赭曲霉毒素A对BHK细胞毒害作用的研究

以叙利亚仓鼠肾细胞(BHK cell)为模型,用噻唑兰(MTT)法检测赭曲霉毒素(ochratoxin A,OTA)对细胞活力的影响,用单细胞凝胶电泳法和DNA梯形条带法检测OTA对细胞DNA的损伤,用黄嘌呤氧化酶法检测细胞中SOD活力的变化,用硫代巴比妥酸(TBA)法测定细胞培养液中MDA的含量.结果显示:OTA对BHK细胞活力的影响呈现时间和剂量依赖性的抑制作用.染毒12 h后,2.5、5、10、20和40 μg·mL-1 OTA剂量组BHK细胞的活力均显著降低(P＜0.05),至染毒24 h,40 μg·mL-1 OTA染毒剂量组细胞活力下降达90%.OTA对BHK细胞DNA的损伤作用同样存在明显的剂量效应关系,与对照组相比,除2.5 μg·mL-1剂量组外,其余各剂量组的彗尾DNA含量和拖尾率差异极显著(P＜0.01),40 μg·mL-1剂量组的细胞拖尾率是对照组的80倍.40 μg·mL-1 OTA处理BHK细胞24 h后检测到特征性的凋亡梯形条带,而对照组则未检测到.OTA作用于BHK细胞使细胞内SOD活力显著降低(P＜0.05),细胞培养液中MDA含量则显著升高(P＜0.05).OTA染毒24 h后,40 μg·mL-1 OTA剂量组细胞内SOD活力降低至对照组的25%,培养液中MDA含量较对照组增高了500%.上述结果表明:OTA对BHK细胞活力的影响与细胞内过氧化物的大量生成和抗氧化酶活力下降有关,且对细胞DNA造成损伤,引起细胞凋亡.     

赭曲霉毒素A促进PCV2复制的自噬机制研究

为研究赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)诱导自噬的信号通路机制,通过药物的特异性抑制信号通路中不同激酶的活性,探讨特异性激酶抑制剂在OTA诱导的自噬及猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)复制促进中的作用。结果表明:1)OTA能够抑制PCV2感染猪肾细胞株(PK-15)中的蛋白激酶B(AKT)和雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)的活性,从而增强自噬能力;2)胰岛素能够逆转OTA引起的AKT与mTOR磷酸化水平的降低,能够逆反OTA诱导产生的自噬以及PCV2的复制促进;3)OTA能够激活细胞外信号调节激酶1/2(extracellular regulated protein kinases, ERK1/2)信号通路;4)ERK1/2的抑制剂(U0126)通过降低ERK1/2的磷酸化水平,从而抑制了OTA诱导的自噬及PCV2的复制促进;5)U0126能够减少OTA引起的mTOR磷酸化水平降低的幅度。     

赭曲霉毒素A对HEK293细胞DNA和组蛋白甲基化修饰酶的影响

探讨了赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)诱导HEK293细胞整体基因组DNA甲基化和组蛋白H3K9甲基转移酶活性变化的剂量效应及可能的调控机制。结果表明,OTA抑制了HEK293细胞的生长,降低了整体基因组DNA甲基化水平,并呈剂量效应关系。随OTA暴露剂量的增加,DNA甲基化转移酶DNMT1 mRNA表达量降低。且本研究首次探究了OTA对组蛋白H3K9甲基化修饰酶的影响。结果显示,OTA引起组蛋白H3K9甲基转移酶活性升高,且H3K9甲基化修饰酶G9a和SETDB1 mRNA表达量在高剂量OTA暴露时显著升高。OTA可能分别通过调控DNMT1、G9a及SETDB1使整体基因组DNA甲基化水平降低和H3K9甲基转移酶活性升高,这可能是OTA导致肾毒性的表观遗传机制。     

赭曲霉毒素A诱导Caco-2细胞的细胞毒性及DNA损伤

【目的】研究不同浓度和时间处理下,赭曲霉毒素A(OTA)对人结肠癌细胞(Caco-2)的细胞生长抑制、氧化损伤以及DNA损伤的影响.【方法】采用0.32、1.6、8、40、200μmol/L OTA处理Caco-2细胞24、48、72h后,利用甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,利用活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内的自由基水平,利用彗星试验检测细胞的DNA损伤.【结果】在各个处理时间段内,OTA浓度大于0.32μmol/L时,OTA对细胞存活率都有显著的抑制作用(P0.05);细胞内ROS以及DNA损伤都随OTA浓度的增加而显著升高(P0.05),尤其在0~8μmol/L低浓度范围内,OTA显示了强烈的毒性.【结论】OTA可导致Caco-2细胞存活率降低,引起细胞氧化应激以及DNA损伤,其中ROS水平升高可能是OTA导致Caco-2细胞DNA损伤的原因.     

