种处理>叶喷处理>CK的结果。这是ABT5号处理后甜菜块根增产的生理机制之一。本实验证实,ABT5号处理仅促进主根生长,不形成簇状叉根。浸种处理在框栽和田间试验中分别比对照增产12.58％和13.10％,叶喷处理比对照增产9.85％和10.67％,ABT5号处理对块根含糖率没有影响。     

玉米幼胚培养及植株再生的研究

以不同玉米自交系幼胚为外植体,研究不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导、6-BA浓度对愈伤组织分化和6-BA与NAA配合使用对试管苗生根的影响。结果表明:不同2,4-D浓度对愈伤组织诱导率影响差异不明显,但对胚性率诱导有明显影响,其诱导最佳培养基为MS+2,4-D 2 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+脯氨酸500 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+谷氨酰胺200 mg/L+PP₃₃₃ 2 mg/L;试管苗生根的最佳培养基是1/2 MS+6-BA0.5 mg/L+NAA2.0 mg/L+PP₃₃₃ 2.0 mg/L+活性炭0.2%。     

荔枝种内原生质体电融合参数研究

选择“桂味”和“妃子笑”两个荔枝(Litchi chinensis Sonn.)品种的花药胚性细胞悬浮系来源的原生质体作融合亲本,在优化电融合参数(排列电压5V,脉冲电压80V,脉冲持续时间45～65 μs,原生质体密度5.0×105～7.5×105个/mL,融合液Ca2+浓度0.2 mmol/L,甘露醇浓度10％～11％)条件下,可获得20％以上双元异核融合率.在亲本原生质体混合前,以0.02％中性红10 min染色“桂味”原生质体,有助于双元异核融合体的有效确认.