应用正向间接血凝试验检测山羊痘抗体

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析的方法纯化山羊痘病毒,以病毒抗原致敏绵羊红细胞建立了山羊痘正向间接血凝试验,并进行了最佳试验条件的摸索.结果表明,试验所制备的诊断液能与山羊痘参考阳性血清发生特异性凝集,其凝集现象能被山羊痘阳性抗原特异性抑制,与其它常见的动物病阳性血清无交叉反应.用本方法及琼脂扩散试验对山羊痘血清进行检测,IHA阳性检出率为89.1%（41/46）;而AGP阳性检出率为34.8%（16/46）.表明正向间接血凝试验比琼脂扩散试验敏感性高.本次试验制备的正向间接血凝试验诊断液可用于兽医临床上进行快速诊断.     

Development and Application of a Diagnostic Kit for Detecting NDV

根据新城疲病毒(NDV)对鸡红细胞的凝集以及相应抗体对病毒血凝的抑制的原理设计出新城疫抗体监测试剂盒,主要用于鸡新城疫抗体水平的监测,为正确实施新城疫疫苗适时接种提供依据。试剂盒包括新城疫阳性血清、新城疲阴性血清、4单位新城疫抗原和10ml/L醛化红细胞。经对50多份血清检测结果表明,用于血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验的醛化红细胞与新鲜红细胞无显著性差异(P>0.05),试剂盒能准确检测出鸡群新城疫抗体水平,具有操作简便,适用,易于保存等特点。     

1%鸡红细胞悬液4℃保存期限试验

试验旨在观察1%鸡红细胞悬液在4℃环境下最多可保存几天不影响试验结果的确定性。通过血凝(HA)试验,使用在4℃环境下保存1、 2、 3、 4、 5、 6、 7d的1%鸡红细胞悬液,分别测定同一批次鸡新城疫血凝抑制试验抗原、禽流感病毒H7亚型血凝抑制试验抗原、禽流感病毒H5亚型(Re-11株)血凝抑制试验抗原、禽流感病毒H5亚型(Re-12株)血凝抑制试验抗原4种抗原的效价。结果表明,1%鸡红细胞悬液在4℃环境下最长可以保存5d,使用时不影响试验结果准确性。     

犬细小病毒血凝和血凝抑制试验研究

对犬细小病毒的血凝特性和血凝试验、血凝抑制试验的最适条件以及BBS-VAD和PBS两种缓冲系统进行比较,结果证明,进行犬细小病毒血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)以BBS-VAD缓冲系统更为适宜。建议HA阳性指标为≥80,HI阳性指标为≥320。     

“猪瘟血凝抗原”试用简报

<正> 猪瘟间接血凝抗原试剂简称“猪瘟血凝抗原,”由醛化血球吸附纯化抗原制成,可用于检测猪瘟抗体与抗原。抗原定性或定量均用血凝抑制试验。抗体定性,以两滴试剂能将检料分为性质不同的三个等级:保护性阳性、无保护阳性和阴性。抗体定量用常规倍比稀释梯度凝集法,可查猪、兔血清效价,     

鹅病的血清学检验

正鹅病的血清学检验也是兽医临床工作中常采用的实验室诊断技术。包括凝集试验、琼脂扩散试验、血凝试验和血凝抑制试验等。1凝集试验凝集反应具有重要的实践意义,利用已知抗原(称为凝集原)检查未知抗体(称为凝集素);也可用已知抗体诊断未知抗原(如被检病料中分离的未知病菌),从而达到鉴定抗体(或抗原)和诊断疾病的目的。     

应用间接血凝试验检测牛肺疫抗体

自制1.5％绵羊红细胞诊断液并用于检测牛肺疫抗体,结果如下:(一)三批标准阳性血清(批号为8601、8301、8001)凝集价均在160倍以上,标准阴性血清(批号为8601)凝集度仅为10倍。15份被检血清IHA的阳性检出率(8/15)高于补体结合反应(CF,6/15)且凝集价均在40倍以上。(二)用牛肝片吸虫病、布氏杆菌病和附红细胞体病阳性血清作类症鉴别诊断,凝集度仅为10倍。(三)把牛肺疫CF8502抗原作倍比稀释,加2个凝集单位牛肺疫阳性血清8601和8301进行间接血凝抑制试验,分别被32倍和16倍稀释的抗原所抑制,本项试验结果表明IHA用于检测牛肺疫,具有检出率高、特异性强、设备要求简单、容易操作等特点,适于在现地推广应用。     

