玻璃化法超低温保存香石竹种质资源的研究

以香石竹"云恋蝶"离体茎尖为试材,研究玻璃化法对香石竹茎尖的高体超低温保存.通过正交设计试验对影响存活率的主要因素(预培养培养基中蔗糖浓度、预培养时间、装载时间和PVS2处理时间)进行分析,结果表明,预培养1 d,预培养基中蔗糖浓度为0.5 mol/L,装载40 min,PVS2液处理40 min,液氮处理1 d,在40℃水浴化冻后的香石竹茎尖,成活率达44.13%,且超低温再生苗与其常温苗的生理生化指标无显著差异.本试验成功地建立了香石竹种质资源玻璃化法超低温保存的技术,为香石竹种质资源的长期保存提供了一条有效途径.     

罗汉果茎尖玻璃化法超低温保存初探

对罗汉果试管苗茎尖玻璃化法超低温保存进行了初步研究。结果表明,切取继代15 d生长健壮的罗汉果试管苗茎尖,长2~3 mm,在25℃下用60%PVS2(玻璃化保护液)预处理40 min,再用100%PVS2在0℃处理50 min,更换新鲜PVS2后投入液氮保存24 h,于40℃水浴中快速解冻2 min,用MS+410.8 g/L蔗糖的液体培养基洗涤40 min,滤纸吸干后接种到MS+1.0 mg/L6-BA+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+0.7%琼脂粉+45 g/L蔗糖的固体培养基上,25℃暗培养7 d,转入正常光下培养。1周时的存活率最高可达94.56%。     

玻璃化法超低温保存甘薯茎尖

对甘薯离体茎尖玻璃化法保存技术进行了初步探究。结果表明,预培养2 d,100%的PVS2溶液0℃处理30 min,液氮冻存2 d,40℃快速化冻后用附加蔗糖1.2 mol/L的MS液体培养基洗涤20 min,接种在MS 6-BA1.5 mg/L NAA0.1 mg/L GA30.05 mg/L培养基上的茎尖成活率最高。     

马铃薯茎尖玻璃化法超低温保存技术研究

为构建马铃薯茎尖玻璃化法超低温保存体系,以6个马铃薯品种为试验材料,研究了预培养时间、茎尖大小、玻璃化液、玻璃化液处理时间及恢复培养基对马铃薯存活率和再生率的影响。结果表明:茎尖大小为1mm左右时,预培养24h后,于PVS2玻璃化液中浸泡30 min,而后转入MS+0.5 mg·L-1 Zeatin+0.10mg·L-1 NAA+1.0mg·L-1 GA3培养基中培养,其成活率和再生率最高。     

月季茎尖玻璃化法超低温保存技术研究

研究月季茎尖玻璃化法超低温保存技术,以期为月季茎尖超低温保存提供理论和实践依据.试验选用金奖章、粉玛雅、韩红、博共4个月季品种进行简单玻璃化法和玻璃化超低温保存试验.结果表明:简单玻璃化法保存时.不同品种的茎尖存活率差异显著,金奖章的茎尖存活率最高(55.3%);通过研究预培养、装载处理和植物玻璃化溶液PVS2脱水时间对粉玛雅茎尖存活率的影响,初步构建了月季茎尖玻璃化法超低温保存体系,即将长1.0cm的茎尖在含0.3mol·L-1蔗糖的培养基上预培养5～6d后,取1.5mm茎尖,室温下A液(MS+2mol·L-1甘油+0.4mol·L-1蔗糖)装载40min或B液[60%PVS2+40%(MS+0.15mol·L-1蔗糖)]装载30min,用PVS2(300g·L-1甘油+150g·L-1乙二醇+150g·L-1二甲基亚砜+0.4mol·L-1蔗糖+MS)于0℃下处理40min,然后液氮保存24h,在40℃水浴中化冻90s,用1.2mol·L-1蔗糖培养液洗涤,最后转入MS+6-BA1.0mol·L-1+IBA0.1mol·L-1上再培养,存活率高于53.3%.     

