饲料中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和己烯雌酚的测定——超高效液相色谱-串联质谱法

本文建立了饲料中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和己烯雌酚的UPLC-MS/MS分析方法。饲料样品经正己烷-乙酸乙酯溶液(V/V=85:15)提取,离心后提取液氮气吹干,正己烷溶解后经-OH净化柱净化,用50%乙腈水溶液洗脱,UPLC-MS/MS分析。结果表明,3种目标化合物药物在10.0~50.0μg/kg浓度范围内线性关系良好,r≥0.99。以玉米、DDGS、配合饲料、精料补充料等为添加基质,其回收率在61.7%~99.4%之间,检出限为10μg/kg,定量限为20μg/kg。说明本方法灵敏度高,专属性好,操作简单,结果可靠,可满足饲料中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和己烯雌酚的分析检测。     

苜蓿青贮过程中霉菌毒素含量变化初探

为了解苜蓿青贮发酵过程中霉菌毒素含量的变化情况,试验以黄曲霉毒素(AFT)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)含量为检测指标,在苜蓿青贮过程中的0、0.5、1、2、3、5、7和30 d,分别测定3种霉菌毒素的含量。结果表明:青贮饲料中黄曲霉毒素的含量从青贮开始时的2.24μg/kg到第5天增长至11.34μg/kg,增长4.1倍;玉米赤霉烯酮含量从青贮开始时的49.26μg/kg到第3天增长至94.37μg/kg,增长约1倍;呕吐毒素含量从青贮开始时的50.00μg/kg到第2天增长至418.57μg/kg,增长7.4倍。此后黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮含量呈平稳状态,而呕吐毒素含量逐渐增加,但增幅减小。青贮第30天,黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素含量分别为11.91、102.67和834.28μg/kg。     

气相色谱-质谱法测定猪肝中盐酸克仑特罗的不确定度评定

对气相色谱-质谱法(GC/MS)测定猪肝中盐酸克仑特罗残留的不确定度进行评定.通过对测定过程中各变量的分析,确定了不确定度来源,建立了数学模型,计算出了各变量的不确定度,最后计算出合成不确定度.当猪肝中盐酸克仑特罗残留量为5.10 μg/kg时,测定结果的扩展不确定度为0.15 μg/kg(k=2).     

不同季节对苜蓿青贮饲料中霉菌毒素含量的影响

为了解不同季节对苜蓿青贮饲料中霉菌毒素含量的影响,试验分别在秋季、冬季、春季和夏季,测定开窖后苜蓿青贮饲料中呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和黄曲霉毒素(AFT)的含量。结果表明:在秋季、冬季、春季和夏季,苜蓿青贮饲料中呕吐毒素含量分别为402.12、527.15、610.40和690.13μg/kg;玉米赤霉烯酮含量分别为187.75、211.56、277.64和295.09μg/kg;黄曲霉毒素含量分别为10.62、13.82、24.14和28.05μg/kg。苜蓿青贮饲料中3种霉菌毒素的含量,均以秋季最低,夏季最高,差异极显著(P0.01)。     

奶牛非常规TMR日粮及生产牛奶霉菌毒素的安全评估

用豆腐渣、酱渣、米酒糟、橙皮、茶叶渣等非常规饲料配制奶牛全混合日粮(TMR),藉UHPLC/UHPLC-MS/MS法检测其中的38种霉菌毒素。结果表明,黄曲霉毒素G2(28.66±8.87)μg/kg,呕吐毒素(264.68±128.82)μg/kg,HT-2(37.80±21.15)μg/kg,伏马菌素B2(16.71±5.14)μg/kg,神经毒素C(0.47±0.13)μg/kg,青霉酸(56.80±5.20)μg/kg;麦角新素(麦角酯醇)2.57±0.84μg/kg,均未超出国家饲料卫生标准;其他31种霉菌毒素未检出,它们分别是:黄曲霉毒素类的黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1;赭曲霉毒素类的赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B;单端孢霉烯毒素B类的3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、去氧瓜萎镰菌醇-3-葡萄糖苷、雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮-X;单端孢霉烯毒素A类的T-2毒素、二醋酸麃草镰刀菌烯醇(蛇形菌素)、Diacetoxyscirpenol、新茄病镰刀菌烯醇;伏马菌素类(烟曲霉毒素)的伏马菌素B1、伏马菌素B3;玉米赤霉烯酮类的玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯醇;青贮(青霉菌属)毒素类的展青霉毒素、霉酚酸、杂色曲霉毒素、胶粘毒素、渥曼青霉素、交链孢霉酚、疣孢漆斑菌;麦角碱毒素类的2-溴基-a-麦角新碱、麦角胺、麦角醇、甲基麦角新碱。用本日粮饲喂泌乳牛,在上海及江苏境内17个牧场采集牛奶样品109件,检测其中残留的黄曲霉毒素M1(AFM1)含量,结果显示,其平均值为(81.75±87.28)ng/kg,变动范围为0³67.27 ng/kg,都低于国家标准500 ng/kg的上限,说明本试验配制的TMR所生产的牛奶是安全的。     

