ELISA与HPLC-MS对饲用玉米中2种霉菌毒素的比较分析

实验采集饲用玉米样品共30份,通过酶联免疫法(ELISA)和高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS)法对玉米赤霉烯酮(ZEA)和T-2毒素(T-2)2种霉菌毒素进行检测,旨在比较两种方法对饲用玉米中霉菌毒素的检测效果。结果表明:两种检测方法对饲用玉米中的ZEA均100%检出。检测T-2时ELISA法的检出率为83.33%,HPLC-MS法则未检出。两种方法检测出的霉菌毒素含量均都表现出ELISA法的检出值普遍高于HPLC-MS法。ELISA法前处理简单、检出速度较快且适合大批量样品检测,但因干扰因素较多易出现假阳性。HPLC-MS法前处理复杂、成本昂贵、操作要求高,但检测结果较为稳定和准确。说明在实际生产应用中,应结合两种检测方法的优缺点,用ELISA法初筛,检测结果呈阳性后,再用HPLC-MS法进行精确定量,这样既能实现检测目的又能节省检测费用。     

不同方法检测霉菌毒素的比较研究

本研究通过比较三种不同方法对霉菌毒素检测结果的差异,旨在为检测霉菌毒素提供科学依据。本实验采用酶联免疫(ELISA)试剂盒、超高效液相色谱(UHPLC)和液相质谱质谱联用(HPLC-MS/MS)三种检测方法,对仔猪配合饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEA)、呕吐毒素(DON)含量进行检测。ELISA法检测AFB1、ZEA和DON时,超标率与UHPLC法和HPLC-MS/MS法接近;但ELISA法检测AFB1结果为限量值为80%以上时,采用UHPLC法的检测结果显著高于HPLC-MS/MS法(P0.05),其他所有样品的AFB1、ZEA和DON两种仪器检测方法差异不显著(P0.05)。ELISA可作为霉菌毒素检测的快速初筛法;对ELISA结果进行确认时,低含量AFB1样品更宜采用HPLC-MS/MS法,其余样品采用UHPLC法检测更经济;对DON和ZEA的ELISA结果确认时,也可采用UHPLC法。     

检测牛乳κ-酪蛋白的间接竞争ELISA法与间接ELISA法比较

试验旨在建立一种快速简单检测牛乳κ-酪蛋白(κ-CN)含量的酶联免疫吸附(ELISA)方法,为解决牛乳蛋白掺假问题提供一定的技术支持。以牛乳κ-CN为包被抗原,以酶标抗体(HRP-IgG)为检测抗体分别建立间接竞争ELISA法和间接ELISA法,并对两种检测方法进行分析比较。结果表明:对于间接竞争ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为2.5μg/mL,线性范围为62.5~1 000.0ng/mL,变异系数2%,回收率在98.46%~101.68%;对于间接ELISA法,κ-CN抗原包被浓度为1.56μg/mL,线性范围为0.098~3.125μg/mL,变异系数1%,回收率在99.10%~101.06%。比较两种检测方法,间接竞争ELISA法检测耗时较短,抗体应用量较少,而间接法不需要包被成本较高的目标标准蛋白,相关系数也较高,但其检测体系组成成分较多,且需包被待测样品,较难组成ELISA试剂盒体系,不宜用于现场检测。因此,大规模制备ELISA试剂盒体系用于快速检测蛋白含量时可采用间接竞争法,不仅抗体应用量少、节约成本且快速、简单,可更好地用于科研实践。     

应用三种方法筛选猪瘟抗体阴性猪的比较试验

为了寻找筛选猪瘟抗体阴性猪更简便的方法,本试验应用猪瘟中和试验(SN)、阻断ELISA和正向间接血凝(IHA)三种方法分别对170份未经猪瘟活疫苗免疫的仔猪血清进行猪瘟抗体检测。结果显示,SN、ELISA和IHA检测出的猪瘟阴性血清分别为144份、150份和131份,表明三种检测方法有较好的符合率,其中SN与ELISA的检测符合率为90.59%,SN与IHA的检测符合率为82.94%,而ELISA法与另两种方法比较阴性符合率最高。本结果表明,ELISA法具有较高的敏感性,适合应用于猪瘟活疫苗安全检验抗体阴性猪的筛选。     

