鸡致病性大肠杆菌的分离、鉴定及药敏试验

从南阳地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌,经常规方法培养、纯化、镜栓及生理生化鉴定,分离出29株鸡致病性大肠杆菌.有14株分离株被鉴定出血清型,其中O<,1>4株、O<,2>3株、O<,78>7株,未定型15株,O<,1>、O<,2>,和O<,78>血清型占分离株总数的48.3%.用29株分离菌株接种供试雏鸡后,发病症状及剖检病变均符合大肠杆菌病特征,其中高致病性菌株有13株,中度致病菌株有9株,低致病性菌株有7株,分别占试验菌株总数的44.8%、31.0%、24.2%.采用Kirby-Bauer纸片法,用22种药敏纸片对29株分离菌进行药敏试验,结果表明,分离出的大肠杆菌耐药性相当普遍,仅对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、壮观霉素及新霉素等药物敏感性较高.     

延边部分地区猪致病性大肠杆菌的分离与鉴定

本文对延边部分地区送检的病死猪、疑似大肠杆菌感染的腹泻病猪采集病料,分别接种在营养琼脂平板、麦康凯琼脂培养基、伊红美兰培养基上,进行分离培养及纯培养,对可疑菌落革兰氏染色,涂片镜检。对初步鉴定的细菌进行生化试验及血清型鉴定。结果从48份样本中,共分离出符合大肠杆菌生长特性的菌株40株。将培养后的40株大肠杆菌菌液分别接种小鼠。结果表明,其中36株为高致病性大肠杆菌、4株呈低致病性。本试验验中对分离得到的大肠杆菌菌株进行血清型分型,结果共分离出37个血清型。其中O6(4/37),O78(5/37)、O90(7/37)、O107(7/37)为优势血清型。     

鸡源大肠杆菌OMP和OmpT基因与血清型相关性

为了解禽致病性大肠杆菌分离株OMP、OmpT基因与血清型相关性,对6种血清型(O78、O38、O9、O91、O11、O157)的7株鸡源大肠杆菌菌株进行了外膜蛋白(OMP)和外膜蛋白酶T(OmpT)基因的研究.用N-十二烷酰肌氨酸法提取其外膜蛋白,经SDS-PAGE电泳后考马斯亮蓝染色,对鸡源大肠杆菌菌株进行了外膜蛋白分型;用PCR和生物信息学的方法对OmpT基因进行检测与分析.7株大肠杆菌共有3个OMP型,其中,分离株5,32,9主要由相对分子质量接近的2条带组成,为OMP-1型;分离株11主要由相对分子质量接近的3条带组成,为OMP-2型;分离株14,7主要由相对分子质量接近的1条带组成,为OMP-3型.这表明同一血清型的菌株可能属于不同的OMP型,而血清型不同的分离株之间却可具有相同的OMP型.PCR检测结果显示7株鸡源大肠杆菌均携带OmpT基因,与GenBank登录的序列比较发现其同源性为91.9％～100.0％,不同血清型菌株间的同源性为91.9％～98.0％.该试验证实了同一血清型分离株之间可发生遗传分化,而不同血清型分离株之间也可具有不同程度的遗传相关性;不同血清型分离株间的OmpT基因的同源性存在一定的差异.     

鸭疫里默杆菌重庆、四川地区分离株ompA基因的遗传变异性

为研究鸭疫里默杆菌(R.anatipestifer)外膜蛋白A(OmpA)的遗传变异性,探讨与R.anatipestifer的血清型分类间的关系,对R.anatipestifer重庆、四川地区分离株进行了生化鉴定、16SrRNA基因和OmpA的遗传多样性分析。结果显示,除DY1210株不液化明胶及DZ1212株和JJ1212株水解七叶苷外,其他分离株生化特征均一致。R.anatipestifer所有分离菌株16SrRNA基因序列相似性达99%以上,均属于同一簇。ompA基因序列分3个基因群(Ⅰ群7株、Ⅱ群8株、Ⅲ群1株),其编码氨基酸序列分3个簇(Ⅰ簇8株、Ⅱ簇7株、Ⅲ簇1株),且不同血清型菌株属于同一基因群或氨基酸簇,同一血清型属于不同的基因群或氨基酸簇。结果表明,R.anatipestifer所有分离菌株ompA所属基因群或氨基酸簇与其血清型没有明显的联系。     

