基于高效液相色谱的一种测定鸡蛋中三聚氰胺残留的方法

针对鸡蛋中的三聚氰胺,建立一套基于高效液相色谱的快速测定方法。以50%甲醇-1%三氯乙酸为提取溶液,经超声、离心、正己烷除脂后,阳离子固相萃取柱净化,采用庚烷磺酸钠离子对试剂∶乙腈(85∶15,V∶V)为流动相,C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),外标法定量。该方法在0.5~80μg·m L-1线性良好,相关系数为0.999 8,加标回收率94.58%~97.62%,定量限为0.3 mg·kg-1。     

不同产地苕叶细辛中马兜铃酸A的HPLC测定

建立了反相高效液相色谱法测定苕叶细辛(Asarum Insigne Diels)中马兜铃酸A含量的方法。色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇∶0.1%冰乙酸=70∶30(V/V)为流动相,检测波长为225 nm。结果表明,马兜铃酸A在0.087 4~8.098 0μg/m L(R2=0.999 7)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率为96.95%~99.42%,相对标准偏差为2.63%~3.72%,检测限为0.003μg/m L。该方法灵敏度高、操作简便、结果准确、重复性好,可用于苕叶细辛中马兜铃酸A的测定。     

对甲基苯磺酰氯衍生化液相色谱法测定土壤中草甘膦

建立简单、灵敏的土壤中草甘膦残留量的高效液相色谱检测方法.土壤样品用0.6 mol·L-1 KOH提取,经对甲基苯磺酰氯衍生化后,注入C18柱中分离,用紫外检测器在235 nm波长检测,流动相组成为0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 5.5)∶甲醇=65∶35(V∶V).样品中草甘膦浓度在0.5～40 mg·L-1范围内与峰面积呈线性关系(R2=0.9998).草甘膦的最小检出量(LOD)为2×10-10 g,土壤中最低检出浓度(LOQ)为0.02 mg·kg-1,平均回收率及变异系数分别为81.3%～98.3%和0.66%～5.63%.     

高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量

利用高效液相色谱法测定清肺颗粒中甘草酸的含量。采用C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),在室温下,以甲醇-0.2 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(66∶33∶1,V/V/V)为流动相,250 nm为检测波长,流速1.0 mL/min。结果表明,甘草酸在4.90～195.90μg/mL范围内,线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为91.97%,RSD为3.41%。本方法简单快捷、精密度好,可用于控制清肺颗粒中甘草酸的含量。     

长柄石杉中石杉碱甲的含量测定

[目的]建立HPLC法测定长柄石杉中石杉碱甲的含量。[方法]色谱条件:色谱柱为ZORBAX Extend-C18(150 mm×4.6 mm,4.5μm),流动相为乙腈-浓度0.02 mol/L磷酸二氢钾(8∶92,V/V),检测波长为310 nm,柱温为25℃,流速为1 ml/min,进样量为10μl。[结果]石杉碱甲在0.046～0.460μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(R=0.999 9),平均回收率为97.45%,RSD为2.70%,平均含量为0.025%。[结论]该方法简单、易行,可用于长柄石杉中石杉碱甲的含量测定。     

RP-HPLC法测定细叶杜香叶中4种活性成分的质量分数

为了建立测定细叶杜香叶中秦皮乙素、秦皮素、金丝桃苷和槲皮素质量分数的方法,采用反相高效液相色谱法(色谱条件:色谱柱为Inertsil ODS-SP(5 μm,4.6mm×250 mm,柱号:9K192609)、流动相为V甲醇)∶V(0.2%醋酸)=43∶57、流速1.0 mL·min-1、检测波长350 nm),测得秦...     

赪桐叶中黄酮的提取及抗氧化活性的研究

本试验研究赪桐叶中总黄酮的提取工艺及体外抗氧化活性。在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验法优化其总黄酮提取的工艺,并测定赪桐叶的黄酮的抗氧化能力。结果表明:赪桐叶的黄酮提取最佳工艺为乙醇浓度80%,料液比1∶30 (g/m L),提取时间20min,赪桐叶片总黄酮提取率为4. 13%;在一定质量浓度范围内,黄酮总还原能力随着浓度的升高而增强,当黄酮浓度为1mg/m L时,黄酮对DPPH·和·OH的最大清除率分别为87. 2%和86. 5%,具有较强的抗氧化活性。     

