硫酸化人参总皂苷体外对免疫活性细胞功能的调节

采用MTT法及形态学观察法研究4种硫酸化人参总皂苷衍生物对体外ConA促淋巴细胞增殖、转化的影响,并采用乳酸脱氢酶释放法探讨了其对NK细胞杀伤活性的影响.结果表明,人参总皂苷对淋巴细胞增殖影响不明显,较高质量浓度(>150 mg/L)能抑制淋巴细胞增殖(P<0.01);硫酸化人参总皂苷衍生物2、3在一定质量浓度下都能明显或极明显增加淋巴细胞(鸡的外周血淋巴细胞,小鼠脾淋巴细胞)增殖活性(P<0.05,P<0.01),且所试质量浓度硫酸化人参总皂苷衍生物的D值显著或极显著高于同质量浓度人参总皂苷(P<0.05.P<0.01);人参总皂苷、衍生物2、3都能提高小鼠NK细胞的活性(P<0.01),且衍生物2、3的作用比人参总皂苷更强(P<0.05,P<0.01).结果提示,人参总皂苷经硫酸化修饰后,在体外能明显增强免疫活性细胞功能.     

经分子修饰后的人参皂苷-Rh2对小鼠免疫功能的影响

为了提高人参皂苷-Rh2的生物学活性和水溶性,对其分子结构进行了一定的化学修饰,并考察其修饰后对小鼠免疫功能的影响。结果与对照组比较,衍生物浓度在5-100μg/ml时可显著促进小鼠B淋巴细胞的增殖(P<0.05),但对T淋巴细胞增殖的促进作用不明显;浓度在50-300μg/ml时可极显著提高NK细胞对YAC-1的杀伤作用(P<0.01);浓度在5-200μg/ml时极显著增强小鼠的代谢功能(P<0.01),一定程度促进了巨噬细胞吞噬中性红作用。试验结果提示,经化学修饰后的人参皂苷-Rh2水溶性良好,可显著提高机体的免疫力。     

华蟾毒精对小鼠免疫细胞活性的影响

为观察华蟾毒精（CBG）对小鼠免疫细胞活性的影响,本研究采用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞的增殖情况,检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能以及小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤作用。结果显示,CBG在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原（Con A或LPS）作用能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖,CBG单独作用可以显著提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,并能够显著提高小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤作用,表明CBG能够提高小鼠免疫细胞的活性。     

硫酸化20(S)一人参皂苷Rh2对小鼠脾淋巴细胞分泌IL -4和IFN -γ的影响

为了进一步评价硫酸化修饰后人参皂苷Rh2的免疫活性变化,试验分别采用MTI法和ELISA法对比研究了浓度为0.2 mg/L、1 mg/L、5 mg/L的人参皂苷Rh2及其硫酸化衍生物(S -Rh2 -1和S - Rh2 -2)对ConA刺激小鼠的脾淋巴细胞增殖和分泌IL -4、IFN -γ的影响.结果表明:S-Rh2 ...     

硫酸化人参总皂苷的制备及其对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响

用氯磺酸-吡啶试剂制备了硫酸化人参总皂苷衍生物，采用红外光谱仪检测到制备的硫酸化人参总皂苷衍生物中在1230cm^-1和810cm^-1有硫酸酯键的特征吸收峰。为了初步探讨硫酸化人参总皂苷的免疫学活性．以MTT法测定了人参总皂苷及其衍生物对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响。结果表明，150μg／m1人参总皂苷和衍生物均能显著抑制鸡外周血淋巴细胞的增殖（P〈0．05），10μg／ml的衍生物能极显著促进淋巴细胞增殖，与同浓度人参总皂苷相比活性极显著增强（P〈0．01）。实验结果提示，对人参总皂苷进行硫酸化修饰是可行的，经硫酸化后人参总皂苷衍生物的免疫活性明显增强。     

