烟草花粉离体萌发液体培养基的筛选和优化

以云烟97和红花大金元花粉为试验材料,研究了液体培养基配方、花粉浓度对花粉离体萌发的影响.结果表明,浓度配比10％～15％蔗糖、25 mg/L硼酸的液体培养基为最佳培养基;培养基中的花粉浓度以2.5 g/L为宜.     

培养基组分与培养条件对乌桕花粉萌发的影响

以乌桕花粉为试材,采用花粉离体培养法,研究不同培养基组分及温度对乌桕花粉萌发的影响。研究结果表明,乌桕花粉离体培养的合适温度在20～30℃,25℃下萌发率为18.05%;蔗糖、硼和钙能促进乌桕花粉萌发,单因素的最适浓度分别为10 g/L、100 mg/L和60 mg/L,花粉萌发率分别为57.32%、25.45%和31.74%。     

培养基组分及pH对油茶花粉离体萌发的影响

为探究培养基组分及pH对油茶花粉离体萌发的影响,本试验以信阳地区主栽长林系列4个油茶品种为试验材料,采用半固体培养进行单因素试验,研究不同浓度的钙、镁、钾、尿素及pH对油茶花粉离体萌发率和花粉管伸长的影响。结果表明：钙对长林系列油茶花粉的萌发率和花粉管伸长均有显著影响(P<0.05),在浓度为100 mg/L时对萌发率促进效果最佳,在浓度为2 400 mg/L时对花粉管伸长促进效果最佳;长林系列油茶的花粉管长度随镁、钾浓度的增加整体呈先增加后降低的趋势,镁在浓度为2 400 mg/L时对花粉管长度及花粉萌发率均表现出强烈的抑制效果,钾对‘长林3号’‘、长林4号’‘、长林40号’的花粉萌发率的影响均不显著;pH对长林系列4种油茶品种的花粉管长度均有显著影响;尿素对长林系列4种油茶品种花粉萌发的影响相较其他因素较小。培养基中钙浓度为2400mg/L,镁浓度在200～400mg/L,钾浓度在200～400 mg/L,尿素浓度为200 mg/L,p H值为6.5时适合油茶花粉管伸长;钙浓度为100 mg/L,镁浓度为200 mg/L时适合花粉萌发。本研究结果为油茶人工授粉和促进油茶花粉萌...     

培养基pH值及蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉体外萌发的影响

为明确培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉离体萌发的影响,筛选出花粉体外萌发的适宜条件、优化液体培养基组分,本研究以'台农一号'百香果花粉为材料,采用液体培养基离体培养的方法,开展单因素及正交试验,并用'台农一号'及'黄果'百香果的花粉验证了最适宜培养基的萌发率.结果 显示:培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对花粉萌发率及花粉管生长均有显著的影响.培养时间为4h,培养基pH值为5.5时萌发率最高,蔗糖、硼酸、PEG-4000为百香果花粉离体萌发的必需物质,适当的浓度可促进花粉萌发及花粉管的生长,但浓度过高起抑制作用,因素间存在明显的互作效应.百香果花粉离体萌发的最佳培养基为:150 g/L蔗糖+150 g/L PEG-4000+25 mg/LH3BO3+300 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+200 mg/L MgSO4·7H2O+ 100 mg/L KNO3,'台农一号'百香果及'黄果'百香果花粉在该培养基中的离体萌发率分别为95.99％及92.35％.本研究筛选到的适宜百香果花粉体外萌发的培养条件及萌发率高的液体培养基,为生产及杂交育种中的人工授粉及百香果孢粉学研究提供参考.     

水稻花粉的离体萌发

选出适合于水稻花粉萌发的液体培养基： 20%蔗糖+10%PEG4000+40 mg.L-1H3BO3+3m mol/L Ca(NO3)2+10 mg.L-1VB1, 得到80%的萌发频率。 离体萌发时, 花粉管生长很快, 在30 min内可达700 μm。 最适萌发的温度范围较宽, 27～33℃都可以得到较高的萌发频率。     

植物生长调节剂对‘秦冠’苹果花粉管生长和花粉萌发的影响

研究吲哚乙酸、萘乙酸、赤霉素、2,4-D、6-BA5种植物生长调节剂对苹果花粉管生长和花粉萌发的影响。以贮藏6个月的‘秦冠’花粉为材料,配制不同浓度梯度植物生长调节剂的固体培养基培养花粉,研究不同浓度植物激素对花粉管生长和花粉萌发的影响。结果表明,当吲哚乙酸≤1 mg/L、萘乙酸≤1 mg/L、6-BA≤5 mg/L、赤霉素≤10 mg/L时对花粉萌发有轻微促进作用,当浓度增大时抑制作用较突出;2,4-D对花粉萌发存在明显抑制作用;当赤霉素、2,4-D、吲哚乙酸、萘乙酸、6-BA浓度分别达到50、30、30、15、25 mg/L时,花粉遭受浓度迫害出现畸形扭曲。吲哚乙酸、萘乙酸、赤霉素、2,4-D、6-BA对‘秦冠’花粉管生长和花粉萌发均无明显促进作用,并且随浓度增大抑制作用较明显,人工辅助授粉时用于添加剂效果不理想。     