食用酒精DDGS对肉仔鸡生产性能、血液生化指标及胫骨质量的影响

分析食用酒精DDGS(玉米干酒糟及其可溶物)营养成分及毒素含量,研究此种DDGS对肉仔鸡生产性能、血清指标及骨骼质量的影响.试验选用240只1日龄科宝艾维菌48肉仔鸡,随机分成4组,每组6个重复.对照组饲喂基础日粮;1～21日龄阶段,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组饲喂含有10％食用酒精DDGS日粮;22～35日龄和36～49日龄两个...     

赭曲霉素毒素A在咖啡中的产生及其对咖啡生产的影响研究

赭曲霉素毒素A(OTA)是一种分布较广的真菌毒素,广泛存在于谷物、其他植物性食品及相关产品和动物性食品中。研究表明,OTA对人和动物具有较强的肝毒性和肾毒性,并有致畸、致突变和致癌作用,OTA与人类健康的关系越来越受到人们重视。从文献上看,国外对咖啡中赭曲霉素毒素A含量测定进行了多方面的研究,国内研究较少。就咖啡中赭曲霉素毒素A的产毒菌株、产生时期以及咖啡加工过程中影响赭曲霉素毒素A含量的因素进行综述。     

番茄红素对赭曲霉毒素A诱导犬肾小管上皮细胞毒性损伤的缓解作用

[目的]本试验以犬肾小管上皮细胞(Madin-Daby canine kidney cell,MDCK)为模型,研究赭曲霉毒素A(OTA)对MDCK的毒性作用以及番茄红素(lycopene,LYC)对细胞损伤的缓解效应.[方法]将对数生长期MDCK,随机分为对照组(无添加)、OTA组(15μmol·L-1 OTA)、L...     

植酸酶和非淀粉多糖酶对肉鸡氮磷利用率的影响

选用1日龄健康黄羽肉鸡600羽随机分成4组，每组3个重复，每重复50羽，饲喂玉米－豆粕型日粮，研究日粮添加植酸酶和（或）非淀粉多糖酶对机体N和P的利用率、骨骼和血清中矿物元素含量及其生产性能的影响。处理1为基础日粮，处理2为低磷日粮添加250g/t植酸酶，处理3在基础日粮中添加1000g/t非淀粉多糖酶，处理4为低磷日粮添加250g/t植酸酶和1000g/t非淀粉多糖酶。结果表明：低磷日糖中添加植酸酶可提高N、P的表观利用率（P＜0．05），而非淀粉多糖酶有提高日粮N、P利用率的趋势（P＞0．05）；低磷日粮中添加植酸酶后胫骨灰分、Ca、P含量、血清中Ca、P、Cu、Zn和Fe等矿物元素含量的趋势（P＞0．05）；日粮中同时添加植酸酶和非淀粉多糖酶有促进日粮N和P利用率以及矿物元素吸收的趋势，但两者没有表现出显著的协同作用，日粮中应用2种酶后可减少粪中氮和磷的排泄量（P＜0．05，P＜0．01），有利于保护环境。     

T-2毒素对小鼠睾丸间质细胞活力和功能的影响

目的研究T-2毒素对睾丸间质细胞活力和功能影响。方法对分离出的4~5周龄BABL/c小鼠睾丸间质细胞进行体外培养,将培养的细胞分别接种于96孔培养板和24孔培养板里,T-2毒素药物处理后培养24 h,弃去96孔培养板里的培养液,添加MTT溶液,继续培养4h后检测睾丸间质细胞的活力情况;收集24孔培养板里的培养液用于睾酮水平的测定。结果贴壁细胞继续培养24 h后,当T-2毒素浓度10ng·m L-1h CG+10-9mol·L-1时,MTT吸光度值(P0.01)和睾丸间质细胞分泌睾酮的浓度(P0.05)与对照组相比差异显著;而10ng·m L-1h CG+10-10mol·L-1T-2毒素试验组睾酮分泌量与对照组相比差异不显著(P0.05)。结论 T-2毒素浓度10-9mol·L-1时对体外原代培养的小鼠睾丸间质细胞活力和功能均有显著毒性作用,且随T-2毒素浓度增加,毒性作用增强。     

