酶免疫分析法诊断家畜妊娠研究进展(续上期)

1．2水牛黄右军等（1994）采用EIA法测定了87头杂种水牛，对头摩拉水牛的脱胎乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态孕酮变化规律。将配种后第21d和27d次取奶样测定孕酮浓度均达到或超过1．7×10~(-9)g／mL者判为妊娠牛，前高后低者（不达者）为空怀牛，对64头配种水牛进行测定，1个月后直检复查，空怀确诊率为97.390（36／37），妊娠确诊率为88．9％（24／27）。与国内外EIA法诊断奶牛妊娠结果基本一致。[11]1．3羊李学斌等（1993）应用ELISA法测定绵羊血清中干扰体液免疫反应的因子，发现在配种后48…     

根据乳汁孕酮水平进行奶山羊早期妊娠诊断的研究

为探求西农莎能奶山羊早期妊娠诊断的方法,应用放射免疫法,分别测定6只奶山羊发情同期和153只奶山羊妊娠早期下午末乳的孕酮水平。6只母羊发情0～1天(发情为0天)的孕酮水平最低,均值为0.83±0.28毫微克/毫升,发情第五天后逐渐上升,于第十一至十七天达峰值分别为32.2、23.4、15.9、12.6和34.2毫微克/毫升,此后又陡然下降,恢复到下一发情周期前的基础水平。配种后第十五至二十九天的孕酮值波动在0.30～42.2毫微克/毫升的范围。根据配种后返情及产羔情况观察,产羔羊配种后第二十二至二十五天的孕酮均维持较高水平,均值≥8.3毫微克/毫升,而返情和未产羔羊这四天的孕酮水平则较低(P<0.01),均值<8.3毫微克/毫升。故以8.3毫微克/毫升的孕酮值为判定界限,即:≥8.3毫微克/毫升为妊娠,<8.3毫微克/毫升为未妊娠,准确率是96.5%(109/113),未妊羊是90%(9/10)。据此,作者认为:根据乳汁孕酮水平能够进行西农莎能奶山羊的早期妊娠诊断。采样时间在配种后第二十二至二十五天,采样次数为隔日2次。此外,对判定界限及诊断的准确率等问题、也进行了讨论。     

奶牛早期妊娠诊断—应用放射免疫测定乳汁孕酮含量的研究

应用放射免疫测定91头黑白花母牛,(配种后21—28天和42天)的混合全乳的孕酮含量,进行早期妊娠诊断研究。结果显示怀孕与未孕牛之间孕酮值差异非常显著(P<0.01)。据此确定全乳孕酮值的判定标准:>11毫微克/毫升为怀孕,<8毫微克/毫升为未孕,8.1～10.9毫微克/毫升为疑似。经直肠妊检核实,用这标准衡量配后21,23,24天妊娠牛的确诊率分别为85.7％,90.2％,91.4％,未孕牛确诊率是100％,因此,最佳采样时间以配后23—24天为宜。     

妊娠早期母猪外周血浆孕酮和雌二醇水平及断奶后不育机理的探讨

母猪妊娠早期外周血出现的17β雌二醇,可能是建立母体妊娠识别及维持胚胎正常发育同孕酮一样是不可缺少的。妊娠早期(40～45天)高水平孕酮可作为早期妊娠诊断的指标。高于10毫微克/毫升可判断为妊娠,低于此值可判断为不孕。对46头配种后40～45天的长白、苏白杂种母猪,14头产后屡配不孕猪外周血浆孕酮和17β雌二醇测定(放射免疫 RIA法),经直肠检查和屠宰验证结果:妊娠组孕酮(n=39)和17β雌二醇(n=19)含量分别为19.47±7.23毫微克/毫升和31.82±24.40微微克/毫升。未妊娠及产后不孕组分别为7.87±4.25毫微克/毫升和12.72±12.16微微克/毫升。妊娠组比非妊娠及产后不孕组孕酮和17β雌二醇水平均高,经统计处理,差异分别为极显菩(P<0.01)和显著(P<0.05)。一例卵泡囊肿猪(84730号)血浆孕酮值为37.65毫微克/毫升,高出妊娠组平均值(19.47毫微克/毫升),为此可考虑用促性腺激素释放激素(G_n,RH)或促黄体素(LH)治疗。     

