铁皮石斛原球茎高效增殖体系的构建

以铁皮石斛T4种群原球茎为试材,研究了原球茎团块直径、接种密度、不同激素配合及继代周期对原球茎的增殖和长势的影响,以期构建铁皮石斛原球茎的高效增殖体系。结果表明:在铁皮石斛原球茎的增殖过程中具有明显的群体效应,适当增大原球茎团块直径和接种密度有利于提高增殖率;不同浓度的激动素(KT)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)与萘乙酸(NAA)配合试验中,NAA 0.02mg/L+KT 0.5mg/L能更有效地促进原球茎的增殖和生长;铁皮石斛原球茎增殖培养的适宜继代周期是50d。     

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖

<正>铁皮石斛又名黑节草,兰科石斛属多年生草本植物,是名贵的中草药,有重要的药用价值,具滋阴清热,生津益胃,止咳润肺之功效,主要分布在亚热带地区,我国分布在西南和南方沿海各省,     

铁皮石斛组培苗研究进展

介绍了铁皮石斛的生物学特征,阐述了铁皮石斛组织培养技术和栽培技术研究概况,并总结发展中存在的问题和展望了发展前景。     

铁皮石斛组织培养瓶苗的防玻璃化研究

铁皮石斛是中华名贵珍稀药材的一种,有"深山灵芝"的美称,铁皮石斛具有比较高的观赏价值,但同时,铁皮石斛自身的生理特性也是比较特殊的,其自身的生长速度缓慢,且繁殖能力比较低,属于兰科附生植物中的一种,在生长、繁育的过程中只能依靠自身的绿叶进行光合作用,而在实际的铁皮石斛组织培养过程中较为容易出现玻璃化的现象,这使铁皮石斛...     

铁皮石斛菌根化研究

应用显微技术探讨铁皮石斛与茵根真菌之间的相互作用.从野生铁皮石斛根中分离出的YSH101、YSH502、YSH131、YSH133 4株菌株,接种到铁皮石斛组培苗上进行接菌试验,结果表明:接菌处理组培苗与对照生长情况有明显差异,并筛选出YSH131菌株为铁皮石斛的优良茵根真菌.因此,铁皮石斛组培苗的茵根化是解决铁皮石斛人工大量繁殖栽培的有效措施.     

南疆铁皮石斛温室栽培技术

阐述了南疆温室中铁皮石斛从组培苗到大苗生长的关键栽培技术,并总结了经常出现的问题。     

正交实验法优化铁皮石斛生根培养体系

以铁皮石斛丛生芽为试材,通过三因素三水平正交实验方法优化生根培养体系,研究了不同添加物浓度对生根的影响,以筛选最适的铁皮石斛生根培养基。结果表明:香蕉泥对铁皮石斛生根有极显著的促进作用,培养基成分为1/2MS+2.5mg·L~(-1) NAA+1.5mg·L~(-1)IBA+150g·L~(-1)香蕉泥时,生根率可达到100%,为最佳的生根培养基。     

铁皮石斛组培苗耐盐性研究

以铁皮石斛为外植体诱导出愈伤组织后,分别接种到不同盐浓度的愈伤增殖、茎叶分化和生根3种培养基中进行耐盐性筛选,30 d后进行脯氨酸含量测定。结果表明:在培养基中,NaCl浓度在0.2%～1.0%范围内,对铁皮石斛的愈伤增殖、茎叶分化和生根均产生抑制作用,并且盐浓度越高,脯氨酸含量也随之升高,抑制作用越大。盐浓度达0.6%时,愈伤诱导受害明显,脯氨酸含量是对照组的3.60倍;盐浓度高于0.5%时,盐胁迫对不定根和茎叶分化诱导更显著。     

铁皮石斛丛生芽增殖培养条件的优化

为筛选出铁皮石斛从生芽继代增殖的最适培养基和培养条件,以MS为基本培养基,研究比较了活性炭、植物激素、有机添加物以及温度和光照等因素对铁皮石斛生长状况的影响.结果表明:丛生芽继代增殖的最佳配方为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+香蕉100 g/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖30 g/L,丛生芽长势好,60 d增殖系数达到7.16;最适培养温度为25℃,最佳的光照强度为2 000 lx.     

铁皮石斛增殖培养培养基配方的优化

以铁皮石斛不定芽为材料,采用单因素随机区组试验和正交试验设计方法,在25℃,2 000 lx,12 h·d-1条件下,研究基本培养基、NAA、6-BA、BR、蔗糖对铁皮石斛不定芽增殖的影响。结果表明:1/2 MS为铁皮石斛不定芽增殖的最佳基本培养基;NAA是影响铁皮石斛增殖有效芽倍增率和生根有效芽倍增率的主要因素;组合1/2 MS+花宝1号3 g·L-1+NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 1.5 mg·L-1+BR 0.001 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+水解络蛋白0.25 g·L-1有利于不定芽增殖,增殖有效芽倍增率(17.31±0.09)、生根有效芽倍增率(5.68±0.03)均极显著高于其他处理。     

铁皮石斛人工种子固形包埋系统的研究

 应用粘土和蛭石粉作基质包埋铁皮石斛种胚来制作人工种子。试验结果表明: 当粘土∶蛭石粉∶MS 培养液为2∶1∶2 时萌发率可达56. 8 %。在此系统中单独添加1. 0 %活性炭或同时添加1. 0 %活性炭和0. 5 %淀粉制作的铁皮石斛人工种子, 平均萌发率分别达76. 7 %和80. 3 %, 分别比对照提高了18. 4 %和24. 2 %。还研究了壳聚糖等作外种皮以及原球茎的失水率对铁皮石斛人工种子萌发及贮藏的影响。     

