HPLC-ECD法测定大观霉素的含量

建立了HPLC—ECD法测定大观霉素含量的分析方法。采用高效液相色谱-电化学检测器,Waters XBridge C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,以pH3．2的革酸盐缓冲溶液-乙腈（1000：105,V：V）为流动相,流速1．0mL／min;柱后衍生溶液为21g／L的NaOH溶液,流速0．5mL／min;ECD系统参数：极性为阳性,检波＋0．12V,氧化电位＋0．70V,还原电位-0．60V,范围5μA。结果表明,大观霉素及4R一二氢大观霉素在40～320μg／mL范围内呈良好的线性关系（大观霉素r=0．9999,4R-二氢大观霉素r=0．9992）,平均回收率为100．0％（n=9）,RSD为0．2％。该方法解决了微生物效价测定大观霉素含量偏高的难题,且操作简便、结果准确,可用于大观霉素及相关制剂产品的质量控制。     

酵母对微量元素硒的生物富集及应用

生物富集是指生物体从周围环境中蓄积某种元素或难分解化合物,从而使该物质浓度超过环境中浓度的现象,富集的程度可以用富集系数来表示(王公德,1993)。酵母对许多微量元素如铁、钙、锌、硒、铬及锗等都具较强的富集作用,是一类高效、选择性好、成本低、操作简便的生物富集体。应用酵母富集微量元素有很多优点,除能富集高含量、高吸收率的微量元素外,还可提供相当数量的蛋白质、必需氨基酸、维生素、酶、甘露糖及一些重要的辅助因子等。富集的微量元素有良好的稳定性,便于贮存、运输,并能与饲料中其他成分更好地协同配伍,避免饲料中营养成分…     

RP-HPLC测定喹烯酮及其制剂的含量

采用RPHPLC方法测定喹烯酮及其制剂含量。以SymmetryC1 8柱为固定相 ,甲醇水 (6 0∶40 )为流动相 ,检测波长 3 1 4nm ,喹烯酮在 0 .0 5～ 0 .2 5mg·mL1 浓度范围内呈线性关系(r=0 .9993 ,n =5 ) ,平均回收率 99.89% ,RSD =1 .1 3 (n =5 )。本法简便、快速 ,可用于该产品的质量控制     

奶牛无浆体病PCR诊断方法的建立及应用

利用边缘无浆体(Anaplasma marginale)高度保守的msp5基因,建立了奶牛无浆体病PCR诊断方法。特异性试验表明与牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、温氏附红细胞体、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和牛白细胞DNA无交叉反应;敏感性试验表明可检测到约200个感染红细胞。利用该方法对黑龙江省西部多个养牛场送检的140份血样进行检测,其中曾出现过高热、气喘、流涎和贫血等临床症状的"无名高热"奶牛血样95份、无临床症状奶牛血样45份,结果有上述临床症状奶牛PCR血样阳性率为44.2%,无症状奶牛血样PCR阳性率为13.3%。从而证实无浆体是引起奶牛"无名高热"的病原之一。     

微生物浊度法测定硫酸安普霉素及制剂含量的试验研究

以金黄色葡萄球菌为供试菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基.将硫酸安普霉素稀释成不同浓度,寻找浓度的对数值与相应的吸光度呈直线相关的线性范围,建立测定硫酸安普霉素及其制剂含量的浊度法.硫酸安普霉素的浓度在3.6～6.0 μ/mL之间,其浓度的对数值与相应的吸光度呈直线相关,相关系数r=0.9909.经t检验,硫酸安普霉素浓度的对数值与相对应的回归效果显著.所建立的浊度法平均回收率为100.73%,平均可信限率为2.94%,RSD为0.31%.     

植物空间诱变育种及其在牧草上的应用

近年来,空间诱变育种已成为空间生命科学研究方面的重要内容之一,即经过卫星搭载,生物在高真空、微重力、强辐射及其他因素的综合作用下产生变异,经过地面选育、筛选和固定变异,培育新品种.在植物方面,国内外已利用该技术培育了粮食作物、经济作物、花卉及菌类等高产、优质新品种(系).空间诱变育种技术开创了育种的又一新途径,其在牧草育种的应用还不多,但前景广阔.     