非淀粉多糖酶对肉鸡肠道消化酶的影响

 将200只21日龄罗斯肉鸡分5个处理组：处理组1（正对照组）、处理组2（负对照组）,处理组3～5在负对照组日粮基础上各添加一种非淀粉多糖酶制剂。肉鸡饲养至42日龄屠宰,测定肠道及内容物消化酶。结果显示：负对照组肉鸡十二指肠和空肠及其内容物的淀粉酶和蛋白酶活性显著小于（P ≤005）正对照组。处理组3肉鸡十二指肠及其内容物的淀粉酶和蛋白酶活性显著大于负对照组,与正对照组相近（P>005）。处理组3肉鸡空肠内容物的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性显著大于其他4个处理组。处理组4和5肉鸡的十二指肠及内容物的淀粉酶活和蛋白酶活性差异不显著,但显著低于处理组3。处理组4肉鸡空肠蛋白酶活性与处理组3差异不显著,但显著大于处理组5。以上结果说明,选用NSP酶制剂应实测产品的酶类和酶活性,以合理有效使用。     

非淀粉多糖酶制剂对肉鸡肉用性能的影响

[目的]研究非淀粉多糖（NSP）酶制剂对肉鸡肉用性能的影响,为合理使用NSP酶制剂提供科学依据。[方法]200只21日龄罗斯肉鸡分5个处理组：处理组1为正对照组、处理组2为负对照组,2个处理组的日粮稍有差异,处理组3～5在负对照组日粮基础上各添加一种NSP酶制剂。肉鸡56日龄屠宰,测定及评价肉用性能。[结果]处理组3肉鸡的全净膛率、腹脂率2个主要肉用性能指标显著大于（P〈0．05）处理组2肉鸡。处理组2肉鸡小肠相对重量小于其他4个处理组。[结论]日粮添加酶类全、活性高的NSP酶制荆促使肉鸡充分利用非常规饲料原料,提高产肉率,肉用性能良好。建议用户选用NSP酶制剂时应实测产品的酶类和酶活性。     

几种商业非淀粉多糖酶制剂对肉鸡消化器官的影响

将21日龄罗斯肉鸡200只分5个处理组,处理组1为正对照组进行,处理组2为负对照组,处理组结果显示,处理组1肉鸡的腺胃相对重量大于处理组2(P<0.05),处理组3肉鸡腺胃和空肠相对重量大于负对照组。试验结果表明,NSP酶制剂有利于肉鸡消化器官生长,但不同商业NSP酶制剂产品酶类和活性差异较大,为了有效使用,建议实测产品的酶种类和活性。     

几种商业非淀粉多糖酶制剂对肉鸡生长性能影响的研究

通过肉用中鸡和大鸡的生长性能试验,比较市场上几种商业非淀粉多糖酶制剂的使用效果。试验选用21日龄罗斯肉鸡200只,随机分为5个处理,分别为正对照、负对照,试验1～3组(在负对照基础上添加不同的商业非淀粉多糖酶制剂)。结果显示,所有处理组间全期日采食量差异不显著(P0.05)。在初始体重一致的条件下,试验1组肉鸡末重较其他添加酶制剂组高。从全期来看,试验1组料肉比显著优于正对照组(P0.05)。试验结果表明,不同商业非淀粉多糖酶制剂产品的酶类肉鸡和活性差异较大,建议在使用前实测酶的种类和酶活性,以综合选择适宜的产品,提高养殖经济效益。     

增施CO_2对马铃薯三膜覆盖栽培块茎产量和干物重的影响

为明确山东二季作区马铃薯早春三膜覆盖栽培模式下增施CO_2的适宜浓度,本试验设计T1(0μL/L,CK)、T2(600μL/L)、T3(1 200μL/L)、T4(1 800μL/L)、T5(2 400μL/L)5个增施CO_2处理,测定不同处理下马铃薯块茎产量、商品薯率、干物质和淀粉含量。结果表明,CO_2增施浓度在0～1 800μL/L范围内,随着CO_2浓度的增加,马铃薯块茎产量显著提高,商品薯率、干物质和淀粉含量稍有提高。T4处理的666.7m~2块茎产量最高(4 473.2 kg,较对照增产25.4%,干物质含量最高(17.12%),比对照增加1.3%。CO_2增施浓度为2 400μL/L时,马铃薯块茎产量和干物质含量反而有所下降。     