以改进的布氏菌全血平板凝集抗原检测自然感染布病阳性绵羊的凝集素滴度

报道了以改进的布氏菌全血平板凝集抗原与标准布氏菌试管凝集试验和玻板凝集试验对照,对10只自然感染布病阳性绵羊在集中舍饲的条件下,经17个月凝集素滴度的检测,证明全血抗原的特异性、敏感性及阳性检出率均优于对照方法。     

血凝和血凝抑制试验中的常见问题及解决方法

血凝和血凝抑制试验是用于检测受检血清抗体的试验。血凝（直接血凝）反应（HA）：某些病毒或病毒的血凝素,能选择性地使某种或某几种动物的红细胞发生凝集。血凝抑制反应（HI）：当病毒的悬液中先加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时,则红细胞表面的受体就不能再与病毒颗粒或其血凝素直接接触,这时红细胞的凝集现象就被抑制。     

草鱼出血病病毒血凝作用及影响因素

为了探明草鱼出血病病毒的血凝作用及其影响因素，应用血凝试验对此进行了测定，结果表明：病毒只对鸡红细胞引起高滴度凝集，这种凝集能被特异性抗血清所抑制；血凝的适宜pH为5.5-7.0,2%的氯化钠为较适宜的稀释液，血凝活性以在37℃温度条件下最好；出血病病鱼肠道的凝集价量高；醛化的鸡红细胞的4℃下保存一年多仍具有新鲜红细胞表面受体活性，从而使草鱼出血病的HA和HI试验更具有稳定性和广泛的实用性，建立了一种快速诊断草鱼出血病的方法。     

双夹心ELISA检测鸡EDS-76病毒抗原的研究

应用鸡抗EDS-76病毒、兔抗EDS-76病毒抗体和羊抗兔抗体,建立了检测EDS-76的双夹心ELISA方法,本试验确定的鸡抗EDS-76病毒抗体、兔抗EDS-76病毒抗体和HRP-羊抗兔抗体的最佳工作浓度分别为1∶160、1∶300和1∶1000。本法对纯化EDS-76病毒的最低检出量约为5 ng/孔。通过对EDS-76病毒试验感染鸡脏器带毒、排毒情况和临床样本的检测,表明双夹心ELISA方法对EDS-76病毒的检测特异性强、敏感度高、适合于成批样本的检测。     

免疫鸡血清与卵黄中EDS-76抗体水平比较

分别采取接种前和接种后的36只处于产蛋期的试验鸡血液分离血清及收集鸡蛋提取卵黄。卵黄分别用16%NaCl、8%柠檬酸钠和氯仿处理后,与血清一起检测减蛋综合症(EDS-76)病毒间接血凝抑制(HI)抗体。试验结果表明,血清HI抗体效价和卵黄HI抗体效价具有较好的一致性。由卵黄代替血清检测减蛋综合症HI抗体效价,作为鸡群诊断,免疫水平评估和疫苗质量评价的手段是可行的,在减蛋综合症防制中具有实际意义。     

应用竞争性酶联免疫吸附试验检测鸡产蛋下降综合症抗体

用鸡产蛋下降综合症(Egg Drop Syndrome-76,EDS-76)灭活油佐剂苗,免疫30周龄产蛋鸡,获取高免血清。提取特异性免疫球蛋白后,用辣根过氧化酶标记,制备成酶标抗体,建立了竞争性酶联免疫吸附试验。该法与血凝抑制试验的平行测定的比较结果为,前者的阳性检出率为71.8%,而后者为59.0%,所以前者明显地优于后者。而且该试验敏感性高,特异性强,具有快速、准确的优点,适用于大规模的检测和检疫。     

