绵羊进行性肺炎病毒与山羊关节炎一脑炎病毒的血清学交以应的研究

本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验和免疫印迹试验对实验感染绵羊进行肺性炎病毒的山羊血清与山羊关节炎－脑炎病毒抗原以及实验感染ＣＡＥＶ的棉羊血清与ＯＰＰＶ抗原的交叉反应进行了研究。     

绵羊进行性肺炎与山羊关节炎脑炎的琼扩试验比较

绵羊进行性肺炎与山羊关节炎脑炎的琼扩试验比较丁恩雨（复旦大学生命科学学院病毒学研究室，上海２００４３３）绵羊进行性肺炎（ＯＰＰ）与山羊关节炎脑炎（ＣＡＥ）均是慢性进行性传染病，以损害绵羊和山羊多种器官为特征，其病原均为反转录病毒科慢病毒亚科中的成员。...     

山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒的抗体应答反应

用琼脂凝胶免疫扩散试验（ＡＧＩＤＴ）和免疫印迹试验（ＩＢＡ）对山羊实验感染绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的抗体应答反应进行了研究。结果,用ＡＧＩＤＴ和ＩＢＡ都可在接毒山羊的血清中检测到ＯＰＰＶ的抗体。ＡＧＩＤＴ最早于接毒后１５ｄ检测到抗体;ＩＢＡ最早于接毒后４ｄ检测到抗ＯＰＰＶ的ｇｐ４４和ｐ２８的抗体,以后又陆续检测到抗ｐ９４、ｐ１４和ｇｐ１２５的抗体。由此看出,ＩＢＡ比ＡＧＩＤＴ更为敏感。本研究结果表明,ＯＰ－ＰＶ可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应,因此用ＯＰＰＶ通过山羊体传代的方法可能会得到具有良好抗原性的ＯＰＰＶ毒株。     

用山羊关节炎—脑炎病毒实验感染绵羊的研究

用山羊关节炎－脑炎病毒（ＣＡＥＶ）接种２只绵羊，３￣４个月后，可观察到接毒绵羊发育迟缓和消瘦，其中１只绵羊在接毒后第８个月出现呼吸困难。未接毒对照绵羊发育正常。用ＣＡＥＶ琼扩抗原检测，２只接毒绵羊于接毒后第７周血清抗体阳转。病理剖检在１只接毒绵羊的多种器官中观察到比较轻微的病变，组织学检查可看到轻微的间质性肺炎、脑膜炎和滑膜炎的病变。实验结果表明，ＣＡＥＶ可感染绵羊，对绵羊有一定的致病性。因此用Ｃ     

用绵羊进行性肺炎病毒实验感染山羊的研究

用绵羊进行肺炎病毒接种４只山羊３－４个月后，可观察到接毒山羊都出现了发育迟缓和消瘦现象，并有１只山羊山现了明显的临床病症。而未接毒的对照山羊则发育正常。接毒２８ｄ后，可以从接毒山羊的外周血单核细胞中分离到病毒。病理剖检发现４只接毒山羊中有１只山羊的多种器官出现了较为严重的病变，组织学检查则可看到典型的间质性肺炎、中度的脑炎和较为严重的脾炎的症变。以上的结果表明ＯＰＰＶ可以感染山羊，并对山羊有较强的     

实验感染山羊关节炎—脑炎病毒的绵羊抗体应答反应的研究

本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验和免疫印迹试验对实验感染山羊关节炎—脑炎病毒（ＣＡＥＶ）的绵羊抗体应答反应进行了研究，用两种方法都可在接毒绵羊的血清中检测到ＣＡＥＶ的抗体。琼脂凝胶免疫扩散试验最早可于接毒后的第７周时检测到抗体，免疫印迹试验最早可于接毒后的第６周时检测到抗ＣＡＥＶ的ｇｐ１２５、ｇｐ４４、ｐ３５、ｐ２８和ｐ１４的抗体，这说明免疫印迹试验更为敏感一些。本实验的结果表明ＣＡＥＶ可在绵羊体内诱生明显的体液免疫应答反应，因此用ＣＡＥＶ通过绵羊体传代的方法可能会得到具有良好的抗原性的ＣＡＥＶ毒株，这对于人工培养ＣＡＥＶ强毒是非常重要的。此外，本实验还为ＣＡＥＶ通过绵羊体传代的研究提供了非常实用的检测手段     

应用酶联免疫吸附试验检测实验感染绵羊进行性肺炎病毒的山羊血清抗体

用酶联免疫吸附试验在接种绵羊进行性肺炎产山羊血清中可测到ＯＰＰＶ抗体。抗体的最早检出时间是接毒后的第１５ｄ，且４只接毒山羊都呈阳性反应。检测结果表明，ＯＰＰＶ可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应。     

鸡病毒性关节炎病毒（AVAV）的分离与鉴定

用ＳＰＦ鸡胚细胞培养，从临床上呈现类似鸡病毒性关节炎症状病鸡的趾屈肌组织中分离出一株病毒，电镜观察，病毒直径约为７５ｎｍ，无囊膜，呈六边形，双层衣壳，理化检查，病毒对５－氟脱氧尿核苷、ｐＨ５．０和乙醚耐受，胰蛋白酶对病毒感染价无影响；核酸电泳分析，病毒由１０个核酸片段组成，呈３－３－１－３分布；血清学试验，该病毒与ＡＶＡＶＳ＿（１１３３）株呈交叉反应。上述检查结果表明分离的病毒为鸡病毒性关节炎病毒，结合现场病鸡的临床症状和双份血清抗体检测结果，认定该鸡场此次发生的传染病为鸡病毒性关节炎。     

宿主菌株及培养温度对乙型脑炎病毒cDNA克隆稳定性的影响

本研究旨在探讨宿主菌株及培养温度对JEV cDNA克隆在宿主菌中稳定性的影响。选取猪源乙型脑炎病毒基因Ⅰ型HEN0701株和基因Ⅲ型SH0601株为研究对象,分别将两毒株基因组克隆中不稳定的质粒转化不同大肠杆菌菌株,并改变转化菌的培养温度,将不同条件下培养的质粒进行序列分析。试验结果表明,不同宿主菌株对重组质粒不稳定性的影响不显著;低温培养可以克服克隆序列的不稳定。对获得的突变质粒的分析结果显示,基因组5'端的3个起始密码子和E蛋白可能与质粒的不稳定性相关。     

日本脑炎病毒NS3基因截短表达及其在神经细胞定位研究

根据GenBank发表的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因序列,合成用于克隆编码病毒NS3蛋白C端的基因片段(955~1857 bp)的引物。从感染JEV的细胞样品中,采用RT-PCR扩增出大小约900 bp的目的片段,插入到pET-28a(+)表达载体,诱导表达出NS3C蛋白。将该重组蛋白免疫小鼠制备NS3C抗血清,通过间接免疫荧光和Western blot验证,该抗血清能特异识别JEV感染Vero细胞中的NS3蛋白。使用该抗血清研究了JEV在神经细胞内的亚定位,发现NS3主要定位于JEV感染的神经细胞的胞浆中,并在细胞核周围分布明显。     

伪狂犬病病毒YN株与闽A株、苏联林交叉对流免疫电泳试验

应用豚鼠制备伪狂犬病病毒高免血清,运用醋酸透析法制备伪狂犬病病毒沉淀抗原,通过交叉对流免疫电泳试验,证明伪狂犬病病毒YN株与闽A株、苏联株之间有共同抗原。本试验建立的对流免疫电泳方法,可供我国开展伪狂犬病的诊断研究参考。