睾丸肾上腺素能受体和胆碱能受体的分布及神经递质对睾丸间质细胞增殖的影响

试验旨在研究不同发育时期小鼠睾丸肾上腺素能受体(β1AR、β2AR、β3AR、α1A、α1B和α1D)和胆碱能受体(M1、M2、M3、M4和M5)mRNA的表达,以及神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对发育期小鼠睾丸间质细胞增殖的影响。RT-PCR结果表明,β1AR和β2AR mRNA在睾丸发育的3个时期都表达,β3AR、α1A和α1B mRNA在小鼠发育早期的睾丸表达,在成年期睾丸不表达,α1D mRNA在睾丸发育的早期不表达,成年期表达;胆碱能受体M1R、M2R、M3R和M5R mRNA在睾丸发育的3个时期都表达,而M4R mRNA主要在成年期表达。另外通过NE和Ach处理体外培养的发育期睾丸间质细胞,发现Ach处理组BrdU阳性细胞的数量明显增加(P＜0.01)。结果表明,肾上腺素能受体和胆碱能受体在小鼠睾丸的整个发育时期都表达,Ach可促进发育期小鼠睾丸间质细胞的增殖。     

甲硫脑啡肽对脂多糖作用下奶牛子宫内膜上皮细胞增殖的影响

为探究甲硫脑啡肽(methionine enkephalin,MENK)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞(BEEC)增殖的影响,利用CCK-8检测细胞增殖活性变化,荧光定量PCR检测细胞增殖相关基因(EGFR、VEGF、TGF-β3、FGF-2)表达,蛋白免疫印迹法检测Wnt/β-catenin通路关键因子、c-Myc和Cyclin D1表达。结果显示,LPS单独作用时,细胞活性增强(P0.05),细胞增殖相关基因表达升高(P0.05),β-catenin、c-Myc、Cyclin D1表达升高(P0.05)。MENK能显著抑制LPS诱导的细胞活性(P0.05)、细胞增殖相关因子及Wnt/β-catenin通路关键蛋白的表达(P0.05);非选择性阿片受体拮抗剂纳洛酮可阻断MENK对细胞活性、细胞增殖相关因子和通路的抑制效应。MENK可抑制LPS诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞的增殖作用,该机制很可能由阿片受体介导。     

β—兴奋剂的应用探讨

β－兴奋剂全称β－肾上腺素能兴奋剂,或肝肾上腺素能受体激动剂,英文名卜Athene（常熟饲料添加剂厂215500）哈cgrist。它是一类能与动物体内大多数肝肾上腺素能受体结合,激发肝肾上腺素能受体兴奋的药物,其基本结构为苯乙醇胺及其衍生物。目前常用的p一兴奋剂有：沙丁胺醇     

β-肾上腺素能兴奋剂的作用机理及应用效果(中)

2 BAA发挥效应的机理 2.1 β受体的分类、分布和结构 Alquist(1948)首次提出α、β-肾上腺素能受体设想。1967年,Lands等又根据它们与肾上腺素、去甲肾上腺素和异丙肾上腺素结合力的大小,将组织中的β受体划分为β1型和β2型。经典β受体理论认为,β1受体主要分布于心脏和脂肪细胞膜上,β2受体则主要分布于骨骼肌、平滑肌、胰岛的Langer-     