对虾中隐蔽态T-2毒素残留对小鼠血常规和血清生化指标的影响

T-2毒素经20 d蓄积毒性试验法染毒对虾,采用LC-MS/MS检测对虾组织中游离态T-2毒素,并将染毒的虾头和肌肉匀浆液连续灌胃小鼠7 d,检测小鼠血常规和血清指标,分析对虾虾头和肌肉中隐蔽态T-2毒素残留对小鼠的毒性效应。结果显示,经20 d蓄积毒性试验,对虾体内没有游离态T-2存在,而且低剂量染毒对虾对小鼠没有影响,但高剂量组(12.2 mg·kg~(-1))可引起小鼠中间粒细胞增加,红细胞系统和血小板各项指标均显著下降(P0.05),血清生化指标差异显著(P0.05),且虾头对小鼠的损伤作用高于肌肉。研究表明,蓄积染毒对虾体内存在隐蔽态T-2毒素,对小鼠具有一定的免疫毒性和血液毒性,导致炎症发生、贫血以及骨髓造血功能下降,对肝功能有损伤作用,且虾头中残留的隐蔽态T-2毒素对小鼠的损伤作用高于肌肉。     

不同大垄栽培方法对大豆生育及产量影响的初探

为探讨大豆高产栽培技术模式,通过小区对比试验,进行了3种不同大垄栽培方式,即高垄平台栽培、宽窄密栽培、宽窄密塔式栽培与三垄栽培(对照)生理指标的研究,结果表明:高垄平台和宽窄密栽培与三垄对照相比,显著和极显著提高了R5期大豆群体地上部干重以及叶面积指数;延后了叶面积指数和群体地上部干物质积累量增长的高峰期;高垄平台与宽窄密栽培模式提高了土壤0～20cm土层的最高与最低含水量,对土壤水分具有较强的调整能力,与对照相比均显著提高了大豆产量。不同栽培处理的叶面积指数、地上部干重与产量均呈显著或极显著正相关。宽窄密塔式栽培提高了R5期的光截获量,产量最高。     

生物统计法分析T-2毒素对凡纳滨对虾形态指标的影响

以不同剂量T-2毒素染毒的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为研究对象,以毒素染毒剂量为自变量、凡纳滨对虾形态学指标为因变量,采用灰色关联度分析、通径分析和回归分析探究毒素剂量与染毒凡纳滨对虾形态学指标的相关性,筛选出最便捷、最简单的生物学统计方法。灰色关联度和通径分析显示,凡纳滨对虾体质量、体长、头胸甲长和第一腹宽是受T-2毒素影响最大的指标;利用回归分析进行显著性检验发现,T-2毒素对凡纳滨对虾体质量、体长、头胸甲长和第一腹宽指标的影响均为显著水平(P<0.05)。3种统计学方法得出的结果相吻合,体质量、体长、头胸甲长、第一腹宽等染毒凡纳滨对虾形态指标的重要生物学标记,均与T-2毒素的暴露剂量呈负相关。其中,灰色关联度分析法是最便捷、最简单的生物统计法。     

干热处理对绿豆淀粉和豌豆淀粉化学组成的影响及其与粉丝品质的关系

在４０℃温度下连续干热处理绿豆淀粉和豌豆淀粉，结果发现：绿豆淀粉和豌豆淀粉中的不溶性直链淀粉含量，随处理时间的延长分别由２０．４％和１５．８％逐渐增加到２９．１％和２３．４％，而直链淀粉总量保持不变；不溶性直链淀粉含量的增加导致粉丝的糊化度下降，溶出率增加，从而导致粉丝食用品质下降，两者呈显著的相关性．     

干热处理对绿豆和豌豆淀粉化学组成的影响及与粉丝品质的关系研究

在40℃温度下干热连续处理绿豆淀粉和豌豆淀粉，结果表明，绿豆和豌豆淀粉中的不溶性直链淀粉含量随处理时间的延长而累积增加，而直链淀粉总量保持不变;不溶性直链淀粉含量的增加导致粉丝的糊化度下降，溶出率增加，食用品质下降.     

发酵剂和添加氮源对马铃薯淀粉渣粗蛋白含量的影响

选用3种发酵菌种进行了马铃薯淀粉干渣发酵处理试验,结果表明,添加活力99、EM、RW 3种发酵菌均能提高发酵物的粗蛋白含量,其中活力99(15 g)+玉米面(1 kg)+马铃薯干渣(12.5 ks)发酵7 d效果较好,可使粗蛋白含量较发酵前增长2.05百分点,增长率达29.67%.添加氮源发酵可明显增加发酵物的粗蛋白含...