应用SSR标记鉴定甜瓜流星翡翠的种子纯度

为建立一套高效、准确、成本低的室内流星翡翠杂交种种子纯度检测技术体系,以甜瓜杂交种流星翡翠及其亲本为材料,通过124对简单重复序列标记(SSR标记)引物筛选出流星翡翠及其父母本材料间多态性引物共3对,分别为GCM90、GCM92和GCM119。利用这3对多态性标记引物进行甜瓜杂交种种子纯度的快速鉴定,鉴定结果为99.65%,表明本研究筛选的3对SSR标记可以快速鉴定甜瓜流星翡翠的种子纯度。     

黄瓜品种‘川绿2号’SSR指纹图谱的构建和纯度鉴定

为了快速而准确地鉴定杂交黄瓜种子的纯度和真伪,用164对全基因组覆盖的SSR引物对黄瓜品种‘川绿2号’及其亲本进行多态性筛选。结果表明,28对引物在亲本间具多态性,这些引物在1~7号染色体均有分布,其中2、6号染色体上分布有较多多态性位点。28对多态性引物中共显性引物22对,缺失多态性引物6对。共显性引物中有10对引物在杂交后代表现为清晰、稳定的父母本互补的带型,特异性强,可分辨程度高,可以用来区别其中混杂的母本、父本及其他种子,为‘川绿2号’及其亲本指纹图谱的核心引物。利用这10对引物对1批‘川绿2号’种子进行检测,分子标记鉴定纯度为96.0%,真、假杂种编号与田间鉴定结果一致。这28对引物组成指纹图谱不仅能为‘川绿2号’杂交种的真伪鉴定、纯度检测及亲本提纯等工作提供更加准确的技术指导,还可为遗传多样性分析、重要表型基因定位分析等提供信息。     

番茄品种浙粉702 DNA指纹图谱构建

用CTAB法提取番茄品种浙粉702及其亲本的基因组DNA,通过CAPS和SSR方法,构建DNA指纹图谱,并用于种子纯度的鉴定。以浙粉702及亲本的基因组DNA为模板进行筛选,结果表明,13对SSR引物扩增产物表现为多态性;CAPS引物扩增得到PCR产物经酶切分析,有17对引物的扩增产物表现出酶切多态性。经种子真伪鉴定、纯度鉴定、定向验证,表明构建的浙粉702指纹图谱有效。     

十二份三系杂交稻亲本的指纹图谱构建与应用

选取分布于水稻12条染色体上的112对SSR引物对12份杂交稻亲本进行多态性分析,检测出35对多态性引物。选取其中25对多态性好的引物构建了12份杂交稻亲本的指纹图谱。利用特异引物分别对万优2号和K优88的杂交种进行纯度鉴定,结果表明,分子标记纯度鉴定与田间鉴定结果差异不明显。     

SSR标记技术在“紫甘1号”紫甘蓝杂交种纯度鉴定中的应用

本研究以"紫甘1号"杂种一代及其亲本为材料,以CTAB法提取子叶DNA,运用SSR分子标记方法对种子纯度进行鉴定,并与田间纯度鉴定结果进行比较。实验结果表明,引物Bo-005在"紫甘1号"及其亲本间具有多态性,该标记鉴定200株杂种一代,种子纯度为98%,与田间鉴定结果完全一致,可以应用于"紫甘1号"的杂交种纯度鉴定。     

番茄品种渝粉109的DNA指纹图谱构建

用SDS法提取番茄杂一代品种"渝粉109"及其亲本的基因组DNA,通过RAPD-PCR分子标记方法,构建其DNA指纹图谱,用于种子纯度鉴定。利用200个RAPD随机引物,以杂一代品种及其亲本的基因组DNA为模板组进行筛选,结果显示:8个RAPD引物的DNA条带表现出多态性,其中R3能稳定地在亲本之间扩增出互补的特异条带。经定向验证、种子真伪鉴定、纯度鉴定,表明构建的渝粉109指纹图谱有效。     

甬砧系列葫芦类型砧木品种分子指纹图谱构建

以市售同类型砧木品种神通力和京欣砧1号为对照,对甬砧系列葫芦类型砧木品种甬砧1号、甬砧3号、甬砧4号和甬砧5号进行RAPD和SSR分子指纹图谱构建.在104个RAPD、240对甜瓜SSR和100对瓠瓜SSR中,共筛选到7个RAPD引物、2对甜瓜SSR引物和5对瓠瓜SSR引物,在6份砧木材料中稳定扩增出18个多态性位点.3种分子标记揭示供试砧木材料的多态性比例分别为0.98％、0.48％和1.54％.通过合并相同赋值的差异引物和位点,得到由9个差异引物产生的13个多态性位点构成的甬砧系列分子指纹图谱.该图谱出现概率为1/115736040000,能够有效区分甬砧系列及其对照,起到品种鉴定与保护作用.     

