水貂流行性乙型脑炎病情鉴定的研究

<正> 流行性乙型脑炎(乙脑)是一种人兽共患性传染病,由日本乙型脑炎病毒(TEV)所致,蚊子是本病的主要传播媒介和宿主.水貂乙脑在我国曾有报道.1986年夏秋,浙江舟山地区某貂场曾流行一种以歪头为主的神经病状为特征的疫病,经流行病学调查、临床观察、剖检变化、血清学检查和病倩鉴定,确认为水貂流行性乙型脑炎.     

猪乙型脑炎间接ELISA与血凝抑制试验方法的比较

用血凝抑制试验和间接ELISA两种方法检测乙脑阳性血清均呈阳性反应,检测乙脑阴性血清均呈阴性反应。用间接ELISA对来自9个猪场74份送检血清进行了猪乙脑病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）抗体检测,并与血凝抑制试验（HI）进行对比,两种方法检测总符合率为85.1%(63/74),经统计分析,检测结果差异不显著(P＞0.05)。对来自无猪乙脑病猪场24头健康猪的血清进行检测,两种方法结果均为阴性,符合率为100%。对10份阳性血清进行检测,ELISA检测效价较HI效价高,表明ELISA比HI敏感。结果表明,ELISA与HI检测结果相符,前者更适用于猪血清中乙脑IgG抗体的大规模检测。     

用微量血凝和血凝抑制试验诊断水貂病毒性肠炎

用8HA单位水貂肠炎病毒(MEV)细胞培养活毒标准抗原、8 HI单位兔抗MEV血清标准抗体、0.5％戊二醛化猪RBC进行微量血凝(HA)-血凝抑制(HI)试验诊断水貂病毒性肠炎(MVE),具有敏感、准确、简便、省时等特点,适于MVE的确诊、检疫、流行病学调查和免疫水平监察,可在接到病料后4小时内报告结果。因本试验只能用活毒标准抗原,所以需把好消毒关。防止散毒。     

春产猪群乙型脑炎感染动态和特异性IgM抗体的检测

乙型脑炎是一种急性人畜共患病,猪是乙脑流行环节中最重要的宿主。在流行季节,头胎母猪和后备公猪常可出现高热、流产死胎及睾丸炎,其余多为隐性感染。易感猪只出现病毒血症,可能表现一过性体温升高和减食,临床上不易诊断。为了解猪群乙脑的自然感染状况,1989年在杭州市郊某规模猪场采用血凝抑制(HI)试验,定期检测乙脑感染率和特异性IgM抗体,探索乙脑的感染动态并作出早期诊断。现将结果介绍如下。     

用间接免疫荧光抗体试验诊断水貂病毒性肠炎的研究

水貂病毒性肠炎(MVE)是水貂的一种急性致死性传染病。为了早期诊断,减少损失,近年来国内已先后研究用血凝(HA)和血凝抑制试验(HI)、对流免疫电泳试     

应用PPA-ELISA检测貉(犬、水貂)细小病毒性肠炎特异性抗体的研究

选用犬细小病毒(CPV)作抗原,酶联SPA作间接抗体,在对120例貉、犬及貂的已知各种血清样品和现地血清样品的各种试验数据考证下,建立了本方法。本方法与HI试验的符合率为88.4％,比HI多检出12例(11.5％);测出的阳性血清的最高滴度是HI的12.5倍。血清样品与血清干燥纸片样品的检出符合率为98％。本方法能检出貉细小病毒抗体,犬和水貂病毒性肠炎抗体,是一种特异、敏感,简易的诊断方法。     

水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗(MEVB株)效力检验用实验动物抗体效价的对比研究

为了变更"水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗(MEVB株)"质量标准中效力检验用的试验动物,试验采用血凝抑制试验方法,对比检验水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗(MEVB株)对水貂和兔产生的抗体效价水平。结果表明:水貂和兔接种疫苗后14～180天的血清HI抗体水平差异不显著(P0. 05),均达到效力检验质量标准要求。用兔替代水貂进行水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗(MEVB株)的效力实验的抗体监测科学、方便、可行。     

