白毛藤生物碱的提取及体外抗菌活性研究

白毛藤又名白英(Solanum Lyratum Thunb),系茄科植物白英的全草,广泛分布于我国的江苏、江西、浙江、安徽、湖南等省,资源非常丰富.白毛藤全草均可入药,干燥全草作为传统中药已有2000多年的历史,具有清热利湿、解毒消肿之功效[1].在白毛藤的众多化学成分中,具有明显生物活性和生理功能的是β-羟基甾体生物碱,主要为α-苦茄碱、蜀羊泉碱、番茄烯胺、澳茄胺[2],这些生物碱均与抗菌、抗病毒有关.白毛藤中总生物碱的提取,目前国内未见报道.笔者用乙醇回流法提取了白毛藤中的生物碱,并对生物碱进行了体外抗菌活性的研究,为进一步开发天然抗菌药物提供依据.     

米糠凝集素的部分特性及其抗新城疫病毒作用

采用红细胞凝集试验和观察细胞病变（CPE）的方法分别研究了米糠凝集素的特性和抗病毒作用。结果显示,米糠凝集素能凝集鸡红细胞,促进新城疫病毒对红细胞的凝集,对热有一定的稳定性,耐酸碱;在体外,用米糠凝集素与新城疫病毒作用或用米糠凝集素预处理Vero细胞,均能抑制新城疫病毒在细胞上病变的形成。提示,米糠凝集素具有直接抗新城疫病毒和预防新城疫病毒感染的作用。     

麦冬多糖对鸡新城疫病毒作用的体外研究

为探究麦冬多糖对鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的作用,试验采用水提醇沉法提取5种分子量麦冬多糖,采取三氯乙酸法去除蛋白等杂质,用苯酚-硫酸法和考马斯亮兰G-250法分别测定提取物的糖和蛋白含量,用MTT法测定不同分子量麦冬多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度,用3种作用方式测...     

白毛藤多糖的提取及体外抑菌试验

白毛藤,又名白英(Solanum lyratum Thumb.)、毛风藤、毛葫芦、毛秀才,系茄科植物白英全草.白毛藤具有清热利湿、解毒、消肿、抗癌等功能[1],对细菌和病毒具有较强的抑制作用,并且能增强动物机体非特异性免疫功能.白毛藤以其独特的药理作用越来越受到人们的关注.尽管对白毛藤各组分的研究已作了大量的工作,但对白毛藤多糖的报道却并不多.本实验对白毛藤多糖进行了提取,并进行了体外抑菌实验,为进一步开发天然抗菌药物提供了理论依据.     

中草药禽瘟灵抗鸡新城疫病毒（NDV）作用的探讨

用禽瘟灵饲喂未进行免疫接种的2月龄鸡，同时设对照组，不饲喂禽瘟灵，以NDV强毒作1：1000稀释人工感染另一组难，以造成一种ND自然流行的小环境。之后，将该组感染鸡与饲喂禽瘟灵10d的试验组鸡和不饲喂禽瘟灵的对照组鸡置于同室饲养，结果人工感染NDV鸡于感染后4－5d全部死亡，试验组鸡只饲喂到25d时仍有96％健活，HI抗体效价达1：80者为55％，而对照组鸡有92％死亡。据此认为，禽瘟灵对于鸡ND流行时具有预防作用。     

新城疫病毒载体疫苗研究进展

新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）作为载体已成功地应用于多种人类和动物疫病疫苗的研发中。大量研究表明,重组新城疫病毒（Recombinant NDV,rNDV）载体疫苗相较于传统疫苗无论在体液免疫、黏膜免疫,还是攻毒保护等方面均有较好的表现。NDV载体已成为研制安全、高效、低毒、免疫原性更佳的载体疫苗的重要工具。该文综述了利用NDV作为疫苗载体的反向遗传学技术在家禽、哺乳动物和人用新型疫苗研制方面的进展,以期为更好地利用NDV载体研制更多的疫苗提供新的思路。     

用胶体金免疫电镜技术检测新城疫病毒

本研究应用柠檬酸三钠还原法制备了20nm的胶体金颗粒标记NDV抗体,并且用直接电镜、免疫电镜和胶体金免疫电镜技术比较观察了新城疫病毒。证明胶体金免疫电镜技术作为检测NDV的检测方法具有简单、快速、准确和无污染等优点。     