HPLC法测定饲料中喹乙醇残留及应用

HPLC法测定饲料中喹乙醇的残留,具有很好的分离度,浓度10～100μg/mL范围呈良好的线性关系,R=0.99998,回收率范围为85.8%～99.4%,批内变异系数≤5.7%,批间变异系数≤1.1%。实践中检测24批鸡配合饲料,喹乙醇残留未检出,检测62批鱼饲料,喹乙醇残留检出率为8.1%,检出的样品中,残留量范围为19.7～42.0mg/kg。表明鱼饲料中存在喹乙醇残留隐患。     

碱式氯化铜检测方法及其应用

铜是动物必需的一种微量元素,参与血红素的合成和红细胞的成熟及动物成骨过程、毛发和皮毛的色素沉着和角质化过程,在动物体内作为几种重要酶的成分(或作为辅因子)而发挥作用。饲料中添加高铜(250m g/kg)能提高断奶仔猪的日增重、采食量和饲料效率(Edm onds等,1985;Crom well等     

紫外分光光度法测定酒石酸泰乐菌素及其可溶性粉含量

采用紫外分光光度法测定酒石酸泰乐菌素原料药及其可溶性粉含量。结果表明,泰乐菌素在5-40μg／mL范围内呈良好的线性关系（r=0．9996,n=5）。与法定的抗生素法检测结果无差异。     

Coexpression of NRAMP1, iNOS, and nitrotyrosine in bovine tuberculosis

In murine models the inducible nitric oxide synthase (iNOS) and the natural resistance associated macrophage protein (NRAMP1) play major roles in host defense against mycobacteria. iNOS regulates nitric oxide (NO) production, which is noxious for ingested mycobacteria, and NRAMP1 displays pleiotropic antimicrobial effects, including upregulation of iNOS expression. Little is known about the role of these molecules in bovine tuberculosis (TB). In this work we demonstrate by Western blot a high expression of NRAMP1 in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), alveolar macrophages (obtained by bronchioalveolar lavage), and lymph node granulomas from 8 Holstein-Freisian cattle with autopsy-proven bovine TB. Immunohistochemistry revealed the abundant expression of NRAMP1 and iNOS in lymph node and lung granulomas. Immunoreactivity was abundant in the cytoplasm of many epithelioid macrophages and multinucleated giant cells of the Langhans type. A striking accumulation of nitrotyrosine (NT), an indicator of iNOS activity and local NO production, was observed in granuloma cells, particularly in multinucleated Langhans cells. This study shows that the expression of NRAMP1 and iNOS is costimulated in granulomas, which are protective T-cell reactions against mycobacteria.     

微生物浊度法测定泰乐菌素及其制剂效价的研究

以金黄色葡萄球菌为试验菌,抗生素检定培养基Ⅲ号为试验用培养基,制成菌悬液。将泰乐菌素稀释成不同的浓度加入菌悬液中,37℃培养3～4h,确立浓度的对数值与相对应的吸光度呈直线相关的线性范围,并对所建立的浊度法进行准确度、精密度、专属性及适用性等验证。结果表明:泰乐菌素的浓度在0.6～2.0u/ml之间,其浓度的对数值与相应的吸光度呈直线关系,相关系数R2为0.9983;经t检验,泰乐菌素浓度的对数值与相应的吸光度回归效果显著;所建立的浊度法平均回收率为100.09%,平均可信限率为1.57%,RSD为1.88%;浊度法与管碟法所测结果无显著性差异。因此,本方法具有可信限率低、灵敏度高、精密度高、快速等优点,可用于泰乐菌素及其制剂的效价测定。     

射干地龙颗粒的含量测定及制剂稳定性研究

本试验旨在建立射干地龙颗粒中次野鸢尾黄素的含量测定方法及考察该制剂的稳定性,为制定该制剂质量标准中含量测定方法及保质期提供依据。采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,色谱柱:GL Sciences Inertsil ODS-3(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(39:61),流速:1 mL/min,检测波长:266 nm,柱温:30℃,进样量:10 μL;根据药典,采用强光照射试验、加速试验及长期稳定性试验考察射干地龙颗粒中次野鸢尾黄素含量的稳定性。试验结果表明,次野鸢尾黄素的含量在0.3422~86.60 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9995(n=10),平均加样回收率为99.80%,RSD为1.50%(n=9);强光照射试验、加速试验及长期稳定性试验结果表明,该产品稳定性良好;此方法简便、灵敏、重现性好,可用于射干地龙颗粒中次野鸢尾黄素的含量测定,且该制剂的稳定性良好。     

大蒜素及其功效研究

大蒜素是近年发展起来的一种多功能饲料添加剂 ,以其作用广泛、效果显著、无残留、无抗药性、无三致作用、低成本和刺激食欲等优点而倍受养殖户和饲料厂家的青睐。当前饲料工业中使用的大蒜素 ,一般系由人工合成的大蒜油为原料制成的预混料 (指大蒜油吸附在一定的载体上形成的预混料 ) ,呈白色流动性的细小粉末。天然大蒜油存在于大蒜中 ,需经过提取才能得到。1　大蒜素的来源1 1　大蒜　大蒜是百合科葱属植物蒜的鳞茎 ,世界各地均有栽培。中医认为大蒜辛辣、性温 ,能解滞气、暖脾胃、消症积、解毒杀虫。大蒜不但是人们常用的调味剂 ,而且…     