青岛地区肉鸡致病性大肠杆菌血清型鉴定及药敏试验

本试验对采自青岛地区多个肉鸡场的疑似大肠杆菌病的病、死鸡内脏器官进行病原的分离鉴定,并对大肠杆菌分离株进行培养特性、血清型及耐药性的检测.共分离到25株大肠杆菌,鉴定出15株血清型,其中以O1、O22 、O157、O24血清型为主,占定型菌株的60%.其中O22血清型占定型菌株的12%,为优势血清型.细菌的耐药性检测结果显示,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,25株大肠杆菌对庆大霉素、阿米卡星高敏比例分别为88%和56%,卡那霉素、硫酸安普霉素次之,敏感菌株比例在20%~48%之间,乳酸环丙沙星等抑菌作用低,敏感菌株比例低于10%.而氟哌酸等对所分离的菌株几乎无抑制作用.     

锦州地区副猪嗜血杆菌血清型鉴定

本研究先后从锦州市太和区、凌海、北镇、黑山、义县等地采集以多发性浆膜炎为主要特征的病猪病料13份,在被检的13份病料中分离到6株疑似副猪嗜血杆菌菌株,同时对所分离的菌株进行了形态学检查、分离培养、生化试验、PCR鉴定及血清型鉴定,最终证实6株为副猪嗜血杆菌,血清型分别为:血清4型1株、血清5型2株、血清12型1株、血清13型2株.本研究初步确定了锦州地区副猪嗜血杆菌流行菌株的血清型,为猪场制定副猪嗜血杆菌病的防控措施提供理论依据.     

齐齐哈尔市猪水肿病病原的分离鉴定及药敏试验

对齐齐哈尔市10个市县猪场送检的30份疑似仔猪水肿病病料进行了实验室检测.经过分离培养、形态学检查、生化鉴定、致病性试验,分离到致病性大肠埃希菌27株.应用微量平板凝集试验,对分离的致病菌进行血清型鉴定.结果表明,以O138、O139、O9血清型最多,共22株,占分离致病菌的81%.药敏试验结果显示,同一猪场不同血清型组的药物敏感性无显著差异,不同猪场相同血清型组和不同猪场不同血清型组的药物敏感性除丁胺卡那外,各组间均不相同.     

南阳市鸡致病性大肠杆菌的分离、鉴定及药敏试验

从南阳地区各养鸡场的发病鸡中分离出大肠杆菌,经常规方法培养、纯化、镜检及生理生化鉴定。分离出29株鸡致病性大肠杆菌。有14株分离株被鉴定出血清型,其中O1为4株,O2为3株,O78为7株,O1,O2和O78血清型占分离株总数的48．3％。未定型15株,用29株分离菌株分别接种供试雏鸡后,发病症状及剖检病变均符合本病特征,其中高致病性菌株有13株,中度致病菌株有9株,低致病性菌株有7株,分别占试验菌株总数的44．8％、31％和24．2％。采用22种药敏纸片对29株分离菌进行药敏试验,结果表明,分离出的大肠杆菌耐药性相当普遍,仅对头孢噻肟、丁胺卡那霉素、壮观霉素及新霉素等药物敏感性较高。     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

采用巧克力琼脂平板从贵州省某养猪场发病猪体分离到3株细菌,经培养特性观察、生化特征检查和血清型鉴定,确定3株分离菌均为猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型。经药敏试验显示,分离菌对氨苄西林、硫酸庆大霉素、丙氟哌酸、氟哌酸、头孢三嗪和四环素等药物高度敏感。     

滨海地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定

为了控制滨海地区鸡大肠埃希菌病的发生,对大肠埃希菌污染严重的部分鸡场进行了病原分离培养、血清型鉴定以及田间试验.结果表明,14株分离菌中有11株属于大肠埃希菌;分离株血清型主要有O78、O24、O93和O11 4种;免疫保护试验使大肠埃希菌病死率降低了6％.     