冈杂棉8号SSR数字指纹图谱的构建

利用32对SSR引物对冈杂棉8号及其亲本进行多态性检测,共有13对引物在2个亲本间具有多态性,这些引物在两亲本间扩增出大小不同的带,且这些标记位点在F1中均表现为杂合带,为共显性标记。将这13对引物在亲本和杂交种间扩增检测得到的01带型数据转换成十进制数据,构建了冈杂棉8号及其亲本的数字指纹图谱,为杂交种的真伪鉴定和纯度检测提供了方法。采用多对引物构建的杂交棉数字指纹图谱,能为冈杂棉8号的真伪鉴定、纯度检测及亲本提纯等工作提供更加准确的技术指导。     

"夏光"、"早夏16"甘蓝杂交种DNA指纹图谱的构建

用SDS法提取甘蓝(Brassica oleraceavar.capitata)杂交种“夏光”、“早夏16”及其各自亲本的基因组DNA,通过SSR、RAPD两种分子标记方法构建其DNA指纹图谱用于纯度鉴定。利用30对甘蓝SSR引物和50个适用于甘蓝的RAPD引物,以各杂交种及其亲本的基因组DNA为模板组合进行筛选,结果显示:多数SSR引物对两组合扩增带型一致,未能建立SSR指纹图谱;通过RAPD标记方法筛选出能鉴定两杂交种纯度的引物分别为S15、S42、S147和S42、S78、S88,其中引物S42对两组合均能扩增出特异的RAPD指纹图谱,并将RAPD指纹图谱转变为相应的数字指纹。     

杂交稻种子纯度的SSR分子检测及应用研究

利用SSR标记构建了15份恢复系和11份不育系共26份籼型杂交水稻亲本的DNA指纹图谱,筛选出了冈优725和Ⅱ优838两个杂交种亲本的共显性SSR标记。同时对四川省6家种子企业生产的两个杂交水稻品种冈优725、Ⅱ优838及其亲本进行田间和SSR标记纯度鉴定。结果表明两种鉴定方法无显著差异,均可应用于种子纯度检测,但分子标记纯度检测的结果更准确、可靠。不同来源的种子纯度存在显著差异,6家种子企业提供的亲本及杂交种的纯度普遍较低,多数未达国家标准。     

基于SSR标记的甜瓜品种（系）DNA指纹图谱库的构建

【目的】建立甜瓜品种的DNA指纹图谱数据库,实现对甜瓜品种进行快速、准确的鉴定。【方法】应用SSR分子标记技术,首先利用20份具有代表性的甜瓜品种（系）筛选SSR引物,然后对105份不同甜瓜品种（系）进行指纹图谱的构建。【结果】从1 219对SSR引物中筛选出18对引物为105份材料形成了多态性的指纹图谱,其中每对引物可以检测到4-14条数目不等的多态性条带,平均为9条;多态性信息含量（PIC）平均为0.68,变化范围为0.55-0.82。105份材料间的相似系数为0.70-0.99。利用这18对SSR核心引物构建的指纹图谱库能够有效区分所有供试材料,并且为每份材料建立了一份独特的指纹图谱。【结论】SSR标记适于构建甜瓜品种  （系）的DNA指纹图谱库,可为甜瓜品种鉴定提供依据。     

结球甘蓝西园六号种子纯度的SSR和SRAP鉴定

用SSR和SRAP标记技术对结球甘蓝西园六号进行品种纯度鉴定,从94对SSR引物和109对SRAP引物 中分别筛选出4对条带清晰、多态性较高且具有高度区分度的引物.依据8对引物在西园六号及其亲本的聚丙烯酰 胺凝胶电泳检测结果,构建了清晰的品种指纹图谱.通过对特异片段的序列分析,比较了亲本特异片段的碱基差异 并揭示了杂交后代中产生非亲条带的本质,将SSR转化为SCAR标记.SSR和SRAP分子标记构成的DNA 指纹 图谱及SCAR标记,为西园六号品种纯度快速鉴定提供了科学依据.     

杂交棉苏杂118的SSR指纹图谱构建

筛选了217对SSR引物,共有12对引物在两个亲本间具有多态性,其中有7对引物在两亲本间扩增出大小不同的带,且这些标记位点在F1中均表现为杂合带,为共显性标记;另外5个引物的F1带型与母本或父本一致,为显性标记。构建杂交棉苏杂118的SSR指纹图谱,为该品种的真伪鉴定和纯度检测提供了分子依据。     