猫瘟热诊断及免疫的研究——Ⅲ.猫源细小病毒细胞培养BEI灭活疫苗区域性免疫试验

自1987年以来,先后在安徽、江苏、贵州、河南、山东和陕西等11个地区(场)应用猫源细小病毒(FNF-8株)细胞培养BEI灭活疫苗进行区域性免疫试验,共注射水貂、猫、犬、貉和狐等1685只(次)。经近3年的流行病学调查和抽样血清抗体检测表明:疫苗是安全的;注苗后2个月,血清HI抗体均增长1～7个滴度,两次接种疫苗的猫最高血清HI抗体达2~(10);控制了疫情。3年来再未见发病,预防效果比较满意。     

水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗保存期试验

对2~8℃条件下保存90,120,150,180,210,240,300,360 d的水貂细小病毒性肠炎灭活疫苗接种水貂进行免疫试验,结果表明:保存300 d的疫苗接种水貂30 d后血清中水貂肠炎细小病毒(MEV)HI抗体均在1∶32以上,免疫水貂强毒攻击均获得100%保护,确定水貂细小病毒细胞灭活疫苗保存期为300 d。该结果为水貂细小病毒细胞灭活疫苗运输和保存提供了理论依据。     

检测鸡毒支原体抗体的间接ELISA方法和HI试验方法的建立及初步应用

本研究旨在建立一种检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)抗体的间接ELISA方法，结合HI试验，为MG感染的监测和净化提供一套有效的组合技术方案。以原核表达的VlhA 3.03重组蛋白(rVlhA)作为包被抗原，使用单一稀释法构建了关于血清抗体滴度与1∶500血清稀释度处S/P值的回归方程lg(抗体滴度)=1.257×lg(1∶500处S/P值)+3.709,R²=0.917 6,S/P临界值为0.32,临界滴度是1 200。经验证，rVlhA-ELISA方法具有良好的特异性、重复性，最低能检出1∶2 000稀释的阳性血清。选择国内MG分离株SH/2020-1作为血凝抑制抗原建立HI试验方法。使用rVlhA-ELISA方法联合HI试验进行血清样品检测，IDEXX-MG方法作为对照，借助RT-qPCR方法监测MG感染情况。结果表明rVlhA-ELISA方法和IDEXX-MG监测的血清抗体趋势与HI复核结果均一致；rVlhA-ELISA与HI联合判定结果与IDEXX-MG符合率可达91.53%。上述结果显示，本研究建立的rVlhA-E...     

饲粮中添加戊糖片球菌对育成期水貂生长性能、营养物质表观消化率以及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究饲粮中添加戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)对育成期水貂生长性能、营养物质表观消化率以及血清生化、抗氧化和免疫指标的影响。选取(75±3)日龄的健康雄性短毛黑水貂100只,随机分为5组,每组20个重复,每个重复1只水貂。每天在每只水貂的基础饲粮中添加1 mL浓度分别为0(Ⅰ组,作为对照组)、1×107(Ⅱ组)、1×108(Ⅲ组)、1×109(Ⅳ组)和1×1010 CFU/mL(Ⅴ组)的新鲜戊糖片球菌菌液。预试期7 d,正试期56 d。结果表明:1)试验第1~28天,各组之间粪便评分差异均不显著(P>0.05);试验第29~42天和第43~56天,Ⅲ、Ⅳ组的粪便评分显著低于对照组(P<0.05);试验第1~56天,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的粪便评分显著低于对照组(P<0.05)。2)试验第1~56天,Ⅲ组的平均日增重和平均日采食量均显著高于对照组(P<0.05);试验第29~42天,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的平均日采食量极显著高于对照组(P<0.01)。3)各组之间干物质、粗蛋白质、粗脂肪和碳水化合物的表观消化率差异不显著(P>0.05)。4)Ⅲ组水貂血清胆固醇含量显著低于对照组(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇含量显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ和Ⅳ组水貂血清低密度脂蛋白胆固醇含量显著低于对照组(P<0.05)。5)各组水貂血清谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量无显著差异(P>0.05);Ⅲ组水貂血清总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05)。6)各试验组水貂血清免疫球蛋白A含量显著高于对照组(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组水貂血清免疫球蛋白M含量显著高于对照组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组水貂血清免疫球蛋白G含量显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加1×108 CFU/(d·只)戊糖片球菌时,可提高育成期水貂的生长性能,调节血脂水平,并提高机体抗氧化能力和免疫功能。     