包埋玻璃化法超低温保存灰杨休眠茎尖的研究

采用包埋玻璃化法,对灰杨休眠茎尖进行了超低温保存研究。将灰杨休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中的蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理时间对灰杨休眠茎尖存活率的影响。结果表明:含灰杨茎尖的胶球在0.8 mol/L的蔗糖溶液中培养24 h,可获得较高的存活率;胶球经玻璃化保护液[40%甘油+45%(0.4 mol/L)蔗糖+10%聚乙二醇(分子量4 000)+5%二甲基亚砜]在25℃处理20 m in,可以显著提高其存活率,在优化条件下存活率可高达58.3%。     

包埋玻璃化法超低温保存沙生柽柳休眠茎尖的研究

[目的]采用包埋玻璃化法,对沙生柽柳休眠茎尖成功地进行冷冻保存。[方法]将沙生柽柳休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理的时间对沙生柽柳休眠茎尖存活率的影响。[结果]含沙生柽柳茎尖的胶球在0.8mol/L蔗糖溶液中培养24h可获得较高的存活率;胶球经玻璃化保护液[40%甘油＋45%（0.4mol/L）蔗糖＋10%聚乙二醇（分子量4000）＋5%二甲基亚砜]在25℃处理20min可以明显提高存活率,在优化条件下存活率可高达48.3%。[结论]蔗糖浓度和预培养时间是决定沙生柽柳茎尖存活率的关键因素。     

克服香石竹茎尖培养玻璃化现象的研究

香石竹茎尖培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍.采用强光照10000-20000LX,在培养中提高糖和琼脂的浓度,降低细胞分裂素的用量,对克服香石竹茎尖培养玻璃化有明显效果,但对在茎尖培养中玻璃苗率高达90%左右的一些红色系品种效果并不理想,其中机制有待进一步研究.青霉素对消除香石竹茎尖培养玻璃化现象无明显效果.     

菠萝茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

以菠萝为试材,建立试管无性系,进行玻璃化法超低温保存及植株再生研究,结果表明,约2.0 ～3.0 cm的菠萝茎尖于含有0.Smol/L蔗糖的培养基上预培养l～2d,剥取含1～2片叶原基(1.0～2.5 mm长)的茎尖,室温(25℃)下用LS装载液预处理50min,再用PVS2溶液于0℃下处理40 min,换入新鲜的PVS2溶液后迅速投入液氪,保存24h后在40℃水浴中迅速化冻90 s,用1.2 mol/L的蔗糖培养液洗涤2次,每次10 min,然后转入含0.3 mol/L蔗糖的MS培养基上,暗培养48 h后转入含BA 0.5 mg/L的MS培养基上,暗培养1周后转移到正常光下,4个菠萝品种(澳大利亚卡因、夏威夷、巴厘、台农16号)的成活率分别为96.5％、95.3％、78.6％、87.7％,再生率分别为93.2％、92.6％、76.7％、87.7％.再生植株生长和分化正常,其形态上与对照一致,生根后可移栽成活.     

江西山药茎尖包埋玻璃化法超低温保存及其遗传稳定性检测

采用植物组织培养法对广丰药薯茎尖的包埋玻璃化法超低温保存程序进行优化,并采用扩增片段长度多态性（AFLP）分子标记法和流式细胞术对其冻后再生苗的遗传稳定性进行检测,同时将超低温程序应用到江西山药其他地方品种,旨在为薯蓣属植物种质资源的长期保存奠定理论基础。结果表明,广丰药薯茎尖预培养的较佳时间为5 d,较佳的蔗糖浓度为0.75 mol·L-1;装载的较佳时间为40 min;脱水的较佳温度为0 ℃,较佳时间为60 min;冻后黑暗培养7 d可以显著提高其成活率。用AFLP分子标记法和流式细胞术对茎尖冻后再生植株的遗传稳定性进行检测,没有发现异常条带和染色体倍性变化,气孔观察也未发现叶下表皮气孔参数的显著变异。将这种超低温保存程序用于江西山药其他基因型,成活率约为40%～85%。该研究建立的包埋玻璃化法超低温保存程序能保证江西山药的遗传稳定性,可为建立江西山药种质资源超低温保存库提供一定的技术支撑。     