不同激素水平对百合愈伤组织诱导研究

以百合根状茎、幼茎、叶片、离体胚为外植体,4种激素2,4-D、NAA、6-BA、ZT采用L9(34)正交实验处理,对愈伤组织诱导的条件进行研究。结果表明:6-BA和2,4-D在诱导百合愈伤组织中作用极为显著,4种激素对愈伤组织的诱导作用大小依次为:6-BA2,4-DNAAZT,初步断定百合愈伤组织诱导的最佳激素配比是:2,4-D0.2 mg/L+NAA0.9 mg/L+6-BA1.0 mg/L+ZT0.25 mg/L;根茎和幼茎作为外植体更易诱导愈伤组织形成;暗培养较光暗交替培养褐化率低。     

铁皮石斛种子、原球茎和类原球茎体的超低温保存研究

对珍稀濒危植物铁皮石斛的种子、原球茎和类原球茎体进行了液氮超低温保存研究。把４个月龄的种子脱水至含水量为１２％～１９％,能获得较高的冻后存活率（９５％）和较快的恢复生长速率。种子在０．５ｍｏｌ／Ｌ脱落酸培养基上萌发３周所形成的原球茎,用玻璃化保护剂ＰＶＳ２处理１５ｍｉｎ,其冻后存活率可达８８％。将生长旺盛的暗培养类原球茎体的含水量在６～７ｄ内干燥至３０％±２％,其冻后存活率可达４８％～８０％。     

铁皮石斛人工种子包衣技术研究

以铁皮石斛未萌发原球茎、萌发原球茎为繁殖体,利用蔗糖、淀粉、ABA、NAA、活性炭、多菌灵、海藻酸钠设计了36种人工胚乳并研究它们对铁皮石斛人工种子萌发及生长状态的影响,筛选出适宜的繁殖体和胚乳配方,在此基础上进行包衣制作。结果表明:以萌发原球茎为繁殖体的人工种子萌发率和成活率较高。适宜的人工胚乳组合为蔗糖3.0%、ABA 1.0mg/L、活性炭浓度0.5%、多菌灵3.0%、海藻酸钠3.0%。在铁皮石斛人工种子外层制作包衣,自然条件下可获得较高的萌发率和成活率。     

铁皮石斛类原球茎空气干燥法超低温保存中的脱水蛋白分析

 用空气干燥法将铁皮石斛类原球茎脱水至不同含水量, 进行超低温保存和热稳定蛋白的SDS-PAGE 分析, 并进行脱水蛋白的Western-blot 检测。结果表明: 在本试验条件下, 含水量以g/ g DM表示时,铁皮石斛类原球茎脱水时间(x) 对含水量(y) 的回归方程式为y = - 0.1208 x + 9.9636。含水量下降为0.1～0.5 g/ g DM时, 冻后存活率达到最大值。当含水量达1.0 g/ g DM时, 热稳定蛋白的含量明显增加, 经免疫检测其中分子量分别为28.7 和34.3 kD 的两个热稳定蛋白为脱水蛋白。认为含水量是铁皮石斛超低温保存成功的关键因素, 也是引起脱水蛋白大量积累的重要条件。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

石斛兰组织培养和细胞学观察

以石斛兰杂交种的茎尖、茎节和幼嫩小叶片作为外植体均可诱导出愈伤组织。愈伤组织在同一培养基上可同时出现不定芽和拟原球茎，两者都能进一步发育成完整幼苗。拟原球茎和不定芽分别来自愈伤组织的表层细胞和深层细胞。由愈伤组织、不定芽和拟原球茎交错在一起的团块可以多次切割继代培养，进行大量无性繁殖。     

铁皮石斛人工繁育技术

以铁皮石斛商品瓶苗和盆栽苗茎段为试材,添加不同浓度6-BA、NAA,诱导茎段腋芽、原球茎和不定根,建立再生体系,快速繁殖铁皮石斛组培苗,以期为秦岭淮河一线以北地区人工繁殖铁皮石斛提供参考依据。结果表明:外植体宜采用70%酒精浸泡20 s,0.1%升汞浸泡8 min消毒;MS+6-BA 3.0~5.0 mg·L^-1+NAA 0.1~1.0 mg·L^-1适合腋芽分化和增殖,分化率92%~100%;1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+土豆泥15%适合原球茎诱导增殖,增殖倍数7.7;1/2MS+NAA 0.3 mg·L^-1生根率为100%;以松针土移栽,成活率83%。     

不同保鲜膜包装对低温储藏铁皮石斛的保鲜效果影响

将刚采收的铁皮石斛放置在0℃下进行储藏,研究不同保鲜膜包装对铁皮石斛保鲜效果的影响。采用薄膜自发气调包装保鲜技术（MAP）,分别使用PVC保鲜膜、PE保鲜膜及微孔膜对鲜石斛进行包装,以散装石斛作为对照,通过对石斛失重率、膜透性、丙二醛、可溶性固形物进行测定,探讨不同保鲜膜对石斛保鲜效果的影响。结果表明,PVC保鲜膜包装的石斛保鲜效果最好,有效地保持了石斛在低温储藏期间的品质,可以延长其货架期,为果蔬的贮藏保鲜提供技术参数。     

铁皮石斛试管苗培养技术的研究

研究了不同量激素浓度、天然添加物及植入密度对石斛试管苗生长的影响.结果表明:使用1/2MS培养基并且在其他条件不变的情况下,当6-BA的含量在3.0 mg/L时,丛生芽数量多且有原球茎的发生;香蕉汁具有明显的壮苗和诱导芽增殖的效果;当铁皮石斛茎段植入密度为10～12个/瓶时,对其分蘖和生长有利.