双酚A对雌鼠探究能力和运动性的影响

双酚A(BPA)是合成聚碳酸酯和环氧树脂的单体,大量用于食品、饮料的包装,也用于牙齿填充剂以及其他塑料制品.塑料制品的广泛应用使得环境中存在高水平的BPA,造成了环境污染和对人类潜在的影响.为了探讨国产期BPA暴露对脑和行为发育的影响,让母鼠从怀孕的第3天到小鼠出生后第21天口服2,200μg/kg BPA,待雌性小鼠70日龄进行新笼子行为检测.结果表明,雌性小鼠的探究行为下降,其中,BPA 200组小鼠的探究能力显著下降;雌鼠的移动行为持续总时间和频次也发生变化,BPA 200组小鼠的移动行为持续总时间和频次相对于对照组而言明显减少.说明围产期BPA暴露可以降低雌鼠的探究能力和运动性,并且这种效应可能是一种雌激素样的效应.     

妊娠期环境雌激素双酚A暴露对子代成年雌鼠的生殖损伤作用

为探究母鼠妊娠期暴露双酚A(BPA)对子代成年雌性小鼠生殖损伤作用及DNA甲基转移酶(DNMT)基因表达量的影响,将120只妊娠母鼠随机分为6组,每组20只。各组分别在母鼠孕0.5～17.5 d内按0、2.5、5、10、20、40 mg·(kg·d)~(-1)剂量灌胃BPA。每组随机选取10只子代成年(56 d)雌鼠,麻醉后处死,收集血液、子宫和卵巢;统计子鼠成年时子宫和卵巢指数;HE染色观察子代雌鼠卵巢的组织形态学变化;放射性免疫法检测子代雌鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测子代雌鼠卵巢内雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)的含量;实时荧光定量PCR法检测子代雌鼠卵巢内ERα、孕酮受体(PgR)、DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA转录水平。结果显示,BPA显著降低子代雌鼠血清FSH、LH、E_2和P_4水平,显著提高子代雌鼠卵巢ERα和ERβ含量,显著降低子代雌鼠卵巢ERα、PgR和DNMT mRNA的转录水平(P0.05或P0.01)。BPA暴露子代小鼠成年时卵巢和子宫指数增大,HE染色观察卵巢实质发生萎缩,初级和次级卵泡数量增加。本研究表明,妊娠期暴露BPA可促进成年子鼠卵巢产生卵泡,显著降低生殖激素的含量及活性,显著增加卵巢激素受体的含量,抑制卵巢激素受体和DNMT的转录,对子代产生生殖损伤。     

菟丝子黄酮缓解妊娠期双酚A暴露对子代成年雌鼠的生殖损伤作用

为探究菟丝子黄酮(CCFs)对母鼠妊娠期暴露双酚A(BPA)导致的子代成年雌鼠生殖损伤的缓解作用,将50只妊娠母鼠随机分为5组,即空白对照组、BPA模型组、BPA+低剂量CCFs组、BPA+中剂量CCFs组、BPA+高剂量CCFs组,每组10只,分别在孕1～17 d灌胃0.2 mL含有相应剂量药物的玉米油。待仔鼠出生56日龄时,每组随机选取10只子代成年雌鼠,收集血液和卵巢,统计各组成年雌鼠的卵巢指数;检测各组子代成年雌鼠血清中促性腺激素释放激素(GnRH)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的含量;检测每组卵巢组织中雌激素(E₂)、孕酮(P₄)、雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)水平;检测卵巢组织活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性;HE染色观察各组卵巢组织学改变;荧光定量PCR法检测卵巢组织Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA的表达。结果显示,BPA模型组小鼠卵巢指数升高,GnRH、FSH、LH、E₂和P₄激素水平降低,卵巢组织中ER水平紊乱。BP...     

青春期前双酚A暴露对雌性大鼠生殖器官发育的影响

本研究旨在从毒性病理学角度探讨双酚A(BPA)暴露对青春期前雌性大鼠生殖器官发育的影响,为研究BPA雌激素样作用提供组织形态学依据。选用21日龄雌性大鼠,经不同浓度的BPA暴露后,检测大鼠脏器指数、血清雌二醇水平,观察子宫和卵巢形态结构。结果显示,BPA给予7 d后与对照组比较,BPA 180 mg/(kg·bw)组大鼠子宫和卵巢指数升高(P<0.05),血清雌二醇水平降低(P<0.05)。光镜观察发现,BPA试验组大鼠与对照组比较,子宫内膜增厚、内膜细胞形态改变,卵巢初级和次级卵泡数量增多。病理半定量分析结果表明,与对照组比较, BPA 180 mg/(kg·bw)组大鼠子宫内膜厚度、内腔面积及外腔直径、总卵泡数量有统计学差异(P<0.05)。表明BPA短期大剂量暴露可促进青春期前雌性大鼠子宫和卵巢发育,其作用存在明显的剂量依赖关系。     

