精氨酸对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响

本研究以奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）为模型,研究添加不同浓度精氨酸对BMECs酪蛋白合成的影响。采用单因素完全随机试验设计,以0.70 mmol/L精氨酸（DMEM培养基中精氨酸的浓度）为对照组,试验组精氨酸的浓度分别为1.40、2.80、5.60和11.20 mmol/L,每组6个重复。采用MTT法检测BMECs的增殖率;利用酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒检测BMECs中精氨酸代谢关键酶活性;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测BMECs中精氨酸代谢关键酶、酪蛋白以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路基因的相对表达量;运用蛋白质免疫印迹（Western Blot）技术检测酪蛋白表达量及mTOR信号通路蛋白磷酸化水平。结果表明：1）当精氨酸的浓度为2.80 mmol/L时,BMECs的增殖率显著高于对照组和其他精氨酸组（P<0.05）;当精氨酸的浓度为2.80和5.60 mmol/L时,BMECs中鸟氨酸脱羧酶活性显著高于对照组和其他精氨酸组（P<0.05）。2) 2.80 mmol/L精氨酸组BMECs中αs1-酪蛋白、к-酪蛋白、蛋白激酶B、m...     

精氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞体外生长及κ-酪蛋白基因表达的影响

本试验旨在研究培养基中添加不同浓度的精氨酸( Arg)对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白(CSN3)基因表达的影响.选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以无Arg的培养基(0.00 mg/L)为对照(0组),试验培养基分别添加69.50(0.25组)、139.00(0.50组)、278.00(1.00组)、556.00(2.00组)、1 112.00(4.00组)和2 224.00 mg/L(8.00组)的精氨酸.结果表明:Arg能促进乳腺上皮细胞的增殖,24 h时,0.25～4.00组与0组相比均差异显著(P＜0.05),8.00组与0组相比差异不显著(P＞0.05);48和72 h时,各试验组与0组相比均差异显著(P＜0.05).Arg能促进CSN3基因的表达,各试验组与0组相比均差异显著(P＜0.05),当Arg浓度为556.00 mg/L时,CSN3基因表达量最高.结果提示,Arg对乳腺上皮细胞增殖及CSN3基因表达均具有明显的促进作用,且在Arg浓度为69.50～1112.00 mg/L时促细胞增殖效果较佳,在Arg浓度为556.00 mg/L时促CSN3基因表达作用最强.     

葡萄糖和泌乳相关激素组合添加对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响

本研究以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）为模型,探讨葡萄糖和泌乳相关激素组合添加对BMECs酪蛋白合成的影响及作用机制。试验共分为9组,分别向培养基中添加不同浓度的葡萄糖、雌激素和催乳素,其中Ⅰ组为对照组,不添加葡萄糖和泌乳相关激素,Ⅱ组添加14.0 mmol/L葡萄糖+200 ng/mL雌激素,Ⅲ组添加17.5 mmol/L葡萄糖+100 ng/mL雌激素,Ⅳ组添加14.0 mmol/L葡萄糖+100 ng/mL催乳素,Ⅴ组添加17.5 mmol/L葡萄糖+200 ng/mL催乳素,Ⅵ组添加100 ng/mL雌激素+100 ng/mL催乳素,Ⅶ组添加200 ng/mL雌激素+200 ng/mL催乳素,Ⅷ组添加14.0 mmol/L葡萄糖+100 ng/mL雌激素+200 ng/mL催乳素,Ⅸ组添加17.5 mmol/L葡萄糖+200 ng/mL雌激素+100 ng/mL催乳素,每组设置6个重复。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖率;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测葡萄糖转运载体、泌乳相关激素受体、酪蛋白合成相关基因、酪氨酸激酶2/信号转导及转录激活因子5...     

催乳素对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响

试验研究催乳素对奶牛乳腺上皮细胞(BMECS)乳蛋白合成的影响.选用健康、状态良好的荷斯坦奶牛乳腺组织为试验材料,分离培养纯化BMECs,选取P3代BMECs进行试验.根据催乳素的添加浓度分为5组(0、100、200、400、800μg/L),催乳素处理24 h.结果 显示,对照组相比,添加100、200 μg/L催乳...     