香石竹组培苗玻璃化控制的研究

本文报道了香石竹玻璃苗发生原因的研究结果：①激素的种类和浓度显著影响玻璃苗发生频率；②琼脂浓度影响玻璃苗产生的比率；③外植体取材部位影响玻璃苗发生频率；④不适宜的培养条件会使玻璃苗叶绿体产生不可逆的变异。     

活性炭对香石竹试管苗继代培养的影响

[目的]研究活性炭对香石竹试管苗继代培养的影响,寻求最适香石竹试管苗增殖的活性炭用量,为组培苗培养基的改良提供一些有益的参考。[方法]将材料分别转接在活性炭浓度为0,2、4、6g／L的培养基中,观察不同浓度活性炭对香石竹试管苗芽增殖数量和速度、株高、节间距及玻化率的影响。[结果]当活性炭浓度在2～4g/L时,能显著提高试管苗的芽数、芽的增殖速率和株高,但对茎节段数的增加无明显作用。在培养基中加入活性炭可显著地降低试管苗的玻化率。[结论]活性炭对香石竹试管苗的增殖和降低玻璃苗有一定的作用。     

不同肥料配方对香石竹生长发育的影响

[目的]筛选适合香石竹生长的最佳肥料配方。[方法]供试香石竹品种为马斯特(R3),栽培基质为陶粒∶草炭=1∶1,共设3个不同肥料配方处理和1个不施肥处理(对照),每处理重复3次,研究不同肥料配方对香石竹的株高、茎粗、叶片长度、花蕾直径、根冠比、干物重的影响。[结果]大量元素水溶性肥料处理的香石竹的株高、茎粗、花蕾直径、干物重分别为82.37 cm、0.79 cm、2.41 cm和0.56 g,均优于其他处理,也可有效促进香石竹的叶片长度和根部发育。[结论]大量元素水溶性肥料是促进香石竹生长的最佳肥料配方。     

香石竹插条冷库存放时间对生根的影响

本文以4个香石竹品种(马斯特、激情、桑巴、深恋)插条为试验材料,以冷藏0 d作为对照,采用不同的冷藏时间(冷藏15、25、35、45、55 d)进行试验,分析香石竹品种在不同冷藏时间的成苗率、生根率和烂根率等指标。结果表明,香石竹品种马斯特、激情、桑巴在冷藏25 d进行扦插,扦插生根率和成苗率最高;品种深恋未经冷藏进行扦插,扦插生根率和成苗率最高。在实际生产过程中,选择适宜的冷藏时间扦插,既能提高出苗率又可为生产提供依据。     

根癌农杆菌法转化康乃馨的条件探索

[目的]为构建高效的康乃馨遗传转化体系奠定基础。[方法]以康乃馨叶片为受体材料,通过抗G418筛选,探讨预培养时间、根癌农杆菌菌液浓度、共培养时间等因素对根癌农杆菌介导康乃馨遗传转化的影响。[结果]20 mg/ml G418是康乃馨叶片转化的适宜浓度。随着预培养时间的增加,康乃馨叶片的存活率降低,预培养2~3 d时抗性芽分化率较高。当根癌农杆菌OD600为0.5~0.8时,抗性芽分化率较高,适合康乃馨转化。共培养2~3 d时,康乃馨叶片生长状态好,抗性芽分化率最高。[结论]预培养、共培养各2~3 d,菌液浓度OD600为0.5~0.8是根癌农杆菌介导康乃馨遗传转化的适宜条件。     