PCR方法检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征(Egg drop syndrome 1976 EDS-76)病毒DNA序列,设计合成了1对能扩增300 bp DNA片段的引物,建立了EDS-76病毒的聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。该方法对EDS-76病毒标准株AV-127扩增结果为阳性;对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的扩增结果均为阴性。结果表明该方法特异且敏感,检测的最低病毒DNA含量达到2.5×10-2pg,PCR检测表明,从试验感染鸡的心脏中不能检测出病毒,肝脏和肾脏只有在感染后7~15 d检出,在试验感染后4~21 d的子宫、血液和4~17 d的脾中均能检测到病毒。     

陕西关中地区EDS－76病毒的分离与初步鉴定

采用鸭胚传代的方法，首次从陕西省关中地区ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性鸡群的卵巢和输卵管中分离到１株病毒，经血凝与血凝抑制试验、电镜现实、乙醚和氯仿的敏感性试验、核酸型鉴定试验及回归动物试验等，鉴定该分离物为ＥＤＳ－７６病毒。从病原学上证实陕西省已有该病的发生与流行     

间接ELISA检测减蛋综合征病毒抗体方法的建立

应用SephdexG-200亲和层析获得纯化的减蛋综合征病毒EDSV作ELISA抗原,应用抗鸡Ig轻链单抗1B7辣根过氧化物酶结合物建立了定量检测EDSV抗体水平的ELISA方法。确立了将鸡血清100倍稀释监测ELISA效价(ET)的回归方程y=0.59287x+0.75757(r=0.96763)可用于定量测定。血凝抑制(HI)抗体与ELISA方法的比较试验表明,ELISA法比血凝抑制试验敏感2倍以上.     

鸡产蛋下降综合症(EDS—76)灭活油乳剂苗的研究 Ⅱ.不同单位病毒和佐剂的疫苗及和其它同类产品的免疫比较

在本试验中,我们比较了每头份疫苗含不同血凝单位病毒的免疫效果,结果每头份含2000单位和3000单位的病毒疫苗免疫后HI抗体峰值分别为9.2log_2和9.6log_2,而含1000单位病毒的疫苗HI抗体峰值为6.8log_2.油乳剂苗的免疫后抗体效价显著高于氢氧化铝胶为佐剂的灭活苗。     

鸭源禽流感病毒的分离与鉴定

用灭菌棉拭共采集蛋鸭和肉鸭的泄殖腔样品 62只 ,鸡胚尿囊腔传代接种法分离到 1株病毒 ,该病毒可凝集鸡红细胞 ,且不能被 ND、EDS-76阳性血清抑制 ,用病变绒毛尿囊膜制备抗原与禽流感琼扩标准阳性血清作用 ,出现明显的白色沉淀线 ,证明该分离株为 A型流感病毒 ,血凝素亚型分析结果为 H9,电镜负染观察可见典型的禽流感病毒粒子 ,致病性试验结果表明该分离株对鸡表现为弱致病性。研究结果还表明 ,环境 (特别是水体 )贮毒可能是禽流感病毒得以长期存在和传播的重要因素和媒介     

鸡减蛋综合症油乳剂灭活疫苗的免疫效果观察

将试验鸡分成3组,第一组、第二组和第三组鸡分别接种鸡减蛋综合症油乳剂灭活苗1ml、 1．5ml和2ml。接种疫苗后3、4、5、6、7、9、11、13、15d采取各组鸡血,检测HI抗体。接种2ml油乳剂灭 活苗的组鸡HI抗体效价上升快,效价高,但下降也非常快,较适合于紧急接种。1ml和1．5ml油乳剂 灭活苗接种鸡HI抗体效价上升较慢,产生免疫力的时间较迟,但维持高抗体水平的时间较长,适于 预防接种。     

鸡减蛋综合症病毒（EDS—76）的分离与鉴定

采取新疆五家渠某鸡场发病鸡病料，接种鸭胚，分离病毒，病料在鸭胚中盲传至第５代，鸭胚尿囊液ＨＡ效价达２１７，ＨＡ可被ＥＤＳ－７６标准阳性血清抑制。免疫电镜观察到了病毒颗粒，表明该病是由ＥＤＳ－７６病毒所致