高效液相色谱法测定西柚不同组织中的10种柑橘黄酮类化合物

该文建立了圣草次苷、柚皮芸香苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、香风草苷、枸橘苷、甜橙黄酮、川皮苷和蜜橘黄酮等10种柑橘黄酮类化合物同时测定的高效液相色谱方法。色谱柱为Welch Ultimate XB-C18(5μm,4.6×150mm),采用甲醇-水(含0.1%甲酸)流动相体系,梯度洗脱,检测波长为280nm。方法学考察结果表明,对10种柑橘黄酮类化合物,提取效率均大于95%;在给定的范围内线性关系良好,相关系数r2均大于0.99;方法的精密度和重现性良好,相对标准偏差(RSD)分别小于5.4%和7.1%。该方法用于西柚不同组织中柑橘黄酮类化合物含量的测定,结果显示,柑橘黄酮类化合物在西柚果皮、囊衣和果瓣中的含量和分布差异显著。     

中华补血草5种黄酮类化合物抗氧化和抗肿瘤活性的比较

比较研究5种中华补血草黄酮类化合物——异鼠李素、槲皮素、异槲皮苷、木樨草素、芹菜素的体外抗氧化和抗肿瘤活性。运用MTT试验,检测5种中华补血草黄酮类化合物对Hep G2和Hela肿瘤细胞体外增殖的影响;运用DPPH自由基清除试验,检测中华补血草黄酮的体外抗氧化活性。研究结果可知,5种中华补血草黄酮类化合物均显示一定抗氧化和抗肿瘤活性,但其活性强弱存在差异。本试验条件下其抗肿瘤活性由强到弱的顺序为:木樨草素>槲皮素>异鼠李素、芹菜素>异槲皮苷;体外抗氧化能力由强到弱的顺序为:槲皮素>木樨草素>异鼠李素>芹菜素>异槲皮苷。结果表明,中华补血草黄酮类化合物木樨草素、槲皮素、异鼠李素、芹菜素等为中华补血草抗肿瘤作用的重要活性成分,抗肿瘤作用与其抗氧化活性有关。     

高效液相色谱法测定不同柑橘品种新老叶类黄酮含量

[目的]利用高效液相色谱法检测9个不同柑橘品种新、老叶片类黄酮含量,分析各品种新、老叶片类黄酮种类及其含量。[方法]色谱柱为Waters ODS C₁₈柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）;以色谱乙腈（溶液A）和含有0.1%甲酸的超纯水（溶液B）为流动相,线性梯度洗脱,流速1 mL/min,柱温25℃;检测波长280 nm。[结果]不同柑橘品种新老叶片所含类黄酮组成差异较大,其中葡萄柚主要为柚皮芸香苷和橙皮苷;胡柚以新圣草次苷和橙皮苷为主,椪柑主要为柚皮苷、甜橙黄酮和川陈皮素,新叶类黄酮化合物总量以汪村1号椪柑最高（21.153 mg/g）,老叶以汤姆逊粉红葡萄柚最高（14.307 mg/g）。[结论]9个柑橘品种之间,同一品种新、老叶间类黄酮含量和种类存在差异,大部分品种老叶含量和种类多于新叶。     

6种不同产地枳壳中化学成分含量的比较

采用反相高效液相色谱法,测定了6种不同产地枳壳中的黄酮类化合物柚皮苷、橙皮苷和生物碱辛弗林的含量,比较这3种成分的相对比例.结果表明,由于产地不同,3种成分含量变化范围很大,柚皮苷含量介于12 05～59 80 mg·g-1、橙皮苷含量介于0 29～11 63 mg·g-1、辛弗林含量介于0 21～37 22 mg·g-1.     