母子两代连续双酚A暴露对子鼠睾丸发育的影响

双酚A(BPA)是一种无处不在的环境雌激素,长期暴露或接触会影响动物的生殖功能。为了探究持续低剂量暴露BPA对雄鼠生殖器官和功能的影响,将妊娠0 d孕鼠随机分为7组,每组20只,分别为空白对照组,0.05 mg·kg~(-1)·d~(-1) BPA组,0.50 mg·kg~(-1)·d~(-1) BPA组,5.00 mg·kg~(-1)·d~(-1) BPA组,10.00 mg·kg~(-1)·d~(-1) BPA组,20.00 mg·kg~(-1)·d~(-1) BPA组, 50.00 mg·kg~(-1)·d~(-1) BPA组。自母鼠怀孕0 d起持续饮水染毒BPA至哺乳期结束,仔鼠21 d断奶后直接以继续饮水染毒至45日龄性成熟期,共染毒63 d。子代雄鼠于45 d处死。结果显示,染毒BPA剂量大于等于10.00 mg·kg~(-1)·d~(-1)时雄鼠血清BPA含量显著高于空白对照组(P<0.05),染毒BPA剂量大于等于20.00 mg·kg~(-1)·d~(-1)时睾丸组织BPA含量显著高于空白对照组(P<0.05)。H&E染色和睾丸器官指数测定结果显示染毒BPA剂量10.00 mg·kg~(-1)·d~(-1)以上导致睾丸生精小管萎缩,小管间隙变大,50.00 mg·kg~(-1)·d~(-1)以上导致子代雄鼠睾丸指数显著增大(P<0.05)。染毒BPA剂量在0.50 mg·kg~(-1)·d~(-1)以上时睾丸精子活力与密度相较于空白对照组均显著减少(P<0.05),而各染毒组精子畸形率均显著大于空白对照组(P<0.05)。染毒BPA剂量在0.50 mg·kg~(-1)·d~(-1)以上时睾丸生殖细胞核DNA损伤显著大于空白对照组(P<0.05)。染毒BPA剂量在0.05 mg·kg~(-1)·d~(-1)以上时睾丸雄激素受体(AR)表达量显著减少(P<0.05)。转录组测序结果显示染毒BPA可导致雄鼠睾丸剪切体U1亚基蛋白质C合成基因Snrpc和剪切体通用载体组件编码基因Hnrnpu均显著下调,使得mRNA的转录后修饰第一步即无法进行,剪切体功能受阻可能是BPA影响睾丸发育的重要原因。荧光定量PCR证实了转录组结果,并进一步证明了Hnrnpu对BPA的敏感性大于Snrpc。     

妊娠期母鼠暴露BPA对子代断乳雌鼠生殖激素水平与受体含量以及卵巢DNA甲基化的影响

为探究母鼠妊娠期暴露双酚A(bisphenol A,BPA)对子代雌鼠生殖激素的影响及BPA与机体发生作用的分子机制。通过灌服不同剂量的BPA制造孕鼠BPA暴露模型,然后计算子代小鼠断乳时的死亡率、卵巢与子宫系数;放射免疫法检测血清中雌二醇(E_2)、孕酮(P_4)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)含量;qPCR法检测卵巢DNA甲基转移酶1(Dnmt1),DNA甲基转移酶3A(Dnmt3A),DNA甲基转移酶3B(Dnmt3B),孕酮受体(PgR)及雌激素受体α(EsR1)mRNA表达。结果显示,子代雌鼠的相关指标与母鼠妊娠期BPA暴露存在非单调性剂量-反应关系;卵巢系数、E_2含量与BPA剂量呈现"U"型关系;子宫系数,血清P_4、FSH、LH水平,卵巢ERβ含量,卵巢Dnmt1、 Dnmt3A、 Dnmt3B mRNA相对转录水平与BPA剂量呈现"波浪式"关系;卵巢PgR、EsR1 mRNA相对转录水平与BPA剂量呈现"倒U"型关系;且BPA暴露组与空白组相比有极显著差异(P0.01)。这表明BPA可能通过增强子代雌鼠DNA甲基化酶的转录活性使生殖激素分泌紊乱,造成子代生殖损伤。     

