无籽罗汉果组培无菌系的构建

【研究目的】研究无籽罗汉果组培快繁技术要点,为无籽罗汉果再生体系建立和工厂化生产提供技术支持。【方法】以幼嫩茎段为试验材料,探讨不同灭菌时间,不同激素组合以及浓度对启动培养、增殖培养、生根培养等的影响。【结果】无籽罗汉果带芽茎段最佳消毒方法为1% HgCl2溶液消毒8 min。最适宜的无籽罗汉果茎段启动培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT,无籽罗汉果继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,增殖系数可达6.8;较适合生根的培养基为1/2MS+1.0 mg/L IBA+0.5 mg/LNAA,新稍平均生根数达7.4条,生根率可达95%。【结论】可为无籽罗汉果大规模组织培养和快速繁殖提供理论基础,并为组织培养高效体系的建立及外源基因导入提供参考。     

海南肾茶的组织培养快速繁殖

【目的】研究肾茶组织培养快繁的最佳材料、最佳激素配比、最佳培养基及练苗移栽技术,以满足产业化生产肾茶对种苗的需求。【方法】以海南产肾茶幼嫩茎段的茎尖、茎节、茎间、叶片等为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对不定芽的萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。【结果】得知外植体消毒方法可采用70%的乙醇和0.1%的HgCl2溶液分时段来进行;最佳材料是茎尖;适宜的诱导培养基为MS+ NAA0.1mg/L +6-BA1.0 mg/L,继代增殖培养基为MS+ NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L或2,4-D0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L,生根培养基为1/2MS+ CM10%+NAA0.1mg/L;【结论】成功建立了海南肾茶组织培养快繁技术体系,掌握了练苗和移栽的相关技术。     

鸡蛋花组织培养与快速繁殖

以鸡蛋花幼嫩带芽茎段为外植体,通过对初代启动培养、增殖及生根培养方案的筛选,建立了鸡蛋花的组织培养和快速繁殖体系。结果表明,最适启动培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.02 mg/L,外植体诱导萌发率达83.33%;培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,培养基MS+6-BA 2.00 mg/L+NAA 0.05 mg/L适宜继代增殖,30 d的增殖系数为8.73;生根最适培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 1.0 mg/L,生根率达98.1%。因此,本研究为鸡蛋花培养育苗与品种改良提供依据。     

黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究

以当年生黄花倒水莲幼嫩带腋芽茎段作为外植体,开展组织培养试验研究.结果表明:最佳外植体诱导培养基为1/2 MS+ BA 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,诱导率可达95.1％;最佳增殖培养基为WPM+ BA 1.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L,增殖系数为6.12,周期为25 d,不定芽生长状况好;最佳生根培养基为1/2 WPM+ IBA 0.1 mg/L+ ABT0.4 mg/L,生根率为95.67％;以泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶1∶1)为移栽基质,移栽成活率可达92.6％,苗木长势好,叶色绿.     

伊贝母鳞茎和茎段的组织培养

以新疆野生伊贝母鳞茎和茎段为试验材料,比较了外植体消毒方法、生长调节剂种类和浓度对伊贝母组织培养的影响,建立了伊贝母组织培养再生体系。结果表明:鳞茎的最佳消毒方式为70%乙醇+0.5%次氯酸钠一次消毒后用2%次氯酸钠进行二次消毒;基本培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA;增殖培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA。茎段以70%乙醇+2%次氯酸钠一次消毒效果最好,基本培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,增殖培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA。生根培养基以1/2MS+0.05mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA最佳。     

四季凤仙的组织培养及快繁体系的建立

以四季凤仙的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,对四季凤仙的组织培养及快繁技术进行了研究。结果表明:最佳的外植体除菌方式为5%的NaClO处理5min;四季凤仙的最佳不定芽诱导培养基为:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.10mg/L+GA30.01mg/L;芽的最佳增殖培养基为:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L;最佳生根培养为:1/2MS+IAA1.0mg/L。     