应用SPA-ELISA与HI、CF试验检测猪乙型脑炎抗体的比较研究

应用辣根过氧化物酶-金黄色葡萄球菌A蛋白(HRPSPA)结合物作为第二抗体,比较SPA-ELISA与血凝抑制(HI)、补体结合(CF)试验对116份疫区猪血清乙脑抗体的检测结果。以SPA-ELISA的检出率为最高(96.7％),其次为HI(81％)和CF(78.3％),证明SPA-ELISA具有良好的特异性与敏感性。阅此,SPAELISA用于猪群乙脑流行病学调查或监测有实用价值。     

水貂肠炎细小病毒(SMPV-11)对雪貂的致病性研究

为了解水貂肠炎细小病毒(MEV)感染雪貂后的致病性,试验选取15只MEV抗体阴性的雪貂,每只口服MEV强毒株SMPV-11细胞培养液10 mL(TCID_(50)为1×10~(5.5)/mL),另选取3只雪貂作为对照,每天监测雪貂的体温、体重、食欲和精神状态,在攻毒0～30 d期间,选取7个时间点各安乐死2只雪貂,解剖观察脏器变化并制作组织切片,检测各器官的组织和粪便中的病毒核酸,测定血清HI抗体效价和血常规变化。结果表明:雪貂感染SMPV-11后表现体温升高、体重下降、食欲减退及精神沉郁等症状;剖检可见肠系膜淋巴结肿大和肠道内有黄色浓稠液体;组织切片可见雪貂的肠系膜淋巴结水肿,肝脏和脾脏出现轻微的病理损伤,肠道出现不同程度的肠绒毛萎缩等病理损伤;在各器官的组织和粪便中可以检测到病毒核酸,并且在感染3～7 d MEV载量有较高水平;HI抗体在感染第7天开始产生,随后迅速升高;血常规检测显示,感染雪貂的白细胞数量略低于对照雪貂。说明雪貂可以感染MEV,出现轻微的临床症状,MEV的体内分布、排毒、抗体产生规律和血常规变化与水貂感染MEV极其相似,雪貂各器官的组织、粪便和血清均可用于检测细小病毒。     

青海省三大貂场病毒性肠炎的调查

水貂病毒性肠炎(MEV)是由水貂细小病毒引起的一种以高热、呕吐、白细胞严重减少和肠炎为主要特征的高度接触性传染病,常导致5日龄以上水貂的大批死亡、对养貂业造成严重威胁。故此,我们对青海省三大貂场MEV的流行情况用HA和HI试验进行了调查。本次调查共抽检三个貂场的粪样。共检出阳性粪样39份,阳性率为9.26％。其中貂场一的阳性率为16.67％(24/144),貂场二为11.11％(15/135),貂场三为0(0/152)。据本次调查,其中貂场一和貂场二在1983年底～1984年初曾检出过阳性貂,由于病貂在康复后仍带毒,同时,貂笼的不合理叠放及较差的卫生条件等诸多原因,为本病的感染和发病创造了条件。鉴于此,我们建议:对病貂场应     

猪流行性乙型脑炎

(一)流行形势与特点 该病是一种人兽共患的虫媒病毒病.由带毒媒介昆虫的叮咬而传播,以三带啄库蚊为主要传播媒介,自然界中约有60多种动物可感染乙脑病毒,世界各地均有流行,但主要发生于亚洲各国.     