翡翠贻贝酶解液体外降压活性评价方法研究

[目的]研究翡翠贻贝酶解液的体外降压活性,为后期开发药品和保健食品等提供前期的理论和试验基础。[方法]采用反向高效液相色谱法检测翡翠贻贝酶解液的体外降压活性。色谱柱:YMC C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:A为0.1%TFA乙腈,B为0.1%TFA水;测定波长228 nm;流速1 mL/min;进样量20μL。[结果]该方法使翡翠贻贝降血压肽、HHL和马尿酸较好地分离,在0.02～0.20 mg/mL线性关系良好(R~2=0.997 2),最低检出限为50 ng,定量限为200 ng,平均回收率为101.87%。[结论]该方法简便、快速、灵敏度高,可用于评价翡翠贻贝降血压肽的体外活性。     

乳白香青中绿原酸含量的HPLC法测定

建立高效液相色谱法测定乳白香青中绿原酸含量的方法。采用ZORBAXSB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以甲醇∶0.04%磷酸(V∶V=23∶77)为流动相,流速1.0 mL/min;检测波长330 nm;柱温30℃;进样量10μL。绿原酸标准品的进样浓度在0.012～0.240 mg/mL的范围内呈现良好的线性关系,r=0.999 9,加标回收率平均值为101.20%,RSD=1.30%(n=9)。高效液相色谱法精密度高,重现性好,是测定乳白香青中绿原酸含量准确、简便、有效的方法。     

鞘脂合成中间产物及其抑制剂的OPA-HPLC-UV检测方法

为建立能同时测定真菌鞘脂合成过程中SPT抑制剂以及中间产物二氢鞘鞍醇、植物鞘氨醇的检测方法。利用邻苯二甲醛衍生化,高效液相色谱法测定。色谱柱为Inertsil C8-3柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相由乙腈-磷酸溶液,柱温25℃,流速1m L·min-1,检测波长230 nm。结果表明,二氢鞘鞍醇浓度在3.125~100.0μg/m L(r=0.9993)、植物鞘鞍醇浓度在5.0~500.0μg·m L-1(r=0.9971)范围内与衍生物峰面积呈良好的线性关系。证明该检测方法准确、可行,为下一步对虫草中的SPT抑制剂以及鞘脂中间产物进行同时检测提供了帮助。     

芦荟中芦荟素含量的测定

建立了高效液相色谱法测定芦荟中芦荟素含量的方法。芦荟用甲醇、水提取,在354 nm波长下检测,色谱柱为Discovery(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:甲醇∶水=50∶50(V/V),流速:1.0 mL/min。芦荟素的质量浓度在5.0~80.0 mg/L范围内与峰面积呈良好线性关系,相对标准偏差为1.6%~2.2%,回收率为95.0%~98.3%。     

HPLC法测定藏药八味獐牙菜丸中盐酸小檗碱的含量

[目的]建立藏药八味獐牙菜丸中盐酸小檗碱含量的测定方法。[方法]采用反相高效液相色谱法测定,色谱柱为依利特Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.033 mol/L磷酸二氢钾溶液(25∶75,V/V)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长为265 nm。[结果]在0.165 6~2.318 4μg范围内,盐酸小檗碱浓度与峰面积线性关系良好,R=0.999 5,平均回收率为97.30%,RSD为1.57%(n=6)。[结论]该测定方法快速、重现性好,可用于八味獐牙菜丸中盐酸小檗碱成分的含量测定。     

复方阿胶泡腾片中4种氨基酸含量测定

采用高效液相色谱法对复方阿胶泡腾片中的4种氨基酸含量进行测定。色谱柱:Unitary C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 m);流动相:A相为乙腈∶0.1 mol/L醋酸钠溶液(醋酸调节pH为6.5)(7∶93),B相为乙腈∶水(4∶1),按照一定梯度进行洗脱;流速:1 mL/min;波长:254 nm;柱温:43℃;进样量:5 L/min。测定产品中L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的含量均值分别为9.345 9、20.5200、10.580 0、14.736 0 mg/g。方法学研究表明,试验所选用的测定复方阿胶泡腾片中4种氨基酸含量的方法稳定、准确、可行。     

解淀粉芽孢杆菌gfj-4发酵上清液及其混剂对番茄早疫病菌抑制活性研究

为探究解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)gfj-4次级代谢产物及其化学杀菌剂复配剂对番茄早疫病菌(Alternaria solani)抑制活性。文章采用菌丝生长速率法测定接种量、发酵培养时间对抑菌物质的影响及发酵上清液、脂肽粗提物、发酵上清液与化学杀菌剂混配剂的病菌抑制活性。结果表明,种子液最适接种量为0.125%(V/V),最适发酵时间为96 h。生防菌发酵上清液和脂肽粗提物对番茄早疫病菌EC50分别为3.774和0.943μL·m L-1。番茄早疫病菌对咪鲜胺、苯醚甲环唑和丙环唑敏感性较高,其中咪鲜胺对病菌EC50达0.095μg·m L-1。发酵上清液和吡唑醚菌酯混配主要表现为相加和增效作用,其中以8.2比例混配毒性比最高为1.26。研究结果可为番茄早疫病防治措施更新和研制新配方农药提供理论依据。     