高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中可的松和氢化可的松残留量的不确定度评价

评定超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中可的松和氢化可的松残留量的不确定度。以本单位自建方法XCZY-051《动物源食品中克仑特罗等51种兴奋剂的检测方法液相色谱-串联质谱法》为基础,结合CNAS-GL006《化学分析中的不确定度评估指南》,建立数学模型,以猪肉中检出率最高的内源性兴奋剂可的松和氢化可的松为例分析不确定度来源并计算各不确定度得到的合成标准不确定度。当样品中可的松含量为3.386μg/kg时,其扩展不确定度为0.4374μg/kg(k=2);当氢化可的松含量为7.866μg/kg时,其扩展不确定度为0.9690μg/kg(k=2)。本方法的不确定度来源主要来自样品回收率、重复性、标准溶液配制和曲线拟合。     

牛肉组织中玉米赤霉醇及相关物残留的气相色谱-质谱法测定

建立了能够同时检测牛肉组织中玉米赤霉醇（又名α-玉米赤霉醇）及3种相关物（β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇）残留的气相色谱-质谱联用法。样品均质后,用甲醇提取样品中的待测物,浓缩,用水稀释后,乙酸乙酯萃取,浓缩。用氢氧化钾溶液溶解,正己烷去脂,乙醚萃取,氨基固相萃取柱净化,衍生化后,用气相色谱-质谱联用仪检测,外标法定量。玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇线性范围均为0.5-10.0 ng/mL,检测限均为1.0 ng/g,在添加5.0 ng/g时,回收率为71.5%-81.4%,变异系数为1.4%-5.0%。     

不同高效液相色谱-串联质谱仪测定猪肉中环丙沙星和恩诺沙星残留量的不确定度评定

评定不同高效液相色谱-串联质谱仪(HPLC-MS)测定猪肉中环丙沙星、恩诺沙星残留量的不确定度。依据GB/T 21312-2007,分别采用Thermo TSQ Quantiva型及Agilent G6470B型高效液相色谱-串联质谱仪测定猪肉中环丙沙星和恩诺沙星残留量,构建评估模型并分析检测过程。结果：当Thermo TSQ Quantiva型测定环丙沙星、恩诺沙星残留量分别为62.91、423.87μg/kg时,其扩展不确定度分别为30.20、36.45μg/kg, k=2;当Agilent G6470B型测定环丙沙星、恩诺沙星残留量分别为61.29、424.87μg/kg时,其扩展不确定度分别为38.00、46.74μg/kg, k=2。结果表明,检测过程的不确定度主要来源于标准工作曲线拟合。且ThermoTSQ Quantiva型测定引入的相对不确定度小于Agilent G6470B测定引入的相对不确定度,更为稳定。     

饲料中常见霉菌毒素的污染报告

从市场采集猪配合饲料、鸡鸭配合饲料、玉米及其加工副产品、小麦及其加工副产品、豆粕、棉籽粕和米糠共292个样品,同时测定其呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮含量。结果表明,玉米及其加工副产品和小麦及其加工副产品中呕吐毒素含量较高,最高污染水平分别达5 296.3、3 566.2μg/kg,猪配合饲料呕吐毒素含量超标率7.9%;玉米及其加工副产品和棉籽粕黄曲霉毒素B1含量较高,最高污染水平分别达300、3 992.5μg/kg,猪配合饲料、鸡鸭配合饲料、玉米及其加工副产品和棉籽粕中黄曲霉毒素B1超标率分别为5.4%、8.5%、4.4%和33.3%;玉米及其加工副产品和小麦及其加工副产品中玉米赤霉烯酮含量较高,最高污染水平分别达1 686.3、1 378.9μg/kg,猪配合饲料玉米赤霉烯酮含量超标率达5.1%;饲料原料和饲料产品中存在呕吐毒素、黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮的共同污染问题,猪配合饲料和鸡鸭配合饲料中3种霉菌毒素的共同污染率分别达35.1%和42.9%。     