如何搞好鸡新城疫的血凝抑制试验

血凝抑制试验(HI)——是新城疫诊断和免疫研究工作中广泛应用的方法。可用以测定疫苗效力,检测鸡群有无新城疫感染,检测鸡群的免疫状况以决定新城疫疫苗的免疫时间,还可以鉴定病毒.所以搞好鸡新城疫的血凝抑制试验(HI),对于各级兽医防疫机构及大型养鸡场是当前做好防疫工作的重要一环。血凝抑制试验有两种方法。一种是定量的血清和不同量的抗原相作用,称为α法。另一种是用定量的抗原与不同量的血清混合,称为β法。近年来普遍主张采用β法,因为β法比较准确稳定。具体进行 HI 试验的方法和步骤如下。     

用微量血凝和血凝抑制试验诊断水貂病毒性肠炎

用8HA单位水貂肠炎病毒（MEV）细胞培养活毒标准抗原、8HI单位兔抗MEV血清标准抗体、0．5％戊二醛化猪RBC进行微量血凝（HA）－血凝抑制（HI）试验诊断水貂病毒性肠炎（MVE），具有敏感、准确、简便、省时等特点，适于MVE的确诊、检疫、流行病学调查和免疫水监察，可在接到病料后4小时内报告结果，因本试验只能活毒标准抗原，所以需好消毒关，防止散毒。     

丁酸梭菌对育成期水貂抗氧化及免疫功能的影响

为探明丁酸梭菌对育成期水貂抗氧化及免疫功能的影响,本试验将40只(60±5)日龄,体重相近[(1.08±0.05)kg]的健康雄性红眼白貂,随机分为4组,每组水貂数为10只。其中I组为对照组,饲喂水貂基础日粮,II、III、IV组为试验组,分别饲喂添加0.5×10~8、1×10~8、2×10~8cfu/g丁酸梭菌的水貂基础日粮,试验期35 d。结果表明:与I组相比,II、III、IV组水貂平均日增重分别提高了17.9%、22.4%、28.4%,II、III、IV组水貂粗脂肪消化率分别提高了17.2%、17.3%、15.4%,与I组相比,II组水貂血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及IgA的含量显著提高,血清中丙二醛(MDA)含量显著降低。说明饲料中添加丁酸梭菌能够提高水貂生长、抗氧化及免疫功能。     

水貂病毒性肠炎CT细胞弱毒疫苗株的选育、驯化及鉴定

应用从唐山地区MVE病死水貂中分离强毒,经牛睾细胞(CT细胞)和CRFK细胞混合培养,强迫感染,传至58代后,CT细胞出现CPE变化,除去CRFK细胞,单用CT细胞传毒,传至70代,经电镜、HA和HI试验证明,驯化弱毒株为典型细小病毒,经终点稀释克隆和致病性试验结果,对貂未发生致病性反应,注射和口服弱毒株的貂HI比对照貂有明显升高。     

腺病毒载体转染水貂耳缘成纤维细胞的研究

试验旨在探究利用携带标记基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的腺病毒载体转染入水貂耳缘成纤维细胞的可行性及感染效率。首先利用组织贴壁法分离培养水貂原代耳缘成纤维细胞并进行传代,然后包装病毒Ad-EGFP并使用TCID_(50)法进行滴度检测,设置两组不同浓度梯度的病毒液感染水貂耳缘成纤维细胞,感染复数(MOI)值分别为0/100/300/500/700/900和0/10/30/50/70/90,通过在显微镜下观察阳性细胞占总细胞数的比值估计转染效率(%)。结果表明,组织贴壁法培养水貂耳皮肤组织11 d可长满原代细胞,传代细胞在3～4 d融合度可达80%左右,包装Ad-EGFP病毒滴度为1.99×10~(11) PFU/mL,用其感染水貂成纤维细胞最佳MOI值为30,瞬时转染效率可达90%以上。综上,利用腺病毒载体转染水貂成纤维细胞具有可行性,是一种高效的转染方式,为后续水貂基因组编辑前期验证试验奠定基础。