肾上腺素能受体β2和胆碱能受体M1在小鼠睾丸的表达定位及功能研究

旨在研究肾上腺素能受体β2和胆碱能受体M1在小鼠睾丸组织的表达定位及其生理功能。采用RTPCR方法检测β2受体和M1受体mRNA在小鼠睾丸不同发育时期的表达变化;免疫组织化学方法研究β2受体和M1受体在小鼠睾丸的表达定位;通过体外细胞培养方法研究睾丸间质细胞β2受体和M1受体的生理功能。结果表明:β2受体和M1受体mRNA在小鼠睾丸不同发育时期均显著表达;β2受体和M1受体主要在睾丸间质细胞表达;10-5和10-6 mol·L-1经递质NE和Ach均能显著促进小鼠睾丸间质瘤细胞MLTC-1的增殖(P0.05),β2受体阻断剂布托沙明(Buto)和M1受体阻断剂哌吡氮平(Pire)均能阻断NE和Ach的促增殖作用(P0.05);NE和Ach均能明显抑制MLTC-1细胞3β-HSD mRNA的表达,其阻断剂Buto和Pire均能阻断其作用效果;NE可明显促进雌激素受体α(ERα)mRNA的表达,而Ach可明显促进ERβ的表达,但其阻断剂Buto和Pire并不能阻断NE和Ach促进ERα和ERβmRNA表达的作用效果。综上表明,NE和Ach调节睾丸间质细胞的数量和雄激素的合成,主要是通过分布于睾丸间质细胞的功能受体β2受体和M1受体介导的,但NE和Ach调节雌激素受体ERα和ERβ的表达并不受β2受体和M1受体的介导。     

β——兴奋剂在动物饲养中的负效应

β—兴奋剂全称β—肾上腺素能兴奋剂(BAA),又称β—激活剂,是一种化学结构和生理功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇类衍生物,它能与动物体内大多数组织胞膜上的β—肾上腺素受体相结合,激活β—肾上腺激导性受体,导致整个细胞改变代谢过程。根据与不同β—受体结合特并性的差异,β—兴奋剂可分为β_1型和β_2型两大类。早期β—兴奋剂在医学上属交感神经作用药,能兴奋支气管平滑肌的β—受体,使得平滑肌松弛,支气管扩张,可用来治疗支气管     

不同日龄的大白猪SCD1基因表达规律的研究

目前,国外学者对猪的硬脂酰辅酶A脱氢酶基因(SCD1)的功能有了一定的研究,SCD1缺失鼠(SCD1-/-)的组织中油酸含量减少,棕色脂肪组织中解链蛋白表达增加,β-3肾上腺素能受体表达增加,脂解作用和氧化作用加强。在能量消耗过程中,腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,A     

猪β_2肾上腺素能受体基因真核表达载体及突变体的构建及表达

试验旨在构建猪β_2肾上腺素能受体(β_2adrenergic receptor,β_2AR)基因及其突变体真核表达载体,并鉴定其在HEK293T细胞中的表达。通过猪基因组DNA克隆猪β_2AR基因,利用同源重组技术将其连接至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-β_2AR,加入c-myc标签后命名为myc-pcDNA3.1(+)-β_2AR。以真核表达载体为模板构建突变体myc-pcDNA3.1(+)-β_2AR-D130N、myc-pcDNA3.1(+)-β_2AR-C285S和mycpcDNA3.1(+)-β_2AR-D130N/C285S,并将构建的真核表达载体和突变体转染HEK293T细胞,利用Western blotting技术验证其表达。结果显示,猪β_2AR基因已正确重组入pcDNA3.1(+)载体中;经测序鉴定,猪β_2AR的第130位天冬氨酸成功突变为天冬酰胺,第285位半胱氨酸成功突变为丝氨酸。Western blotting检测结果证明所构建的表达载体均可在HEK293T细胞中表达。本研究成功构建了猪β_2AR野生型的真核表达载体及2个单点突变和1个双点突变的突变体,并验证其在HEK293T细胞中正常表达,为进一步研究猪β_2AR蛋白表达及其药理学活性奠定基础。     

山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立

本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩增ERβ部分基因。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体pET32a(+),构建重组表达载体pET32a(+)-ERβ,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定;经Ni-NTA纯化融合蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并检测抗体效价及特异性;使用该抗体检测济宁青山羊卵巢和子宫组织细胞中的ERβ分布。结果表明,成功扩增出ERβ部分基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量约为53ku的融合蛋白;Western blotting证明该融合蛋白能与兔抗人的ERβ多克隆抗体特异性反应。制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶213,以此抗体代替购置的标准兔抗人ERβ抗体,进行Western blotting反应,特异性良好;使用该抗体建立免疫组化方法检测结果表明济宁青山羊卵巢颗粒细胞和子宫内膜上皮细胞、平滑肌细胞存在ERβ的分布。本研究获得特异性兔抗山羊ERβ多克隆抗体,使用该抗体建立免疫组化方法首次报道了济宁青山羊卵巢和子宫ERβ的分布表达,为进一步研究β雌激素受体的生物学功能奠定了方法学和形态学基础。     