不同乳酸菌剂对发酵全混合日粮霉菌毒素含量的影响

本试验研究了不同乳酸菌剂对发酵全混合日粮(FTMR)中6种霉菌毒素含量的影响。将不同乳酸菌剂组(无添加组、添加BM组、添加CL组和添加YX组)的FTMR贮存发酵64d,采用多功能色谱柱净化-电化学衍生-高效液相色谱法测定FTMR中的黄曲霉毒素(AFT),免疫亲和柱-高效液相色谱法测定玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)含量,外标法定量。结果表明,4个处理组AFB1含量分别为23.37μg/kg、19.71μg/kg、21.81μg/kg和20.39μg/kg,ZEN含量分别为1159.95μg/kg、665.71μg/kg、964.12μg/kg和851.74μg/kg,DON含量分别为137.84μg/kg、114.46μg/kg、129.71μg/kg和129.39μg/kg,4组中均未检测出AFG1、AFB2和AFG2。结果表明,乳酸菌剂能够显著降低FTMR中霉菌毒素含量,其中BM乳酸菌剂效果最好。     

獭兔玉米赤霉烯酮中毒的诊断

山东某獭兔场饲养的3 000只母兔发生了一种以流产及青年兔死亡为特征的疾病,通过对发病兔进行细菌培养及兔病毒性出血症病毒的RT-PCR以及饲料中的玉米赤霉烯酮、呕吐毒素及黄曲霉毒素进行鉴别检测,首先排除细菌病及兔病毒性出血症发病的可能,并从饲料中检测3种毒素的含量分别为1 196.1、130.8、6μg/kg,经过对照饲料标准发现玉米赤霉烯酮严重超出标准(标准为300μg/kg)。通过饲喂试验发现这次发病与所饲喂的饲料有关,诊断为玉米赤霉烯酮中毒。     

液相色谱-串联质谱法测定鱼饵中地西泮的不确定度评定

试验为评定液相色谱-串联质谱法测定鱼饵中地西泮含量的不确定度。试验通过建立数学模型分析不同来源的不确定度,评定各不确定度分量。结果显示,测量结果的相对标准不确定度为4.55%,相对扩展的不确定度为9.10%,样品中地西泮含量为（23.821±2.168）μg/kg (K=2)。研究表明,鱼饵中地西泮含量的测量不确定度主要源于试样重复测量、标准溶液配制和试样称量。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定甘蔗糖蜜中钼含量的不确定度评定

试验研究微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定甘蔗糖蜜中钼含量的不确定度来源,对其不确定度分量进行定量评定。结果显示：微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定甘蔗糖蜜中钼的不确定度主要来源为标准溶液配制、重复性,其相对标准不确定度分别为0.011 72和0.008 882。当平均称样量为0.520 0 g时,甘蔗糖蜜中钼含量为0.297 mg/kg,扩展不确定度为0.010 mg/kg,包含因子k=2,测量结果可表示为0.297 mg/kg。研究表明,甘蔗糖蜜钼含量测定的不确定度各分量贡献率大小依次为：标准品纯度及标曲配制、重复性、标准曲线拟合、重复性、消解液定容、样品称量。     

我国部分地区饲料原料及配合饲料玉米赤霉烯酮污染情况调研

试验随机采集北京、山东、河南、四川等地的饲料原料共179份、配合饲料共61份,通过免疫亲和柱净化-高效液相色谱法对所采集样品中玉米赤霉烯酮(ZEA)含量进行检测。结果表明:在被检饲料原料中,棉粕/棉籽、麸皮、青贮饲料ZEA检出率为100%,但均没有超过我国限量标准。其中,玉米和DDGS中ZEA含量最高,阳性平均值分别为477.14μg/kg和417.67μg/kg,超标率分别为23.21%和13.33%;在被检配合饲料中,大猪料污染较为严重,阳性平均值为510.42μg/kg,为中度污染。乳猪料和其他配合饲料ZEA含量较低,但检出率高达100%。由于试验过程中存在不可避免的误差,此次试验结果仅代表我国部分地区ZEA污染情况,不具有全国代表性。     