耐寒美国红枫的组织培养体系的建立

本试验以美国红枫带芽茎段为外植体,通过筛选外植体消毒方式,筛选出适宜的初代诱导培养、继代增殖培养、壮苗培养、生根培养的培养基,建立美国红枫组织培养体系,从而为美国红枫工厂化育苗提供技术支持。研究结果表明：最佳的消毒处理方式是先后用75%酒精消毒30 s及10%次氯酸钠消毒10 min,平均存活率为64.15%;适宜的腋芽诱导培养基为改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA。在改良MS培养基中添加0.005 mg/L TDZ+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L GA₃+0.1 mg/L IBA适用于美国红枫继代增殖培养,增殖系数为6.91;筛选最佳的壮苗培养基为MS+1.0 mg/L ZT+0.3 mg/L IBA;生根培养基为1/2MS+1.0 mg/L GA₃+2 mg/L 2,4-D,平均生根数量为5条。     

‘中黄1号’茶树带腋芽茎段组培快繁体系建立

本研究以‘中黄1号’茶树带腋芽茎段为外植体,探索外植体的取样时间和消毒条件、最佳萌发和增殖培养基、生根和壮苗培养基配方以及炼苗移栽条件。结果表明:最佳外植体取样时间为4月份,茎段经75%酒精浸泡60 s,0.1%升汞浸泡12 min,外植体存活率为91.3%,污染率为2.7%,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L GA_3作为腋芽萌发培养基,培养40 d出芽率为91.7%,以MS+4 mg/L 6-BA+1 mg/L IBA作为增殖培养基,培养45 d增值系数可达3.8。以MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA作为壮苗培养基进行壮苗,经45 d可培养至约4～5 cm后诱导生根,在50 mg/L IBA无菌溶液中浸泡5 min后,转至1/2MS+1.5 mg/L IBA生根培养基中,生根率可达82.5%。自然光条件下开瓶室温炼苗5 d,移栽到以营养土和蛭石2∶1比例基质中,成活率最高,移栽成活率为66.7%。本研究建立‘中黄1号’带腋芽茎段组培快繁体系,为‘中黄1号’茶树工厂化育苗提供技术支持。     

圆锥绣球‘北极熊’组培快繁体系的建立

为了探索木本花卉圆锥绣球的组培快繁体系的建立,本研究以‘北极熊’品种的幼嫩的茎尖和带腋芽的茎段为外植体,探索了适宜的外植体的采集时间、预处理及消毒方法、适宜的启动培养、增殖培养、生根培养基及培养方法。结果表明:适宜的茎段外植体采集时间为4月份;预处理及消毒方法为:将枝条先用75%百菌清1 000倍液浸泡约10 min后冲洗,再用洗衣粉溶液浸泡约5 min,然后流水冲洗1～1.5 h,然后在超净工作台内,用75%酒精浸泡消毒60 s,无菌水冲洗3～5遍后,再用0.1%～0.2%HgCl_2消毒(4+4) min,然后用无菌水反复冲洗3～5次,其成活率达76.7%。启动培养的最佳配方为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.06 mg/L,诱导率可达84.2%。较适宜的增殖配方为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,附加蔗糖30 g/L,增殖系数达6.0。适宜的生根培养基为:1/2MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,附加蔗糖20 g/L,生根率达83.3%,平均根长2.7 cm。本研究结果对圆锥绣球‘北极熊’的组培快繁提供了技术支持。     

枫杨组织培养快繁技术研究

为了实现枫杨优良种源和变异个体的种质保存和快速繁殖,选用枫杨带腋芽半木质化茎段为外植体,进行组织培养技术研究。结果表明：枫杨外植体适宜消毒处理为75%酒精30 s+0.1% HgCl2 5 min,外植体接种成功率可达87.5%;枫杨愈伤增殖基本培养基以MS为宜,而试管芽苗增殖和根诱导DKW培养基明显优于MS、B5;试管芽苗增殖适宜培养基为(1.0~2.0) mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+(0.3~0.5) mg/L IBA,20~25天增殖4倍以上;根诱导以1/2 DKW+(0.5~0.7) mg/L NAA和1/2 DKW+0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L IAA为宜,生根率82%以上。     

观赏性小苹果“特丽”的组织培养及快速繁殖技术

以MS为基本培养基，以观赏性小苹果“特丽”的茎段为外植体，建立了无菌培养体系，研究了不同的激素配比和不同茎段类型对增殖培养的影响以及不同的生长素组合对试管苗生根的影响。结果表明：MS+BA0.5 mg/L~2.0mg/L+NAA0.1mg/L均为适合的芽萌发培养基；MS+BA1.5mg/L+IBA0.1mg/L是最适合的茎段增殖培养基；继代增殖培养取留顶芽无侧芽和去顶芽带有1~2个侧芽两种类型的茎段有利于提高增殖系数；1/2MS+0.2mg/L IAA是最佳生根培养基。试管苗增殖系数达到5.6，生根率达91.9%。     