蛋氨酸对奶牛乳腺酪蛋白合成及其上皮细胞自噬的影响

蛋氨酸(Met)是奶牛的第一或第二限制性氨基酸,能够通过调控细胞器的形态和活性促进酪蛋白的合成,研究蛋氨酸促进奶牛乳腺中的酪蛋白合成及调控机制具有重要意义.本文综述了目前蛋氨酸的研究概况,分析了其对酪蛋白合成以及对乳腺上皮细胞活性的影响机制,以期为奶牛酪蛋白合成的机制研究提供更多的理论依据.     

哺乳母猪饲粮添加碘化酪蛋白对育仔的效应试验

碘化酪蛋白 (Ｔｈｙｒｏｐｒｏｔｅｉｎ)系利用精制酪蛋白 ,经特殊加碘处理 ,使碘结合在酪蛋白分子上而得到。该制品是由美国农业技术开发公司首先研制成功。 2 0世纪四五十年代国外就有应用碘化酪蛋白提高奶牛、奶山羊产奶量的报道[1,2 ] ,可提高产奶量 1 0 %～ 30 %。我国四川省阳平种牛场给奶牛饲喂碘化酪蛋白 ,提高产奶量 8 4 %。但在母猪饲料中添加碘化酪蛋白 ,提高母猪泌乳能力 ,从而提高哺乳仔猪体重 ,降低仔猪死亡率的报道不多。为此 ,我们根据碘化酪蛋白对乳腺泌乳具有重要的促进功能原理 ,在没有改变原来饲养条件下 ,在泌乳母猪饲…     

泌乳母猪饲粮精氨酸水平对哺乳仔猪小肠黏膜发育的影响

本试验旨在研究泌乳母猪饲粮精氨酸水平对哺乳仔猪小肠黏膜发育的影响及其抗氧化作用机理.试验选择长大二元杂交经产母猪36头,随机分为0.82%精氨酸组(n=12)、1.23%精氨酸组(n=12)和1.64%精氨酸组(n=12)3个组,分别饲喂含0.82%、1.23%和1.64%精氨酸的饲粮.试验从产后第4天开始至第22天结束.结果表明:1.64%和1.23%精氨酸组哺乳仔猪十二指肠黏膜绒毛高度显著高于0.82%精氨酸组(P<0.05);1.64%精氨酸组哺乳仔猪十二指肠和回肠黏膜隐窝深度显著低于0.82%精氨酸组(P<0.05),1.64%和1.23%精氨酸组哺乳仔猪空肠黏膜隐窝深度显著低于0.82%精氨酸组(P<0.05).1.64%精氨酸组哺乳仔猪十二指肠和空肠黏膜乳糖酶和碱性磷酸酶活性显著高于0.82%精氨酸组(P<0.05);哺乳仔猪小肠黏膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性随泌乳母猪饲粮精氨酸水平升高而升高,其中在十二指肠中各组间差异显著(P<0.05),在空肠和回肠中1.64%精氨酸组显著高于0.82%精氨酸组(P<0.05);1.64%精氨酸组哺乳仔猪十二指肠、空肠和回肠黏膜超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于0.82%精氨酸组(P<0.05);哺乳仔猪小肠黏膜丙二醛(MDA)含量在十二指肠中1.64%和1.23%精氨酸组显著低于0.82%精氨酸组(P<0.05),在空肠中1.64%精氨酸组显著低于0.82%精氨酸组(P<0.05).结果提示,提高泌乳母猪饲粮精氨酸水平能够促进哺乳仔猪小肠黏膜发育,其作用机制可能与母猪饲粮中补充精氨酸改善仔猪抗氧化机能有关.     