硫酸化20(S)-人参皂苷Rh_2对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ的影响

为了进一步评价硫酸化修饰后人参皂苷Rh2的免疫活性变化,试验分别采用MTT法和ELISA法对比研究了浓度为0.2 mg/L、1 mg/L、5 mg/L的人参皂苷Rh2及其硫酸化衍生物(S-Rh2-1和S-Rh2-2)对ConA刺激小鼠的脾淋巴细胞增殖和分泌IL-4、IFN-γ的影响。结果表明:S-Rh2-1为0.2 mg/L、5 mg/L,S-Rh2-2为1 mg/L,Rh2为5 mg/L时能显著或极显著抑制由ConA引起的脾淋巴细胞增殖(P<0.05或P<0.01);S-Rh2-2为1 mg/L、5 mg/L,Rh2为0.2 mg/L、5 mg/L时能显著或极显著抑制由ConA引起的脾淋巴细胞分泌IL-4的量(P<0.05或P<0.01);S-Rh2-1、Rh2的3个试验浓度以及S-Rh2-2为0.2 mg/L、1 mg/L时都能极显著抑制由ConA引起的脾淋巴细胞分泌IFN-γ的量(P<0.01)。说明Rh2进行硫酸化修饰后其免疫活性在一定程度上得到了增强。     

硫酸化20（S）-人参皂苷Rh2体外对鸡免疫活性细胞功能的影响

为了评价硫酸化人参皂苷Rh2化学修饰前后免疫活性变化，采用MTT法及流式细胞术研究体外对ConA促鸡外周血淋巴细胞增殖的影响，采用乳酸脱氢酶释放法研究体外对鸡外周血NK细胞杀伤活性的影响。结果表明：Rh2、Rh2溶剂及硫酸化Rh2低浓度时都能促进淋巴细胞增殖，高浓度时能抑制淋巴细胞增殖，Rh2溶剂及硫酸化Rh2都显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）高于同浓度的Rh2。Rh2及Rh2溶剂都能显著促进鸡外周血NK细胞杀伤活性，但Rh2极显著（P〈0．01）低于同浓度Rh2溶剂，而硫酸化Rh2表现一定促进作用。结果提示：Rb2体外能抑制免疫活性，化学修饰后的硫酸化Rh，体外能促进免疫活性。     

常山提取物和常山乙素对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为了明确常山提取物和常山乙素的免疫学活性,应用MTT法测定2种药物体外对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响。结果显示,常山碱提取物质量浓度达到200mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在10mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在10～200mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。常山乙素质量浓度达到0．1mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在0．001～0．01mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）,质量浓度在0．0001mg／L时具有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在0．0001～0．005mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。结果表明,常山提取物和常山乙素具有良好的免疫增强活性,为今后相关研究提供了免疫学参考。     

人参总皂苷及其衍生物对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

探讨人参总皂苷及其衍生物对小鼠腹腔巨噬细胞免疫活性的影响。采用中性红试验和MTT法分别测定总皂苷及其衍生物对巨噬细胞吞噬中性红作用及其代谢功能的影响。结果显示,总皂苷及其衍生物浓度在试验范围内时小鼠巨噬细胞吞噬中性红及其代谢功能均有不同程度的促进作用．而衍生物的促进作用更强,且对巨噬细胞的细胞毒性明显降低。提示衍生物对巨噬细胞的免疫活性优于总皂苷。     

人参皂苷-Rh2的硫酸化衍生物鉴定及其对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

为了评价硫酸化修饰后人参皂苷-Rh2的活性变化,利用薄层色谱、红外光谱及质谱鉴定所用Ⅱ a、Ⅱb为人参皂苷-Rh2的硫酸化衍生物,并探讨了人参皂苷-Rh2及其硫酸化衍生物Ⅱa、Ⅱ b对小鼠的巨噬细胞吞噬中性红和在LPS刺激下分泌TNF-α量的影响.结果显示,衍生物Ⅱ a、Ⅱ b在1 mg/L时均能显著促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性(P＜0.05),Rh2在0.2mg/L和5mg/L亦可显著促进巨噬细胞吞噬中性红(P＜0.05).Ⅱa 0.2、5 mg/L时,Ⅱb在为5 mg/L时其在LPS的协同作用下能极显著促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α(P＜0.01),而Rh2在5mg/L表现出极显著的抑制 LPS促进小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α作用(P＜0.01).结果提示,Rh2硫酸化修饰后对巨噬细胞的功能有显著增加作用.     