芝麻花粉的离体萌发及超声波处理对萌发的影响

以离体的芝麻花粉为实验材料,研究了不同的培养基组分以及超声波处理对芝麻花粉萌发的影响.实验结果表明:蔗糖对于芝麻花粉的萌发有重要作用,当蔗糖浓度为35%时,芝麻花粉内外的渗透压达到平衡,有利于花粉萌发;培养基内添加适量的硼酸和氯化钙能有效地促进花粉萌发,但超过一定浓度时起抑制作用;培养基以35%的蔗糖,40 mg/L的硼酸,200 mg/L的氯化钙较为适宜,花粉的萌发率可以达到58%左右;超声波处理的功率、处理时间以及处理次数对芝麻花粉的萌发率和破碎率有显著影响.     

大丽花花粉活力及离体萌发研究

为筛选大丽花花粉活力有效的测定方法,了解大丽花不同品种的花粉活力,以大丽花栽培品种为试验材料,采用4种方法检测大丽花花粉活力,在此基础上,采用单因素试验和正交设计试验分别对大丽花花粉的离体萌发培养条件及培养基组分进行优化,得到最优方案后进一步检测、比较不同品种之间的花粉活力。研究结果显示,TTC染色法不能使花粉着色,I₂-KI和孢粉染色法不能有效区分有活力和无活力花粉,离体萌发法效果良好,可准确直观地反映大丽花花粉活力状况, 是测定大丽花花粉活力的有效方法。当培养条件为pH 6.0、温度25℃、培养时间2.5 h时,花粉萌发率最高。培养基组分对大丽花花粉萌发的影响程度依次为PEG>蔗糖>硼酸,实际最佳处理组合为A₃B₄C₂,即PEG4000 25 g/L、蔗糖60 g/L、硼酸50 mg/L的处理组合下,大丽花花粉萌发率最高达62.1%。采用上述获得的最优方案检测22个大丽花品种的花粉活力,花粉萌发率为11.75%~78.72%,不同品种的花粉萌发率差异大,其中,‘兰花公主’的花粉萌发率最低,‘波彻儿’最高。大丽花品种的花粉活力多样性丰富,所测定的22个大丽花品种有14个品种正常可育,杂交时可用作父本;8个品种为半不育或低不育,杂交时更适合作母本。     

硼酸和蔗糖对马铃薯花粉离体萌发的影响

以马铃薯(Solanum tuberosum L.)9个品种(系)为试材,研究了不同时间、不同浓度的硼酸和蔗糖的培养基对其花粉萌发的影响.结果表明:马铃薯花粉在含15%蔗糖+90 mg/L硼酸的培养基上萌发率最高;4～6 h时为最好的观察时期;在试验条件下,青薯2号萌发率最高,萌发率达到83.25%,最低为02-1-1,萌发率为70.20%.     

阔叶杨桐花粉离体萌发和花粉管生长特性的研究

研究了不同浓度的蔗糖和硼酸,在不同温度和培养时间内对阔叶杨桐花粉萌发率和花粉管生长的影响,以期为阔叶杨桐的繁殖育种研究提供依据.结果表明:1)不同浓度的蔗糖和硼酸处理组之间存在显著性差异,蔗糖和硼酸都能促进杨桐花粉萌发和花粉管的生长,但超过一定浓度则会起到抑制作用;2)随着培养温度的升高,花粉萌发率和花粉管长度呈先升后降的趋势;3)随着培养时间的延长,花粉萌发率和花粉管长度逐渐增加,但最初的前12h内花粉萌发快,在培养的前9h内花粉管生长较快.4)实验显示:阔叶杨桐花粉培养的最适培养基是15％蔗糖和0.02％硼酸,最适培养温度为25℃,培养24 h后花粉萌发率为84.32％,花粉管长达2 003.51 μm.     

