不同木腐菌菌株对松材线虫繁殖的影响

测试了松生拟层孔菌(Fomitopsis pinicola)、洁丽香菇(Lentinus lepideus)、桦褶孔菌(Lenzites betulina)、黑木耳(Auricularia auricular)、硫磺菌(Laetiporus sulphureus)、裂褶菌(Schizophyllum commune)、粗皮侧耳(Pleu-rotus ostreatus)、杂色云芝(Coriolus versicolor)、密粘褶菌(Gloeophyllum trabeum)、虎掌菌(Tremellodon gelatino-sum)、灵芝(Ganodermalucidum)、绣球菌(Sparassis crispa)和茯苓(Poriacocos)13种木腐菌的22个菌株对松材线虫繁殖的影响。结果表明,除裂褶菌以外,其他菌株都能抑制松材线虫的繁殖。松材线虫在松生拟层孔菌W10和W11菌株、硫磺菌5452和6600菌株、粗皮侧耳6221菌株、虎掌菌6320菌株、茯苓6284菌株和灵芝6501菌株菌落上完全不能存活。     

病木样本松材线虫DNA检测方法研究

松材线虫是我国禁止进境的检疫性有害生物,在形态学特征上和拟松材线虫很相似。为提高12I岸木材检疫中松材线虫鉴定速度和准确性,我们开展了从含线虫木样中直接检测松材线虫的初步研究。根据松材线虫和松树内其他寄生线虫核糖体DNA的ITS区序列差异,设计了松材线虫的特异性引物对BXF／BXR,并对7个松材线虫分离物、4个拟松材线虫分离物和1个待鉴定伞滑刃线虫分离物的基因组DNA进行PCR扩增,结果从所有松材线虫分离物中都扩增到长度约为580bp的特异性条带,而其他分离物没有扩增产物出现。采用CTAB法提取含虫病木样本总基因组DNA,用引物对BXF／BXR对不同稀释梯度的DNA样品进行扩增,当含虫木样总DNA被稀释到8倍以上时,可从DNA模板中扩增出特异性条带。特异性引物对BXF／BXR检测木样中松材线虫的灵敏度可达10条线虫／100mg木样。     

1株间座壳属真菌抗松材线虫的活性

筛选对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)有致死作用的内生真菌。从苦楝(Melia azedarach)健康组织(茎、叶、果实)中分离纯化内生真菌,菌株采用摇瓶培养,发酵液和菌丝体分别用乙酸乙酯萃取制备胞外和胞内代谢产物,采用浸渍法进行杀线虫活性筛选。共计分离纯化31株内生真菌,其中菌株J352-03的发酵液对松材线虫有显著的毒杀活性,在2 mg·mL^-1质量浓度下处理48 h,菌株J352-03胞内、胞外的次生代谢产物对松材线虫校正死亡率均达到100%,LC₅₀值分别为0.46 mg·mL^-1、0.42 mg·mL^-1;对松材线虫卵的孵化抑制率分别为66.54%、76.04%,松材线虫体内三磷酸腺苷酶(ATP酶)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性显著低于对照组。菌株J352-03经形态学与rDNA-ITS序列分析鉴定为间座壳属一未知种Diaporthe sp.。综上所述,菌株J352-03对松材线虫有良好的生防潜力,具有进一...     

马尾松松材线虫抗性候补木的选拔及评价研究

为了选拔马尾松松材线虫抗性候补木,安徽省松材线虫抗性育种中心于2003~2005年间开展了1次及2次接种检定。20032、004年对抗性候补木选拔母群体中培育的324个家系、约44 000株苗木进行了1次检定,平均生存率分别为20.8%、18.6%;2004、2005年对1次检定合格的298个家系8、035株苗木进行了2次检定,平均生存率分别为57.0%、92.6%。说明不同环境对检定结果有影响。应用2次检定合格的家系生存率来评价抗性强弱,区别出23个抗性强的家系,在抗性苗木生产之前,可以使用23个家系的原母树。     

松材线虫和拟松材线虫的PCR快速检测

利用PCR技术对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus与拟松材线虫B．mucronatus的rDNA的ITS1区和5．8S区核甘酸序列扩增．根据松材线虫与拟松材线虫的ITS1序列区别,分别设计出松材线虫和拟松材线虫的特异性引物,实现了单条活的或FG(φ为4％的甲醛)固定的松材线虫和拟松材线虫的快速检测．     