辣椒基因组SSR引物的开发及品种纯度分子鉴定

辣椒是世界上重要的蔬菜作物之一,基因组简单重复序列(simple sequence repeats,简称SSR)标记的开发对于辣椒分子育种和杂交种子纯度检测具有重要意义。为了检测辣椒品种绿陇3号杂交种子的纯度,基于辣椒全基因组序列开发了75对SSR标记。结果表明,只有SSR标记p50对父母本的扩增结果表现为带型清晰、共显性,且具有高多态性,可进一步用于杂交种的纯度检测。为了确保标记p50的准确性和可靠性,对其PCR产物进行了进一步测序。测序结果表明,在父母本中分别扩增出了251、293 bp的序列。用标记p50对绿陇3号辣椒进行纯度检测,结果显示,种子纯度为100%,鉴定结果与田间纯度一致。新SSR分子标记的开发,为辣椒杂交种子纯度的鉴定提供了参考,也为辣椒种质资源遗传多样性分析及分子育种研究奠定了基础。     

快速检测甜瓜西州蜜17号种子纯度的SSR标记

[目的]以甜瓜杂交品种西州蜜17号及其母本为材料,运用SSR分子标记技术对杂交种与母本之间的扩增谱带的多态性进行研究,筛选出一种能够快速检测杂种的SSR标记.[方法]在选取的18个SSR标记中,SSR标记CMBR068在母本中扩增出一条谱带,在杂种中扩增出两条大小差异较大的谱带,其中一条谱带的大小与母本扩增的谱带大小一致.[结果]利用2.5;琼脂糖凝胶电泳技术和CMBR068标记对100粒杂交种子的纯度进行检测,种子纯度的鉴定结果为98;.[结论]西州蜜17号甜瓜杂交种子的纯度,可利用SSR标记CMBR068,结合2.5;琼脂糖凝胶电泳技术进行快速检测.     

香优1号DNA指纹分析及种子纯度鉴定

利用RAPD和SSR两种分子标记检测杂交稻香优1号及其亲本的DNA指纹，分别筛选到7个稳定的RAPD标记和1个SSR标记用于鉴别香优1号、川香28A、川香28B和CD22，进一步应用于杂交及其亲本种子纯度鉴定。     

两系超级稻丰两优四号指纹图谱构建及纯度快速鉴定

为加强两系超级稻丰两优四号的品种质量控制,打击假冒伪劣,该研究利用SSR分子标记技术构建丰两优四号的指纹图谱,筛选适用于该品种的SSR特征引物,并利用纯度SSR快速鉴定技术体系鉴定丰两优四号的纯度。结果表明:在48对标准SSR引物中,有19对引物在丰两优四号亲本间具有多态性,杂交种呈现双亲互补带型,可用于该品种纯度鉴定;利用SSR快速鉴定技术鉴定丰两优四号样品纯度的结果表明,引物RM224和RM336不仅能区分母本、父本混杂,还能鉴定多种串粉和机械混杂,是对丰两优四号纯度鉴定较为适宜的特征引物。     

利用SSR标记建立杂交水稻分子指纹图谱数据库

鉴别优质种子并保护育种者的知识产权是市场经济发展的需要。长期以来,人们主要通过形态特征来鉴定区分水稻种子质量,但这种鉴定方法准确性显然较差。近年来,利用不同水稻种质在DNA水平上的差异（即DNA分子指纹图谱）进行品种鉴定已引起人们的关注。RAPD标记最早被用于鉴定杂交稻的纯度,并取得较好的结果。但由于RAPD标记不够稳定,且为显性标记难以将亲本和F1杂种区分开,因而在水稻纯度鉴定和指纹图谱分析中利用有限。由于SSR是共显性标记且多态性丰富,相比其他标记如RFLP或RAPD,更能揭示生物遗传多样性。     

4个加工番茄新品种SSR指纹图谱的构建与品种鉴定

[目的]探明加工番茄主要品种的遗传变异,建立准确高效的种子纯度鉴定方法.[方法]利用SSR引物对4个加工番茄杂交品种及其8个亲本进行PCR扩增,经4;的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,进行带型分析.[结果]从34对SSR引物中筛选出10对扩增产物具有稳定多态性的引物,这些引物分布在番茄整个基因组,每对引物可以检测到2～4个数目不等的多态性片段,共28个多态性片段,平均2.8个,片段大小介于60～150 bp,成功构建出4个加工番茄杂交种及其8个亲本的指纹图谱,并鉴定出了这4个杂交种的共显性标记.[结论]这些标记不仅可用于亲本材料和杂交品种的真伪鉴别,还可为杂交种纯度的鉴定提供可靠的方法,对亲本知识权的保护及杂交种推广具有重要意义.     

西园四号甘蓝纯度的RAPD鉴定及其在杂交制种中的应用

利用RAPD-PCR分子标记技术,对西园四号甘蓝及其亲本的DNA指纹进行了分析研究,从520个随机引物中筛选出1个特征引物,构建了相应的DNA指纹图谱,用于西园四号杂种、亲本A和亲本B的种子质量鉴定。同时,利用RAPD对纯度的快速鉴定,可以对杂交制种进行指导。