鸡防御素Gal-13对雏鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为观察鸡防御素Gal-13对雏鸡淋巴细胞增殖功能的影响,以Gal-13为研究对象,在体外培养雏鸡淋巴细胞,运用MTT法首先研究不同质量浓度的Gal-13对抗原刺激的雏鸡外周血淋巴细胞增殖功能的影响,然后选取1mg/L的Gal-13饲喂雏鸡,观察其各免疫器官和外周血淋巴细胞增殖功能的变化.结果发现:体外Gal-13(0.625～1.250 mg/L)提高淋巴细胞的增殖功能,但过高剂量的Gal-13(5～10 mg/L)抑制淋巴细胞的增殖.1 mg/L的Gal-13能够提高雏鸡中枢免疫器官淋巴细胞增殖功能,抑制脾脏淋巴细胞的增殖功能.结果表明,Gal-13能够提高中枢免疫器官的免疫反应,对免疫器官的作用具有一定选择性.     

日本大耳白兔红细胞调控淋巴细胞和NK细胞活性研究

应用红细胞促淋巴细胞转化和促NK细胞活性试验,对不同生理发育时期日本大耳白兔红细胞调控淋巴细胞和NK细胞活性进行研究。结果表明：青年组日本大耳白兔红细胞调控淋巴细胞能力明显高于幼年兔和老年兔（P〈0．01）;老年组红细胞调控NK活性能力明显高于青年组和幼年组（P〈0．01）,青年组高于幼年组（P〈0．01）。日本大耳白兔红细胞调控淋巴细胞能力在青年时期达到了高峰．随后逐渐降低：而红细胞调控NK活性随年龄增长而显著增强,这提示老年兔的免疫活性细胞较多地处于预激活状态,并对刺激显示良好的免疫应答能力。     

Astaxanthin stimulates cell-mediated and humoral immune responses in cats

Astaxanthin is a potent antioxidant carotenoid and may play a role in modulating immune response in cats. Blood was taken from female domestic shorthair cats (8-9 mo old; 3.2 ± 0.04 kg body weight) fed 0, 1, 5 or 10mg astaxanthin daily for 12 wk to assess peripheral blood mononuclear cell (PBMC) proliferation response, leukocyte subpopulations, natural killer (NK) cell cytotoxic activity, and plasma IgG and IgM concentration. Cutaneous delayed-type hypersensitivity (DTH) response against concanavalin A and an attenuated polyvalent vaccine was assessed on wk 8 (prior to vaccination) and 12 (post-vaccination). There was a dose-related increase in plasma astaxanthin concentrations, with maximum concentrations observed on wk 12. Dietary astaxanthin enhanced DTH response to both the specific (vaccine) and nonspecific (concanavalin A) antigens. In addition, cats fed astaxanthin had heightened PBMC proliferation and NK cell cytotoxic activity. The population of CD3(+) total T and CD4(+) T helper cells were also higher in astaxanthin-fed cats; however, no treatment difference was found with the CD8(+) T cytotoxic and MHC II(+) activated lymphocyte cell populations. Dietary astaxanthin increased concentrations of plasma IgG and IgM. Therefore, dietary astaxanthin heightened cell-mediated and humoral immune responses in cats.     

白花蛇舌草提取物对肉鸡淋巴细胞增殖功能的影响

为了研究中药白花蛇舌草对肉鸡免疫力的调节作用,探讨其作用机理。在体外培养的肉鸡血液和脾脏淋巴细胞中加入不同浓度的白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮等成分,观测其对淋巴细胞增殖功能的影响。白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮分别在浓度为4 000 mg/L、1 000 mg/L~2 000 mg/L和5 mg/L~100 mg/L时对鸡血液淋巴细胞有明显的刺激增殖作用(P0.05),在浓度为200 mg/L~800 mg/L、10 mg/L~1 600 mg/L和25 mg/L~50 mg/L时对鸡脾脏淋巴细胞的增殖具有明显的刺激作用(P0.05)。研究结果说明白花蛇舌草水煎剂、粗多糖和总黄酮对体外培养的肉鸡淋巴细胞的增殖均有促进作用。     