高效液相色谱法测定动物性食品中二氯二甲吡啶酚的不确定度评定

运用测量不确定度的基本方法和程序,建立高效液相色谱法测定鸡肝中二氯二甲吡啶酚残留量的测量不确定度评定的数学模型,对测量过程中的不确定因素来源进行分析和量化计算,得出高效液相色谱法测定鸡肝中二氯二甲吡啶酚残留量不确定度结果,当求得鸡肝中二氯二甲吡啶酚的残留量为78.0μg/kg 时,扩展不确定度为3.5μg/kg。     

动物组织中莱克多巴胺残留的不确定度评定

为保证实验室测试结果的准确性和可靠性,依照国家计量技术规范JJF1059—199《测量不确定度评定与表示》,对气相色谱-质谱法测定动物组织中莱克多巴胺残留量进行了不确定度的评定。分析和量化了影响测定结果的各不确定度分量,得出了被测量的合成标准不确定度和扩展不确定度。当动物组织中莱克多巴胺残留量为17．72μg／kg时,其合成标准不确定度为0．47μg／kg,扩展不确定度为0．94μg／kg（k=2）。     

2012年新季玉米霉菌毒素污染调查分析

对2012年玉米主产区新季玉米的89个样品进行霉菌毒素检测分析,结果表明,2012年新季玉米呕吐毒素和黄曲霉毒素B1的感染率较高,分别达到了53.75％和50‰,阳性平均值分别为889μg/kg和6.905μg/kg,玉米赤霉烯酮感染率与含量都比较低;从产地来看,陕西、安徽的玉米霉菌毒素污染较低,辽宁、黑龙江、山西的玉米不仅霉菌毒素感染率高,其含量也高.     

微生物法测定婴幼儿配方乳粉中生物素含量的不确定度评定

建立微生物法测定婴幼儿配方乳粉中生物素含量的不确定度评定方法,以进行检测结果的质量控制,提高检测数据的准确性。按照GB 5009.259—2016《食品安全国家标准食品中生物素的测定》进行婴幼儿配方乳粉中生物素含量的检测,根据JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》和GB/T 27418—2017《测量不确定度评定和表示》等要求,对检测过程中产生的各不确定度分量进行评定,合成标准不确定度。结果表明：标准曲线拟合和重复性检测产生的不确定度最大;婴幼儿配方乳粉中3个含量生物素的不确定度报告：样品A(19.87±2.84)μg/100 g,样品B(30.35±4.41)μg/100 g,样品C(53.15±7.15)μg/100 g（置信区间95%,包含因子k=2）;随着样品中生物素含量的增高,检测结果的扩展不确定度也随之增大。     

高效液相色谱法测定牛奶中四环素残留量的不确定度评定

建立了高效液相色谱法测定牛奶中四环素残留量的不确定度评定的数学模型.通过对测量过程中的不确定度来源进行分析与评定,当残留量为85.3 μg/kg时,求得扩展不确定度为5.0μg/kg(k=2).结果表明,标准溶液配制、重复性测量、定容体积和回收率引入的不确定度为测量结果不确定度的主要影响因素.     

鸡饲料及原料中真菌毒素分布及其对肉鸡代谢影响初探

研究对鸡饲料及饲料原料中真菌毒素进行测定,分析不同种类鸡饲料和饲料原料中真菌毒素的检出情况,并对添加真菌毒素的饲料进行肉鸡喂养试验。结果表明,所收集的48份鸡饲料中,玉米赤霉烯酮的超标率和检出率分别为12.5%和75.0%,检出最高值为2 042.44μg/kg,黄曲霉毒素B_1超标率和检出率分别为2.1%和18.5%,检出最高值为25.16μg/kg,脱氧雪腐镰刀菌烯醇和赭曲霉毒素A均未检出。不同种类鸡饲料中黄曲霉毒素B_1和玉米赤霉烯酮均有检出,超标情况以大鸡料最为严重,中鸡料和小鸡料次之;各类饲料原料中,玉米和蛋白粉中检出黄曲霉毒素B_1,干酒糟、蛋白粉、高粱和玉米中检出玉米赤霉烯酮,麸皮、高粱和玉米中检出赭曲霉毒素A。研究对肉鸡进行真菌毒素喂养试验,结果发现,饲料中真菌毒素含量越高,鸡粪便中真菌毒素含量越高,不同浓度水平鸡饲料与肉鸡粪便中真菌毒素含量随着喂养时间延长均呈先递增后减少,最终趋于稳定的趋势。相关性分析结果表明,随着喂养时间延长,玉米赤霉烯酮在肉鸡机体内的代谢过程发生变化。