孕鼠暴露双酚A对仔鼠存活率、生殖激素及相关基因的影响

为了研究孕鼠在孕期暴露双酚A（bisphenol A,BPA）对仔鼠生殖激素及相关基因的影响,试验将40只昆明孕鼠随机分为A、B、C、D共4组,每组10只。其中A组为对照组,饲喂普通鼠粮;B、C、D组孕鼠整个妊娠期（妊娠1 d至分娩）分别按每只鼠每天50、500、2 500 mg/kg体重给予BPA,待孕鼠自然分娩,观察记录仔鼠死亡情况。至仔鼠性成熟（56日龄）剖杀仔鼠,摘取睾丸或卵巢称重并计算脏器指数,HE染色观察卵巢或睾丸组织结构的变化,ELISA试剂盒分析仔鼠血清睾酮（T）、促卵泡素（FSH）及雌二醇（E₂）水平,免疫组织化学方法检测仔鼠睾丸或卵巢Bax、Bcl-2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测仔鼠睾丸StAR、CYP11a或卵巢AMH、Kitlg mRNA表达。结果显示,孕鼠暴露BPA极显著增加了仔鼠死亡率（P<0.01）,显著降低了仔鼠睾丸重（P<0.05）。ELISA检测结果表明,孕鼠暴露BPA极显著降低了仔鼠T（♂）及FSH（♀）含量（P<0.01）,极显著升高了仔鼠（♀） E₂水平（P<0.01）。HE染色结果显示,随BPA剂量增加,仔鼠睾丸组织损伤严重,间质细胞减少;卵巢组织结构随BPA剂量增大,空泡逐渐增多,黄体颗粒数量逐渐减少。免疫组化结果显示,孕鼠暴露BPA增加了仔鼠睾丸或卵巢组织中Bax阳性蛋白表达,减少了Bcl-2阳性蛋白表达,显著降低了雄性仔鼠StAR mRNA表达量（P<0.05）;B、D组雄性仔鼠CYP11a mRNA表达量极显著降低（P<0.01）,而C组CYP11a mRNA表达量极显著升高（P<0.01）;C、D组雌鼠Kitlg mRNA表达极显著降低（P<0.01）,AMH mRNA表达量显著升高（P<0.05）。本试验结果表明,孕鼠妊娠期暴露不同剂量BPA增加了仔鼠死亡率,扰乱了生殖激素平衡和睾丸/卵巢中相关凋亡蛋白及生殖基因表达。     

母鼠孕期暴露双酚A对子代断乳雄鼠生殖内分泌以及睾丸DNA甲基化的影响

为探究母鼠妊娠期暴露双酚A(bisphenol A,BPA)对子代断乳雄鼠生殖内分泌与睾丸DNA甲基化的影响。按0,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0 mg·kg~(-1)·d~(-1 )BPA剂量在妊娠期(PND)1～17 d灌胃孕鼠,制备孕鼠BPA暴露模型。然后统计母鼠妊娠期流产率,仔鼠断乳时存活率,睾丸系数。放射免疫法检测血清中雌二醇(E_2)、睾酮(T)含量;酶联免疫吸附法检测血清中雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)含量;实时定量荧光PCR法检测睾丸中DNA甲基转移酶1(Dnmt1)、DNA甲基转移酶3a(Dnmt3a)、DNA甲基转移酶3b(Dnmt3b)mRNA相对转录水平。结果显示,20.0 mg/kg BPA暴露可极显著增加断乳时仔鼠睾丸系数(P0.01);20.0,40.0 mg/kg BPA暴露可显著增加母鼠流产率(P0.05),极显著降低仔鼠存活率(P0.01);2.5,20.0 mg/kg BPA暴露可极显著提高仔鼠血清T和ERβ含量(P0.01);各BPA剂量均可极显著降低仔鼠血清雌二醇水平(P0.01),促进睾丸内Dnmt1转录,抑制Dnmt3a和Dnmt3b转录;血清中雌激素受体α含量与BPA剂量呈现非线性关系。表明BPA通过干扰子代雄鼠睾丸内DNA甲基转移酶(Dnmt)的转录,使睾酮、雌二醇及雌激素受体分泌紊乱,影响子代雄鼠的生殖机能。     

双酚A对孕鼠子宫、卵巢相关因子的影响及菟丝子黄酮的缓解作用

将60只昆明孕鼠随机分为3组,每组20只。A组为空白对照组,孕鼠妊娠1～14d灌胃玉米油。B组为双酚A(BPA)组,孕鼠妊娠1～7d灌胃玉米油,8～14d灌胃BPA(500mg/kg)。C组为菟丝子黄酮+BPA组,孕鼠妊娠1～7d灌胃1mg/kg菟丝子黄酮,8～14d灌胃BPA(500mg/kg)。母鼠产后21d剖杀,取子宫卵巢检测。组织学观察发现BPA导致子宫或卵巢组织结构损伤,预先给予菟丝子黄酮有一定缓解作用。免疫组化和免疫荧光方法检测均显示,BPA使母鼠AMH、StAR、Bax的表达水平显著升高,CYP11a1、Kitlg、Bcl-2的表达水平显著降低。菟丝子黄酮显著缓解BPA引起上述因子的变化和伤害,起到一定的保护作用。     