饲粮精氨酸水平对肉鸡肉品质的影响

本试验旨在研究饲粮精氨酸(Arg)水平对肉鸡肉品质的影响。试验选用1日龄罗斯308肉鸡192只,公母各占1/2,按体重相近原则分成4个处理,每个处理8个重复,每个重复6只鸡。4个处理的饲粮在玉米-豆粕型基础饲粮中分别添加0(对照)、0.3%、0.6%、0.9%的L-Arg。试验期42 d。结果表明:饲粮Arg水平可线性提高肉鸡腿肌率(P0.50),饲粮中添加0.6%Arg的肉鸡的腿肌率最高,可较对照处理提高12.08%。饲粮Arg水平有线性降低肉鸡腹脂率的趋势(P0.10),饲粮中添加0.9%Arg的肉鸡的腹脂率最低,可较对照处理降低10.20%。饲粮Arg水平可线性降低腿肌中粗脂肪含量(P0.01),其中饲粮中添加0.6%Arg的肉鸡腿肌中粗脂肪含量最低,可较对照处理降低21.64%。饲粮Arg水平对腿肌的硬度(P0.01)、弹性(P0.01)和胸肌的硬度(P0.10)、弹性(P0.05)呈先降低后升高的二次曲线变化,饲粮添加0.3%Arg时,肉鸡腿肌的弹性和胸肌的硬度、弹性可降低至最低,分别较对照处理降低了46.34%、10.24%、41.79%。饲粮Arg水平对肉鸡腿肌中C16∶0、C16∶1、C18∶1、C18∶0含量(P0.05)和C20∶0、C20∶3含量(P0.10)呈先降低后升高的二次曲线变化。饲粮添加0.6%Arg时,肉鸡腿肌中C16∶0、C16∶1、C18∶1、C18∶0、C20∶0、C20∶3含量最低,分别较对照处理降低了48.58%、52.67%、48.40%、46.72%、54.08%、34.29%。饲粮中适当添加Arg可提高肉鸡腿肌率,有降低肉鸡腹脂率的趋势,可降低肉鸡腿肌中粗脂肪和部分脂肪酸含量,降低腿肌、胸肌的硬度和弹性。     

妊娠母猪日粮中添加精氨酸对初生仔猪肠道发育的影响

本研究旨在评估妊娠母猪日粮中添加精氨酸对初生仔猪肠道发育的影响。试验将12头第3～4胎次、体重接近、膘情和健康状况一致、妊娠第60天的长大（长白×大白）二元母猪随机分为2组,每组6头。对照组饲喂常规日粮,试验组饲喂试验日粮（常规日粮添加1%精氨酸,同时减少1%豆粕）,试验从母猪妊娠60 d开始至分娩结束。结果：妊娠母猪日粮中添加1%精氨酸能显著提高窝产活健仔数、活健仔率、平均初生个体重和初生窝重（P＜0.05）,极显著提高初生仔猪小肠重量和长度（P＜0.01）,显著提高十二指肠绒毛高度和绒毛宽度、空肠绒毛宽度（P＜0.05）,显著降低小肠各段隐窝深度（P＜0.05）,显著提高小肠各段绒隐比（P＜0.05）。结论：妊娠母猪日粮中添加精氨酸能显著提高初生仔猪肠道发育水平。 [关键词]肠道发育|精氨酸|初生仔猪|妊娠母猪     

日粮添加精氨酸对攸县麻鸭蛋成分的影响

为研究日粮添加L-精氨酸添对产蛋期攸县麻鸭鸭蛋品质的影响,选择120只90日龄、体重相近的健康攸县麻鸭,随机分为2组,每组6个重复,每个重复10只攸县麻鸭,分别饲喂基础日粮和添加0.5%的L-精氨酸添的基础饲粮,进行为期42 d的饲养试验。结果表明:日粮添加0.5%的L-精氨酸可显著提高总蛋重和蛋黄重(P0.05),对蛋清重(P=0.078)和蛋壳重(P=0.057)有提高的趋势;可显著提高蛋黄中天冬氨酸、苏氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸和脯氨酸的含量,但对蛋清氨基酸含量影响不显著。日粮添加0.5%的L-精氨酸有提高攸县麻鸭血清中IgA和IgM抗体含量的趋势。     