仔猪水肿病病原菌的分离及血清型鉴定

本试验从山西省长治市某大型猪场采集25份疑似仔猪水肿病病料进行细菌的分离和生化鉴定,分离到大肠杆菌24株,其中致病性大肠杆菌23株.采用微量平板凝集试验,对分离的致病菌进行了血清型鉴定,鉴定出22株共有11种血清型,其中以0139、0138、0141、08血清型最多,共有15株.     

山东地区禽舍空气中大肠杆菌分离鉴定及血清型调查

为了解山东地区鸡舍内空气中大肠杆菌的血清型,用伊红美蓝培养基对山东地区大型养殖场空气中大肠杆菌进行分离,通过培养特性、染色镜检、生化特性、PCR试验对分离菌株进行鉴定;对鉴定的大肠杆菌用平板凝集试验进行血清型鉴定。结果表明:共分离到202株大肠杆菌,其中有89株未能定型,占分离株的44.06%;定型了113株,占分离株的55.94%。定型的大肠杆菌共分为24个血清型,优势血清型为O_2、O_(14)、O_1、O_(11)、O_(78)和O_(20),占已定型分离株的76.99%。     

肉鸡大肠杆菌病病原菌的分离鉴定

从山西省的10个地市肉鸡场采集52份疑似大肠杆菌病料进行细菌的分离和生化鉴定,分离到大肠杆菌49株.应用微量平板凝集试验,对分离的49株致病菌进行了血清型鉴定,鉴定出42株共有11种血清型,其中以O2、O78、O1、O74、O11血清型最多,占能定型分离致病菌株的75.9%.     

宁远县猪大肠杆菌病流行病学调查报告

笔者对从宁远县12个猪场采集20份疑似猪大肠杆菌病病料进行细菌分离与鉴定,分离到致病性大肠杆菌24株。应用微量平板凝集试验,对分离的24株致病菌进行了血清型鉴定,共检出7个血清型(O1、O2、O9、O45、O78、O139、O147)共24株;其中以O9、O45、O139血清型最多,共有16株,占能定型分离致病菌株数的70%。     

红斑丹毒丝菌的分离鉴定及药敏试验

为确定引起广东潮州某猪场后备母猪发病的病原,采用自制的含马血清的牛心浸汁替代琼脂培养基,从送检的肝脏组织病料中分离到菌落形态一致的1株细菌,根据其菌落形态特征、革兰染色观察、生化特性和16SrDNA序列分析,最终鉴定为红斑丹毒丝菌,将其命名为CZ1。CZ1对31种常用抗菌药物的药敏试验结果显示,该菌对青霉素类和头孢菌素类、四环素类、呋喃类、大部分氨基糖苷类、大环内酯类、喹诺酮类均敏感;对磺胺类药物、利福平和氟罗沙星耐药。对菌株CZ1和实验室早前分离的韶关株SG7分别进行小鼠LD50测定,测得CZ1株和SG7株的LD50分别为1.02×10^4 CFU/mL和7.3×10^3 CFU/mL,表明CZ1株的毒力弱于韶关分离株SG7株。用大鼠分别制备抗CZ1株和SG7株高免血清,血清玻片凝集试验显示,抗CZ1株和SG7株高免血清均能与自身菌株新鲜培养物发生强的凝集反应。交互凝集试验显示,抗CZ1株高免血清能与SG7株新鲜培养物发生强的凝集反应,抗SG7株高免血清能与CZ1株新鲜培养物发生强的凝集反应,表明此次潮州分离株CZ1与SG7株很有可能属于同一种血清型分离株。而2种抗血清均不与现有疫苗株GC42发生凝集反应,提示猪丹毒病的病原血清型可能发生了变化。     

一例鸽大肠杆菌病的病原鉴定及其致病性研究

为了确定某赛鸽公棚病死赛鸽的病原菌,试验从送检病死鸽的肝脏分离出病原菌,然后对病原菌进行纯化培养、染色、生化试验、血清型鉴定、菌毛基因PCR检测与系统发育分析,以及肠毒素基因PCR检测、动物致病性试验。结果表明:共分离得到7株病原菌,7株病原菌均符合大肠杆菌的生物学特性;血清型分别为O55(3/7)、O1(1/7)、O164(1/7),2株未定型;分离菌除O164外,其余6株均表达黏附素基因K99、肠毒素基因STa及LT毒力因子; O55分离株对试验鸽有一定的致病性。说明该公棚赛鸽病死系由大肠杆菌引起。     