姜黄素对雏鸡T淋巴细胞转化功能的影响

将60羽健康雏鸡随机分成3组,试验Ⅰ组注射姜黄素溶液0.5mL/只,试验Ⅱ组注射姜黄素溶液1mL/只,对照组注射生理盐水1 mL/只。30日龄时取脾脏组织制备淋巴细胞和NK细胞,以MTT法测定淋巴细胞、LDH测定法测定NK细胞活性。结果显示,一定浓度的姜黄素溶液能提高雏鸡T淋巴细胞转化率及NK细胞活性,且在一定范围内呈剂量依赖关系。     

Determination of the immunotoxic potential of heavy metals on the functional activity of bottlenose dolphin leukocytes in vitro

Heavy metals may affect the immune system of cetaceans. But no information exists on their effects on the bottlenose dolphin (Tursiops truncatus) immune system, although this species is a coastal top predator which can bioaccumulate high concentrations of them. This work studies the effects of Hg (1, 5 and 10mg/L), Al (2,5, 25 and 50mg/L), Cd (1, 10, 20 and 40mg/L), Pb (1, 10, 20 and 50mg/L) and Cr (1 and 10mg/L), on the function of phagocytes and lymphocytes isolated from the peripheral blood of bottlenose dolphins under in vitro conditions. Cell viability, apoptosis, lymphocyte proliferation and phagocytosis were evaluated. Viability and lymphoproliferation were measured with Alamar Blue assay, and apoptosis and phagocytosis were evaluated with flow cytometry. Apoptosis was detected as mechanism of cell death after cadmium and mercury exposure. A significant reduction in the lymphoproliferative response was registered by exposure to 1mg/L of mercury, 10mg/L of cadmium and 50mg/L of lead. Decreased phagocytosis was also observed at 5mg/L of mercury, 50mg/L of aluminium and 10mg/L of cadmium. Chromium did not present any effects on any immune assay at the concentrations tested. The concentrations of heavy metals that were found to affect the functional activity of bottlenose dolphin leukocytes are within the environmental ranges reported in the tissues of bottlenose dolphins. These results support the hypothesis that exposure to these contaminants, particularly mercury and cadmium could lead to a reduction in host resistance to disease in these animals.     

胸腺素α_1调节鸡脾脏淋巴细胞免疫功能的信号转导途径

在无菌条件下,从健康墟岗黄鸡体内取出脾脏,分离淋巴细胞并进行体外培养。在细胞培养液中分别加入终浓度为0.01 mol/L咖啡碱、0.05 mol/L EDTA、0.01 mol/L氯化锂和5μg/mL甲派氟丙嗪,然后用10μg/mL胸腺素α1(Tα1)处理,再加入20μg/mL ConA,研究Ca2+-肌醇磷脂-蛋白激酶系统和cAMP-肌醇磷脂-蛋白激酶系统在Tα1调节淋巴细胞免疫功能中的作用,揭示Tα1调节免疫功能的信号转导机制。结果表明,咖啡碱处理能显著增强Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达,提高培养液中IL-2浓度(P<0.05);而EDTA处理能显著抑制Tα1促进脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2的基因表达与分泌的作用(P<0.05);氯化锂和甲派氟丙嗪对Tα1的免疫调节作用的影响不明显(P>0.05)。结果提示,Tα1调节鸡脾脏淋巴细胞的增殖和IL-2的基因表达与分泌的作用,主要通过cAMP、Ca2+和PKC等第二信使的介导。     

芝芪菌质多糖的制备及其增强免疫活性的初步研究

为研究芝芪菌质多糖体外免疫活性增强作用,本研究采用水提、醇沉、离子交换层析等方法纯化芝芪菌质多糖,并对各多糖组分(GAP-1、GAP-2、GAP-3、GAP-3)进行小鼠脾细胞增殖、NK细胞活性以及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性的测定。结果表明:纯化的4种芝芪菌质多糖在10-3mg/mL～10-1mg/mL浓度范围内均能够显著增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;在25mg/kg～100mg/kg剂量范围内均能够显著增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活性,而且呈剂量依赖性,其中以GAP-3效果最为明显;对NK细胞活性也有不同程度的增强作用,其中,GAP-3在浓度为100μg/mL时,NK细胞的杀伤率为27%,与IL-2阳性对照组比较,有显著增强作用(p0.05)。本研究证明,纯化的芝芪菌质多糖具有较好的体外增强免疫活性,为芝芪菌质作为增强机体免疫力的饲料添加剂提供了理论依据。