培养条件及贮藏方式对郁香忍冬离体花粉萌发的影响

花粉是植物有性生殖遗传物质传递的载体,其活力直接影响遗传物质传递的效率,花粉正常萌发是保证受精作用顺利进行的前提,人工模拟柱头中的花粉萌发环境,是检测花粉活性最可靠的方法。本研究以郁香忍冬离体花粉为试验材料,研究了不同蔗糖浓度(15%~45%)、硼酸浓度(100~300 mg/L)、不同培养温度(9℃,12℃,15℃,18℃)及贮藏方法对花粉萌发率的影响。结果表明:郁香忍冬花粉在30%蔗糖+100 mg/L硼酸溶液中,12℃条件下培养,萌发率最高。花粉短期贮藏的最佳方式为冷冻(-20℃)贮藏,冷藏(5℃)次之,而室温条件不适宜郁香忍冬花粉贮藏。该结果可为忍冬属植物人工杂交育种工作的开展提供参考依据和技术支撑。     

木麻黄花粉变应原蛋白质组分的双向电泳分析

木麻黄(CasuarinaequisetifoliaLinn)为广东和华南沿海防护林及用材的优良树种。在最近的植物花粉过敏原调查中发现,木麻黄的花粉为中国东南沿海地区主要吸入性过敏原之一,开花季节会引起过敏人群产生哮喘、过敏性鼻炎等变态反应性疾病。目前,大约40%的过敏反应症状是由于接触特定的花粉后产生的,因此,当前有关花粉过敏原的研究都主要集中在花粉中特定致敏因子鉴定和分析上。为了解木麻黄花粉中的主要致敏因子,为今后花粉过敏反应的免疫治疗提供研究基础,本研究通过三氯乙酸(TCA)法提取木麻黄花粉总蛋白质,应用等电聚焦和第二向SDS-PAGE分析法获得完整的木麻黄花粉总蛋白图谱。结果表明:木麻黄花粉变应原中有85个不同的蛋白质组分,通过ImageMaster2D分析软件对获得的蛋白质图谱进行详细的全量蛋白质组分的量化分析,进一步确定木麻黄花粉蛋白质的等电点分布主要集中在4.5￣5.5之间,分子量分布集中在10￣30kD之间,各种蛋白质的相对含量差别很大,其中所有蛋白质种类等电点和各自所对应的分子量之间存在显著的相关性。相对国内外相关报道,本研究首次应用双向电泳技术获得木麻黄花粉高分辨率的蛋白质图谱,并通过相应软件获得详细的量化信息。本研究结果将为今后进一步确定木麻黄花粉变应原中的致敏蛋白并应用与相关临床研究奠定基础。     

温度、培养基成分和渗透势对新疆雪莲种子萌发的影响

以新疆雪莲为研究对象,探讨了温度、培养基成分和渗透势对其种子萌发的影响,差异显著性分析结果表明:温度、培养基成分和渗透势显著影响新疆雪莲种子的萌发,其中温度对新疆雪莲种子萌发影响极显著(p<0.001),20/10℃变温条件下种子萌发率最高;渗透势和培养基成分对新疆雪莲种子萌发影响显著(p<0.05),种子萌发的最适培养基为1/2 MS0.PEG模拟水分胁迫研究表明:PEG高于-0.9 MPa时,种子不能萌发.回归分析表明:温度和渗透势与新疆雪莲种子萌发率之间显著相关.而培养基成分与其萌发率之间相关不显著.     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

圆柏品种‘蓝塔’扦插试验的比较

采用完全随机区组试验设计,研究了3个母株树龄(10a,25a,35a)、4种扦插基质(河沙,珍珠岩,河沙:草炭=1:1,河沙:草炭:珍珠岩=1:1:1)、4种生长调节剂种类(ABT-1,IBA,NAA,IBA:NAA=2:1)和5个生长调节剂浓度(50 mg/L,100 mg/L,200 mg/L,500 mg/L,1000 mg/L)对‘蓝塔’扦插生根的影响。结果表明:生长调节剂种类以IBA:NAA=2:1为最佳处理,且隶属函数评价表明,25个处理组合中1000 mg/L IBA:NAA=2:1速蘸10 s生根效果最好。基质以珍珠岩效果最佳,母株树龄对插穗生根影响不显著。综上所述,‘蓝塔’圆柏扦插应以珍珠岩为基质,并用1000 mg/L IBA:NAA=2:1速蘸10 s。该研究初步解决‘蓝塔’扦插生根率低的问题,为‘蓝塔’快速扩繁提供了参考。     

影响黄皮花粉活力的化学因子研究

分析了不同矿质元素和植物生长调节剂对黄皮花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明,不同化学因子对黄皮成熟花粉萌发和花粉管生长表现出不同的作用效果。在B、Ca、Mn三种矿质元素中,黄皮成熟花粉的萌发率由大到小为：B〉Mn〉Ca,生长速率由大到小为：Mn〉Ca〉B;IBA、GA3、IAA等对黄皮成熟花粉萌发率的促进作用由大到小为：IBA〉GA3〉IAA,而生长速率由大到小则为：GA3〉IAA〉IBA。在这些化学因子中,对黄皮成熟花粉萌发率促进作用最明显的是1．5mmol／LIBA,为22．6％,是ck的322．1倍,而对生长速率促进作用最明显的则为60mmol／LMnCl2,为109．7μm／h,是ck的22．6倍。