β－肾上腺素能受体兴奋剂（BAA）在养猪中的应用

β－肾上腺素能受体兴奋剂（ＢＡＡ）在养猪中的应用何庆兰（富阳市农业局）应用β－肾上腺素能受体兴奋剂来提高猪体瘦肉率是现今渐趋热门的一个课题。１ＢＡＡ能提高猪体瘦肉含量的药理本质１．１肾上腺素能受体的概念。肾上腺素能神经细胞轴突有多数分枝的末梢，末梢上...     

β-兴奋剂在动物饲养中的负效应

β－兴奋剂全称β－肾上腺素能兴奋剂（ＢＡＡ），又称β－激活剂，是一种化学结构和生理功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇类衍生物，它能与动物体内大多数组织细胞膜上的β－肾上腺素受体相结合，激活β－肾上腺激导性受体，导致整个细胞改变代谢过程。根据与不同...     

禁止非法使用β-兴奋剂的措施浅析

β-兴奋剂,全称β-肾上腺素能兴奋剂或β-肾腺素能受体激动剂,也有称能量重分配剂。它是一化学结构和生理功能类似肾上腺素的苯乙醇胺类生物,能与动物体内大多数β-肾上腺素能受体结,激发β-肾上腺素能受体兴奋的药物。β-兴奋剂影响营养物质在动物体内的流向和重新分配,有促进肌肉组织生长,降低胴体脂肪含量,提高瘦肉和增加瘦肉产量,因而曾在欧美广泛使用;但另一面,能与细胞表面的β-受体结合产生明显的生理用,如心悸、头疼、目眩、恶心、呕吐、发烧、战粟、神过敏、血管扩张、心率加快、肌肉震颤等,而且β-奋剂残留会聚集在动物可食用组织…     

抗chTLR3单克隆抗体制备及其初步应用

Toll样受体3(TLR3)是激发机体天然免疫的模式识别受体,为了制备能与天然结构的鸡TLR3(chTLR3)蛋白结合的单克隆抗体,将前期构建的可以在细胞内表达的真核重组质粒pVAX1-Igk-chTLR3免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗chTLR3单克隆抗体;并应用该抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术检测镉中毒雏鸡外周血淋巴细胞与脾内chTLR3的表达变化。结果发现,获得1株阳性杂交瘤细胞,该细胞株单个细胞染色体数量为(94±2)条,细胞上清效价为1∶25,抗体亚类鉴定为IgG3,细胞上清能够与原核表达的chTLR3胞外区蛋白及鸡外周血淋巴细胞中的chTLR3特异性结合。应用此抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术均能够在对照组和染镉组雏鸡外周血淋巴细胞及脾内检测到chTLR3的蛋白表达。结果表明,成功制备了具有天然活性的chTLR3单克隆抗体,该抗体可用于Western blot、间接免疫荧光技术及流式细胞术研究chTLR3在鸡组织细胞的分布定位、表达变化,为示踪chTLR3蛋白分布、表达及研究其在鸡发病机制中的作用提供了重要的物质基础。     

鸡β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性测定

为研究鸡β干扰素(chicken interferon-β,ChIFNβ)蛋白在毕赤酵母中的表达及其抗病毒活性,将克隆的ChIFNβ基因亚克隆至酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组质粒pPIC-ChIFNβ。将鉴定正确的质粒pPICChIFNβ线性化,通过电转化整合到毕赤酵母菌株X-33基因组中,得到阳性菌株。经1.0%甲醇连续诱导4d,表达产物利用SDS-PAGE电泳、细胞病变抑制法等进行分析。ChIFNβ在酵母中获得了分泌型表达,表达产物分子质量约为17ku。表达产物以细胞病变抑制法检测其活性,效价为107.5 U/mL;在鸡胚中能有效抑制禽流感病毒H9N2的增殖。动物攻毒保护试验结果显示,表达的蛋白可提供70%的免疫保护。表达的ChIFNβ蛋白具有较好的抗病毒活性,本研究可为ChIFNβ的应用提供重要参考。     