4类重庆柑橘乙醇提取物类黄酮分析及其体内外抗氧化评价

[目的]研究4类重庆柑橘乙醇提取物的类黄酮成分及其体内外抗氧化活性。[方法]以4种重庆产区柑橘果实(梁平柚、奉节脐橙、万州大红袍红橘和潼南尤力克柠檬)为研究材料,利用Xevo G2-S Qtof高分辨四级杆飞行时间质谱仪中的超高效液相色谱仪(Ultraperformance liquid chromatography with a photodiode array detector,UPLC-PDA)对柑橘果皮和果肉的乙醇提取物中主要的10种类黄酮(橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、地奥司明、橘皮素、川陈皮素、圣草次苷、甜橙黄酮、异橙黄酮和山柰酚)进行了定性和定量分析,并用3种体外抗氧化测定方法(DPPH、ABTS、FRAP)评价柑橘果实乙醇提取物的抗氧化活性。同时,以酿酒酵母BY4742菌株为试验模型,检测用低、中、高浓度的4类柑橘果实乙醇提取物处理后酵母菌胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量。[结果]不同柑橘、同种柑橘不同部位的类黄酮种类和含量都存在差异。总体而言,柑橘果皮类黄酮物质的种类与总含量高于果肉,果皮提取物的内外抗氧化能力高于果肉提取物。其中,梁平柚果实中含量最高的是柚皮苷,奉节脐橙、万州大红袍红橘和潼南尤力克柠檬果实提取物中含量较高的是橙皮苷。此外,圣草次苷大量存在于潼南尤力克柠檬果实中,川陈皮素大量存在于万州大红袍红橘中,芸香柚皮苷大量存在于奉节脐橙中,山柰酚主要分布于梁平柚果皮中,地奥司明主要分布于柠檬和柚子的果肉中。[结论]奉节脐橙具有较好的营养价值。与其他3种柑橘果肉相比,奉节脐橙果肉含有最高的类黄酮含量、综合抗氧化活性和较高的活性氧清除能力。     

铁皮石斛的黄酮类成分测定及其生物可及性研究

为探究铁皮石斛中黄酮类化合物的含量及其生物可及性，建立固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定17个黄酮单体的含量，并采用体外模拟消化法分析铁皮石斛在消化过程中黄酮类化合物的生物可及性。结果表明，铁皮石斛中总黄酮含量为1.52～4.36 mg·g^-1,柚皮素、芦丁和夏佛塔苷是其中含量较高的3种黄酮单体。模拟胃-小肠消化后，总黄酮的生物可及性为13.75%～21.45%,柚皮素、芦丁和夏佛塔苷的生物可及性分别为8.23%～18.37%、1.85%～22.87%和24.26%～42.65%;进一步结肠消化后，总黄酮的生物可及性为6.38%～14.13%,柚皮素、芦丁和夏佛塔苷的生物可及性分别为2.12%～5.67%、1.42%～5.70%和5.34%～13.33%,黄酮类化合物在胃-小肠中的生物可及性大于结肠。铁皮石斛75%乙腈提取液的抗氧化能力>胃-小肠消化液的抗氧化能力>结肠消化液的抗氧化能力，且抗氧化能力与黄酮类化合物的含量呈显著正相关。     

RP-HPLC法测定青果果肉中的黄酮类物质

应用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了广东产15个品种青果果肉中黄酮类物质的含量.结果表明,在分离柱为Nucleosil C18反相柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),流动相A为体积分数20%的甲醇,流动相B为体积分数30%的乙腈,A和B流动相用体积分数50%的磷酸调pH至3.2±0.05,流动相C为乙腈,三元梯度洗脱,流速1～1.2 mL/min,柱温35 ℃,分析波长285 nm～350 nm的检测条件下,15个品种青果果肉中均含有柚皮苷和金丝桃苷,6个品种含有芦丁,并且不同品种之间柚皮苷、金丝桃苷和芦丁等3种黄酮类物质的含量存在显著差异(P<0.05);其中芦丁含量以长穗赤品种青果最高,达1 858.17 μg/g干质量;金丝桃苷含量以小鸡心品种青果最高,达3 238.21 μg/g干质量;柚皮苷以红心榄品种青果最高,达6 440.84 μg/g干质量.     

HPLC法同时测定柠檬果实中11种类黄酮含量

以四川安岳、云南瑞丽、广东河源的尤力克柠檬和重庆北碚的里斯本、北京柠檬、粗柠檬为材料,建立了HPLC法同时测定柠檬果实中11种类黄酮(橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷、圣草枸橼苷、橙皮素、柚皮素、木犀草素、川陈皮素、圣草素、芦丁)含量的方法。结果显示:以乙腈–0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长287 nm,11种类黄酮在50 min内完全分离,线性范围为0.010 0~100.000 0μg/m L(R2=0.999 9~1.000 0),检出限为0.020~0.079μg/m L,定量限为0.065~0.263μg/m L,加标回收率为95.49%~103.10%,RSD为0.81%~1.20%;6个供试材料果皮中的橙皮苷、圣草枸橼苷和芸香柚皮苷的含量分别在14.42~27.37、0.10~9.38、0.18~0.52 mg/g,以橙皮苷含量最高,其他8种成分的含量未超过0.50 mg/g或未检出;果汁中的橙皮苷和芸香柚皮苷的含量分别为6.64~7.42和0.03~0.15 mg/g,圣草枸橼苷的含量为0.03~0.17 mg/g(里斯本和北京柠檬未检出),芦丁的含量在0.08~0.13 mg/g(里斯本未检出),川陈皮素在四川安岳尤立克、里斯本和粗柠檬中的含量分别为0.05、0.06、0.06mg/g,其他6种成分均未检出。结果表明,不同品种柠檬果实中类黄酮含量存在差异,不同产地的尤立克品种间的类黄酮含量也存在差异。     