益生菌的作用机制及其应用

益生菌是一类对人和动物有益的活性微生物,可调节肠道微生物的平衡,增强免疫应答,有效抑制致病菌在肠道中的定殖,保持机体健康。饮食摄入益生菌可预防和治疗多种疾病,提高养殖动物的营养利用效率。本文阐述了益生菌在促进营养物质的消化和吸收,减少腹泻与肠道炎症,优化肠道环境,提高免疫功能等方面的作用及应用。     

转基因技术及其应用

介绍了植物转基因技术方法和动物转基因技术方法,对于植物转基因技术方法中几种较为常用的外源DNA导入方法:农杆菌介导法、基因枪法、电击/聚乙二醇(PEG)法和花粉管通道法作了说明。同时就其在转基因食品、抗病性育种、控制发育、品质改良、医药研究、生产药物、农业生产、动物饲养等诸多领域的应用作了简单概述。另外,对转基因沉默及转基因食品的安全性问题进行了相关讨论。     

甜菜碱及其应用

甜菜碱为一种白色或微棕色结晶的化合物 ,系一种季胺型生物碱 ,广泛存在于动植物中 ,尤以甜菜糖蜜中含量最高。目前养殖业中使用的甜菜碱有两种 ,一种是从甜菜制糖后的废糖蜜中提取的生物甜菜碱 ,另一种是用化学合成方法生产的盐酸甜菜碱。两者性质相同 ,但含量和风味有一定差异。生物甜菜碱是一种天然 ,无毒害、无污染、无残留的化合物。盐酸甜菜碱属实际无毒类物质 ,无明显蓄积作用 ,无致突变性 ,是一种安全的饲料添加剂。1　甜菜碱在畜牧业上的应用1 1　作为甲基供体对鼠的研究证实 ,甜菜碱主要在肝脏中发挥甲基供体的作用 ,并受甜菜碱…     

HPLC检测猪血浆和尿液中的喹烯酮及其主要代谢物

本试验旨在建立猪血浆和猪尿液中喹烯酮及其主要代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)、脱一氧喹烯酮、脱二氧喹烯酮同时检测的高效液相色谱法。血浆样品用乙腈沉淀蛋白,经高速离心后直接检测。尿液样品用乙酸乙酯提取喹烯酮、脱一氧喹烯酮、脱二氧喹烯酮,用盐酸提取MQCA,再用乙酸乙酯萃取,50 ℃氮气吹干后过HLB固相萃取小柱。以0.1%甲酸水-乙腈为流动相梯度洗脱,314 nm波长下检测。喹烯酮及3种代谢物在血浆中的回收率在72.54%~104.2%之间,尿液中的回收率在63.20%~86.24%之间。4种目标化合物在血浆和尿液中定量限均为0.05 μg/mL。     

绵羊血浆中三氯苯达唑及其代谢产物的HPLC同步测定方法的建立

为建立血浆样品中三氯苯达唑(TCBZ)及其代谢产物三氯苯达唑砜(TCBZSO2)和三氯苯达唑亚砜(TCBZSO)的高效液相色谱同步检测方法,以甲苯咪唑(MBZ)为内标物,将加有目标物标准品的新鲜绵羊血浆样品经甲醇提取净化和氮气浓缩等前处理后,供HPLC检测;并对以上3种目标物紫外检测方法的专属性、稳定性、准确度和灵敏度等进行了系统研究。结果表明,三氯苯达唑、三氯苯达唑砜、三氯苯达唑亚砜以及内标物甲苯咪唑的保留时间分别为10.021、4.373、5.407、3.420min,分离良好,且不受干扰峰的影响;目标物均在0.05μg/mL～6.4μg/mL范围内呈现良好的线性关系,R2分别为0.999 5、0.999 0和0.999 1;血浆样品被测物含量的日内和日间变异系数(CV)分别小于1%和12%;绝对回收率分别为84.96%、83.84%和86.27%,内标物甲苯咪唑的绝对回收率为90.16%;最低检测限为0.05μg/mL。表明该方法适用于跟踪检测三氯苯达唑及其代谢产物在绵羊血浆中的浓度,是一种稳定而准确的检测方法。     

RNA干扰的实验方法及应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)就是把与内源mRNA编码区同源的长度为19~23 bp的外源双链RNA(double stranded RNA,dsR-NA)导入细胞中,通过一系列细胞内反应引发细胞中相应mRNA的降解,从而导致特定基因表达沉默的一种技术。是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵,抑制转座子活性及基因表达的监控机制。由于RNAi可以作为一种简单、有效代替基因敲除的遗传工具,在功能基因组学领域掀起一场真正的革命,并彻底改变这个领域的研究步伐。本文从RNAi的发现着手,对其原理、实验方法及应用作了系统介绍。