奶水牛乳腺组织学研究报告

[目的]探究水牛泌乳性与乳腺组织的关系。[方法]采用组织切片及显微照相研究摩拉水牛和摩×尼×本三元杂水牛泌乳期的乳腺组织。[结果]泌乳期水牛乳腺结缔组织和脂肪组织较少,腺泡较多。泌乳水牛乳腺组织占62.8%,结缔组织占7.6%,脂肪组织占19.6%。摩拉水牛乳腺小叶区域的乳腺泡数量范围为80～150个/mm2,直径范围为50～100μm。摩×尼×本三元杂水牛泌乳后期乳腺小叶区域的腺泡数量范围为50～100个/mm2,直径范围为50～150μm。[结论]乳腺腺泡数及大小是影响水牛泌乳量的重要内在因素。     

酪蛋白酶解物对断奶小鼠肠道生长发育的影响

本试验以小鼠为动物模型，研究了酪蛋白酶解物对断奶小鼠肠道生长发育的影响。结果表明：每天灌注0．25ml浓度为20mg／ml的酪蛋白酶解液可显著提高小鼠小肠DNA、RNA的含量，灌注0．25ml浓度为12mg／ml的酪蛋白酶解液可显著提高小鼠小肠的蛋白质浓度，但对小肠长度、重量及体增重均无显著影响。     

半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响

为了研究半胱胺对奶山羊乳腺发育的影响,选6只空怀奶山羊进行自身前后对照试验和8只妊娠奶山羊进行同胎次配对试验.结果表明,空怀奶山羊对照期乳腺的腺泡很少发育,几乎看不到乳导管,试验期乳腺有明显导管生长和少量腺泡发育;妊娠奶山羊对照组乳腺随着妊娠的进行有少量腺泡发育,腺导管有明显的生长,试验组乳腺有大量的腺泡发育,腺导管生长更明显,且有分泌物出现.试验期血浆中与乳腺发育相关的激素水平明显升高.以上结果提示半胱胺在一定程度上促进了奶山羊乳腺发育.     

miRNA对乳腺发育及泌乳调节作用的研究进展

microRNA(miRNA)是一类在转录后调节基因表达的非编码RNA,已有大量研究表明,miRNA参与多种生命活动的调节,包括细胞增殖与分化、激素分泌、新陈代谢、肌肉和脂肪的形成发育、免疫应答反应、疾病的发生和肿瘤的形成等.近年来miRNA已成为生命科学研究中的亮点.随着miRNA的发现及其功能研究的深入,有关乳腺生长发育和泌乳调控的研究也进入了miRNA调控的新层面.文章总结了乳腺发育和泌乳过程中miRNA表达的阶段特异性及健康乳腺和乳腺病变时miRNA的差异表达,综述了miRNA对乳腺发育和泌乳的调节作用,旨在为从miRNA层面研究乳腺发育及泌乳提供新思路.     

miR-138对小鼠乳腺发育及泌乳功能的影响

microRNAs(miRNAs)在各种类型细胞增殖、分化和凋亡中发挥了重要作用。miR-138参与乳腺发育周期过程中细胞增殖分化的调控。试验以小鼠为动物模型,尾静脉注射miR-138基因抑制剂,应用幼鼠体重称重法,检测miR-138抑制后乳腺泌乳量变化;应用电子显微镜等技术观测乳腺组织形态变化,抑制miR-138后,小鼠乳腺上皮细胞增加,乳汁分泌量增加;抑制miR-138后,观察小鼠乳腺组织超微结构可发现,乳腺细胞的代谢活动增强;收集尾静脉注射miR-138 抑制剂的小鼠乳汁,检测发现其乳糖、乳中酪蛋白含量均有所增高。研究认为,miR-138可刺激乳腺上皮细胞增殖,增加乳腺发育泌乳过程中乳的分泌,并且调控乳汁中重要成分含量。     

多个顺式作用元件调控t-PAcDNA乳腺定位表达

由牛 β-酪蛋白 ( β-Casein)启动子与大鼠乳清酸蛋白 ( WAP)启动子融合及串联构建成 2个组织纤溶酶原激活剂 ( t-PA) c DNA乳腺定位表达载体 p SVL-βΔWAP-PA和 p SVL-WAPβ-PA。将这 2种表达质粒分别注入怀孕家兔乳腺导管中 ,溶圈试验结果显示 ,2种质粒均能在家兔乳腺中表达 ,且以分娩后第 5天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 70 0 μg/ L和 50 0 μg/ L。本试验为进一步研究 t-PA基因乳腺定位表达调控和建立 t-PA乳腺生物反应器奠定了基础     