全缘兔耳草不同萃取部位黄酮和环烯醚萜苷含量及其抗氧化和抗AChE活性研究

为研究全缘兔耳草不同萃取部位黄酮和环烯醚萜苷含量及其抗氧化和抗乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase, AChE)活性,采用紫外可见分光光度法测定全缘兔耳草不同萃取部位黄酮和环烯醚萜苷含量。以加兰他敏为阳性对照,采用AChE抑制试验,评价不同萃取部位AChE抑制活性。以维生素C为阳性对照,采用DPPH和ABTS法评价不同萃取部位抗氧化活性。结果表明：乙酸乙酯部位和正丁醇部位黄酮和环烯醚萜苷含量显著高于石油醚部位;乙酸乙酯部位和正丁醇部位抗氧化和抗AChE活性也显著高于石油醚部位。皮尔森相关分析表明,全缘兔耳草黄酮和环烯醚萜苷含量与抗氧化和AChE抑制活性呈显著的正相关,提示黄酮类和环烯醚萜苷类成分可能是全缘兔耳草发挥抗氧化和抑制AChE作用的活性成分。     

高效液相色谱法同时测定柑橘果实中18种类黄酮的含量

【目的】建立一种高效液相色谱法同时测定柑橘果实中18种类黄酮（圣草次苷、二氢槲皮素、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、野漆苷、槲皮苷、圣草素、香峰草苷、枸橘苷、柚皮素、木犀草素、山奈酚、香叶木素、橙黄酮、川陈皮素、橘皮素）的含量。【方法】 色谱柱为ZORABX SB-C18（4.6 mm×250 mm, 5 μm）,流动相为甲醇-甲酸-水,梯度洗脱,流速为0.7 mL•min-1,柱温25℃,检测波长黄烷酮为283 nm、黄酮和多甲氧基黄酮为330 nm、黄酮醇为367 nm。【结果】 18种类黄酮在42 min内完全分离,线性范围为62.4—960 mg•L-1（r=0.9996—1.0000）,定量限为0.05—0.133 μg•mL-1,回收率为88.70%—104.76%,相对0.33%—3.05%（n=6）。【结论】该方法简便、快速、准确、可靠,适合柑橘果实中18种类黄酮的含量测定。     

甘薯茎、叶柄、叶片黄酮含量与抗氧化活性的关系

分别测定了甘薯茎、叶柄、叶片黄酮类化合物对二苯代苦味酰自由基(DPPH·)的清除率,研究黄酮含量与抗氧化活性关系.结果表明,不同品种甘薯茎、叶柄、叶片黄酮含量均以叶片最高,茎、叶柄次之.甘薯茎、叶柄、叶片提取物均具有较高的抗氧化活性,分别为97.21%、91.50%、92.38%,以甘薯茎提取物抗氧化活性最高.随着贮藏时间的延长,甘薯茎、叶柄、叶片抗氧化活性逐渐降低.甘薯茎、叶柄、叶片提取物黄酮含量与其抗氧化活性间呈正相关,相关性不显著(r=0.7729),表明甘薯茎、叶柄、叶片黄酮类化合物抗氧化活性成分存在差异.     

鬼针草不同溶剂萃取物的总黄酮含量及抗氧化、酶抑制活性

测定鬼针草不同溶剂萃取物总黄酮类含量,研究其体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶抑制作用。鬼针草水提醇沉后用不同极性溶剂进行萃取,测定各提取物的总黄酮含量,采用DPPH和超氧阴离子法测定各提取物的抗氧化活性及对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并利用液相质谱联用法对乙酸乙酯提取物中的黄酮类化合物进行分析。分析结果,鬼针草乙酸乙酯和正丁醇提取物的总黄酮含量明显高于其他提取物,氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取物具有较强的抗氧化活性。乙酸乙酯和正丁醇萃取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均具有较强的抑制作用。其中乙酸乙酯萃取物中含有芹菜素、柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草苷和木犀草素等黄酮类成分。结果表明,鬼针草有机溶剂萃取物具有明显的抗氧化活性和α-淀粉酶及α-葡萄糖苷酶抑制作用,其中黄酮类化合物可能是其生物活性的主要物质基础。     