ELISA和IHA检测弓形虫抗体的比较试验研究

目的:分析ELISA方法和IHA方法检测弓形虫病的可靠性。方法:本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接血凝试验(IHA)两种方法,平行检测来自龙岩市某个猪场的32份猪血清中的抗弓形虫特异性抗体。结果:ELISA和IHA对猪弓形虫抗体阳性检出率分别为62.5%(20/32)、53.13%(17/32),这两种方法的阳性检出符合率较高,为71.88%(23/32)。其中,ELISA方法的敏感性(93.33%)、检测效率(81.25%)以及Youden指数(63.92%)都在IHA方法之上,但ELISA方法的特异性(12/17,70.59%)略低于I-HA方法(13/17,76.47%)。结论:ELISA和IHA两种方法均可用于猪弓形虫病的诊断和血清学调查,但ELISA方法更适用于猪弓形虫病的血清学调查。     

狂犬病病毒核蛋白的原核表达及间接ELISA方法的建立

将狂犬病病毒核蛋白(N)与麦芽糖结合蛋白(MBP)在大肠杆菌中融合表达。采用Western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测该重组融合蛋白的抗原性,并建立了间接ELISA方法检测狂犬病病毒特异性抗体。ELISA结果与快速荧光抑制试验(RFFIT)检测的中和抗体进行比较,RFFIT检测的中和效价与ELISA检测的OD值相关性很好(r=0.943 6),并且ELISA的敏感性和特异性分别为93.4%和100%。     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

单克隆抗体直接ELISA法检测家蚕微孢子虫

本文报道的是将辣根过氧化物酶(HRP)直接标记于单克隆抗体上进行直接ELISA法检测家蚕微孢子虫,实验结果表明:直接ELISA法比间接ELISA法检测家蚕微孢子虫其灵敏度和特异性二者差异不大,但直接ELISA法操作简单,是实用性较强的一种检测家蚕微孢子虫的方法。     

快速ELISA技术检测钩端螺旋体病的方法研究

ELISA法为钩端螺旋体(以下简称钩体)病检测诊断的最常用血清学方法之一,也是抗钩体单克隆抗体筛选的首选检测方法。常规的ELISA法从加样到判断结果整个过程至少需2个小时。本文探讨了聚乙二醇(PEG)对ELISA法的促进作用,建立了快速ELISA法检测钩体病。此法可使整个检测过程缩短至40分钟以内,而且大大提高了检测的灵敏度。     

酶联免疫吸附技术分析及其在食品安全检测中的应用

食品安全关系重大,近年来食品安全检测技术迅速发展,其中以酶联免疫吸附法(ELISA)的发展最为迅速。文章从食品安全现状入手分析食品安全检测的重要性,并对ELISA的原理和分类进行了简述,最后对该法在食品安全检测的各个方面应用情况进行了综述以期为保障食品安全,促进社会健康发展提供参考。     

三种免疫学检测方法对呋喃唑酮代谢物的检测

为了对动物源性食品中的呋喃唑酮进行快速、有效的检测,试验对检测呋喃唑酮残留的三种免疫学快速检测方法,即化学发光免疫分析法(CLEIA法)、酶联免疫分析法(ELISA法)、胶体金免疫层析法(ICA法)在检测限、检测时间等方面进行综合比较。结果表明:CLEIA法、ELISA法、ICA法对呋喃唑酮代谢物(AOZ)的检测限分别为0.01μg/L、0.02μg/L、50 ng/L,CLEIA法和ELISA法添加回收试验的变异系数范围分别为小于15.0%和小于8.0%。说明三种免疫学检测方法在不同的应用环境各具优势,CLEIA法检测灵敏度高,适用于实验室痕量残留检测;ELISA法灵敏度满足限量残留检测,适用于实验室一般项目的快速检测;ICA法所用胶体金试纸条价格低廉,操作简便,无需任何仪器,适用于野外大批量样本的阳性筛选。     

应用ELISA法、RT-PCR法检测固原市部分地区肉牛轮状病毒的研究

为了探析固原地区肉牛轮状病毒病的流行情况及临床意义,采集宁夏固原市部分地区500头腹泻病牛粪样,首先用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行轮状病毒检测,再用RT-PCR法进行核酸复检。结果表明:所有采集的500份粪样中,用ELISA检测出128份轮状病毒粪样,阳性率为25.6%;用RT-PCR检测出141份轮状病毒粪样,阳性率为28.2%。说明:轮状病毒是导致固原地区肉牛腹泻的主要病原微生物;ELISA法和RT-PCR法结合应用检测肉牛轮状病毒效果良好。     

间接ELISA法检测鸡新城疫抗体

应用醛化的鸡红细胞经吸附释放方法获得纯化的新城疫病毒(NDV),经triton X-100处理并反复冻融制备新城疫 ELISA抗原.应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测NDV抗体水平的ELISA方法.确立了将鸡血清100倍稀释检测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.941 28 x 0.206 77,r=0.981 63,可用于定量测定.血凝抑制(HI)方法与ELISA方法的比较试验表明,ELISA法的敏感性是HI方法的3倍以上.应用建立的ELISA方法比较了卵黄、气管及胆汁中局部抗体与血清抗体的差异.     