大鼠乳腺局部免疫的调节机制--泌乳期与静止期乳腺肥大细胞分布的比较

应用改良甲苯胺蓝染色法(MTB)观察了大鼠泌乳期和静止期乳腺肥大细胞的分布、形态、数量变化规律．并用阿尔新蓝一番红鉴别染色法(AB-S)进行了细胞化学分型研究。结果：AB-S染色显示，大鼠乳腺只存在黏膜型肥大细胞；无论是泌乳期还是静止期。乳腺肥大细胞大多分布于腺泡间和小叶问结缔组织中。细胞的形态各异，但细胞数量在静止期和泌乳期有显著差异。泌乳期的乳腺肥大细胞数量明显减少(P＜0．01)。乳腺肥大细胞的动态变化，可能与乳腺泌乳期腺泡上皮的生长和静止期腺泡问结缔组织细胞增生等结构变化有关。     

荷斯坦奶牛乳腺发育中的乳糖变化研究

目的:研究荷斯坦奶牛乳腺发育中乳糖的变化规律.方法:高效液相色谱法测定荷斯坦奶牛乳腺发育中乳糖的含量.结果:围产期,乳腺中才出现可检测到的乳糖;泌乳期乳糖含量增高,泌乳140d达到峰值;退化期乳腺乳糖含量迅速降低,退化30d含量很少.结论:不同生理时期,荷斯坦奶牛乳腺中的乳糖含量不同.     

蛋氨酸三肽对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白和小肽转运载体基因表达量的影响

本试验旨在研究蛋氨酸三肽(Met-Met-Met)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)酪蛋白和小肽转运载体基因表达量的影响。采用酶消化法培养的第3代奶牛乳腺上皮细胞为模型,各处理在培养基中分别添加0(对照)、40、50、60、70和80μg/mL的蛋氨酸三肽,每个处理5个重复,每个重复1个培养孔,分别培养细胞24、48和72h,检测奶牛乳腺上皮细胞的相对增殖率,整体试验重复2次,确定最佳培养时间;各处理在培养基中分别添加0(对照)、40、50、60、70和80μg/mL的蛋氨酸三肽,每个处理3个重复,每个重复1个培养孔,以最佳培养时间培养,用实时定量PCR法检测酪蛋白基因的表达量,确定适宜蛋氨酸三肽浓度,整体试验重复3次;以最佳培养时间和适宜蛋氨酸三肽浓度培养细胞,以未添加蛋氨酸三肽的培养基为对照,每个处理3个重复,每个重复1个培养孔,测定小肽转运载体基因的表达量,整体试验重复3次。结果表明:在培养基中添加蛋氨酸三肽培养奶牛乳腺上皮细胞24h时,相对增殖率最高;培养基中加入60μg/mL的蛋氨酸三肽培养细胞24h,αs1-酪蛋白和β-酪蛋白的基因表达量最高,同时发现奶牛乳腺上皮细胞中小肽转运载体1和小肽转运载体2基因表达量显著高于对照处理(P0.05)。综上所述,培养基中添加60μg/mL的蛋氨酸三肽能够提高奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白和肽转运载体基因的表达量。     

三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白基因表达的影响

本试验旨在研究三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)酪蛋白基因表达的影响。采用3头健康的3～5岁泌乳黑白花奶牛的乳腺组织,将BMECs经1代纯化后进行三维培养,在三维模式下分别培养3、5、7、9 d,测定BMECs中αs1-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白的基因表达量。结果表明,利用三维模式培养5 d的BMECsαs1-酪蛋白和κ-酪蛋白基因表达量极显著高于培养3、7、9 d(P<0.01);利用三维模式培养5 d的BMECsβ-酪蛋白的基因表达量极显著高于培养3、7 d(P<0.01),高于培养9 d,但差异不显著(P>0.05)。结果显示,三维模式下培养时间影响BMECs中αs1-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白的基因表达量,本试验条件下最佳培养时间为5 d。