四川松材线虫与拟松材线虫的PCR-RFLP鉴别

应用PCR-RFLP技术对来自四川省8个地方的枯死松树样品中的伞滑刃属线虫(Bursaphelenchus)群体进行了分子鉴定。结果显示来自邻水、雅安的枯死松树样本中含有松材线虫(B.xylophilus),而来自大竹和遂宁的枯死松树样本中含有拟松材线虫(B.mucronatus)。其他伞滑刃属线虫包括莱鲁尔夫伞滑刃线虫(B.rainulf)、霍夫曼伞滑刃线虫(B.hofumanni)、泰国伞滑刃线虫(B.thailandae)、变异伞滑刃线虫(B.aberrans)。本研究中选用的4种限制性内切酶(DraⅠ、SalⅠ、HhaⅠ、AluⅠ)除SalⅠ外均可对所鉴定的这6种伞滑刃属线虫产生特异性的酶切位点,从而可均有效地鉴别出松材线虫、拟松材线虫和其他4种伞滑刃属线虫,其结果可为今后这几种伞滑刃属线虫的分子鉴定提供一定的参照。     

松材线虫的人工培养研究

本研究用松木屑和真菌培养松材线虫，结果表明：无菌的松木屑不能生长和繁殖线虫，有菌的才能繁殖线虫，其效果随松木屑来源（松树品种）的不同而异，不同的真菌培养线虫的效果有较大差异．长喙壳菌（Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓｓｐ．）、毛壳菌（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｓｐ．）和镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．）的效果明显优于常用的灰葡萄孢菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）和盘多毛孢菌（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａｓｐ．），可选用于培养松材线虫，在真菌菌落上，不同的接种虫量以及不同的温度对松材线虫的培养均有一定的影响．     

杀线虫真菌Sr18发酵液对松材线虫超微结构的影响

Sr18真菌是一株自主分离获得的具有广谱杀线虫活性的生防菌。为探明该菌的杀线虫作用机理,以松材线虫为靶标,借助场发射高分辨扫描电镜及透射电镜,对1/2浓度的Sr18发酵液小分子活性组分处理后的线虫及未处理的正常线虫进行了超微观察。高分辨率扫描电镜观察结果表明,小分子物质对松材线虫头部、体壁和尾部均有损伤,并观察到内容物外溢的现象。透射电镜观察结果显示,线虫表皮和体腔分离,细胞核受损严重,形状不规则,粗面内质网核糖体聚集,线粒体空泡样变,肌纤维受损。这些现象从形态结构角度证实了该发酵液小分子活性成分对线虫的损伤是整体性的毒杀作用,排除了表面触杀的机制。这为进一步揭示Sr18的杀线虫机理以及线虫生防制剂的开发提供了重要理论依据。      

具杀松材线虫活性的金线莲内生真菌的筛选和鉴定

采用浸渍法对金线莲内生真菌的培养滤液进行杀线活性及其稳定性测定,筛选高效杀线菌株,并 通过形态学和分子系统学对活性菌株进行鉴定。结果表明,从金线莲中分离获得内生真菌139 株,杀线活性大于 50% 的有21 株,其中菌株XX34、XX49 的培养滤液对松材线虫处理24 h 杀线虫率达100%,且这两株菌株的杀线 遗传稳定性较好。经鉴定,XX34、XX49 分别为阿姆斯特丹散囊菌（Eurotium amstelodami）和竹生炭角菌（Xylaria bambusicola）。高效杀线活性的植物内生真菌筛选在松材线虫生物防治方面具有较大的开发和应用价值。     

松材线虫的人工培养研究

本研究用松木屑和真菌培养松材线虫,结果表明：无菌的松木屑不能生长和繁殖线虫,有菌的才能繁殖线虫,其效果随松木屑来源（松树品种）的不同而异,不同的真菌培养线虫的效果有较大差异．长喙壳菌（Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓｓｐ．）、毛壳菌（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍｓｐ．）和镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．）的效果明显优于常用的灰葡萄孢菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）和盘多毛孢菌（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａｓｐ．）,可选用于培养松材线虫,在真菌菌落上,不同的接种虫量以及不同的温度对松材线虫的培养均有一定的影响．     

松材线虫病的病理学研究进展

综述了松材线虫病早期症状的研究进展，同时，对线虫侵入后病树的生理学、组织学和病理学变化过程进行了概括。     

松材线虫入侵对不同类型松林群落演替的影响

对马尾松和黑松纯林及混交林不同类型森林生态系统的植物分层情况、种类丰富度、个体数量、多样性指数、均匀度指数、生态优势度及重要值进行了调查和分析.结果表明:内陆型生境中,无论是马尾松纯林还是马尾松混交林群落,被松材线虫危害后,乔木层植物的种类及植物多样性均有较大程度的增加,原有森林群落并未向灌丛方向退化,反而比危害前生物多样性指数有较大的增加.危害后的黑松混交林群落比纯林的生物多样性指数大,种类丰富度及个体数量均增大.无论是纯林还是混交林,马尾松林乔木层植物的种类丰富度、生物多样性均大于黑松林,种类组成及空间分布更趋合理.     