农业部再次公布饲料、养殖业中禁止使用药物和物质清单

1.肾上腺素受体激动剂①盐酸克仑特罗：β2肾上腺素受体激动药。②沙丁胺醇：β2肾上腺素受体激动药。③硫酸沙丁胺醇：β2肾上腺素受体激动药。④莱克多巴胺：β兴奋剂。⑤盐酸多巴胺：多巴胺受体激动药。⑥西马特罗：β兴奋剂。⑦硫酸特布他林：β2肾上腺素受体激动药。     

绵羊β3肾上腺素能受体基因在脂肪组织中的表达研究

旨在对绵羊β3肾上腺素能受体基因在脂肪组织中的表达进行研究。本研究通过real-time PCR和免疫组化的方法检测了2个绵羊群体皮下脂肪、大网膜、小网膜、腹膜后脂肪、肠系膜和肾周等6种脂肪组织中ADRB3基因mRNA及其蛋白的表达量与分布情况。结果表明:ADRB3蛋白位于脂肪细胞的细胞膜中。ADRB3基因mRNA及其蛋白在皮下脂肪组织的表达丰度最小(0.159和0.139),在腹膜后脂肪组织的表达丰度最大(2.911和2.225),深层脂肪组织中ADRB3基因mRNA表达量要显著高于皮下脂肪组织(P<0.05),表明皮下脂肪组织的脂肪分解率要低于深层脂肪组织。品种对ADRB3基因mRNA的表达没有显著影响,但对于ADRB3蛋白的表达影响显著。不同脂肪组织中ADRB3表达丰度的差异反映了山西肉用绵羊的遗传稳定性较差。本研究的结果与已知的ADRB3调节脂肪分解和产热的功能是一致的,为利用ADRB3基因作为候选基因进行绵羊新品种的培育提供理论依据。     

β─兴奋剂对肉兔增重的影响

β一兴奋剂对肉兔增重的影响山东农业大学２７１０１８朱湘萍，张再生β一兴奋剂即β一肾上腺素能兴奋剂，是一类结构及生理功能类似肾上腺素和去甲肾上腺素的苯乙醇胺类衍生物，因能与动物体内大多数组织细胞膜上的β一肾上腺素能受体结合而得名。８０年代以来，国外对此...     

阿替美唑药理特性及其在动物麻醉中的应用

阿替关唑是一种α2-肾上腺素能受体颉颃剂,可快速逆转α2-肾上腺素能受体激动剂引起的镇静和麻醉,普遍地被国外兽医应用于α2-肾上腺素能受体激动剂诱导动物镇静和麻醉后的苏醒,或与多种麻醉剂联合应用。本文从阿替美唑的药理特性及在动物麻醉方面的应用进行阐述,旨在为该药物在国内兽医临床的合理应用提供参考。     

转录因子互作调控鸡脂肪细胞分化研究

哺乳动物的CAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、CAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)和胆固醇调节元件结合蛋白质1(SREBP1)是脂肪细胞分化调控的重要因子,鸟类脂肪细胞分化的分子调控网络目前还不清楚。本研究利用荧光素酶报告基因检测发现,C/EBPα、C/EBPβ和SREBP1过表达促进鸡PPARγ基因启动子活性(P0.05);C/EBPβ和SREBP1过表达抑制鸡C/EBPα基因启动子活性(P0.05);PPARγ过表达促进鸡FAS基因启动子的活性(P0.05),并抑制鸡LPL和AFABP基因启动子活性(P0.05),但对鸡C/EBPα基因启动子活性没有显著影响(P0.05)。本研究结果为进一步阐明鸡脂肪细胞分化的转录调控网络奠定了基础。     

β_2AR表达纯化及其在β_2激动剂多残留检测中的应用

β2肾上腺素受体(β2adrenergic receptor,β2AR)激动剂(β2激动剂)是一类结构和功能类似肾上腺素的苯乙醇胺类化学合成衍生物,主要用于防治人、兽支气管哮喘和支气管痉挛,对动物具有促进