夏枯草总黄酮的抗氧化活性研究

采用分光光度法研究了夏枯草(Prunella vulgaris L.)总黄酮的抗氧化活性。结果表明,在浓度为0.12 mg/m L时,对羟基自由基(·OH)清除率达到96%;在浓度为0.004 mg/m L时,对ABTS自由基正离子(ABTS+·)的清除率达到99%;在浓度为0.01 mg/m L时,对超氧阴离子(O2-·)的清除率达到92%;夏枯草总黄酮也具有较强的还原能力,证明夏枯草具有良好的还原能力和自由基清除活性。     

LC-MS法测定不同产地蛇足石杉石杉碱甲含量

建立起一套基于液相色谱串联质谱联用法(LC-MS)测定石杉碱甲(Hup A)含量的方法。样品用1.5%CH_3COOH提取总生物碱,在正离子模式下,采用离子监测模式(SIM)检测,定量分析离子为50~2 000 m/z,在Agilent ZORBAX SB-C18平台上(4.6 mm×250 mm),流动相(体积比)为甲醇∶水(90∶10),流速0.5μL·min~(-1),检测波长310 nm,柱温28℃,进样量10μL。结果表明,在前述试验条件下,Hup A在50~400μg·m L~(-1)浓度范围内线性关系良好(r=0.999 4)。利用该方法测定4产地蛇足石杉不同部位Hup A含量,结果显示,蛇足石杉叶和茎中的含量均是云南(玻璃温室种植)江西湖南福建。     

DNFB柱前衍生化RP-HPLC测定大鼠肝组织18种氨基酸

目的采用柱前衍生RP-HPLC法测定大鼠肝脏组织中18种氨基酸的含量。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,采用Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇作为流动相A,0.015mol·L-1醋酸钠缓冲液(pH=6.0)作为流动相B,梯度洗脱,柱温30℃,流速为1ml·min-1,检测波长360nm。结果在30min内大鼠肝脏组织中的18种氨基酸可以得到完全分离,且各氨基酸浓度与峰面积之间具有良好的线性关系,回收率在88.3%~110%之间。结论该方法简便、快捷、灵敏、准确,有高度的稳定性和很好的重复性。可以为其他生物样品氨基酸测定提供参考。     

基于PRiME HLB净化高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中苯乙醇胺A

建立高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中苯乙醇胺A的分析方法。样品用80%(V∶V)乙腈水溶液提取,经PRiME HLB净化后,采用高效液相色谱-串联质谱法测定,外标法定量。以0.1%甲酸水溶液和甲醇作为流动相,用Hypersil GOLD C18色谱柱(1.9μm,2.1mm×100mm)进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI+)、正离子扫描多反应监测(MRM)模式进行定性和定量分析。结果表明:苯乙醇胺A在5.0～200.0ng·mL-1的范围内线性关系良好(r=0.999 2)。在10.0、20.0、50.0μg·kg-1添加水平下的回收率为82.2%～91.5%,相对标准偏差(n=6)为6.8%～8.5%,检出限(以信噪比>3计)为0.1μg·kg-1,定量限(以信噪比>10计)为0.3μg·kg-1。该方法精密度好,灵敏度高,可用于大批量快速准确测定饲料中的苯乙醇胺A,有效提高工作效率。     

大鲵糖肽组分的高效液相色谱分析及其抗氧化活性研究

利用高效液相色谱方法对大鲵糖肽进行分析,使用Sino Chrom C18反相柱和紫外可变波长检测器,并测定大鲵糖肽的羟基自由基清除能力。结果表明：大鲵糖肽组分的最佳液相色谱检测条件为：检测波长280 nm;流动相为V（乙腈）∶V（甲醇）∶V（0.1%三氟乙酸）=5∶5∶90;流速1.0 mL/min;进样量20μL。大鲵糖肽在5.78μg/mL浓度时,羟基自由基的清除率达60.19%,具有较好的抗氧化活性。     

盐酸林可霉素可溶性粉含量测定方法

建立并验证了高效液相色谱法测定盐酸林可霉素可溶性粉中林可霉素含量的方法。采用C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),检测波长为214 nm,流动相为0.02 mol/L磷酸氢二铵-乙腈(75∶25,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃。结果表明,林可霉素在0.1～4.0 mg/mL范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.999 7(n=8),平均回收率99.5%,RSD为1.2%。该方法流动相中含盐量降低,可减少盐溶液对色谱柱的污染,提高色谱峰的理论板数,同时流动相配制方便,快速。