松材线虫病防治中及时清理死亡松树和诱杀松褐天牛的必要性研究

松材线虫病是世界上最具危险性的检疫性植物病害,是松林的毁灭性病害,重庆自2001年发生松材线虫病以来,经过多年的防治,未能控制松材线虫病的扩散蔓延,其主要原因是地方上没有充分认识到严格执行松材线虫病防治措施的必要性。从科学研究的角度,分析严格按疫情除治要求开展松材线虫病病树、死树及时清理和诱杀松褐天牛的重要性研究,以期促进松材线虫病的防控。     

环氧乙烷对松木片中松材线虫的熏蒸效果

在18℃、60%-70%RH的室内条件下,研究了不同剂量环氧乙烷(EO)对松木片中松材线虫的熏蒸效果.结果表明:EO对松材线虫具有一定的熏杀作用,松材线虫的死亡率(y)与EO剂量(x)呈线性相关[y=-44.998+1.838x(p=0.00948)],EO对松材线虫的LD50为51.686 g.m-3,LD99.9为78.835 g.m-3;松木片对EO的吸附作用很大,当EO剂量为56 g.m-3时,24 h浓度值为1.157 g.m-3,吸附量达到89.974 mg.L-1,且吸附量随剂量的增大而增加,吸附主要发生在熏蒸开始后4 h内,4 h吸附率可达94%以上.因此,不推荐将EO用于集装箱内松木片松材线虫的处理.     

松材线虫病疫木除害的微波设备与技术参数

为了快速高效杀灭松材线虫病疫木(简称松疫木)内的松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)和松墨天牛(Monochumus alternatus),用家用机、原木机、板材机3种微波机型开展了疫木除害试验。结果表明:3种微波机均能快速杀灭疫木内的线虫和天牛,最短2min就能100%杀灭疫木内线虫;微波除害难以得到杀灭线虫的松疫木临界温度,松疫木温度≥60、41～59、≤40℃,线虫死亡率分别为88.9%、61.3%、0;微波杀灭线虫与单位质量疫木所受到的微波能量有关,夏季3.5W.min.g-1、冬季9.0W.min.g-1能100%杀灭线虫;杀灭天牛所需能量高于线虫,其中杀灭天牛需能9.76W.min.g-1,杀灭线虫需能8.86W.min.g-1。微波杀灭线虫K与微波处理时间T和微波机功率W呈正比,与疫木质量m和升温Δt呈反比,可用公式K=T.W/(m.Δt)表达;微波处理疫木所需时间T与疫木质量m和升温Δt成正比,与微波功率W成反比,可用公式T=K.Δt.m/W表达。     

几种松树挥发物对松材线虫行为的影响

通过室内生测的方法,研究了几种主要的松树挥发物对松材线虫行为的影响.结果表明,α-异松油烯、β-水芹烯、β-蒎烯抑制松材线虫繁殖,其中α-异松油烯、β-水芹烯抑制力较强,β-蒎烯抑制力较弱,而β-月桂烯、反式-石竹烯、莰烯、异长叶烯和α-蒎烯对线虫繁殖没有影响.β-水芹烯和莰烯具有杀松材线虫活性,β-蒎烯和β-月桂烯增强松材线虫活力,而异长叶烯、α-蒎烯、反式-石竹烯对线虫存活没有影响.β-蒎烯、反式-石竹烯、异长叶烯、莰烯对松材线虫具引诱作用,其中β-蒎烯引诱力最强,反式-石竹烯次之,异长叶烯、莰烯引诱力最弱,而α-蒎烯、β-水芹烯、α-异松油烯和β-月桂烯对线虫无引诱作用.并对几种挥发物在松树抗松材线虫病中的作用进行了讨论.     

松材线虫病致病机理的研究进展

从病理生理学和与病害相关的微生物2个方面论述了松材线虫病致病机理的研究进展；从6个方面对病理生理学进行了阐述，包括水分代谢、活性氧代谢、苯丙烷类代谢、酶、毒素和激素，并指出了该领域今后的研究方向。     

松材线虫病疫木除害技术综述

阐述了松材线虫病疫木的除害处理技术措施,包括疫木异地集中除害、安全利用措施及林内就地现砍现烧和就地套袋覆盖熏蒸等传统措施,以及铁纱网罩就地隔离、疫木种植茯苓等除害新技术,并提出了一些针对性的除害处理建议。     

休眠松材线虫幼虫快速检疫方法

较系统地介绍了采用物理与化学相结合的方法,快速破除木包装中松材线虫幼虫休眠期,加速休眠幼虫转变为成虫,促进休眠幼虫的分离数量,缩短检疫时间,提高松材线虫的检出率。