牛人工授精后血清中孕酮浓度的变化与受胎效果

笔者通过对授精当天、７天后和２０～２２日后牛体血清中孕酮浓度的测定（酶免疫法）与分析，探讨了该法应用于牛的发情鉴定和早期妊娠诊断的可能性。在５２头供试牛中，有４７头（９０．４％）属正常发情（排卵性发情），有１头（１．９％）属假发情（不排卵性发情），另有４头（７．７％）未发情，６０天后妊检结果，有３６头（６９．２％）怀孕，这３６头牛均为正常发情者。输精后第７天血清中的孕酮浓度，妊娠牛（ｎ＝３６）与非妊娠牛群（ｎ＝１６）间无显著差异，但在第２０～２２天后的第二次发情预计日，妊娠牛的孕酮浓度［５．３±１．７（１．２－８．２）ｎｇ／ｍｌ］则显著高于非妊娠牛［１．３±１．２（０．４－５．５）ｎｇ／ｍｌ］。采用此时血清中孕酮浓度指标，判定有４０头牛妊娠，其早期妊娠诊断的准确率在妊娠牛为９０．０％（３６／４０），对非妊娠牛达１００％（１２／１２）。因而，本法在早期妊娠诊断上具有实用价值。     

应用同期发情定时输精提高水牛繁殖率

用国产氯前列烯醇对３６头本地沼泽型水牛，和１３头摩拉杂交水牛，进行激素诱导同期发情和定时人工授精，６０天内配种母牛发情率和配种受胎率是：本地水牛１００％和８６．１１％，杂交水牛１００％和５３．８５％，明显高于同期母牛的自然情率和配种受胎率。     

妊娠母猪外周血浆中硫酸雌酮含量的研究

7头妊娠母猪从配种至妊娠36天通过颈静脉持久导管频繁采血,其中3头采血至分娩。用放射免疫分析法对血浆中硫酸雌酮(E_1S)进行测定。妊娠20天以前—般低于0.5毫微克/毫升,25至30天达到1.7～7.5毫微克/毫升的峰值,36天降至0.5毫微克/毫升以下。处于发情周期的非妊娠母猪,其E_1S始终小于0.4毫微克/毫升。据此,可利用E_1S含量进行猪的早期妊娠诊断。     

怀不同胎儿类型的母驴、母马妊娠前期外周血清中孕酮水平的变化

本文系用放射免疫法测定怀不同胎儿类型的母驴、母马妊娠前期(0～120天)外周血清中的孕酮含量。处于发情高潮时的母驴、母马外周血清中孕酮水平很低,母驴平均为1.7(0.7～2.6)毫微克/毫升(n=11),母马为0.7(0.6～0.9)毫微克/毫升(n=3) 在妊娠第8天前后,孕酮含量处于较高水平。怀驴母驴为34.0(13.3～58.7)毫微克/毫升(第13天),怀骡母驴为31.8(20.1～49.8)毫微克/毫升(第8天),怀马母马为10.0(5.1～16.8)毫微克/毫升(第8天),怀骡母马为14.0(10.0～21.5)毫微克/毫升(第8天)。在这一时期,怀不同胎儿类型的同种动物孕酮水平很接近(P>0.05),而且母驴妊娠后的孕酮水平同发情周期中黄体期相接近(P>0.05)。妊娠35天后,孕酮水平都有升高的趋势。在妊娠55天到120天间,怀骡母驴孕酮平均水平远远高于怀其他三种胎儿类型的母畜,而且不同个体间差异极大。怀其他三种胎儿类型的母畜中,以怀骡母马孕酮水平最低。在妊娠前期,两组孕马外周血清中的孕酮水平始终低于两组孕驴,表明母体的物种特性是决定孕酮水平的主要因素。     

奶牛发情期前后脱脂乳中孕酮水平与受胎率之间的关系

本试验用酶联免疫法(EIA)对34头具有发情表现的上海黑白花奶牛进行了脱脂乳孕酮含量的测定.结果表明,配种后妊娠的母牛和未妊娠的母牛在原人工授精当天的脱脂乳孕酮水平分别为0.23±0.17ng/ml 和0.65±0.72ng/ml,两者差异显著(P<0.05).母牛在开始发情后16～18小时,脱脂乳孕酮水平低于0.23ng/ml 时配种,其受胎率为100%.     