外源乙烯对香石竹切花开放的影响

[目的]为了探寻简便安全的方法使香石竹(Dianthus caryophyllus L.)切花在短时间内盛开,以减短存货期并随时满足用花需求。[方法]采用乙烯利溶液喷撒花枝、将乙烯利加入瓶插液以及将乙烯利放在花枝旁边3组处理方法。[结果]适宜的乙烯浓度(环境中乙烯浓度为8.65×10-6 mol/L左右)可促使香石竹切花提前4～5 d盛开,观赏期达7 d,处理的花枝花色正常,最大花径和花枝重有所提高。但是高浓度乙烯、乙烯利溶液喷撒花枝和将乙烯利加入瓶插液均对香石竹产生明显伤害,造成花瓣变色、坏死,花朵不能完全开展。[结论]超过浓度阀值的外源乙烯能使香石竹切花迅速开放,在花枝旁边放置适量乙烯利溶液可有效地促进花朵盛开。     

不同螯合剂对香石竹(Dianthus caryophyllus)修复镉污染土壤的影响

在含10 mg/kg镉的土壤中分别添加2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/kg的螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)、草酸(OA)和柠檬酸(CA),研究了它们对香石竹(Dianthus caryophyllus)生长、吸收土壤中镉,以及对土壤中镉活性的影响。结果表明:在施用EDTA 5.0 mmol/kg处理下,香石竹的地上部和单株干重最大,显著高于对照的;在3种螯合剂不同浓度处理下的香石竹地下部干重与对照无显著性差异;EDTA对香石竹吸收镉的促进效果较好,其中施用低浓度(≤10.0 mmol/kg) EDTA有助于香石竹植株各个部位对镉的吸收;CA处理显著提高了香石竹根和叶中的镉含量,且当OA浓度低于7.5 mmol/kg时香石竹各个部位的镉含量均显著高于对照;施用低浓度(≤5 mmol/kg) EDTA不仅有利于香石竹对镉的富集而且有助于镉由地下部向地上部的转移。在本试验设置的浓度范围内,OA对香石竹吸收和累积镉的促进效果优于CA;EDTA、CA和OA的施用均提高了土壤中有效态镉的含量。     

矮壮素· 多效唑对鲜切花香石竹矮化的影响

[目的]筛选适宜鲜切花香石竹的矮壮素。[方法]以苔丝和激情为试验材料,分析不同浓度的矮壮素(CCC)、多效唑(PP333)对鲜切花香石竹苔丝和激情的生长的影响。[结果]不同浓度的矮壮素、多效唑都能使得鲜切花香石竹植株矮化,节间粗短,叶色深绿,研究结果表明矮壮素600倍液对鲜切花香石竹苔丝、激情矮化效果最佳。[结论]该研究可为鲜切花香石竹的生产提供参考。     

控释肥对香石竹出圃苗质量的影响

【目的】利用长效控释氮肥（脲甲醛泡沫）、活性磷肥调控香石竹基质配方,研究不同处理对香 石竹出圃质量的影响,为香石竹施肥技术提供理论依据。【方法】设定不同控释肥处理对香石竹进行盆栽种植, 分别于 0、15、30 d 对香石竹的株高、冠幅进行测定,并在 30 d 对香石竹进行采样分析生物量、地上部氮磷积 累量和根系形态指标。【结果】种植 30 d 后,T4 处理（草花基质添加复合肥 1.6 kg/m3、缓释肥 1.14 kg/m3、活 性磷 5.71 kg/m3、脲甲醛 6.05 kg/m3 作为栽培基质）的叶、茎、根的生物量,总根长,总根表面积,地上部氮、 磷积累量均为最大值,分别为 3.12 g/ 株、1.75 g/ 株、0.82 g/ 株、5.15 m/ 株、526 cm2/ 株、179 mg/ 株和 21.32 mg/ 株,与对照处理（草花基质添加复合肥 4.8 kg/m3、缓释肥 3.6 kg/m3 作为栽培基质）相比显著差异。【结论】施 加脲甲醛泡沫和活性磷肥对香石竹的生长有显著影响,从生物量、总根长、总根表面积、地上部氮磷积累量等 方面综合考虑,T4 处理的石竹生长效果最好,不仅能获得较好的形态指标,而且能提高氮磷肥的积累量,香石 竹出圃苗质量较佳。