新城疫病毒外膜蛋白脂质体疫苗的实验研究

本研究以冷冻干燥法制得新城疫病毒（ＮＤＶ）外膜蛋白脂质体疫苗，两次免疫后ＳＰＦ鸡的血清ＨＩ抗体效价结果显示：ＮＤＶ外膜蛋白脂质体疫苗免疫组的算术滴度要高于仅以ＮＤＶ外膜蛋白免疫组，二者间具有是生差异，且前者以ＮＤＶ强毒株攻击后的保护率也１００％，也优于单纯以ＮＤＶ外膜蛋白免疫组。     

硫酸化黄芪多糖抗雏鸡人工感染新城疫病毒作用的测定

取18日龄雏鸡180羽,随机均分为6组.空白对照组隔离饲养,其余5组每羽肌肉注射NDV 0.5 mL,攻毒6h后4个中药治疗组分别在饮水中加入4种硫酸化黄芪多糖(sAPSt,sAPS40,sAPS50和sAPS60),1 mL/羽,1次/d,连续3 d;病毒对照组不给药.每天记录各组死亡数,观察至攻毒后14d统计死亡率;分别于攻毒前(D-1)、攻毒后第1(D1)、3(D3)、7(D7)、14(D14)天每组随机抽取6羽臂静脉采血,分离血清,用β-微量法测抗体效价;于D14各组存活鸡称重,比较增重情况;然后全部处死,测定胸腺、法氏囊和脾指数.结果显示,3个sAPSs组的死亡率均低于、抗体效价和免疫器官指数多高于病毒对照组,以sAPS60组的抗病毒效果最为显著.表明硫酸化修饰可以提高黄芪多搪的抗病毒活性,可望进一步开发为新型抗新城疫病毒药物.     

重组新城疫病毒载体疫苗研究进展

新城疫病毒(NDV)作为疫苗载体可以在宿主的呼吸道组织细胞中有效复制,诱导产生针对外来抗原的局部和全身免疫反应。NDV的基因组较大,可以很好地容纳外源基因。作为RNA病毒,与宿主细胞发生DNA重组的可能性较小。由于宿主范围的限制,人群中没有预先存在的NDV抗体,NDV对人类来说相对安全。因此,NDV作为一种疫苗载体颇受关注。论文简要论述了NDV的生物学特征,外源基因的插入方式,重点阐述了重组新城疫病毒载体疫苗的研究进展,以期为设计其他有效的兽用和人用活载体疫苗提供参考。     

米糠凝集素的提取及其对新城疫病毒血凝效价的影响

用萃取、浸泡等方法,提取米糠凝集素,分别测定了对鸡红细胞的凝集作用及对新城疫病毒血凝效价的影响。结果显示,无论萃取法,还是浸泡法提取的植物凝集素,其血凝集价没有差异,均为25;在体外提高新城疫血凝效价2滴度,并能在一定程度上抑制Lasota病毒在鸡胚繁殖。这提示米糠凝集素对鸡新城疫苗血凝效价和繁殖有影响。     

单抗ELISA试剂盒检测肉鸽新城疫病毒初步研究

应用新城疫病毒单克隆抗体建立的抗原捕捉ELISA试剂盒，对人工攻毒和自然发病的肉鸽进行检测．结果表明，从人工攻毒肉鸽各脏器组织均可检出新城疫病毒，从自然发病肉鸽泄殖腔内也可检出病毒。     

复方白毛藤注射剂对小鼠的免疫调节作用

为研究复方白毛藤注射剂对小鼠免疫调节作用 ,采用常规免疫学方法进行了 con A诱导的小鼠淋巴细胞转化增殖试验 ,硝基氟苯诱导迟发型变态反应试验 ,腹腔巨噬细胞吞噬功能试验及小鼠碳粒廓清试验。结果表明 :该制剂中 ,高剂量组均具有明显增强 con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力 ,能显著增强硝基氟苯诱导的小鼠迟发型变态反应 ,明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及小鼠碳粒廓清能力。与对照组相比差异极显著 (P <0 .0 1 ) ,中、高剂量组差异不显著 (P >0 .0 5)。     

鹅源新城疫病毒云南流行毒株的分离鉴定

取病死鹅的脑和脾脏,常规处理,接种9～10日龄非免疫鸡胚,结果可使鸡胚致死;用死亡鸡胚的尿囊液进行血凝试验,结果能凝集鸡、鸭、豚鼠的红细胞;再用死亡鸡胚的尿囊液进行血凝抑制试验,结果死亡鸡胚的尿囊液的血凝性能被抗鸡NDV阳性血清所抑制,而不能被抗AIV-H5N1阳性血清和抗EDSV-76阳性血清所抑制。试验结果提示,本试验所分离的病原为一株鹅源的新城疫病毒（命名为：KM2007株）。     