柑桔皮中黄酮类化合物的提取及抗氧化作用研究

文章对柑桔皮中黄酮类化合物的提取工艺和抗氧化活性进行研究,以黄酮提取率为考察指标,选用L9(34)表进行正交试验,确定从柑桔皮中提取黄酮类化合物的最佳提取工艺,并用TAB法和烘箱储藏法对提取的黄酮类化合物进行抗氧化研究。结果表明,最佳的提取条件为乙醇浓度70%,提取时间1.5 h,固液比1:20,提取温度80℃,提取的黄酮类化合物为柑桔皮干重的2.689%;抗氧化试验结果表明,柑桔皮中提取的黄酮类化合物能阻断芝麻油和猪油自氧化作用,具有良好的抗氧化活性。研究为利用桔子皮工业化生产黄酮类药用成分提供科学依据。     

黄酮类化合物对银鱼的保鲜效果的研究

以橙皮苷和柚皮苷为研究对象,考察了黄酮类化合物对银鱼的保鲜效果。通过对pH值、挥发性盐基氮(TVB-N)、硫代巴比妥酸值(TBA)、细菌总数、感官品质等指标的测定,结果表明橙皮苷和柚皮苷具有良好的抗菌作用和抗氧化活性,能有效抑制微生物的生长及延缓脂肪氧化,延缓鱼肉pH值、TVBN值、TBA值以及菌落总数的升高,是理想的鱼类保鲜剂。     

龙葵果提取物抗氧化活性测定及酚类活性成分分析

[目的]比较不同龙葵果提取物的抗氧化活性,同时测定其活性成分.[方法]用浓度60％乙醇浸提龙葵果,获得粗提物,减压蒸馏后分别用正丁醇、乙酸乙酯、氯仿3种溶剂萃取,采用DPPH·、·OH,O2-·清除法对各提取物的抗氧化作用进行评价,并与浓度60％乙醇粗提物溶液进行比较;分别测定4种龙葵果提取物中酚酸、黄酮、原花青素和花色苷的含量.[结果]浓度60％乙醇粗提物对DPPH·和·OH的清除效果最好,清除率分别为（68.45％±2.68％）和（49.12％±2.26％）;乙酸乙酯萃取物对O2-·的清除率最大为（79.64％±5.16％）.浓度60％乙醇粗提物中花色苷浓度为3.65 mg/ml,而乙酸乙酯萃取物中含有高浓度黄酮,浓度为3.42 mg/ml.[结论]龙葵果提取物中起主要抗氧化作用的是花色苷和黄酮.     

常山胡柚果实不同部位中主要功能性成分分析

本研究针对常山胡柚全果油胞层、白皮层、囊衣、汁胞和籽5个不同部位，连续提取其中的多酚类物质和果胶多糖，采用超高效液相色谱-串联质谱法测定不同部位中的30种柑橘多酚类物质，比较果胶多糖的组成及分子量，全面分析常山胡柚果实不同部位中主要功能性成分的组成。结果表明：常山胡柚各部位黄酮类化合物主要以黄烷酮类形式存在，白皮层中新橙皮苷、新北美圣草苷质量分数较高，分别可达13 700.72μg/g(按干质量计，下同)和6 270.24μg/g；不同部位酚酸类组成中肉桂酸类含量高于苯甲酸类，且以油胞层中肉桂酸类含量最高；淀粉酶辅助乙二胺四乙酸溶液提取到的白皮层果胶多糖得率最高(27.46%)，氢氧化钠(NaOH)溶液提取到的油胞层果胶多糖得率最高(11.30%)，且2种提取方法得到的油胞层果胶多糖重均分子量均最大，分别为6.888×10⁵ g/mol和2.343×10⁵ g/mol。常山胡柚油胞层、白皮层和囊衣可作为黄酮类化合物和果胶的加工来源，其丰富的新北美圣草苷可作为胡柚加工副产物新的开发方向。     