枸杞多糖对双酚A暴露小鼠生精细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

研究枸杞多糖(LBP)对双酚A(BPA)暴露小鼠睾丸生精细胞中Caspase-3、Bcl-2和Bax凋亡蛋白表达的影响.将50只成年雄性昆明小鼠随机分为A、B、C、D、E共5组,每组10只.除正常对照组(A组)注射等量橄榄油外,其余4组小鼠分别腹腔注射20 mg·kg 1的BPA,连续7d,建立生精损伤模型.同时C、D、E组小鼠分别灌服7d不同剂量的LBP(50、100、200 mg·kg-1),正常对照组(A组)和模型组(B组)小鼠灌服等量生理盐水.制备组织切片观察睾丸组织病理学变化,免疫组化法测定睾丸组织Caspase-3、Bax和Bcl-2凋亡蛋白的表达.结果显示,BPA可极显著增加睾丸生精细胞Caspase-3和Bax的阳性细胞数量(P＜0.01),降低Bcl-2的表达(P＜0.05).补充不同剂量LBP后,Caspase-3的阳性表达均极显著低于模型组(P＜0.01).200 mg·kg-1 LBP组生精细胞Bax的阳性细胞数量极显著低于模型组(P＜0.01);Bcl-2的表达随LBP剂量的增加而提高,其中200 mg·kg1LBP组阳性表达极显著高于模型组(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值也随着LBP剂量的增加而上升.结果表明,枸杞多糖通过调节凋亡相关基因的表达,抑制生精细胞凋亡,从而缓解双酚A引起的雄性生殖损伤.     

苜蓿总黄酮对未达性成熟期及成年雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢性腺轴相关基因表达量的影响

为研究苜蓿（Medicago sativa）黄酮对动物未达性成熟期及成年期下丘脑-垂体-卵巢性腺轴相关基因表达量的影响,以雌性大鼠为模式动物,分为5个试验组：3个苜蓿黄酮剂量组（120,400,1200 mg·kg^-1）和2个对照组（己烯雌酚0.5 mg·kg^-1、空白对照组）。结果表明：未达性成熟期雌鼠中、高剂量组和己烯雌酚组促性腺激素释放激素（GnRH）表达量显著降低（P<0.05）;低剂量苜蓿黄酮组促黄体生成素（LH）表达量显著高于高剂量组（P<0.05）;其卵巢中苜蓿黄酮高剂量组促卵泡生成素受体（FSHR）表达量极显著升高（P<0.01）;芳香化酶（CYP19A-1）在苜蓿黄酮低剂量组表达量极显著升高11倍（P<0.01）,在己烯雌酚组显著升高8倍（P<0.05）。成年大鼠苜蓿黄酮3个剂量组和己烯雌酚组的GnRH表达量显著降低（P<0.05）;低剂量苜蓿黄酮的促黄体生成素受体（LHR）表达量极显著升高6倍（P<0.01）,CYP19A-1表达量比空白对照提高8倍（P<0.05）。苜蓿黄酮对不同生理阶段雌鼠影响各不相同,但都通过下丘脑-垂体-卵巢性腺轴产生负反馈调节,并通过负反馈调节显著抑制了GnRH的表达,从而影响雌鼠性腺轴上其他相关基因的表达量。     

维生素A和维生素K3对产蛋后期蛋鸡卵巢繁殖基因表达和抗氧化功能的影响

试验旨在研究维生素A和维生素K3对产蛋后期蛋鸡卵巢繁殖基因表达和抗氧化功能的影响。采用3×3试验设计,维生素A添加量为0、7000、14000IU/kg,维生素K3添加量为0、2.0、4.0 mg/kg。选取1 080羽88周龄罗曼粉蛋鸡,随机分为9组,每组8个重复,每个重复15羽。预试期2周,正式试验期8周。结果表明：与0 IU/kg维生素A相比,添加7 000、14 000 IU/kg维生素A增加了卵巢中骨形态发生蛋白15和骨形态发生蛋白受体1B的mRNA相对表达量（P<0.05）,降低了卵巢中总超氧化物歧化酶（T-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力以及核因子E2相关因子2和GSH-Px1 mRNA相对表达量（P<0.05）;添加2.0 mg/kg维生素K3上调了卵巢中激活素受体I型和促卵泡激素受体的mRNA相对表达量（P<0.05）;维生素A和维生素K3对血清中孕酮含量、卵巢繁殖基因雌激素受体1、抗氧化基因GSH-Px3的mRNA相对表达量以及卵巢中GSH-Px、T-SOD有显著交互作用。由此可见,添加7 000、14 000 IU/kg维生素A可...