猪口蹄疫免疫抗体两种不同ELISA检测方法的比较

将5个规模化养猪场各20份猪血清样本分成5组用两种不同ELISA检测方法进行FMD免疫抗体检测,采用液相阻断ELISA方法检测的抗体合格率为63%,采用间接ELISA方法检测的抗体合格率为77%,两者差异显著。试验结果表明:(1)液相阻断ELISA的检测合格率明显低于间接ELISA的检测合格率;(2)运用液相阻断ELISA方法评价FMD免疫质量(不加强免疫),难以达到农业部所定标准,解决的最佳途径就是做好口蹄疫疫苗的强化免疫工作。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测滤纸条上自然干燥血液中抗猪囊虫抗体诊断活猪囊虫病

酶联免疫吸附测定法(ELISA)用于检测血清中的抗猪囊虫抗体诊断活猪囊虫病是一个好方法。作者等意欲以纸条采血法取代试管采血法,简化样本采集过程,以节省劳力、器械和时间,为生产实践中大面积普查应用提供了一个简单易行的方法,故对ELISA检测滤纸条上自然干燥血液中的抗     

酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-高效液相色谱法在检测饲料中黄曲霉毒素B1含量中的比对研究

为了探讨酶联免疫吸附法检测饲料中黄曲霉毒素B1含量的可行性,试验采用酶联免疫吸附法(ELISA法)比对免疫亲和柱-高效液相色谱法(IAC-HPLC法),对饲料中黄曲霉毒素B1含量进行了检测,对检测结果的准确度、精密度和样品加标回收率进行了分析.ELISA法线性方程相关系数为0.9952,相对标准偏差(RSD)为1.6％...     

应用单抗竞争ELISA快速检测肠炎沙门氏菌

本研究应用抗肠炎沙门氏菌 O9抗原的酶标单抗 3- 4 7- 2 6和肠炎沙门氏菌脂多糖( LPS)建立了快速检测肠炎沙门氏菌的竞争ELISA方法 ,该法通过样品中的肠炎沙门氏菌 L PS与微量板包被的肠炎沙门氏菌 LPS竞争结合酶标抗体 ,以检测样品中的肠炎沙门氏菌。通过与国标法对样品的比较检测结果表明 ,该法可检测出每克粪便中 5×1 0 4 CFU的肠炎沙门氏菌 ,国标法可检出 4.9× 1 0 1 CFU/g粪便。竞争 EL ISA( C- ELISA)方法的敏感性和特异性分别为 94.4%和 97.7%。并进一步讨论了该方法建立时的选择条件和应用意义     

奶牛布鲁氏菌病不同血清学检测方法的比较研究

为了比较布鲁氏菌病不同血清学诊断方法的优缺点,试验采用虎红平板凝集试验(RBT)、快速诊断试纸卡、间接酶联免疫吸附试验(i ELISA)、竞争酶联免疫吸附试验(c ELISA)四种不同的血清学检测方法,同时对河南地区2 545头疑似布鲁氏菌病病牛进行了布鲁氏菌的检测。结果表明:与i ELISA、c ELISA以及快速诊断试纸卡方法相比,RBT法操作简便、成本较低,且阳性检出率较高,但其特异性较低,容易出现假阳性结果;快速诊断试纸卡与i ELISA、c ELISA的阳性检出率、敏感性和特异性相互比较均无显著差异(P0.05)。说明在实际应用中牧场应根据自己的条件与需要选择合适的检测方法。     

应用生物素-亲和素系统检测感染兔弓形虫抗体的实验研究

鉴于弓形虫病感染的多样化,病原诊断又较困难,血清学检测逐渐成为常规辅助诊断方法之一.七十年代末国内外相继建立了检测血清中抗弓形虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA).近年来,生物素-亲和素系统(BAS)已用于多种抗原抗体系统但未见检测弓形虫抗体的报道.本文应用亲和素和生物素标记的过氧化物酶复合物(ABC)为标记物的ABC-ELISA方法检测感染兔弓形虫抗体的实验研究并与常规ELISA法进行对比观察,现将初步试验结果报告如后.     

ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较

比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体.将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14 d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21 d攻击狂犬病毒BD06株.结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%.