栀子优良品种快繁体系的建立

为了保存和尽快繁殖栀子优良种质,以品系优良的10年生栀子新萌枝条为试验材料,在添加不同植物激素的MS培养基上进行了栀子组培再生体系建立的试验研究,并探讨栀子组培苗的炼苗移栽技术。结果表明：适宜栀子外植体的启动培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增值系数可达4.6;较适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg/L,生根率为87%;炼苗移栽基质使用草炭和蛭石,比例为1∶1时效果最好。     

红花长寿花愈伤组织的诱导和植株再生研究

350002 福建省福州金山福建农林大学园艺植物生物工程研究所     

欧李高效再生体系的建立

研究旨在利用植物组织培养技术,筛选出引进资源品种（系）SN6、SN7和自育品系YC24的最适培养基,确定3个欧李品种的再生体系,为欧李高效快速规模化繁殖提供技术性支持。以3个欧李品种（系）为材料,对外植体的消毒方式、分化、增殖和生根培养阶段的最适培养基和激素配比进行研究。结果表明,头孢霉素浓度为100 mg/L时,外植体存活率最高、污染率最低;SN6、SN7的最适分化培养基为MS+ 0.5 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L ZT+ 0.05 mg/L IBA,YC24的最适分化培养基为MS+ 0.5 mg/L 6-BA+ 0.5 mg/L ZT+ 0.05 mg/L IBA;SN6的最适生根培养基为1/2MS+ 0.2 mg/L NAA+ 0.1 mg/L IBA+ 1.0 g/L活性炭,SN7、YC24的最适壮苗生根一步培养基为1/2MS+ 0.05 mg/L NAA+ 0.2 mg/L IBA。本研究建立了欧李嫩枝快速繁殖体系,可为优良种质的后续练苗移栽、扩大培养和推广应用提供参考。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

线柱苣苔无菌萌发及快速繁殖研究

为了通过组织培养方法建立线柱苣苔高效再生体系,以线柱苣苔种子为外植体,在MS培养基中添加6-BA与NAA不同浓度激素配比,筛选初代培养、继代增殖与生根培养等各阶段最适的培养基。结果表明,用0.1% HgCl2溶液对线柱苣苔蒴果与种子灭菌10 min可有效抑菌。种子萌发及不定芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。最佳的继代增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA。利用本试验所得出的结果,增殖系数为13.5/20天,可实现线柱苣苔种苗的快速繁殖,为种质资源的保护和可持续利用提供技术指导。     

兰州百合微繁的研究

以兰州百合的鳞茎增殖为基础，进行了离体微繁研究。鳞茎增殖的适宜激素组合为0.9 mg/L BA +0.1~0.2 mg/L NAA。培养基中总离子浓度和氮浓度过高或过低都会影响兰州百合增殖，3种基本培养基N6、MS、和1/2MS以N6增殖效果最好。适当提高糖浓度对鳞茎增殖有促进作用，在各处理中以蔗糖浓度为40 g/L增殖倍数高。兰州百合的适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.1 mg/L，生根率达100%，生根苗移栽成活率达90%。     

金莲花组织培养和快繁体系建立的研究

近年来,野生金莲花资源因被大量采摘而受到严重破坏,对野生金莲花进行引种驯化,并将之运用于园林绿化具有重要意义。本研究以金莲花种子为初始材料建立金莲花离体培养体系,研究不同灭菌时间对金莲花成苗的影响,同时通过比较不同培养基对金莲花增殖和生长的影响,筛选获得适宜金莲花增殖和生根培养的最佳培养基。研究结果如下：用0.1% HgCl2对金莲花种子灭菌20 min可有效抑菌;适宜金莲花增殖培养的培养基是1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,适宜金莲花生根、壮苗培养的培养基是1/2MS或1/2MS+0.05 mg/L NAA。试验结果将为金莲花快繁和规模化生产提供依据。     

结球甘蓝的离体快繁技术研究

以结球甘蓝无菌苗的胚轴和子叶为材料，几乎不生长愈伤组织，分化出不定芽。不定芽在添加6-BA的MS培养基上增殖很快，适宜的生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+ NAA0.1mg/L。通过增加培养基中糖和琼脂粉的用量，提高培养时的光照强度等有效控制了玻璃苗的产生。