山东省临沭县鸭疫里默氏杆菌分离鉴定及生物特性分析

为了解山东省临沭县鸭疫里默氏杆菌（RA）血清型、耐药性和致病性,2023年5—6月在8家养殖场无菌采集疑似感染RA的病死鸭鹅心血、脑和肝脏组织病料,利用细菌分离培养、生化试验和PCR方法对分离菌进行鉴定,用玻片凝集试验鉴定分离菌血清型,并对分离菌进行药敏性和致病性分析。结果显示：共有12株分离菌的菌落特性、镜检、生化特点和16S rRNA基因序列符合RA特征;有7株RA为血清1型,2株为血清2型,3株为血清11型;所有菌株均对丁胺卡那、庆大霉素、新霉素和阿莫西林耐药,对头孢他啶、头孢曲松、头孢氨苄敏感;用3种血清型RA攻毒均可导致雏鸭发病死亡,且临床症状、病理变化与RA感染典型特点相同。结果表明：临沭县RA感染比较普遍,主要流行3种血清型,其中血清1型为优势血清型;RA对多种抗菌药表现出耐药性,致病性较强。建议加强定期病原学监测和耐药性分析,结合本地菌株生物学特性选择疫苗和抗菌药防治,以提高RA感染防控效果。     

湖北省部分肉鸡场致病性大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析

对湖北省部分肉鸡场的大肠埃希菌病流行病学进行调查,从采集的50份发病及死亡鸡肝脏、心脏和气囊中共分离出21株大肠埃希菌,对其培养特性、形态特征、生化特性、致病性进行了研究,初步鉴定为大肠埃希茼.同时对分离的21株大肠埃希菌的O群抗原进行了血清型鉴定,其结果为10株O78、6株O18,2株O1,还有3株有待于进一步的血清...     

副猪嗜血杆菌的分离鉴定及相关特性研究

本试验从2013年北京地区疑似副猪嗜血杆菌病病料中分离到19株革兰氏阴性短小杆菌,对分离株进行培养特性、荚膜染色、生化特性、血清型分型及PCR鉴定,结果显示分离的19株细菌均为副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,Hps）,分别属于血清4、5、7、12及13型。对分离株进行药敏试验及致病性试验,结果表明各分离株均有多重耐药性,且各分离株除GS-3外均有较强毒力。     

规模化养鸭场鸭源大肠杆菌分离株的致病性及系统发育分析

为研究鸭源大肠杆菌(E.coli)的致病性,明确鸭病原性E.coli与人和其他动物E.coli的亲缘关系及O血清型与菌种间遗传关系的相关性,本研究从我国西南地区规模化养鸭场患典型E.coli败血症的雏鸭体内分离37个血清型共82个E.coli分离株(其中优势血清型32株,其他血清型50株),以每株0.2 mL (109 cfu/mL)腿部肌肉接种7日龄健康鸭进行致病性试验;并对其中14个鸭源E.coli代表株进行16S rRNA基因克隆、测序及系统发育分析.结果表明:所有分离株全部为致病性E.coli,其中高致病株、中等致病株和低致病株分别占受试菌株的80.5％(66/82)、17.1％ (14/82)和2.4％(2/82),4个优势血清型全部为高致病株和中等致病株,分别占受试菌株的84.4％(27/32)和15.6％(5/32);14个代表株鸭源E.coli的16S rRNA形成2个主要分支,3株新发现的血清型单独形成一个较远的分支,11株常见血清型与人及其他动物源E.coli形成另一个大的分支,其中有6株与人的O157亲缘关系较近,2株与出血性E.coli O157:H7 sakai聚为一个小分支;从遗传进化的关系分析,这些菌株有可能是人类的潜在病原菌;同时还发现不同血清型的分离株可以聚为一支,而同一血清型的分离株可以处于不同的分支,常规的O血清学分型不能体现菌种间遗传关系的远近.