复方白毛藤注射剂对小鼠免疫调节作用的试验研究

复方白毛藤注射液是经水醇法制备而成,以小鼠为试验动物模型,连续给药15d后,通过ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验小鼠碳粒廓清试验、二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应(DTH)试验及腹腔巨噬细胞吞噬功能试验测定脾淋巴细胞增殖能力、DNFB诱发的DTH反应的强度、腹腔吞噬细胞的吞噬率及廓清指数。结果表明。高剂量组显著增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力和小白鼠对DNFB诱发的DTH反应;同时吞噬百分数、吞噬指数、廓清指数也明显高于对照组。表明复方白毛藤注射剂具有免疫增强的调节作用。     

复方白毛藤注射剂对小鼠免疫调节作用的试验研究

复方白毛藤注射液是按照中兽医“君、臣、使、佐”的科学组方原则，经过精心筛选，再按正交试验法组方，以药敏试验及临床治疗试验效果最终确定以白毛藤为君药，以板兰根、蒲公英、黄连为辅药，以白术为佐药，按一定比例组方制备的，即能提高动物机体的免疫功能，又能有效抗菌抗病毒的复方中草药注射剂。本试验目的在于探讨复方白毛藤注射液对机体免疫功能的影响，探讨复方白毛藤注射剂对动物机体免疫药理作用的影响。     

新城疫病毒人工感染鹅脾脏差异表达蛋白质组初步分析

脾脏是新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染的重要靶器官,本试验旨在从分子水平上分析NDV与宿主之间的相互作用,探寻早期基因Ⅳ型强毒Herts/33和晚期基因Ⅶ型强毒JS5/05造成鹅脾脏病变差异的相关蛋白。30日龄非免疫鹅分别人工感染NDV强毒株Herts/33和JS5/05,并于感染后36、72、108h采集2个感染组和对照组的鹅脾脏,提取脾脏蛋白,以17cm、pH5～8的IPG胶条进行二维电泳,运用PDQuest 8.0.1软件对凝胶图谱进行差异蛋白分析。结果显示:与对照组相比,Herts/33感染组和JS5/05感染组脾脏组织分别有154个和148个蛋白出现了显著的差异表达,其中有86个蛋白点是不同感染组共有的差异点,包括52个感染后上调表达蛋白点,34个下调表达蛋白点;另外,有130个差异蛋白点为NDV感染鹅后不同毒株之间产生的差异表达,包括71个感染后上调表达蛋白点,59个下调表达蛋白点。基因Ⅳ型NDV强毒和基因Ⅶd亚型NDV强毒分别感染鹅后,能引起宿主脾脏组织蛋白表达谱发生不同的改变,这为进一步研究Ⅶd亚型NDV对水禽致病性增强的机制提供了重要线索。     

不同鸡种的红血球及其浓度和新鲜度对新城疫病毒凝集价的影响

不同鸡种的红血球及其浓度和新鲜度对新城疫病毒凝集价的影响吴荣富，丁雯，王天军，王永坤，季明，朱国强（江苏农学院畜牧兽医系　２２５００１）鸡红血球凝集试验（ＨＡ）在新城疫病毒（ＮＤＶ）以及产蛋下降综合征病毒（ＥＤＳ－７６）等的检测中应用十分广泛，其效价...     

GPI锚定蛋白介导嵌合新城疫病毒样颗粒的组装

当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI锚定蛋白可以被定量嵌合至真核细胞膜表面。因此,本研究以可溶性蛋白、Ⅰ型跨膜蛋白、Ⅱ型跨膜蛋白为嵌合对象,以GPI锚定方式将外源蛋白嵌合至新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)表面。流式细胞术检测可见GPI锚定蛋白可锚定至各真核细胞表面,并且与孵育时间呈正相关性;各组装GPI-cVLPs在电镜观察下具有完整的病毒粒子结构,与野生型NDV相似;经Western blot检测分析各GPI-cVLPs与NDV阳性血清和His单抗发生反应。综上,该GPI锚定策略能有效将外源蛋白嵌合至NDV VLPs,可为NDV VLP载体平台的应用奠定基础。