水牛早孕诊断方法比较研究

本试验的目的是通过比较几种不同的妊娠诊断方法,建立一套简便而准确的水牛早孕诊断方法。选择体况相似的8头中国沼泽型奶水牛为研究对象,通过视诊法连续观测8头母水牛配种后15个时间点眼睛形态学特征的变化;采用ELISA法检测8头母水牛人工授精后8个时间点晨血的血清中孕酮、雌二醇水平;采用牛早孕试纸检测卡检测尾根血清中的早期妊娠相关糖蛋白,以上早孕检测结果均与B超孕检结果进行对比分析。结果发现：配种后前28d观测水牛的眼部未见异常形态;怀孕母牛的孕酮水平均为5.76ng/mL,自16d开始保持在4.9～8.43ng/mL,至24d有小幅度升高,而未怀孕母牛的孕酮水平则表现下降趋势;配种后28d时采用牛早孕试纸检测卡检测发现有4头水牛怀孕,与B超孕检结果相一致。可以得出,配种后前28d形态学观察法不适用于水牛早期的妊娠诊断;孕牛与未孕母牛的孕酮激素水平变化规律存在差异,可为今后建立水牛早孕诊断方法提供技术支撑;牛早孕试纸检测卡在28d后获得较高的准确率,可应用于水牛早期妊娠诊断。该试验的开展可为今后水牛早期妊娠诊断研究提供参考,同时对促进水牛产业的健康发展具有重要的意义。     

用ELISA测乳汁孕酮进行奶牛的发情检查和早孕诊断的研究

本试验用ELISA测定了101头奶牛配种期0～2天和配种后18～24天的乳汁孕酮含量,提供了牧场分两阶段测试乳样进行奶牛的发情检查和早孕诊断的可行方案。测定的结果经临床检验核实:发情检查的确诊率为100％;配种后20～22天,妊娠牛和空怀牛的确诊率分别为92.1％和96.9％,可疑率为4.0％,总确诊率为89.9％。     

合浦县奶水牛发展现状

合浦牛杂交改良工作起步较早。上世纪六十年代初就先后引进摩拉和尼里／拉菲公牛和冷冻精液,采用本交和人工授精相结合的办法改良本地牛,有较好的品改基础。水牛是本地牛改良的重点。到上世纪末,全县有良种公牛12头,人工授精配种点6个。三十多年来共杂交配种水牛26356头。配种受胎率45．1l％。     

地中海水牛人工授精效果研究

[目的]为了解意大利地中海水牛冻精的授精效果及其在我国生长适应情况。[方法]利用国内首次引进意大利地中海水牛冻精与我国现有的摩拉、尼里——拉菲和本地水牛进行人工授精,试验选取自然发情的摩拉水牛20头,尼里水牛16头,本地水牛32头,年龄在2.5~9岁之间,采用直肠把握子宫角深部输精法,配种后40 d应用B超进行早期妊娠诊断怀孕情况。[结果]：摩拉、尼里——拉菲和本地水牛受胎率分别为50.00%、75.00%、56.25%,平均人工授精配种受胎率为58.82%,品种间人工授精受胎率差异不显著（P〉0.1）。[结论]表明引进地中海水牛冻精开展杂交组合,改良我国现有的水牛品种,提高其生产性能是切实可行的。     

奶水牛养殖小区建设--我区水牛奶业发展的加速器

近几年来，我区水牛杂交改良虽然取得厂突破性进展，但水牛奶业发展缓慢。根据5年配种改良的数据分析，共配种43．58万头母牛，水牛约占60％，受胎率按35％计算，应产杂种水牛9l518头，其中母水牛为45759头，按3岁投产至少有挤奶杂种水牛20000头以上，可是现在仅有挤奶水牛2386头，即是说，有     

农村现有杂种水牛的综合利用亟待开发

我县1985年底有水牛63,392头,其中繁殖母牛24,540头,占水牛群的38.7％。为了提高我县水牛的品质,除开展本品种选育之外,于1965年我们开始引进摩拉水牛,一九七七年又引进尼里一瑞菲水牛,全县十九个乡镇采取人工授精配种与本交结合,全面开展杂交改良,据1985年底不完全的统计,全县繁殖了杂种水牛2,193头,其中摩拉杂交,尼里杂交水牛和三品杂交水牛等达8,142头。而1986年仅有拉杂种1,540头,     