分蘖洋葱鳞茎中黄酮类化合物分析及其与番茄根结线虫病发生的关系

分蘖洋葱伴生可减轻番茄根结线虫病,但是否与分蘖洋葱鳞茎中黄酮类化合物有关尚不清楚.以南方根结线虫和44份分蘖洋葱种质为试验材料,研究了44份分蘖洋葱鳞茎中黄酮类化合物(芦丁、杨梅黄酮、山奈酚、槲皮素及总黄酮)含量及其对番茄根结线虫死亡率、虫卵孵化抑制率以及线虫趋化性Cf值的影响,同时分析了黄酮类化合物与根结线虫发病率、病情指数、土壤虫口防效以及根结指数间相关性.结果表明,44份分蘖洋葱鳞茎黄酮类化合物含量为593.22～2204.88 mg·100 g-1 DW,其中M11和M51鳞茎中黄酮类化合物含量较高,为2186.59和2204.88 mg·100 g-1 DW,以槲皮素为主;分蘖洋葱鳞茎中杨梅黄酮、槲皮素、山奈酚及总黄酮含量均与根结线虫虫卵孵化抑制率呈显著正相关,黄酮类化合物含量均与根结线虫趋化性Cf值呈显著负相关,杨梅黄酮与土壤虫口防效呈显著正相关,与番茄根结线虫病情指数和根结指数呈显著负相关;槲皮素与番茄根结指数、根结线虫病情指数和发病率呈显著负相关.综上,分蘖洋葱伴生减轻番茄根结线虫病,与分蘖洋葱鳞茎中黄酮类化合物含量密切相关.     

不同生长时期玫瑰柑果实品质分析

【目的】研究不同生长时期玫瑰柑果实理化性质及其有机酸、总黄酮、总酚等活性成分含量的变化规律,分析其不同组织部位的活性成分,为玫瑰柑的品质评价及其副产物综合利用提供科学依据。【方法】采用蒽酮—硫酸法测定不同生长时期（2020年9月20日—2021年1月20日）玫瑰柑果汁中总糖含量,总酸含量采用氢氧化钠中和滴定法测定,采用高效液相色谱法分析不同生长时期果皮、果渣和果汁中主要黄酮化合物以及果汁中有机酸和可溶性糖含量,采用Folin-Ciocalteu法测定其总酚含量,并采用DPPH、FRAP和ABTS 3种方法测定其抗氧化能力。【结果】9月—次年1月,随着果实的发育,玫瑰柑果实的单果重、果汁pH、糖酸比及可溶性固形物含量均逐渐增加;果汁中柠檬酸和乙酸含量显著降低（P<0.05,下同）,苹果酸含量显著上升;果糖和葡萄糖含量逐渐降低,蔗糖含量则上升了4.03倍;果皮、果渣和果汁中总黄酮、总酚含量及其总抗氧化能力均呈下降趋势,玫瑰柑果实的总酚含量依次为果皮>果渣>果汁,果皮中总酚含量从1.84 mg GAE/g降至0.89 mg GAE/g,橙皮苷、香蜂草苷、桔皮素、甜橙黄酮和川陈皮素5种黄酮类化合物含量显著下降,在果汁和果渣中未检测到甜橙黄酮、川陈皮素和桔皮素,橙皮苷和香蜂草苷含量依次为果渣>果皮>果汁;果皮的总抗氧化能力是果渣的1.34倍,果汁的2.16倍。【结论】随着玫瑰柑果实的成熟,蔗糖含量显著增加,果糖、葡萄糖、总黄酮、总酚含量及抗氧化活性降低。不同生长时期玫瑰柑果实理化性质、主要营养成分及活性成分的变化规律,可为玫瑰柑果实品质调控及不同部位的综合开发利用提供参考依据。     

通经草黄酮对小鼠体内丙二醛含量影响

本实验以60%乙醇作为提取溶剂,采用超声提取法及溶剂萃取法分离提取通经草中的总黄酮。并将通经草黄酮按低(50 mg·m L-1)、中(150 mg·m L-1)、高浓度(250 mg·m L-1)分别对小鼠连续灌胃14 d,用硫代巴比妥酸法测定其血清和肝组织丙二醛含量,研究通经草黄酮的体内抗氧化作用。结果表明随着通经草黄酮浓度增大,小鼠体内丙二醛含量逐渐降低,其中高浓度通经草黄酮可明显降低血清及肝脏丙二醛含量,说明通经草黄酮具有显著的体内抗氧化活性。     

不同品种和类型酸橙质量评价

采用高效液相色谱法对重庆、湖南、江西3个主要道地产区的30个不同品种的酸橙资源进行质量品质分析。新橙皮苷在0.102～2.040μg范围内线性关系良好(r=0.9991),回收率为102.24%,RSD为1.65%;柚皮苷在0.094～1.880μg范围内线性关系良好(r=0.9996),回收率为99.08%,RSD为1.36%。3个主要产地的枳壳药材新橙皮苷的含量在0.89%～10.42%,柚皮苷的含量在2.43%～14.1%,不同品种或类型的酸橙中柚皮苷和新橙皮苷含量有明显的差异,可为今后枳壳优质种源选育提供材料,为枳壳药材良种选育和资源利用提供参考依据。