血清雌酮硫酸盐的酶免疫分析法及其在猪早期怀孕诊断上的应用

对一种实用的血清雌酮硫酸盐的酶免疫分析法进行了改进并应用于猪的早期怀孕诊断。从配种后15～26天(0天=末次配种日)的238头猪采取血样。血清雌酮硫酸盐浓度在0.9毫微克/毫升或以上者为已怀孕,这已被后来的分娩或流产所证实。用此法进行怀孕诊断,已孕猪在配种后17～26天的准确率为100％,但未孕猪直到配种后第19天其准确率仅有8.2％。在配种后20～26天进行的否定试验,其准确率为78.6％。因此,在母猪配种后20～26天用酶免疫分析法测定其血清雌酮硫酸盐浓度进行怀孕诊断总准确率可达97.8％,这种方法也许是猪早期怀孕诊断的一种实用的方法。     

猪精液抑制素主动免疫诱导黄牛超数排卵的研究

用从猪精液提取的抑制素制品作免疫原对产后２～５个月的２５头母黄牛进行主动免疫。抑制素用福氏完全佐剂乳化后间隔２０天对其进行两次免疫。在发情配种后第１０天对１１头受试牛经直肠触摸卵巢检查黄体数，同时颈静脉采血，采用ＥＬＩＳＡ法检测血清孕酮水平。用直肠触摸黄体数来估测有超排反应的母牛占１８％（２／１１），而通过孕酮水平与排卵数的线性回归关系推算有超排的牛占３６％（４／１１）。结果表明，用猪精液抑制素主动免疫黄牛，可以提高其排卵率。     

福安水牛生理生化指标的测定

选择福安水牛品种资源保护区临床健康的福安水牛公、母牛各10头进行福安水牛生理生化指标的测定。结果表明：福安水牛的呼吸频率、心率、体温都比滨湖水牛的都低;福安水牛的白细胞计数、血红蛋白比滨湖水牛略高,但在《奶牛疾病学》和《家畜生理学》的正常值范围内;福安水牛母水牛的红细胞数平均值比滨湖、摩拉、尼里、三元杂种、广西本地五种母水牛都低;福安水牛白细胞总数比湖南滨湖母水牛、摩拉水牛高,比尼里母水牛、广西灵山当地母水牛低;而福安母水牛的白细胞总数仅比广西灵山当地水牛低。福安水牛的生理生化指标在性别上没有显著性差异。     

水牛同期发情技术的研究

采用不同药物处理和给药方式,对不同品种水牛在不同季节自然发情和同期发情配种后的受胎效果进行系统研究,以期建立一套稳定的适合水牛同期发情的处理方法。试验选取本地水牛(102头)、摩拉水牛(129头)、尼里/拉菲水牛(98头)和杂交水牛(326头)共655头,分为5个组进行比较试验。结果表明:河流型摩拉水牛和尼里/拉菲水牛的同期发情率和配种受胎率均高于杂交水牛和本地水牛(P<0.05),但同为河流型的摩拉和尼里/拉菲水牛之间没有差异(P>0.05),以本地水牛效果最差,其同期发情率和配种受胎率分别为74.51%和30.39%;应用不同的药物处理时,以GnRH+PGF2α+GnRH效果最好,同期发情率和受胎率分别为88.46%和46.38%,其同期发情率显著高于其他各药物组(P<0.05),而用PGc的效果最差(分别为79.10%和33.21%);用PMSG肌注+PGc灌注法,其同期发情率和受胎率效果最好,显著高于其他各组(P<0.05),其次是PMSG肌注+PGc肌注法,PGc肌注法效果最差;在冬季进行同期发情处理时,同期发情率和受胎率最高(分别为83.75%和43.28%),明显高于其他各季节(P<0.05);水牛自然发情的人工授精受胎率和胚胎移植的受胎率均比同期发情的高,差异显著(P<0.05)。     

应用国产15甲基PGF_(2α)诱导中国水牛同期发情及定时输精的重复试验报告

对水牛广泛应用冷冻精液、推广人工授精技术的主要障碍之一,是在农村条件下难以鉴别母牛发情和适时输精的时间。为了克服这一困难,国内外应用PGF_(2x)或其类似物诱导水牛的同期发情已有少数报道。这些报道虽肯定了其溶解黄体的高效活性,但未能获得满意的受胎效果。国外,Khurana.N.K等(1982)报道用PGF_(2x)分别对14和7头摩拉青年水母牛一次和两次肌注(每次25mg)后用鲜精配种的第一情期受胎率平均只有20％;46头自然发情对照组的情期受胎率也只有17.4％。Perera,B.M.A.O等(1978)报道,用ICI80996两次肌注(每次500微克,间隔11天)35头水母牛后,用鲜精配种的情期受胎